一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及 其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 腦膠質(zhì)瘤是發(fā)生在人類身上最為常見的腫瘤之一，其惡化程度很高。一般從確診 開始，患者的壽命不超過一年。作為中樞系統(tǒng)疾病中最為常見的腫瘤之一，腦膠質(zhì)瘤約占成 人顱內(nèi)腫瘤的30% -50%，有容易復(fù)發(fā)、治療困難等特點(diǎn)。目前對(duì)腦膠質(zhì)瘤的治療手段仍然 采用手術(shù)為主，放療化療為輔。由于腦膠質(zhì)瘤的侵襲性生長(zhǎng)，手術(shù)時(shí)不能完全切除，從而也 就決定了化療是繼腦膠質(zhì)瘤手術(shù)之后的輔助治療中最為重要的一環(huán)，但是腦膠質(zhì)瘤對(duì)諸多 化療藥物的耐藥性，導(dǎo)致腦膠質(zhì)瘤的臨床化療的治療效果均不理想。因此，尋找對(duì)腦膠質(zhì)瘤 更有效而且抗耐藥性的中草藥制劑，并探討其可能機(jī)制是當(dāng)下迫切需要解決的問題之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 鑒于外科手術(shù)和化療存在的不足，本發(fā)明的目的是提供一種治療腦膠質(zhì)瘤的中藥 組合物及其應(yīng)用。
[0004] 為了實(shí)現(xiàn)本能發(fā)明的目的，發(fā)明人通過大量試驗(yàn)對(duì)傳統(tǒng)中藥材進(jìn)行研究并不懈探 索，最終獲得了如下技術(shù)方案：
[0005] -種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，該藥物組合物由中藥材原料經(jīng)乙醇溶液熱回流 提取的濾液制得，按重量份計(jì)，所述的中藥材原料包括：海藻15-25份、狗仔花30-37份、鐵 線草30-37份、黃藥子10-18份、八月札9-15份、玉簪花9-15份、三棱11-20份、天竺黃9-15 份、天麻9-15份。
[0006] 優(yōu)選地，如上所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，按重量份計(jì)，所述的中藥材原料由 海藻19-22份、狗仔花32-34份、鐵線草32-34份、黃藥子13-15份、八月札11-13份、玉簪 花11-13份、三棱14-16份、天竺黃11-13份和天麻11-13份組成。
[0007] 在本發(fā)明的一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施例中，如上所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，按重 量份計(jì)，所述的中藥材原料由海藻20份、狗仔花33份、鐵線草33份、黃藥子14份、八月札 12份、玉簪花12份、三棱15份、天竺黃12份和天麻12份組成。
[0008] 進(jìn)一步優(yōu)選地，如上所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，熱回流提取所采用的乙醇 溶液的體積分?jǐn)?shù)為70 % -80 %，再進(jìn)一步優(yōu)選為75 %。
[0009] 需要說明的是，本發(fā)明的藥物組合物所采用的中藥材原料具有如下來源：海藻 選用馬尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum(Turn.)C.Ag.的干燥藻體。狗仔花選 用菊科斑鳩菊屬植物咸奸花Vernonia patula(Ait. )Merr.的干燥全草。鐵線草選用 禾本科狗牙根屬植物狗牙根Cynodon dactylon(L. )Pers.干燥全草。黃藥子選用薯截 科薯截屬植物黃獨(dú)Dioscorea bulbifera L.的干燥塊莖。八月札選用木通科植物木 通Akebia quinata(Thunb. )Decne的干燥成熟果實(shí)。玉簪花選用百合科植物玉簪Hosta plantaginea(Lam.)Ascherson.的干燥花。三棱選用黑三棱科植物黑三棱Sparganium stoloniferum Buch. -Ham.的干燥塊莖。天竺黃選用禾本科植物青皮竹Bambusa textilis McClure桿內(nèi)的分泌液干燥后的塊狀物。天麻選用蘭科植物天麻Gastrodia elata Blume. 的干燥塊莖。
[0010] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的藥物組合物通過多靶點(diǎn)誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡發(fā)揮藥 效，具有較好治療腦膠質(zhì)瘤的活性。另外，本發(fā)明為純中藥制劑，對(duì)人體特別是對(duì)肝臟無毒 性，并且本發(fā)明藥物制備簡(jiǎn)單，原料易得，適于大眾化使用，具有很好的臨床應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 以下是本發(fā)明中藥提取物的制備實(shí)施例和藥效試驗(yàn)例，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。 但是，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受限于以下實(shí)施例，凡是基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù) 均屬于本發(fā)明的范圍。
[0012] 實(shí)施例1 :中藥提取物的制備
[0013] 稱取海藻2. 0kg、狗仔花3. 3kg、鐵線草3. 3kg、黃藥子1. 4kg、八月札1. 2kg、玉簪 花1. 2kg、三棱1. 5kg、天竺黃1. 2kg和天麻1. 2kg，合并，粉碎，置于中藥提取裝置中，用體 積濃度為75%的乙醇溶液熱回流提取三次，第一次加藥材總量12倍的乙醇溶液，提取2h ; 第二次加藥材總量11倍的乙醇溶液，提取1. 5h ;第三次加藥材總量10倍的乙醇溶液，提取 1. 5h ;四層紗布過濾，合并濾液，減壓濃縮并回收乙醇后至稠膏，冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，過 100目篩，得到中藥提取物，用于實(shí)施例3的體外試驗(yàn)。
[0014] 實(shí)施例2 :大鼠 C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的培養(yǎng)
[0015] 將大鼠 C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞復(fù)蘇，加入含10%已滅活胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基 (含NaHC032g/L，青霉素100U/mL，鏈霉素100U/mL)中，將培養(yǎng)瓶放入含5% C02、37°C條件 下的恒溫密閉細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，取10 μ L對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期C6細(xì)胞，用紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板光鏡下計(jì) 數(shù)，調(diào)節(jié)濃度使每10 μ L含1 X 106個(gè)細(xì)胞，然后按1 :9加入0. 4%臺(tái)盼藍(lán)等滲鹽溶液，lmin 內(nèi)確認(rèn)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞存活率> 95%。
[0016] 實(shí)施例3 :中藥提取物對(duì)腦膠質(zhì)瘤的療效研究
[0017] 健康SD大鼠，7周齡，雄性，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后用于試驗(yàn)。試驗(yàn)開始后首先復(fù)制大 鼠腦膠質(zhì)瘤模型，方法如下：采用10%水合氯醛進(jìn)行腹腔注射麻醉，大鼠腦立體定向儀頭 架固定頭部，兩耳針深入外耳道，剪去頭頂部毛發(fā)，消毒，鋪洞巾。剪開頭皮，逐層暴露至顱 骨，確定前囟位置。囟中點(diǎn)前1mm，矢狀縫右側(cè)旁開3. 0~3. 5mm，接種對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的C6腦膠 質(zhì)瘤細(xì)胞（實(shí)施例2培養(yǎng)）。接種部位為大鼠右側(cè)尾狀核，自接種點(diǎn)垂直進(jìn)針，從接觸硬膜 開始計(jì)算，進(jìn)針深度約6_，后退1_，將微量注射器內(nèi)10 μ L細(xì)胞懸液（含有約1. 0 X 106C6 細(xì)胞），緩慢注入，拔針后用骨蠟封閉，逐層縫合頭皮。給予3d含抗生素的飲用水預(yù)防感染。 接種后10d，行強(qiáng)化頭部MRI，確定是否有腫瘤形成。將荷瘤鼠隨機(jī)分為如下三組：模型對(duì) 照組，提取物高、低劑量組，每組10只大鼠。提取物高、低劑量組分別灌胃給予800、400mg/ kg的中藥提取物（實(shí)施例1制備，以純化水配制成藥液），模型對(duì)照組灌胃等容積的純化 水。三組均每日早晚各灌胃一次相應(yīng)受試物，時(shí)間為1個(gè)月。給予結(jié)束后，每組大鼠行頭顱 MRI檢查，記錄腫瘤體積，然后斷頭處死大鼠，切取腫瘤組織，4%多聚甲醛固定，測(cè)量腫瘤長(zhǎng) 短徑，按照公式計(jì)算各組抑瘤率。抑瘤率=(模型對(duì)照組腫瘤體積-治療組腫瘤體積）/模 型對(duì)照組腫瘤體積X 100%。需要說明的是，抑瘤率多30%為腫瘤對(duì)藥物敏感；腫瘤體積= aXbX π/6(a為測(cè)量的腫瘤短徑，b為腫瘤長(zhǎng)徑）。另外，取腫瘤組織10%甲醛固定，常規(guī) 包埋蠟塊。切片進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察腫瘤細(xì)胞數(shù)量、密度及壞死情況。試驗(yàn)結(jié)果如下：
[0018] 通過表1的試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果可以看出，與模型對(duì)照組相比，提取物各劑量組的腫瘤 體積均顯著減?。≒ < 0. 05或P < 0. 01)，這說明本發(fā)明的藥物組合物具有抑制腦膠質(zhì)瘤生 長(zhǎng)的作用。
[0019] 表1各組腦膠質(zhì)瘤大鼠腫瘤體積及抑瘤率比較
[0022] 通過觀察HE染色后的病理切片可以看出，模型對(duì)照組C6膠質(zhì)瘤內(nèi)可見生長(zhǎng)活躍 的腫瘤細(xì)胞，密集成群，瘤細(xì)胞異型性明顯，細(xì)胞核大深染，核分裂像多見。提取物低劑量組 腫瘤細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組減少，圍繞增生小血管或壞死灶云集在一起呈花環(huán)狀。提取物高劑 量組C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)密度較模型對(duì)照組降低更為明顯，細(xì)胞體積變小，細(xì)胞核形態(tài)相對(duì) 規(guī)則，有大片壞死，并可見核固縮的凋亡細(xì)胞。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，其特征在于：該藥物組合物由中藥材原料經(jīng)乙醇 溶液熱回流提取的濾液制得，按重量份計(jì)，所述的中藥材原料包括：海藻15-25份、狗仔花 30-37份、鐵線草30-37份、黃藥子10-18份、八月札9-15份、玉簪花9-15份、三棱11-20 份、天竺黃9-15份、天麻9-15份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，其特征在于：按重量份計(jì)，所述的 中藥材原料由海藻19-22份、狗仔花32-34份、鐵線草32-34份、黃藥子13-15份、八月札 11-13份、玉簪花11-13份、三棱14-16份、天竺黃11-13份和天麻11-13份組成。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，其特征在于：按重量份計(jì)，所述的 中藥材原料由海藻20份、狗仔花33份、鐵線草33份、黃藥子14份、八月札12份、玉簪花12 份、三棱15份、天竺黃12份和天麻12份組成。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，其特征在于：所述的乙 醇溶液的體積分?jǐn)?shù)為70% -80%。5. 權(quán)利要求1或2或3所述的中藥材原料組合物在制備抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的藥物 中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及其應(yīng)用，該藥物組合物由中藥材原料經(jīng)乙醇溶液熱回流提取的濾液制得，按重量份計(jì)包括：海藻15-25份、狗仔花30-37份、鐵線草30-37份、黃藥子10-18份、八月札9-15份、玉簪花9-15份、三棱11-20份、天竺黃9-15份、天麻9-15份。本發(fā)明的藥物組合物通過多靶點(diǎn)誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡發(fā)揮藥效，具有較好治療腦膠質(zhì)瘤的活性。
【IPC分類】A61K36/902, A61P35/00
【公開號(hào)】CN105233108
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510627458
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請(qǐng)人】青島金智高新技術(shù)有限公司
【公開日】2016年1月13日
【申請(qǐng)日】2015年9月28日