專(zhuān)利名稱(chēng)：版納霉素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的化合物，特別是一種從微生物發(fā)酵產(chǎn)物中提取的版納霉素。
來(lái)源于微生物次生及其代謝產(chǎn)物的抗生素，在臨床醫(yī)學(xué)中除廣泛用于治療各種微生物感染性疾病外，它們中一些具有新穎生理活性的新物質(zhì)如酶抑制型抗生素，抗腫瘤，抗HIV類(lèi)抗生素等的研究也越來(lái)越受到人們的重視，對(duì)它們的研究正在成為該領(lǐng)域的一個(gè)研究方向。對(duì)它們的研究和開(kāi)發(fā)不僅可以擴(kuò)展微生物抗生素的適用范圍，也是人們面對(duì)“現(xiàn)代疾病”新形勢(shì)作出的抉擇。
本發(fā)明的目的是提供一種新的具有酶抑制功能的化合物。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的版納霉素，英文名為4，4-Dimethyl-3，4-dihydro-2H-phthalazim-1-one，其特征在于分子式為C10H12N2O 分子量為176結(jié)構(gòu)式為 其物化特征是外觀無(wú)色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)117～118℃，熔點(diǎn)測(cè)定用微熔點(diǎn)測(cè)定儀(YANAGIMOTO MFG，CO.)溫度未校正。紅外吸收(KBr壓片，vmax)3334，3171，2970，2922，2863，1658，1650，1612，1579，1513，1486，1420，1389，1362，1329，1277，1187，1149，808，750，701，512，471cm-1，以上數(shù)據(jù)系由Bio-Rad FTS-135紅外線掃描儀所得。1H-NMR核磁共振譜溶解溶劑C5D5N，400MHz，δppm8.87(1H，s-NH-)，8.70(1H，s-NH-)，6.8～8.3(4H，m，苯環(huán)上的H)，1.64(6H，s，-CH3)；13C-核磁共振溶解溶劑C5D5N，100MHz，δppm164.7(s，C＝O)，148.2(s，C-1)，115.6(s，C-2)，115.1(d，C-3)，128.6(d，C-4)，117.6(d，C-5)，133.9(d，C-6)，67.8(s，CH3-C-CH3)，29.7(q，-CH3)。EI+MS176[M]+(23)，161[M-CH3]+(100)，135(20)，120(45)，119(23)，92(82)，91(54)，84(32)，77(12)，65(35)，56(24)，52(17)本發(fā)明所述的版納霉素按下面的方法步驟獲得取微生物JX-42菌株，菌株在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)10天，轉(zhuǎn)到種子培養(yǎng)基中進(jìn)行液體培養(yǎng)(用500ml的三角燒瓶做培養(yǎng)瓶，每瓶裝100ml培養(yǎng)基)。液體培養(yǎng)基由2％的大豆餅粉，4％的淀粉，0.4％的NaCl和0.5％的CaCO3組成(重量體積比)，pH值自然。種子液在28℃，600轉(zhuǎn)/分的搖床上培養(yǎng)48小時(shí)，爾后轉(zhuǎn)移到發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)(用500ml的三角燒瓶做培養(yǎng)瓶，每瓶裝100ml培養(yǎng)基)。發(fā)酵培養(yǎng)基的組成如下(重量體積比)5％葡萄糖，0.5％玉米漿，1.5％大豆粉，1.0％酵母膏，1.0％ NaCl，0.3％CaCO3；滅菌前用0.1M NaOH水溶液調(diào)至pH7.0～7.2。菌株在28℃，550轉(zhuǎn)/分的搖床上發(fā)酵培養(yǎng)144小時(shí)；發(fā)酵培養(yǎng)液取下后，3000轉(zhuǎn)/分離心，過(guò)濾。上清液用乙酸乙酯萃取三次?；厥沼袡C(jī)相，菌絲體用70％甲醇提取三次，所得粗提物用硅膠G柱層析的方法進(jìn)行分離和純化。獲得以上化合物。
本發(fā)明的微生物菌株JX-42是從我國(guó)云南省關(guān)坪自然保護(hù)區(qū)的土壤樣品中分離得到。
該菌株JX-42形態(tài)和培養(yǎng)特征是分離菌種所用培養(yǎng)基為HV培養(yǎng)基腐殖酸1.0g(在研缽里研碎之后，加入10ml 0.2N NaOH，再研磨；放置過(guò)夜，加入500毫升水，轉(zhuǎn)入燒杯里加熱煮沸，離心或靜置，調(diào)pH)，Na2HPO40.5g，KCl 1.7g，MgSO4·7H2O 0.05g，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01g，CaCl21g，瓊脂18g，維生素B，放線菌酮50mg，其他抗生素或萘啶酮酸20mg；pH 7.2。分離方法用稀釋平板法。
本發(fā)明所述的版納霉素，目前經(jīng)實(shí)驗(yàn)已證明，對(duì)NO酶有著很好的抑制效果，(在心腦血管病人的體內(nèi)NO酶的含量很高，該酶不僅會(huì)使心腦血管病加劇，而且還會(huì)引起其他炎癥)。本發(fā)明所述的化合物對(duì)NO酶有著很好的抑制效果，具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為治療心腦血管疾病藥物的潛力。
實(shí)施例本發(fā)明的版納霉素按前述提取方法及步驟即可獲得。
權(quán)利要求
1.一種版納霉素，英文名為4，4-Dimethyl-3，4-dihydro-2H-phthalazim-1-one，其特征在于分子式為C10H12N2O，分子量為176結(jié)構(gòu)式為
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的版納霉素，其特征在于外觀為無(wú)色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)為117～118℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的版納霉素，其特征在于它的高分辨EI質(zhì)譜為176[M]+(23)，161[M-CH3]+(100)，135(20)，120(45)，119(23)，92(82)，91(54)，84(32)，77(12)，65(35)，56(24)，52(17)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的版納霉素，其特征在于紅外吸收為(KBr壓片，vmax)3334，3171，2970，2922，2863，1658，1650，1612，1579，1513，1486，1420，1389，1362，1329，1277，1187，1149，808，750，701，512，471cm-1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的版納霉素，其特征在于1H-NMR核磁共振譜溶解溶劑C5D5N，400MHz，δppm8.87(1H，s-NH-)，8.70(1H，s-NH-)，6.8～8.3(4H，m，苯環(huán)上的H)，1.64(6H，s，-CH3)；13C-核磁共振溶解溶劑C5D5N，100MHz，δppm164.7(s，C＝O)，148.2(s，C-1)，115.6(s，C-2)，115.1(d，C-3)，128.6(d，C-4)，117.6(d，C-5)，133.9(d，C-6)，67.8(s，CH3-C-CH3)，29.7(q，-CH3)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的化合物,特別是一種從微生物發(fā)酵產(chǎn)物中提取的版納霉素,本發(fā)明的分子式為C
文檔編號(hào)C07D237/32GK1384101SQ0111762
公開(kāi)日2002年12月11日 申請(qǐng)日期2001年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月29日
發(fā)明者崔曉龍, 李銘剛, 李文軍, 徐麗華, 姜成林 申請(qǐng)人:云南省微生物研究所