:取對數(shù)生長期的MCF-7細胞,用無血清培養(yǎng)基調(diào) 整密度至IXioVml細胞懸液。將細胞懸液接種于裸鼠蔽窩處皮下,每只皮下注射0.2ml 細胞懸液,接種細胞數(shù)為2X1〇7個。觀察成瘤時間,接種MCF-7細胞懸液后10d,將成瘤 裸鼠隨機分為4組,8只/組,分別為:模型組、本實施例治療乳腺癌中藥的高、中、低劑量組 (W下簡稱:丹檐逍遙散高、中、低劑量組)。丹檐逍遙散高、中、低劑量組分別給予本實施例 治療乳腺癌中藥 17.98g-kgi,di、8.99g-kgi,di、4. 50g-kgi'diig,2次M連續(xù) 給藥15d,模型組ig等容積的生理鹽水。末次給藥Ih后,脫頸椎處死裸鼠,剝離裸鼠蔽 窩處皮下腫瘤組織,-80°C保存?zhèn)溆谩?br>[0028] 1. 2腫瘤質(zhì)量抑瘤率測定:摘取瘤體,稱取新鮮的裸鼠腫瘤瘤體質(zhì)量,計算質(zhì)量抑 制率。抑制率(%)=(模型組平均瘤質(zhì)量一丹檐逍遙散各組平均瘤質(zhì)量)/模型組平均瘤質(zhì) 量X100〇/〇。
[0029] 1. 3腫瘤組織形態(tài)學(xué)觀察:將腫瘤組織標(biāo)本固定于4%多聚甲醒溶液中,20%薦糖脫 水,石蠟包埋,切片,脫蠟,蘇木素、伊紅染色,脫水、透明、封片,光學(xué)顯微鏡下觀察腫瘤組織 形態(tài)并拍照。
[0030] 1. 4腫瘤組織細胞調(diào)亡測定:腫瘤組織標(biāo)本冰凍切化Tunel細胞調(diào)亡檢測,按試 劑盒說明書操作處理,顯微鏡下觀察并拍照。
[0031] 1. 5統(tǒng)計分析:采用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析,計量資料采用"均值+標(biāo)準(zhǔn)差" 表示,多組數(shù)據(jù)之間比較采用單因素方差分析(one-wayAN0VA),檢驗水準(zhǔn)a=0. 05,即P <0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 陽〇3引 2、結(jié)果。
[0033] 2. 1本實施例提供的治療乳腺癌的中藥備稱"丹檐逍遙散")對荷瘤裸鼠腫瘤組織 生長情況的影響:人乳腺癌MCF-7細胞接種后裸鼠成瘤率為100%,與模型組比較,丹檐逍遙 散高劑量組和丹檐逍遙散中劑量組對腫瘤組織生長均有不同程度的抑制作用(P< 0. 05或 P< 0. 01),而丹檐逍遙散低劑量組與之比較無統(tǒng)計學(xué)意義,見表1。
[0034] 表1:丹檐逍遙散對荷瘤裸鼠腫瘤組織質(zhì)量和抑瘤率影響(均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差,n= 8)。
陽0對注:與模型組比較"戶< 0. 05,"尸< 0. 01。
[0036] 2. 2丹檐逍遙散對腫瘤組織形態(tài)學(xué)的影響,見圖1,圖1中A為模型組、B為丹檐逍 遙散高劑量組、C為丹檐逍遙散中劑量組、D為丹檐逍遙散低劑量組。分離后的裸鼠腫瘤結(jié) 節(jié)呈類圓形、楠圓形、或呈不規(guī)則形,腫瘤結(jié)節(jié)剖面蒼白,部分腫瘤組織累及皮膚,但未見淋 己結(jié)和臟器轉(zhuǎn)移。光學(xué)顯微鏡下見模型組細胞排列密集呈團索樣,細胞核增大、呈深染,異 型性明顯,散在分布少量細胞壞死灶。與模型組比較,丹檐逍遙散高劑量組和中劑量組見壞 死灶顯著增加,胞漿淡染;而丹檐逍遙散低劑量組與模型組無明顯差異。
[0037] 2. 3丹檐逍遙散對腫瘤組織細胞調(diào)亡的影響,見圖2,圖2中A為模型組、B為丹檐 逍遙散高劑量組、C為丹檐逍遙散中劑量組、D為丹檐逍遙散低劑量組。Tunel染色實驗結(jié) 果提示,模型組可見少量細胞調(diào)亡;與模型組比較,丹檐逍遙散高劑量組和丹檐逍遙散中劑 量組腫瘤組織細胞被化nel染色明顯增加,調(diào)亡細胞的胞核呈棟色或棟褐色,不均勻散在 分布,說明細胞加速進入調(diào)亡狀態(tài);而與模型組比較,丹檐逍遙散低劑量組無明顯差異。
[0038] 綜上所述,本實施例提供的治療乳腺癌的中藥,可W抑制荷瘤裸鼠腫瘤組織生長, 其抑制程度與劑量相關(guān),丹檐逍遙散中劑量組抑瘤效果最好。
[0039] 實施例2。
[0040] 本實施例提供一種治療乳腺癌的中藥,是由如下重量份數(shù)的原料組成的:當(dāng)歸10 份、白藥20份、巧等10份、白術(shù)10份、柴胡20份、牡丹皮5份、檐子5份、炙甘草5份。 陽OW實施例3。
[0042] 本實施例提供一種治療乳腺癌的中藥,是由如下重量份數(shù)的原料組成的:當(dāng)歸10份、白藥10份、巧等20份、白術(shù)20份、柴胡10份、牡丹皮5份、檐子5份、炙甘草5份。
【主權(quán)項】
1. 一種治療乳腺癌的中藥,其特征在于,是由如下原料組成的:當(dāng)歸4~20份、白藥 4~20份、茯苓4~20份、白術(shù)4~20份、柴胡4~20份、牡丹皮2~10份、梔子2~10 份、炙甘草2~10份。2. 如權(quán)利要求1所述的治療乳腺癌的中藥,其特征在于,是由如下原料組成的:當(dāng)歸15 份、白藥15份、茯苓15份、白術(shù)15份、柴胡15份、牡丹皮7. 5份、梔子7. 5份、炙甘草7. 5 份。3. 如權(quán)利要求2所述的治療乳腺癌的中藥,其特征在于,是由如下重量份數(shù)的原料組 成的:當(dāng)歸10份、白藥20份、茯苓10份、白術(shù)10份、柴胡20份、牡丹皮5份、梔子5份、炙 甘草5份。4. 如權(quán)利要求3所述的治療乳腺癌的中藥,其特征在于,是由如下重量份數(shù)的原料組 成的:當(dāng)歸10份、白藥10份、茯苓20份、白術(shù)20份、柴胡10份、牡丹皮5份、梔子5份、炙 甘草5份。5. 如權(quán)利要求1-4所述的治療乳腺癌的中藥的制備方法,其特征在于,水提,加水浸泡 30min,煎煮時間為30min,煎好后用八層紗布過濾藥物,收集藥液,取過濾后藥物按照前 述方法再次煎煮,將兩次煎煮后的藥液混合,即得。
【專利摘要】一種治療乳腺癌的中藥,是由如下重量份數(shù)的原料組成的:當(dāng)歸4~20份、白藥4~20份、茯苓4~20份、白術(shù)4~20份、柴胡4~20份、牡丹皮2~10份、梔子2~10份、炙甘草2~10份。本發(fā)明提供的治療乳腺癌的中藥,組方的八味中藥辛甘酸苦合用、收散清補并進,配伍規(guī)律基于中醫(yī)基本理論,切中乳腺癌的中醫(yī)病因、病機,對于乳腺癌及癌前病變、術(shù)后以及不宜手術(shù)、放、化療的患者,以及在防止腫瘤轉(zhuǎn)移、術(shù)后復(fù)發(fā)、改善癥狀和體征等方面,均發(fā)揮了較好的療效;另外,本發(fā)明采用辨證和辨病相結(jié)合治療乳腺癌患者,具有療效確切,安全、副作用少的特點,能夠降低腫瘤轉(zhuǎn)移的可能性,增強機體免疫力,提高患者的生活質(zhì)量和生存率,市場潛力巨大。
【IPC分類】A61P35/00, A61P15/14, A61K36/744
【公開號】CN105343241
【申請?zhí)枴緾N201510931240
【發(fā)明人】李然, 李海波, 劉立萍, 顏頎, 李雪峰
【申請人】遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【公開日】2016年2月24日
【申請日】2015年12月15日