可利霉素在抗結核分枝桿菌感染中的應用
【技術領域】：
[0001] 本發(fā)明設及大環(huán)內醋類抗生素在治療結核桿菌感染中的應用。 技術背景：
[0002] 結核病是由結核分枝桿菌(MTB)感染引起的慢性傳染病，主要累及肺，是傳染病中 單一導致死亡人數最多的疾病。結核病多見于免疫功能低下人群，也是最常見的與艾滋病 相關的一種機會感染性疾病。據世界衛(wèi)生組織(WHO)報告，全世界每年有800萬-1000萬肺結 核新發(fā)病例，有300萬~400萬人死于結核病，且W發(fā)展中國家患者為甚。另據預測，2000-2020年將有約10億人被感染，3500萬人死于結核病。與此同時，MTB耐藥性逐年增加，將成為 全球控制結核病的一大威脅。我國是全球結核病高發(fā)的22個國家之一，活動性結核病患者 數居世界第二位，且流行的特點呈現高感染率、高患病率、高耐藥率和高死亡率，全國200萬 MTB陽性患者中，有1/4W上為結核菌耐藥患者。
[0003] 目前，臨床常用治療結核病的一線藥物(具有明確的抗結核分枝桿菌活性)有:利 福平、異煙阱、鏈霉素、乙胺下醇和化嗦酷胺等5種。然而運些藥物不良反應多，殺菌作用有 限，療程較長，通常使用6個月W上，患者依從性差。二線抗結核藥物(對結核分枝桿菌具抑 菌作用)有:卷曲霉素、乙硫異煙胺、對氨基水楊酸、環(huán)絲氨酸、環(huán)丙沙星、阿米卡星和卡那霉 素等，而運些藥物不良反應較大，治療時間更長（18~24個月），花費昂貴，治愈率也更低。值 得關注的是，臨床研究表明，一線抗結核藥物均可對肝臟造成損害，如異煙阱的不良反應為 周圍神經炎、肝毒性、中樞神經系統(tǒng)障礙及過敏反應;利福平的不良反應有肝毒性、消化道 不適、神經系統(tǒng)癥狀和過敏反應；乙胺下醇的不良反應主要為視神經毒性;化嗦酷胺的不良 反應為出現皮膚黃染和血尿酸增高;鏈霉素毒性及細菌耐藥性問題嚴重限制了其應用，因 與其它藥物聯(lián)用可減少細菌耐藥性的發(fā)生率，盡管臨床應用不多，但仍用作抗結核病的一 線藥物。[朱珊梅海峽藥學2010,22(2): 123-125]。另據報道，2010年，對518株臨床分離結核 分枝桿菌的研究表明，在一線藥物中，對異煙阱的耐藥率最高達到53.67%，對鏈霉素耐藥 率為45.95 % ;在二線藥物中，對氧氣沙星耐藥率達39.77 %，對阿米卡星耐藥率為15.83 %， 對卷曲霉素耐藥率為21.81%;在321株對一種及W上一線藥物的耐藥菌株中，對氧氣沙星 耐藥高達57.Ol%，對阿米卡星和卷曲霉素耐藥率分別為25.55%和33.02% ;在217株多重 耐藥株中，對氧氣沙星耐藥率達72.35% [劉一典等2010中國防瘦協(xié)會臨床基礎專業(yè)學術大 會匯編274-275頁]。運對我國結核病控制工作，特別是耐多藥結核病控制工作的實施帶來 嚴峻的挑戰(zhàn)。因此，盡快尋找抗結核分支桿菌特別是抗多重耐藥菌株的替代產品已經刻不 容緩了。
[0004] 新大環(huán)內醋類藥物克拉霉素、阿奇霉素、羅紅霉素為十四元環(huán)紅霉素的衍生物，其 抗菌作用機制與上述一線、二線抗結核藥物不同，是與菌體內核糖體的50S亞基可逆性結 合，干擾蛋白質的合成。國內有報道稱，克拉霉素對敏感結核分枝桿菌的MIC為0.25-2.0微 克/毫升，對耐藥菌的MIC為2.0-32微克/毫升;阿奇霉素抗結核分枝桿菌的MIC為128微克/ 毫升[唐神結，抗結核藥物研究最新進展，中國防瘦雜志，2006年28卷增刊1-3頁]。據國外報 道，克拉霉素對M. tuberculosis冊7Rv(ATCC 27294)的MIC為6微克/毫升;阿奇霉素的MIC 為95微克/毫升[KanakeshwariFalzari et 曰1: In vitro and in vivo activities o macrolide derivatives against Mycobacterium tuberculosis.Antimicrob.Agents and Chemother. 2005,49(4): 1447-1454];羅紅霉素的MIC ^ 64微克/毫升。此類藥物并未被 列入臨床治療結核分枝桿菌感染的藥物，但有臨床上單獨或與抗結核藥物合并使用治療耐 多藥結核菌感染疾病的報道[許麗等深圳市住院病人抗結核相關抗菌藥物應用調查中國防 瘦雜志 2010,32(3): 151-154]。
[000引研究證明，16元環(huán)與14元環(huán)大環(huán)內醋類抗生素具有相類似的抗菌作用機制。此類 藥物對結核分枝桿菌活性低，如對M. tuberculosis冊7Rv(ATCC 27294)，泰洛菌素的MIC為 58.6微克/毫升，螺旋霉素和麥迪霉素均>100微克/毫升[KanakeshwariFalzari et al: In vitro and in vivo activities of macrolide derivatives against Mycobacterium tuberculosis.Antimicrob.Agents and Qiemother.2005,49(4): 1447-1454]。因此，迄今 為止，國內外尚無此類抗生素用于臨床治療結核病的相關報道。
[0006] 本實驗室研制的一種新型16元環(huán)大環(huán)內醋類抗生素-可利霉素(原用名生技霉素、 必特螺旋霉素），系W異戊酷螺旋霉素為主組分的4"-酷化螺旋霉素，其作用機制是通過與 細菌核糖體結合而抑制其蛋白質合成。體內外試驗結果表明，可利霉素對革蘭陽性菌，尤其 對某些耐藥菌（如耐e-內酷胺金葡菌、耐紅霉素金葡菌等)有效，與同類藥無明顯的交叉耐 藥性。與此同時，它對支原體、衣原體有很好的抗菌活性，對部分革蘭陰性菌也有抗菌作用， 且對弓形體、軍團菌等亦有良好抗菌效果[王W光等，"必特螺旋霉素及其在抗感染性疾病 中的應用"，2003年12月23日，中國發(fā)明專利:ZL 200310122420.9]。可利霉素具有良好的組 織滲透性，其體內抗菌活性明顯優(yōu)于體外，且具有潛在的免疫調節(jié)作用。通過I、ii、m期臨 床研究，證明可利霉素是一種使用安全療效顯著的抗生素。
[0007] 為了進一步發(fā)掘潛在功效，擴大可利霉素臨床適應癥和使用范圍，近年來，本實驗 室W臨床常用的抗結核病相關一線藥物為對照，進行了可利霉素抗結核分枝桿菌活性測定 的系列研究，結果表明，所述可利霉素對臨床分離的結核分枝桿菌中顯示活性的菌株有效 數，均優(yōu)于對照組，提示其有望在治療某些耐藥結核分支桿菌感染疾病中得到應用。本發(fā)明 所述可利霉素在抗結核分枝桿菌感染中的應用，迄今尚未見有國內外的相關報道。

【發(fā)明內容】
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[0008] 本發(fā)明的目的是，提供可利霉素對臨床分離結核分枝桿菌活性的系列檢測實驗研 究，W證明其可能具有治療結核桿菌感染疾病的新用途。
[0009] 本發(fā)明的主要步驟是，采用絕對濃度法對臨床分離的結核桿菌，進行可利霉素抗 結核分枝桿菌活性測定，并W臨床使用的抗結核病一線藥物異煙阱和利福霉素作為對照。 實驗結果表明，可利霉素對臨床分離的240株結核分枝桿菌中顯示活性的菌株為172株，總 有效率為71.66%，其中活性優(yōu)于異煙阱的有37株，占有效菌數的21.5%;活性優(yōu)于利福霉 素的有39株，占有效菌數的22.7%;活性比兩者均優(yōu)的有23株，占有效菌數的13.4%。本發(fā) 明結果提示，可利霉素有望在治療對異煙阱和利福霉素耐藥的結核分枝桿菌感染疾病中發(fā) 掘新的用途。
[0010] 本發(fā)明還提供可利霉素為有效成分與藥學上可接受的載體組成的組合物在制備 抗結核菌感染藥物中的應用。
[0011] 本發(fā)明所述的應用，可W采用口服劑型，也可W采用注射劑型或其它任何適宜的 劑型。
[0012] 實施方案:
[0013] W下實施例僅為幫助本領域技術人員更好地理解本發(fā)明，但不W任何方式限制本 發(fā)明。
[0014] 《實施例1》結核分枝桿菌標本的獲取與處理
[0015] 根據衛(wèi)生部發(fā)布的國標WS288-2008《肺結核診斷標準》的規(guī)定，挑選