一種刺五加提取物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種中藥提取物制備方法，具體涉及一種刺五加提取物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 刺五加（Acanthopanaxsenticosus)為五加科植物，其干燥根和莖具有舒筋活血、 益氣健脾及補(bǔ)腎安神的藥用功效?，F(xiàn)代中醫(yī)藥制劑學(xué)中將刺五加經(jīng)提取加工制成注射液， 主要功效為平補(bǔ)肝腎，益精壯骨，用于治療肝腎不足所致的短暫性腦缺血發(fā)作，腦動(dòng)脈硬 化，腦血栓形成及腦栓塞等病癥；同時(shí)也用于治療冠心病，心絞痛合并神經(jīng)衰弱和更年期綜 合癥等。
[0003] 刺五加中的主要活性成分為黃酮、皂苷類及多糖，苷類含量最高的是刺五加苷 B(紫丁香苷）和刺五加苷E，也含有多種氨基酸、脂肪酸、維生素及礦物質(zhì)。近年來，有較多 關(guān)于刺五加活性物質(zhì)提取分離的技術(shù)研究被報(bào)道或推廣應(yīng)用，主要目的是提高刺五加中總 黃酮、紫丁香苷及刺五加苷E的含量或純度，降低其雜質(zhì)成分的含量，以提高刺五加制劑的 有效性、穩(wěn)定性及用藥安全性。
[0004] 如中國(guó)專利申請(qǐng)CN101084953A-種制備刺五加提取液/物的方法；CN101810656A 一種刺五加提取物及其藥物組合物；CN102579532A-種刺五加組合物、含其制劑及其檢測(cè) 方法等，均是以水溶液提取刺五加藥材，再經(jīng)過醇沉或大孔樹脂過濾等方法制備刺五加提 取物。這些現(xiàn)有技術(shù)方法中均存在提取速率緩慢，提取周期長(zhǎng)，有效成分提取率低，溶劑使 用量大，導(dǎo)致后處理過程復(fù)雜，相應(yīng)產(chǎn)生的的雜質(zhì)增加，不經(jīng)增加了生產(chǎn)成本，還大大影響 了刺五加提取物在藥物制劑中的質(zhì)量，不利于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和刺五加制劑的藥用安全。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供一種提取速率快、有效成分提 取率高的刺五加提取物制備方法。
[0006] 本發(fā)明采用的技術(shù)方案為將刺五加藥材經(jīng)乙醇提取、石硫處理、醇沉、滅菌超濾、 濃縮袋式干燥等工序制備而成。
[0007] 具體包括以下步驟：
[0008] 1) 3~8體積倍量的40~70%乙醇逆流提取刺五加藥材，合并提取液，濃縮至相 對(duì)密度為1. 20~1. 25(80°C測(cè)）；
[0009] 2)用5~10體積倍量的純化水稀釋，攪拌均勻后，過濾，待濾液溫度30 °C~50 °C 時(shí)，用石灰乳調(diào)節(jié)pH值至堿性，攪拌，再用硫酸調(diào)節(jié)pH值至酸性，繼續(xù)攪拌，靜置，濾取上清 液并回收濃縮至相對(duì)密度為1. 15~1. 25 (80°C測(cè)）得到濃縮膏；
[0010] 3)加入濃度93 %以上乙醇使藥液乙醇濃度達(dá)到75 %~85 %，充分?jǐn)嚢?，靜 置12~24小時(shí)，濾取上清液，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，并濃縮至相對(duì)密度為1. 11~ 1. 25(80°C測(cè)）；
[0011] 4)用注射用水稀釋至含總黃酮約5. 0~20.Omg/ml，攪拌均勾后，過濾，濾液調(diào)pH 值4. 0~6. 0,攪拌均勻，高溫滅菌，冷藏12~24小時(shí)，調(diào)pH值為酸性，經(jīng)0. 45μm微孔濾 膜過濾澄清后，采用1~10萬(wàn)級(jí)超濾，再將濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 20~1. 25 (80°C測(cè)）， 帶式干燥，得刺五加提取物干燥粉。
[0012] 上述方法，所述步驟1)逆流提取中乙醇為40%~70%的乙醇，優(yōu)選為55%的乙 醇，逆流提取流速為25~35min/罐，提取溫度為30~80°C，提取時(shí)間為0. 5~2小時(shí)；
[0013] 步驟2)中所述石灰乳為10%~20%的石灰乳，優(yōu)選為15%，所述堿性為pH值 10~12,優(yōu)選pH值11 ;所述硫酸為10%~20%硫酸，優(yōu)選為15%硫酸，所述酸性為pH值 5.0~6. 5,優(yōu)選pH值6 ;
[0014] 步驟3)中所述濃度大于或等于93%的乙醇，優(yōu)選為95%的乙醇；
[0015] 步驟4)中所述高溫滅菌處理為115~121°C下40~60分鐘；調(diào)節(jié)pH值酸性至 5. 5~6. 5,微孔濾膜過濾中膜孔鏡為0. 45μm; 1~10萬(wàn)級(jí)超濾過程中，所用超濾膜的單位 為截留分子量；帶式干燥的溫度為80~105°C，時(shí)間為0. 5~2小時(shí)。
[0016] 上述步驟中所涉及的" ％ "含量均為體積百分比。
[0017] 優(yōu)選地，所述刺五加提取物由以下方法制備：
[0018] 1) 3~8體積倍量的40 %~70%乙醇逆流提取刺五加藥材，逆流提取流速為25~ 35min/罐，提取溫度為30~80°C，提取時(shí)間為0. 5~2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度 為 1. 20 ~1. 25(80°C測(cè)）；
[0019] 2)用5~10體積倍量的純化水稀釋，攪拌均勻后，過濾，待濾液溫度30°C~50°C 時(shí)，用10~20 %的石灰乳調(diào)節(jié)pH值至10. 0~12. 0,攪拌，再用10~20 %的硫酸調(diào)節(jié)pH 值至5. 0~6. 5,繼續(xù)攪拌，靜置，濾取上清液并回收濃縮至相對(duì)密度為1. 15~1. 25 (80°C 測(cè)）得到濃縮膏；
[0020] 3)加入濃度93 %以上乙醇使藥液乙醇濃度達(dá)到75 %~85 %，充分?jǐn)嚢?，靜 置12~24小時(shí)，濾取上清液，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，并濃縮至相對(duì)密度為1. 11~ 1. 25(80°C測(cè)）；
[0021] 4)用注射用水稀釋至含總黃酮約5. 0~20.Omg/ml，攪拌均勾后，過濾，濾液調(diào)pH 值4. 0~6. 0,攪拌均勻，115~121 °C滅菌40~60分鐘，冷藏12~24小時(shí)，調(diào)pH值5. 5~ 6. 5,經(jīng)0. 45μm微孔濾膜過濾澄清后，采用1~10萬(wàn)級(jí)超濾，再將濾液濃縮至相對(duì)密度為 1. 20~1. 25(80°C測(cè)），溫度80~105°C下帶式干燥0. 5~2小時(shí)，得刺五加提取物干燥粉。
[0022] 更優(yōu)選地，所述刺五加提取物由以下方法制備：
[0023] 1) 6體積倍量的55%乙醇逆流提取刺五加藥材，逆流提取流速為30min/罐，提取 溫度為50°C，提取時(shí)間為1小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1. 25 (80°C測(cè)）；
[0024] 2)用8體積倍量的純化水稀釋，攪拌均勻后，過濾，待濾液溫度40°C時(shí)，用15%的 石灰乳調(diào)節(jié)pH值至11，攪拌，再用15 %的硫酸調(diào)節(jié)pH值至6,繼續(xù)攪拌，靜置，濾取上清液 并回收濃縮至相對(duì)密度為1. 25 (80°C測(cè)）得到濃縮膏；
[0025] 3)加入濃度95%的乙醇使藥液乙醇濃度達(dá)到80%，充分?jǐn)嚢瑁o置16小時(shí)，濾取 上清液，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，并濃縮至相對(duì)密度為1. 11 (80°C測(cè)）；
[0026] 4)用注射用水稀釋至含總黃酮約5. 0~20.Omg/ml，攪拌均勾后，過濾，濾液調(diào)pH 值5. 0,攪拌均勻，120°C滅菌50分鐘，冷藏16小時(shí)，調(diào)pH值5,經(jīng)0. 45μm微孔濾膜過濾澄 清后，采用10萬(wàn)級(jí)超濾，再將濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 20 (80°C測(cè)），溫度80°C下帶式干燥 1小時(shí)，得刺五加提取物干燥粉。
[0027] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：
[0028] 本發(fā)明所提供的方法中刺五加藥材經(jīng)乙醇逆流提取和現(xiàn)有技術(shù)中水加熱提取或 水回流提取相比具有顯著的優(yōu)勢(shì)，不僅減少了溶劑的使用節(jié)省能耗，而且在逆流提取過 程中藥材和提取溶劑保持一定速率的逆向運(yùn)動(dòng)（發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)尤其在50°C下，流速為 30min/罐，提取1小時(shí)，提取率最佳），使藥材中的有效成分物質(zhì)提取更加充分，提高有效物 質(zhì)的提取率，提取速率更快，縮短提取周期；其次提取過程中溶劑的使用量減少，也避免引 入更多的雜質(zhì)，使?jié)饪s后處理更為簡(jiǎn)便。
[0029] 其次，刺五加藥材經(jīng)乙醇逆流提取后用石灰乳調(diào)堿，使有效成分中黃酮類與之形 成螯合物，再加硫酸進(jìn)行調(diào)酸，使黃酮類成分溶于溶液中，而雜質(zhì)成分沉淀下來，在經(jīng)過后 續(xù)的醇沉處理，有效除去大分子蛋白質(zhì)等物質(zhì)。高溫滅菌后進(jìn)一步使用超濾，提高包含所得 刺五加提取物制劑的安全性，同時(shí)也最大程度減少有效成分的損失，有效控制刺五加提取 物中總黃酮、紫丁香苷及刺五加苷E有效成分的含量。最后采用采用帶式干燥，提高干燥效 率和受熱時(shí)間，改善提取物粉末顏色。
[0030] 本發(fā)明提供的方法還具有操作簡(jiǎn)單，節(jié)省生產(chǎn)周期，安全高效的優(yōu)點(diǎn)特別適合工 業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 除非另有定義，本發(fā)明使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)的含義與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域 普通技術(shù)人員通常理解的含義相同。通常，本發(fā)明使用的命名及下述實(shí)驗(yàn)方法都是本領(lǐng)域 公知的或常用的，若未特別指明，本發(fā)明實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料。試劑盒儀器等均可市售 獲得。為了使本發(fā)明所解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案及有益效果更加清楚明白，以下結(jié)合具體 實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0032] 實(shí)施例1 :刺五加提取物的制備
[0033] 1)3體積倍量（18L)的40%乙醇逆流提6kg取刺五加藥材，逆流提取流速為 25min/罐，提取溫度為30°C，提取時(shí)間為2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1. 20 (80°C 測(cè)）；
[0034] 2)用5體積倍量的純化水稀釋，攪拌均勻后，過濾，待濾液溫度30°C時(shí)，用10%的 石灰乳調(diào)節(jié)pH值至10. 0,攪拌，再用10 %的硫酸調(diào)節(jié)pH值至5. 0,繼續(xù)攪拌，靜置，濾取上 清液并回收濃縮至相對(duì)密度為1. 15 (80°C測(cè)）得到濃縮膏；
[0035] 3)加入濃度93%的乙醇使藥液乙醇濃度達(dá)到75%，充分?jǐn)嚢?，靜置12小時(shí)，濾取 上清液，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，并濃縮至相對(duì)密度為1. 11 (80°C測(cè)）；
[0036] 4)用注射用水稀釋至含總黃酮約5. 0~20.Omg/ml，攪拌均勾后，過濾，濾液調(diào)pH 值4. 0,攪拌均勻，115°C滅菌60分鐘，冷藏12小時(shí)，調(diào)pH值5. 5,經(jīng)0. 45μm微孔濾膜過濾 澄清后，采用1萬(wàn)級(jí)超濾，再將濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 20 (80°C測(cè)），溫度80°C下帶式干燥 2小時(shí)，得刺五加提取物干燥粉。
[0037] 實(shí)施例2 :刺五加提取物的制備
[0038] 1) 8體積倍量（40L)的70 %乙醇逆流提取5kg刺五加藥材，逆流提取流速 為35min/罐，提取溫度為80°C，提取時(shí)間為0. 5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為 1. 25(80°C測(cè)）；
[0039] 2)用10體積倍量的純化水稀釋，攪拌均勻后，過濾，待濾液溫度50°C時(shí)，用20%的 石灰乳調(diào)節(jié)pH值至12. 0,攪拌，再用20 %的硫酸調(diào)節(jié)pH值至6. 5,繼續(xù)攪拌，靜置，濾取上 清液并回收濃縮至相對(duì)密度為1. 25 (80°C測(cè)）得到濃縮膏；
[0040] 3)加入濃度98%以上乙醇使藥液乙醇濃度達(dá)到85%，充分?jǐn)嚢?，靜置24小時(shí)，濾 取上清液，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，并濃縮至相對(duì)密度為1.