阿比朵爾在抗絲狀病毒感染中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明是關(guān)于阿比朵爾在抗絲狀病毒感染方面的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā) 明包含阿比朵爾在抗絲狀病毒預(yù)防或治療中的單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 絲狀病毒科（Filoviridae)又稱纖絲病毒，該科病毒只有一個(gè)屬，即絲狀病毒 屬（Filovirus)。絲狀病毒是外形如絲狀的包膜病毒，其基因組為單鏈負(fù)鏈RNA，該屬是 包括兩種病毒，即埃博拉病毒（Ebola virus, E1B0V)和馬爾堡病毒（Marburg virus, MBV), 這兩種病毒均為管制病毒，需要在生物安全4級(jí)（P-4)實(shí)驗(yàn)室操作完成[Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories.4th ed. Washington, DC:U. S. Department of Health and Human Services, U. S. Government Printing Office ；1999. DHHS Publication CDC 93-8395·]。埃博拉出血熱（Ebola hemorrhagic fever，EHF)由埃 博拉病毒引起，是嚴(yán)重危害公共安全和人類健康的重大烈性傳染病，致死率高達(dá)50 % -90 % [Sanchez,A. ；Geisbert, Tff. ；Feldmann, H. Filoviridae:Marburg and Ebola viruses. In :Knipe, DM. ；Howley, PM. , editors. Fields virology.Philadelphia:Lippincott Williams&Wilkins ;2006. 1409-1448.]。馬爾堡病毒也會(huì)引起出血熱，死亡率達(dá)到 50-80% [Nonfatal cases were underreported due to an uncooperative community ； thus, the mortality value seems overestimated(WHO update, August 24,2005]〇 絲 狀病毒是單鏈負(fù)鏈RNA病毒，有囊膜，表面有包膜糖蛋白GP，是唯一負(fù)責(zé)病毒進(jìn)入宿主的 病毒蛋白，中心為螺旋狀核衣殼，包括基因組RNA及其他6種病毒蛋白[Feldmann，H.; Geisbert, Tff. ；Jahr 1 ing, PB. , et al. Filoviridae. In:Fauquet, C. ；Mayo, MA.； Maniloff, J. ；Desselberger, U. ；Ball,LA., editors. Virus taxonomy:VIIIth report of the international committee ontaxonomy of viruses. 2004. 645-653. ] 〇 絲狀病毒基因 進(jìn)化樹(shù)如圖 5 所不[Sanchez A, Trappier SG,Mahy BW,et al. The virion glycoproteins of Ebola viruses are encoded in two reading frames and are expressed through transcriptional editing. Proc Natl Acad Sci USA 1996;93:3602-3607],其 中埃博拉病毒的基因目前已確定5個(gè)亞型，分別為扎伊爾型（Zaire-EBOV)、蘇丹型 (Sudan-EBOV)、萊斯頓型（Reston-EBOV)、科特迪瓦型（Cote d'lvoire-EBOV)和本迪布焦 型（Bundibugyo-EBOV)，其中扎伊爾型惡性程度最強(qiáng)，死亡率90%以上。
[0003] 埃博拉出血熱和馬爾堡出血熱是人畜共患病，人類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物普遍易感，主要 爆發(fā)于非洲地區(qū)，美國(guó)、英國(guó)、瑞士和中東曾報(bào)道有輸入病例。臨床癥狀是突然高燒、頭痛、 肌痛、惡心嘔吐、腹瀉等，最終病人死于多器官出血衰竭、組織壞死[streether LA. Ebola virus. Br J Biomed Sci. 1999. 56 (4) : 280-284. ] 〇
[0004] 目前尚無(wú)針對(duì)絲狀病毒有效疫苗和治療藥物，主要是通過(guò)防范措施控制病毒擴(kuò) 散，密切監(jiān)控疫情，對(duì)有出血癥狀的可疑病人進(jìn)行隔離觀察。治療方法主要是輔助性的，包 括平衡電解質(zhì)、修復(fù)血小板以防止出血，由于埃博拉康復(fù)者的血清在治療疾病中無(wú)顯著作 用，常用的抗病毒方法，如干擾素、利巴韋林均無(wú)效[Heinz Feldmann，Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862.]，目前尚無(wú)特效治療方 法。
[0005] 在針對(duì)絲狀病毒藥物研發(fā)方面[Heinz Feldmann, Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862. ] : (1)常規(guī)抗病毒治療方法，如利 巴韋林和干擾素均無(wú)效；（2)血清療法，應(yīng)用恢復(fù)期病人的血清用于病人的被動(dòng)免疫治療， 結(jié)果沒(méi)有定論；（3)反義RNA或干擾RNA療法，在鼠類和非人靈長(zhǎng)類中顯示有療效。但RNA 干擾療法受限于明確EB0V亞型序列的前提，無(wú)法應(yīng)對(duì)疫情爆發(fā)早期的快速診斷；（4)針對(duì) EB0V凝血異常的癥狀，有報(bào)道來(lái)源于線蟲(chóng)的抗凝蛋白rNAPc2在治療非人靈長(zhǎng)類感染中有 33 %的療效。
[0006] 現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明病人的生存率與病毒量密切相關(guān)，當(dāng)病毒量低于l〇45pfu/ml血液的 病人存活率大大提高[Geisbert TW, Hensley LE, Larsen T，et al. Pathogenesis of Ebola haemorrhagic fever incynomolgus macaques: evidence that dendritic cells are early and sustained targets of infection. Am J Pathol. 2003;163:2347 - 2370·]。因 此，盡量降低病毒的復(fù)制速度，讓宿主的先天和后天免疫應(yīng)答來(lái)克服感染是抗絲狀病毒藥 物研發(fā)的重要策略，阻斷絲狀病毒進(jìn)入的抑制劑研發(fā)有重大意義。
[0007] 以宿主為靶點(diǎn)進(jìn)行抗病毒藥物篩選是當(dāng)前病毒學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。病毒的進(jìn)入 需要宿主蛋白的參與。針對(duì)絲狀病毒進(jìn)入宿主的過(guò)程，2005年和2011年分別發(fā)現(xiàn)細(xì)胞 內(nèi)含體/溶酶體中的組織蛋白酶B(Cathepsin B)和NPC1蛋白（Niemann Pick C1)是宿 主應(yīng)答絲狀病毒侵入的關(guān)鍵因子。另外，2014年最新報(bào)道發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨 酸受體AXL也是重要的EB0V進(jìn)入相關(guān)的宿主因子[Kartik Chandran et al.Endosomal Proteolysis of theEbola Virus Glycoprotein IsNecessary for Infection. Science.2005. 308:1643-1645.]。
[0008] 阿比朵爾（結(jié)構(gòu)式I)是1993年首先由Trofimov等合成并報(bào)道[Trofimov，F(xiàn). A. et al. , Synthesis of a new antiviral agent, arbidole. Pharm. Chem. J. 1993. 27, 75 - 76.], 由前蘇聯(lián)Moscow-based Masterlek?藥廠研發(fā)的抗流感藥物。該藥物在前蘇聯(lián)（現(xiàn)俄羅斯） 已應(yīng)用超過(guò)20年，主要用于甲型和乙型流感病毒引起的呼吸道疾病[Boriskin，Y. S.，et al.,Arbidol:a broad-spectrum antiviral compound that blocksviral fusion. 2008. Cum Med. Chem. 15, 997 - 1005.]。在我國(guó)阿比朵爾也作為人用藥和獸藥用于流感的預(yù)防 和治療[Berendsen，B. J.，et al. , Quantitative trace analysis of a broad range of antiviral drugs in poultry muscle using column-switch liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Anal. Bioanal. Chem. 2012. 402, 1611 - 1623. ]〇
[0009] 除抗流感病毒外，研究還發(fā)現(xiàn)阿比朵爾對(duì)多種RNA病毒感染都有阻斷作用，如副 粘病毒科的呼吸道合胞病毒[Shi，L.，et al.，Antiviral activity of arbidol against influenza A virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackie virus and adenovirus in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2007. 152, 1447 - 1455.]、小核糖 核酸病毒科的脊髓灰質(zhì)炎病毒、鼻病毒和柯薩奇病毒[Brooks，M.J.，et al.，Antiviral activity of arbidol，a broad-spectrum drug for use against respiratory viruses, varies according to test conditions. J. Med. Virol. 2012. 84, 170 - 181.； Zhong, Q. , et al. , Antiviral activity of Arbido1 against Coxsackie virus B5in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2009. 154, 601 - 607.]、本揚(yáng)病毒科的漢坦病毒[Deng, H. Y. , et al. , Efficacy of arbidol on lethal hantaan virus infections in suckling mice and in vitro. Acta Pharmacol. Sin. 2009. 30, 1015 - 1024·]、披蓋病毒科的基孔 肯亞病毒[Delogu, I.,et al. , In vitro antiviral activity of arb idol against Chikungunya virus and characteristics of a selected resistant mutant.2011. Antiviral Res. 90, 99 - 107.]、肝DNA病毒科的乙型肝炎病毒[Zhao, C. , et al· , Synthesis and in vitro anti-hepatitis B virus activities of some ethyl5-hydroxy-lH-indole-3-carboxylates. Bioorg. Med. Chem. 2006. 14, 2552 - 2558]、黃病毒科的丙型 月干炎病毒[Blaising, J. , et al. , Arbidol inhibits viral entry by interfering with clathrin-dependent trafficking. Antiviral Res. 2013. 100,215 - 219.]和 本 揚(yáng)病毒科的克里米亞-剛果出血熱病毒[Lisa Oestereich,et al., Evaluation of Antiviral Efficacy of Ribavirin, Arbidol, and T-705 (Favipiravir)in a Mouse Model for Crimean-Congo