[0060] 實(shí)施例3
[0061] 在夏季生長茂盛花未全開時(shí)采摘，將采摘好的益母草曬干，將驚曬好的益母草 4000g浸泡水中12小時(shí)，然后放入提取罐加熱煮沸1小時(shí)，過濾，濾液備用;濾渣加水，第二次 加熱，煮沸45分鐘，過濾，濾液備用;濾渣再加水，第=次加熱煮沸半小時(shí)，過濾;將=次濾液 合在一起，用紗布過濾，殘?jiān)屑尤?0-60%乙醇，60°C-7(rC繼續(xù)浸提化，每IOmin攬拌一 次，紗布過濾，合并浸提液，成組分1;薄荷lOOOg、白術(shù)llOOg、白巧1000 g和白巧IlOOg用蒸饋 法汽化成結(jié)晶，粉碎待用，為組分2;再取積雪草1200g，黃巧1200g，玉竹1200g，葛根llOOg， 丹參1200g，黃精1200g，天花粉llOOg，紅花1200g，白巧llOOg，白巧等1200g，白蔥1200g，月 季花IlOOg，金盞花1200g，當(dāng)歸1200g，杏仁1200g，玫瑰花IlOOg，天竺葵IlOOg，合歡皮 llOOg，冬瓜皮1200g，用水浸泡，加熱煮沸3次，每次1-2小時(shí)，過濾，濾液備用;將合并后3次 的濾液抽入減壓濃縮罐內(nèi)，減壓濃縮至相對密度為1.20，溫度至60°C-7(rC的浸膏；成為組 分3,混合組分1和組分2組分3,調(diào)和基質(zhì)，成凝膠劑;所述基質(zhì)選自：蜂膠。紫外線殺菌裝罐， 本發(fā)明不含防腐劑，必須冷藏。
[0062] 藥理學(xué)毒性試驗(yàn)
[0063] 毒理學(xué)試驗(yàn)：
[0064] 試驗(yàn)例1:本發(fā)明急性毒性試驗(yàn) [00化]一、試驗(yàn)材料；
[0066] 動物：昆明種小鼠，體重2l-24g，雌雄各半，山東大學(xué)生物試驗(yàn)室育種。藥物:本發(fā) 明美容霜。
[0067]二、方法：
[006引1、LD50計(jì)算:采用改良寇氏法，將小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半，將洗液 劑溶解，配成最大濃度，按小鼠最大允許容量給藥，所給劑量按生藥量依次為18,14.4， 11.5，9.2，7.4(g. kg-1)，在動物禁食(不禁水）18小時(shí)后，一日內(nèi)分兩次給藥(間隔半小時(shí)）， 每次0.5ml，觀察動物死亡情況。
[0069] 2、最大耐受劑量測定(MTD值）：取小鼠20只，雌雄各10只。將片劑加蒸饋水溶解，配 成最高濃度，按動物的最大耐受量，W注射灌喂器能抽動為準(zhǔn)。在動物禁食(不禁水）18小 時(shí)后，一日內(nèi)分兩次給藥(間隔半小時(shí)），每次0.5ml(每ml含生藥0.36g)，總藥量為1始生藥/ kg. d，相當(dāng)臨床成人50Kg體重用量的300倍。給藥后連續(xù)觀察7天。
[0070] S、試驗(yàn)結(jié)果：
[0071 ]在LD50計(jì)算中當(dāng)用最大允許濃度和最大允許容量給予小鼠時(shí)（18g/Kg. d)，未見小 鼠死亡，即未測出LD50,只可求最大耐受劑量，在7天觀察期中，動物其食欲、活動、毛色、精 神狀態(tài)等皆正常，發(fā)育正常，未見有死亡。即選用相當(dāng)于臨床劑量的300倍藥量，并無不良反 應(yīng)發(fā)生，表明急性毒性極小，111)> 18g/Kg. d。
[0072] 試驗(yàn)例2:本發(fā)明急性皮膚刺激試驗(yàn)報(bào)告
[0073] 1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?檢測本發(fā)明對實(shí)驗(yàn)動物皮膚的刺激/腐蝕作用和強(qiáng)度
[0074] 2、材料和方法：
[0075] 2.1.受試物名稱:本發(fā)明美容霜(實(shí)施例方法2制得）
[00M] 2.2.實(shí)驗(yàn)動物：壹級大耳白種家兔，10只，雌性，體重2.1-2.3kg;由青島大學(xué)醫(yī)學(xué) 院生物系實(shí)驗(yàn)動物中屯、提供；
[0077] 2.3.試驗(yàn)方法：
[0078] 選用皮膚完好的健康家兔10只，于試驗(yàn)前24小時(shí)將其背部脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去 毛面積左、右各約4cm X 4cm。試驗(yàn)時(shí)取受試物0.2ml涂于2.5cm X 2.5cm的二層紗布上，敷貼 于一側(cè)去毛皮膚表面，油紙覆蓋，膠布固定。另一側(cè)皮膚作為空白對照。封閉4小時(shí)后，去除 覆蓋物，并用溫水清洗去殘留受試物，于去除受試物后的1、24和48小時(shí)觀察涂抹部位皮膚 反應(yīng)，并評分。
[0079] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)動物皮膚未出現(xiàn)任何紅斑，紅腫，發(fā)炎現(xiàn)象。
[0080] 4、小結(jié):根據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》（1999)中皮膚刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)判定，本發(fā)明軟膏 劑對動物皮膚刺激強(qiáng)度屬無刺激性。
[0081 ]實(shí)施例3:陰道粘膜刺激試驗(yàn)結(jié)果
[0082] 1.試驗(yàn)方法：
[0083] 實(shí)驗(yàn)動物檢疫3天后，選用18只上述健康家兔，隨機(jī)分為=組，每組各6只，分別為： 空白對照、賦形劑對照、本發(fā)明美容霜。分別用適當(dāng)大小的滅菌棉條浸W滅菌生理鹽水和受 試物置于賦形劑對照組和受試物組動物陰道內(nèi)，與陰道粘膜接觸6小時(shí)，24小時(shí)后處死動 物。取出局部陰道組織，觀察病變情況。
[0084] 2、試驗(yàn)結(jié)果:陰道粘膜刺激試驗(yàn)結(jié)果
[0087] 實(shí)施例4:皮膚過敏試驗(yàn)結(jié)果
[0088] 用本發(fā)明美容霜，進(jìn)行誘導(dǎo)和激發(fā)接觸試驗(yàn)，在24小時(shí)和48小時(shí)后觀察試驗(yàn)小鼠， 均不見皮膚有紅斑及水腫等現(xiàn)象，與陰性對照組無差異。結(jié)果表明，該膏劑對皮膚反應(yīng)強(qiáng)度 近于零，即無皮膚變態(tài)反應(yīng)。
[0089] 實(shí)施例5:長期毒性實(shí)驗(yàn)資料
[0090] 1、實(shí)驗(yàn)方法
[0091] 將豚鼠隨機(jī)份成4組，每組15只。在豚鼠背部脊柱兩側(cè)將脫毛劑均勻涂上，使其脫 毛范圍約40平方厘米。洗凈脫毛劑，觀察24小時(shí)后每組豚鼠分別涂本發(fā)明眼霜0.2、0.4和 0.8ml，分別含生藥92、184和368mg，另一組涂溶媒0.8ml每日二次，連續(xù)30天，觀察豚鼠的一 般情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動物進(jìn)行血液學(xué)、血液生化及病理學(xué)檢查。
[0092] 2、結(jié)果
[0093] 上述=組用藥豚鼠軀干去毛區(qū)，未見局部皮膚有水腫、充血、紅斑、出血點(diǎn)及潰瘍。 用藥組與對照組動物毛發(fā)色澤、攝食、四肢活動等對照組無明顯差異，血液生化檢查，用藥 組與對照組均在正常范圍。病理組織學(xué)檢查，實(shí)驗(yàn)各組屯、、肝、腎及局部皮膚均未見明顯病 變。提示，本發(fā)明中藥面霜長期用藥對局部皮膚及全身重要臟器均未見明顯的毒性作用。
[0094] 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)
[00M] -、本發(fā)明的微循環(huán)實(shí)驗(yàn)方法：
[0096] 1、材料與方法:取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，每組10只（雌雄各半），對照組每鼠右耳 涂生理鹽水少許；陽性對照組每鼠右耳給予市售歐萊雅復(fù)顏抗皺緊致滋潤晚霜30ml，受試 組為本發(fā)明外用美容膏30mlDl5min后腹腔注射0.1%戊己比妥鋼0.11111/10旨麻醉動物，隨后 尾靜脈注射0.1 %腎上腺素0.1 mL/lOg，立即觀察小鼠右耳微動靜脈口徑(WI1)及0.2mm2毛細(xì) 血管網(wǎng)點(diǎn)數(shù).t檢驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).
[0097] 2結(jié)果與討論
[009引 2.1.對微循環(huán)的影響
[0099] 與對照組相比，受試組1對小鼠毛細(xì)血管開放數(shù)有明顯增多(P<0.01);受試組2對 微靜脈口徑和毛細(xì)血管開放數(shù)有顯著增加(P<〇.01);受試組3對小鼠微動、靜脈口徑及毛 細(xì)血管開放數(shù)皆有增加(P<〇.01);說明受試藥能改善微循環(huán)，有活血化疲作用(表1)。
[0100]表1、本發(fā)明美容膏對小鼠微動、靜脈口徑及毛細(xì)血管開放數(shù)的影響
[0102] 二、對己豆油所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0103] 取健康小鼠30只，隨機(jī)分成3組，即空白對照組、市售歐萊雅復(fù)顏抗皺緊致滋潤晚 霜陽性對照組、本發(fā)明美容膏，每組10只，雌雄各半，陽性對照組和本發(fā)明組分別涂抹，空白 對照組涂抹等劑量的生理鹽水，連續(xù)給藥7天，于末次給藥后0.5小時(shí)，在小鼠左耳內(nèi)外測涂 己豆油致炎劑（2 %己豆油，20 %無水乙醇，5 %蒸饋水，73 %乙酸)0.1 ml致炎，致炎后4小時(shí) 用打孔器(孔徑6mm)打下左、右耳片，稱重，W左右耳片重量差作為腫脹程度，結(jié)果見表2。
[0104] 表2對己豆油所致小鼠耳廓腫脹的影響(X±SD)
[0106] 注：與對照組比較:*沖<0.01;與陽性對照組比較:#P<0.05;由上表實(shí)驗(yàn)結(jié)果可 W看出，本發(fā)明具有更好的消腫藥理作用。
[0107] 對角叉菜膠所致大鼠足巧腫脹的影響
[0108] 取健康大鼠30只，體重180-220g，隨機(jī)分成空白對照組、歐萊雅復(fù)顏抗皺緊致滋潤 晚霜陽性對照組、本發(fā)明美容膏。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。陽性對照組和本發(fā)明藥物 組分別每日涂抹0.2g，空白對照組給予同劑量的生理鹽水涂抹，連續(xù)給藥7天，于末次給藥 后30分鐘，分別在大鼠右后足巧皮下注射1%角叉菜膠混懸液0.1ml/只致炎，分別于致炎前 和致炎后15、30、60、120、240分鐘測大鼠右后足巧的周長，并計(jì)算腫脹率【腫脹率=(致炎后 足巧周長-致炎前足巧周長)/致炎前足巧周長X 100%】;結(jié)果見表3。
[0109] 表3對角叉菜膠所致大鼠足巧腫脹的影響(X±SD)
[0112] 注：與對照組比較:*沖<0.0 l;與陽性對照組比較:#P<0.05;由上表實(shí)驗(yàn)結(jié)果可 W看出，本發(fā)明藥物組具