Artalbic acid的衍生物的組合物用于制備抗炎藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種Artalbic acid的O?(二氯乙胺基)乙基與O?(二(2?甲硫基乙基)胺基)乙基衍生物的組合物在抗炎藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及Artalbic acid的O?(二氯乙胺基)乙基與O?(二(2?甲硫基乙基)胺基)乙基衍生物的組合物、制備方法及其在制備抗炎藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種Artalbic acid的O?(二氯乙胺基)乙基與O?(二(2?甲硫基乙基)胺基)乙基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的Artalbic acid的O?(二氯乙胺基)乙基與O?(二(2?甲硫基乙基)胺基)乙基衍生物的組合物具有抗炎的作用，具有開發(fā)抗炎藥物的價(jià)值。
【專利說明】
Arta I b i c ac i d的衍生物的組合物用于制備抗炎藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 炎癥發(fā)生在局部，同時(shí)也可影響全身。局部臨床特征是紅、熱、腫、痛和功能障礙。 紅、熱是由于炎癥局部血管擴(kuò)張、血流加快所致。腫是由于局部炎癥性充血、血流成分滲出 引起。研發(fā)具有抗炎作用的藥物對于緩解驗(yàn)證、減輕痛苦有重要意義。
[0003] 炎癥的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物中尋找化 合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有重要價(jià) 值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Antonella Maggio et al ·， 2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily·Tetrahedron Letters，52(2011 )4543-4545)的化合物，我 們對化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合 物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗炎癥活性進(jìn)行了評價(jià)，其具有抗炎癥活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為80%和20%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。所述的炎癥為無菌性炎 癥。
[0009] 本發(fā)明組合物在制備抗炎藥物中應(yīng)用的有益效果如下：
[0010] 首先證明了本發(fā)明組合物具有有效抗炎作用。采用了經(jīng)典的二甲苯所致的小鼠耳 腫脹模型以及大鼠瓊脂性足腫脹模型，觀察本發(fā)明組合物在一定時(shí)間內(nèi)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抗炎 作用。研究表明：
[0011] 1、本發(fā)明組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用。
[0012] 2、本發(fā)明組合物對大鼠瓊脂性足腫脹有明顯抑制作用。
[0013] 以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體 實(shí)施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 實(shí)施例1化合物Artalbic acid的制備
[0015] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發(fā)表的文獻(xiàn) (Antonella Maggio et al.,2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters ,52 (2011)4543-4545)的方法。
[0016]
[0017] fciciutnju-丄丄
[0018] 將化合物I(266mg，1.00mmol)溶于lOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙燒(3.76(^，20.00_〇1)和61]1]^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?0攝氏 度攪拌lehieh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1.0，v/V)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(272mg，73% )。
[0019] ΧΗ NMR(500MHz,DMS0-d6)5ll.41(s,lH),6.06(s,lH),5.76(s,lH),4.99(s,lH), 4.71(s,1H),4.56(s,1H),3.86(s,2H),3.54(s,2H),2.65(s,1H),2.43(s,2H),2.33(s,2H), 2.10(s,lH),1.64(s,3H),1.54(s,lH),1.44(s,2H),0.95(s,3H).
[0020] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.93(s),149.13(s),148.15(s),117.05 (s),109.43(s),81.86(s),70.27(s),57.68(s),41.26(s),39.07(s),38.86(s),35.69(s), 33.36(s),30.72(s),20.44(s),18.42(s).
[0021] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci7H26Br〇4：373.1014；found 373.1017.
[0022]
[0023] 實(shí)施例3Artalbic acid的0_(二氯乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0024] l、Artalbic acid的〇-(二輕乙胺基）乙基衍生物的合成
[0025] 將化合物II(187mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀(690mg， 5.0mmol)，碘化鉀（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，lOmmol)，混合物加熱回流lh。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇，v/v)，收集黃色集中洗脫帶 并揮去溶劑即得到化合物Arta 1 bi c ac id的0-(二輕乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體 (146.9mg,74%)〇
[0026] 4 NMR(500MHz，DMS0-d6)Sl8.72(s，lH)j6.11(s，lH)，5.80(s，lH)，5.14(s，lH)， 4.73(s,lH),4.63(s,lH),3.57(s,2H),3.45(s,4H),2.70(d,J=15.6Hz,3H),2.60(s,4H), 2.50(s,2H),2.46(s,2H),2.33(s,lH),1.88(s,2H),1.68(s,3H),1.62(d,J=19.9Hz,3H), 1.02(s,3H).
[0027] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5202.01(s),176.11(s),149.21(s),148.55(s),117.15 (s),109.60(s),81.93(s),67.25(s),59.28(s),57.88(s),56.83(s),53.74(s),41.36(s), 39.24(s),38.93(s),35.88(s),30.82(s),20.61(s),18.49(s).
[0028] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2iH36Ni〇6:398.2543;found:398.2547〇
[0029]
[0030] Artalbic acid的0_(二輕乙胺基）乙基衍生物
[0031] 2、Artalbic acid的0_(二氯乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0032] 合成足夠多的Artalbic acid的0_(二輕乙胺基）乙基衍生物，將Artalbic acid的 〇-(二輕乙胺基）乙基衍生物(0. l〇〇g，〇. 5mmol)溶于4mL氯仿，逐滴加入氯化亞砜(0.238g， 2mmol)，反應(yīng)物加熱回流2h。將反應(yīng)物冷卻至室溫，滴加甲醇分解過量的氯化亞砜，減壓濃 縮除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化(石油醚/丙酮100:0.2，v/v)，得到化合物III的淡黃色 固體（145.4mg，67%)。
[0033] 4 NMR(500MHz，DMS0-d6)Sl3.05(s，lH)，S6.05(s，lH)，5.75(s，lH)，4.67(s，2H)， 4.58(d,J = 7.5Hz,lH) ,3.68(s,4H) ,3.50(s,2H) ,2.86(s,2H) ,2.74(s,2H) ,2.62(d,J = 0.9Hz,3H),2.44(s,2H),2.38(s,2H),2.22(s,lH),1.61(s,3H),1.49(s,lH),1.42(s,2H), 0.95(s,3H).
[0034] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.68(s),175.56(s),148.88(s),147.80(s),116.82 (s),109.05(s),81.60(s),66.70(s),57.44(s),55.79(s),53.30(s),41.03(s),39.21(s), 38.80(s),38.49(s),35.44(s),30.38(s),20.17(s),18.05(s).
[0035] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2iH34Cl2N〇4+:434.1865;found:434.1861。
[0036]
[0037] 實(shí)施例4Artalbic acid的0_(二(2-甲硫基乙基)胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0038] 制備足夠多的化合物III，將化合物III(0.217g，0.5mmol)溶于10mL乙醇，室溫下 加入甲硫醇鈉(〇.21g，3mmol)，反應(yīng)物加熱回流2h。減壓濃縮除去溶劑，所得產(chǎn)物用硅膠柱 層析進(jìn)行純化(石油醚/丙酮1 〇〇: 〇. 3，v/v)，得到黃色固體物，即化合物IV(0.158g，69%)。
[0039] 4 MMR(500MHz，Chloroform-dl)Sl8.86(s，lH)，6·14(s，lH)，5.82(s，lH),5.33 (s，lH)，4.75(s，lH)，4.62(s，lH)，3.54(s，2H)，2.86(s，lH)，2.72(dd，J=18.2,6·8Ηζ, 11H),2.50(s,2H),2.39(s,2H),2.12(s,6H),1.71(s,3H),1.56(s,2H),1.41(s,lH),1.06 (s,3H).
[0040] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.96(s),175.97(s),149.17(s),148.22(s),117.11 (s),109.47(s),81.85(s),67.07(s),57.69(s),53.56(s),52.49(s),41.29(s),39.00(s), 38.79(s),35.63(s),32.15(s),30.74(s),20.43(s),18.43(s),14.87(s).
[0041] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C23H4〇N〇4S2+:434.1865；found:434.1863〇
[0042]
[0043] 實(shí)施例5組合物抗炎藥效學(xué)研究
[0044] 試驗(yàn)材料
[0045] 1.昆明(KM)種小鼠：雄性，6周，18.5-22.5g，由江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
[0046] 2.大鼠(Wistar):雄性，體質(zhì)量140~160g，由江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
[0047] 3.組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的80mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的20mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合 物，使用時(shí)用水溶解這1 〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0048]試驗(yàn)方法
[0049] 1.灌胃組合物對小鼠耳部炎癥的作用：取體質(zhì)量18.5~22.5g健康雄性小鼠50 只，隨機(jī)分成5組，每組10只。分組為：組合物2.5mg · kg<、化合物III 2.5mg · kg<、化合物 IV 2.5mg · kg'阿司匹林組（200mg · kg<)、空白對照組(生理鹽水）。各組分別灌胃給藥， 連續(xù)7d，第七天灌胃后lh，3組小鼠均在小鼠右耳前、后面均勻涂二甲苯0.02mL，制備耳廓炎 癥模型。lh后后頸脫臼處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8_打孔器分別在兩耳的同 一部位打下圓耳片，稱重精確到O.OOOlg。立即用電子天平分別稱質(zhì)量，以左右兩耳質(zhì)量差 作為腫脹度，并計(jì)算其腫脹度。
[0050] 腫脹度=右耳片重一左耳片重
[0051 ] 2.灌胃組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的作用：取體質(zhì)量140~160g健康雄性Wistar 大鼠40只，隨機(jī)分成5組。組合物2.5mg · kg-\化合物III 2.5mg · kg-\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg，、空白對照組(生理鹽水）。分別灌胃給藥，連續(xù)7d，第七天灌 胃后lh，大鼠的右后足跎皮下注射10g/L瓊脂O.lmL制備足腫急性炎癥模型，用大鼠足容量 測量儀測其右后足正常容積。致炎后l、5、8h分別測量各鼠右后足容積，并計(jì)算腫脹度。 [0052]腫脹度=右后足容積一左后足容積 [0053]試驗(yàn)結(jié)果
[0054] 1、組合物對小鼠耳部炎癥的影響
[0055] 致炎后，各組小鼠右耳立刻出現(xiàn)高度紅腫現(xiàn)象。阿司匹林組和組合物組對二甲苯 所致的小鼠耳腫脹均有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳 腫脹沒有顯著抑制作用，結(jié)果見表1。
[0056] 表1組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0059] 與模型組比較*Ρ〈0·01
[0057]
[0058]
[0060] 2、組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的影響
[0061] 注射瓊脂后，各組大鼠足爪均有一定程度的腫脹現(xiàn)象。在肉眼觀察下，模型組腫脹 發(fā)紅最明顯，阿司匹林組稍有腫脹無明顯發(fā)紅現(xiàn)象，組合物組有腫脹無明顯發(fā)紅現(xiàn)象。組合 物對大鼠足腫有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對大鼠足腫無顯著抑制作用，見 表2。
[0062] 表2組合物對大鼠瓊脂性足趾腫脹度的影響
[0063]
[0064] 與模型組比較*Ρ〈0·05
[0065] 結(jié)論:組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用；組合物對大鼠瓊脂性 足腫脹有明顯抑制作用。而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳腫脹無明顯抑 制作用;化合物III和化合物IV則對大鼠瓊脂性足腫脹無明顯抑制作用。組合物可以用于制 備抗炎藥物，化合物III和化合物IV不能用于制備抗炎藥物。
[0066] 實(shí)施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0067] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0068] 實(shí)施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0069] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為80%和20%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為80%和20%充分混合。3. 如權(quán)利要求1所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述炎癥為無菌性炎 癥。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述無菌性炎癥為化 學(xué)品刺激引起的。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述化學(xué)品為二甲 苯。7. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述化學(xué)品為瓊脂。
【文檔編號】A61P29/00GK106038529SQ201610475718
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月24日
【發(fā)明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫(yī)藥科技有限公司