一種旱獺油提取物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種經(jīng)二氧化碳超臨界流體萃取獲得的旱獺油提取物及其制備方法，以及該提取物在制備治療燒燙傷的藥物中的應(yīng)用。相比于現(xiàn)有的旱獺油，本發(fā)明提取物具有活性成分濃度高，治療燒燙傷時(shí)間短和治愈率高的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】
一種旱獺油提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
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[0001]本發(fā)明主要涉及一種經(jīng)二氧化碳超臨界流體萃取的旱獺油提取物及其制備方法，以及該提取物在制備治療燒燙傷藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
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[0002]旱獺又名土撥鼠，草地獺，屬哺乳綱，嚙齒目，松鼠科，旱獺屬，又叫哈拉、雪豬、曲娃(藏語(yǔ))。是松鼠科中體型最大的一種，是陸生和穴居的草食性、冬眠性野生動(dòng)物。中國(guó)有4個(gè)亞種:喜馬拉雅旱獺、蒙古旱獺、長(zhǎng)尾旱獺和阿爾泰旱獺。旱獺具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值:其肉可食;脂肪可入藥，內(nèi)可治咯血，外可治燒傷，還可加工制成高級(jí)化妝品，具有潤(rùn)膚、護(hù)膚作用。
[0003]旱獺油常用于治療燒燙傷，相關(guān)報(bào)道資料可見(jiàn)于醫(yī)學(xué)雜志及專利文獻(xiàn)，具體包括:
[0004]《動(dòng)物學(xué)雜志》2000年第35卷第4期公開(kāi)的《喜馬拉雅旱獺油治療燒傷動(dòng)物模型復(fù)制及療效觀察》，其中記載了將健康旱獺處死，經(jīng)滅蚤后剝皮取背、腹部板油，加溫?zé)捴瞥梢后w高壓消毒后備用。用家兔30只做燒傷動(dòng)物模型復(fù)制，觀察旱獺油治療燒傷的療效，結(jié)果表明，旱獺油治療動(dòng)物燒傷創(chuàng)面的療效明顯優(yōu)于對(duì)照藥物京萬(wàn)紅和美寶濕潤(rùn)膏。
[0005]《青海醫(yī)藥雜志》2003年第33卷第6期公開(kāi)的《旱獺油用于治療燒傷創(chuàng)面20例體會(huì)》，其中記載了將選取好的旱獺殺死后，取其身體上富含脂肪的軟組織，放入加有少量清水的熱鍋內(nèi)燒煮，直至鍋內(nèi)水分完全蒸發(fā)，軟組織不再有液體溶出為止。待油性液體溫度減退至室溫后裝入清潔的瓶?jī)?nèi)加蓋備用。臨床用于20例燒傷患者的各類創(chuàng)面，均取得良好效果，總有效率100 %。
[0006]專利申請(qǐng)?zhí)?6103744.X公開(kāi)了一種旱獺油燒傷、燙傷藥膏，其中記載了對(duì)旱獺進(jìn)行細(xì)菌性檢查后，陰性者則剝皮取油，將油熱煉去渣后冷卻保存，再與黃連、地榆、凡士林和冰片按一定比例攪拌混勻制得。
[0007]專利申請(qǐng)?zhí)?00510041851.1公開(kāi)了一種含旱獺油的醫(yī)用滲透劑，其中記載了將旱獺依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生部相關(guān)文件規(guī)定，獲取脂肪油，過(guò)濾后提取備用。再與月桂或南桂香精油和苯甲酸攪勻，經(jīng)輻照滅菌獲得成品。
[0008]專利申請(qǐng)?zhí)?01410198737.9公開(kāi)了一種含有旱獺油和虎杖甙的復(fù)方旱獺油藥物膜劑。
[0009]綜上，現(xiàn)有技術(shù)中的旱獺油制備方法通常為簡(jiǎn)單的將健康旱獺處死后，通過(guò)簡(jiǎn)單的取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)過(guò)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油成品。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0010]本發(fā)明的目的在于提供了一種精制、高效的旱獺油提取物及其制備方法，以及該提取物在制備治療燒燙傷的藥物中的應(yīng)用。具體而言，本發(fā)明
【申請(qǐng)人】通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)和研究，在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)明了一種經(jīng)二氧化碳超臨界流體萃取后的旱獺油提取物及其制備方法，以及該提取物在用于制備治療燒燙傷的藥物中的應(yīng)用。相比于現(xiàn)有的旱獺油產(chǎn)品，本發(fā)明提取物具有活性成分濃度高，治療燒燙傷時(shí)間短和治愈率高的優(yōu)點(diǎn)。
[0011]具體地說(shuō)，本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0012]—、本發(fā)明旱獺油提取物及其制備方法
[0013]為了獲得活性成分濃度更高，治療燒燙傷更有效，產(chǎn)品性質(zhì)更穩(wěn)定和更安全的旱獺油提取物，發(fā)明人篩選了多種制備方法，進(jìn)行了多項(xiàng)研究和試驗(yàn):
[0014]制備方法A、取健康旱獺身體上富含脂肪的軟組織，放入加有少量清水的熱鍋內(nèi)燒煮，直至鍋內(nèi)水分完全蒸發(fā)，獲得濃縮的旱獺油提取物為止。在后期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，該方法不能有效地去除旱獺油中的脂肪，對(duì)治療動(dòng)物燒燙傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷男Ч焕硐搿?br>[0015]制備方法B、將現(xiàn)有技術(shù)獲得的旱獺油用化學(xué)方法進(jìn)行提取，例如發(fā)明人分別使用70%-95%范圍內(nèi)不同濃度(70%，80%，90%和95%)的乙醇進(jìn)行提取，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雖然能夠分離出部分脂肪，獲得進(jìn)一步的旱獺油提取物，然而該方法具有化學(xué)物質(zhì)殘留問(wèn)題，對(duì)人體具有傷害，特別不適用于燒燙傷患者。發(fā)明人又分別選用了乙醚、乙酸乙酯和丙酮等溶劑進(jìn)行提取，結(jié)果和上述使用乙醇提取結(jié)果類似，存在化學(xué)物質(zhì)殘留問(wèn)題。
[0016]制備方法C、取健康旱獺身體上油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油，再進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，壓力為24Mpa-35Mpa，二氧化碳流量為1L-20L/小時(shí)，優(yōu)選壓力為29Mpa，二氧化碳流量為12L/小時(shí)，獲得了純度高、性質(zhì)穩(wěn)定、無(wú)殘留的本發(fā)明旱獺油提取物。再進(jìn)行環(huán)氧乙烷消毒，達(dá)到醫(yī)用級(jí)。后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該提取物對(duì)燒燙傷有顯著治療作用和促進(jìn)愈合作用，并且安全穩(wěn)定。
[0017]所述現(xiàn)有技術(shù)制備獲得的旱獺油通常為但不限于:將健康旱獺處死后，通過(guò)簡(jiǎn)單的取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)過(guò)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得。
[0018]將現(xiàn)有技術(shù)中制備獲得的旱獺油，進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，壓力為24Mpa_35Mpa，二氧化碳流量為10L-20L/小時(shí)，然后獲得本發(fā)明旱獺油提取物。
[0019]進(jìn)一步地，將現(xiàn)有技術(shù)中制備獲得的旱獺油，進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，壓力為29Mpa，二氧化碳流量為12L/小時(shí)，然后獲得本發(fā)明旱獺油提取物。
[0020]本申請(qǐng)發(fā)明人通過(guò)大量的研究和實(shí)驗(yàn)，研究出了適合旱獺油提取的二氧化碳超臨界萃取工藝。超臨界二氧化碳萃取分離過(guò)程的原理是利用超臨界二氧化碳對(duì)某些特殊天然產(chǎn)物具有特殊溶解作用，利用超臨界二氧化碳的溶解能力與其密度的關(guān)系。在超臨界狀態(tài)下，將超臨界二氧化碳與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小不同的成分依次萃取出來(lái)。在不同壓力和萃取時(shí)二氧化碳的流量的情況下，所得到的萃取物是不同的，但可以控制條件得到最佳比例的提取物。在選擇二氧化碳超臨界流體萃取旱獺油的過(guò)程中，發(fā)明人在壓力10Mpa-45Mpa之間、二氧化碳流量5L-30L/小時(shí)的范圍內(nèi)進(jìn)行了試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)壓力和流量過(guò)低時(shí)萃取不完全，壓力和流量過(guò)高則萃取時(shí)容易過(guò)分消耗原料、浪費(fèi)二氧化碳。在經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)后，發(fā)明人最終確定了壓力在24Mpa-35Mpa、二氧化碳流量在10L-20L/小時(shí)之間較為合適。進(jìn)一步地，
【申請(qǐng)人】分別選擇壓力為29Mpa和二氧化碳流量為12L/小時(shí)，壓力為32Mpa和二氧化碳流量為17L/小時(shí)、壓力為27Mpa和二氧化碳流量為15L/小時(shí)三組條件進(jìn)行了試驗(yàn)分析，確定壓力為29Mpa和二氧化碳流量為12L/小時(shí)獲得的旱獺油提取物純度最理想，動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)效果最明顯，即節(jié)約資源又能達(dá)到治療效果O
[0021]本發(fā)明的有益效果為:避免了溶劑提取法分離過(guò)程中蒸餾加熱所造成的油脂氧化酸敗，且不存在溶劑殘留，克服了壓榨法產(chǎn)率低、精制工藝繁瑣，產(chǎn)品色澤不理想等缺點(diǎn)?！揪唧w實(shí)施方式】:
[0022]實(shí)施例1:將健康旱獺處死后，通過(guò)取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)過(guò)熱煉或燒煮，消毒滅菌，然后進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，萃取壓力為29Mpa，二氧化碳流量為12L/小時(shí)，最終獲得本發(fā)明旱獺油提取物。
[0023]實(shí)施例2:將健康旱獺處死后，通過(guò)取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)過(guò)熱煉或燒煮，消毒滅菌，然后進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，萃取壓力為32Mpa，二氧化碳流量為17L/小時(shí)，最終獲得本發(fā)明旱獺油提取物。
[0024]實(shí)施例3:將健康旱獺處死后，通過(guò)取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)過(guò)熱煉或燒煮，消毒滅菌，然后進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，萃取壓力為27Mpa，二氧化碳流量為15L/小時(shí)，最終獲得本發(fā)明旱獺油提取物。
[0025]最后應(yīng)說(shuō)明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，其依然可以對(duì)上述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或?qū)ζ渲胁糠旨夹g(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則范圍之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0026]二、本發(fā)明旱獺油提取物與現(xiàn)有技術(shù)的旱獺油的對(duì)比實(shí)驗(yàn)
[0027]
【申請(qǐng)人】通過(guò)大量的研究和實(shí)驗(yàn)，篩選出了合適條件的二氧化碳超臨界萃取工藝，并將該工藝下制備獲得的旱獺油提取物A和現(xiàn)有技術(shù)制備獲得的旱獺油成品B對(duì)比，進(jìn)行了研究和藥理實(shí)驗(yàn)，具體如下:
[0028]1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?研究A和B對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性燒燙傷的I度、II度治療作用。
[0029]2、實(shí)驗(yàn)方法:通過(guò)燒灼法制備皮膚模型、大鼠、家兔體外燒燙傷試驗(yàn)考察A和B治療效果。
[0030]3、實(shí)驗(yàn)材料
[0031]3.1藥品
[0032]A與B(分裝于聚酯瓶?jī)?nèi)瓶?jī)?nèi))；
[0033]3.2動(dòng)物
[0034]SD大鼠；日本大耳白家兔。
[0035]4、實(shí)驗(yàn)方法
[0036]4.1燒傷分度
[0037]I度(輕度):表皮受損，局部紅斑和輕度腫脹，痛感過(guò)敏。
[0038]II度(中度):真皮淺層受損，局部滲出有水皰、紅腫、疼痛。
[0039]III度(重度):真皮深層受損，淺紅色，表面有紅點(diǎn)，痛覺(jué)遲鈍，愈合后有瘢痕。
[0040]IV度(嚴(yán)重度):皮膚全層受損，無(wú)水皰和無(wú)痛覺(jué)，可形成焦痂。
[0041 ] V度(極重度):總面積在80%以上(兒童40%以上)，或III度面積超過(guò)50% (兒童為25%)0
[0042]4.2對(duì)SD大鼠實(shí)驗(yàn)性燒傷的治療作用
[0043]SD大鼠20只，雌雄各半，按性別體重隨機(jī)分為3組，
[0044]設(shè)A對(duì)照組、B對(duì)組，每組10只。自由進(jìn)水飲食，適應(yīng)環(huán)境I周。用15%硫化鈉脫去大鼠背毛，戊巴比妥鈉麻醉并固定，將大鼠背部脫毛區(qū)置于孔洞面積為7cm圓形厚紙板上，點(diǎn)燃乙醇，以低焰(皮膚距離火源2cm)造成I度燒傷，燒傷0.5h后分別在燒傷部位按組別涂抹給藥。每日在第I次用藥前用分別測(cè)量和記錄所有動(dòng)物創(chuàng)口的大小和愈合情況。分別對(duì)創(chuàng)傷部位涂A和B，每日給藥3次，每次涂約2mm厚。
[0045]結(jié)果表明，本發(fā)明旱獺油提取物對(duì)大鼠燒傷的療效顯著，A組平均愈合時(shí)間為(3.5±0.6)(1，與8組的(5.7±1.6)(1相比，差異具有顯著性(？<0.01)。
[0046]4.3燙傷分度:
[0047]I度燙傷只損傷皮膚表層，局部輕度紅腫、無(wú)水泡、疼痛明顯。
[0048]II度燙傷真皮損傷，局部紅腫疼痛，有大小不等的水泡。
[0049]III度燙傷皮下，脂肪、肌肉、骨骼都有損傷，并呈灰或紅褐色。
[0050]4.4對(duì)家兔實(shí)驗(yàn)性燙傷的治療作用
[0051]日本大耳白家兔10只，按性別體重完全隨機(jī)分組，每組5只。設(shè)立A對(duì)照組、B對(duì)組，每組5只。自由進(jìn)水飲食，適應(yīng)環(huán)境I周。用15%硫化鈉脫去家兔背毛，戊巴比妥鈉麻醉并固定，實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，恒溫電烙器溫度設(shè)定為50°C，將連接了恒溫電烙器的燙傷探頭接觸背部脫毛部位，造成約I度燙傷模型。燙傷0.5小時(shí)后分別在燙傷部位按組別涂抹給藥，每日在第I次用藥前用分別測(cè)量和記錄所有動(dòng)物創(chuàng)口的大小和愈合情況。每日給藥3次，每次涂約2_厚。
[0052]結(jié)果表明，本發(fā)明旱獺油提取物對(duì)家兔燙傷的療效顯著，A平均愈合時(shí)間為(1.5±
0.6)(1，與郎勺(3.8±1.6)(1相比，差異具有顯著性(？<0.01)。
[0053]4.5結(jié)論
[0054]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于現(xiàn)有技術(shù)中用于燒燙傷的旱獺油產(chǎn)品，本發(fā)明旱獺油提取物對(duì)燒燙傷具有更加顯著的治療作用和促進(jìn)愈合作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種旱獺油提取物，其特征在于:將健康旱獺處死后，取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油，再進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，壓力為24Mpa-35Mpa，二氧化碳流量為10L-20L/小時(shí)，然后獲得旱獺油提取物。2.如權(quán)利要求1所述的旱獺油提取物，其特征在于:現(xiàn)有技術(shù)為將健康旱獺處死后，通過(guò)取油或含脂肪的軟組織，經(jīng)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油。3.如權(quán)利要求1所述的旱獺油提取物，其特征在于:二氧化碳超臨界流體萃取壓力為29Mpa，二氧化碳流量為12L/小時(shí)。4.一種旱獺油提取物的制備方法，其特征在于:將健康旱獺處死后，取油或富含脂肪的軟組織，經(jīng)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油，再進(jìn)行二氧化碳超臨界流體萃取，壓力為24Mpa-35Mpa，二氧化碳流量為10L-20L/小時(shí)，然后獲得。5.如權(quán)利要求4所述的旱獺油提取物的制備方法，其特征在于:現(xiàn)有技術(shù)為將健康旱獺處死后，通過(guò)取油或含脂肪的軟組織，經(jīng)熱煉或燒煮，消毒滅菌獲得旱獺油。6.如權(quán)利要求4所述的旱獺油提取物的制備方法，其特征在于:二氧化碳超臨界流體萃取壓力為29Mpa，二氧化碳流量為12L/小時(shí)。7.如權(quán)利要求1所述的旱獺油提取物在制備治療燒燙傷藥物中的應(yīng)用。8.如權(quán)利要求2所述的旱獺油提取物在制備治療燒燙傷藥物中的應(yīng)用。9.如權(quán)利要求3所述的旱獺油提取物在制備治療燒燙傷藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K35/35GK105935366SQ201610300809
【公開(kāi)日】2016年9月14日
【申請(qǐng)日】2016年5月10日
【發(fā)明人】張玲
【申請(qǐng)人】張玲