一種紫鴨跖草提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥提取物領(lǐng)域，具體涉及一種紫鴨跖草提取物，該提取物的制備方 法及醫(yī)藥用途，該提取物可以應(yīng)用于制備降血糖的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 紫鴨跖草為為鴨跖草科植物紫露草的全草。夏、秋采收，曬干或鮮用。又名血見愁 (《廣西中藥志》）、鴨舌草、本山金線連、鴨舌黃（《泉州本草》）。
[0003] 紫鴨跖草原形態(tài)紫露草為一年生草本，高20~50厘米。莖多分枝，帶肉質(zhì)，紫紅 色，下部匍匐狀，節(jié)上常生須根，上部近于直立。葉互生，披針形，長(zhǎng)6~13厘米，寬6~10 毫米，先端漸尖，全緣，基部抱莖而成鞘，鞘口有白色長(zhǎng)睫毛，上面暗綠色，邊緣綠紫色，下面 紫紅色。花密生在二叉狀的花序柄上，下具線狀披針形苞片，長(zhǎng)約7厘米；萼片3,綠色，卵 圓形，宿存；花瓣3,藍(lán)紫色，廣卵形；雄蕊6, 2枚發(fā)商，3枚退化，另有1枚花絲短而纖細(xì)，無 花藥；雌蕊1，子房卵形，3室，花柱絲狀而長(zhǎng)，柱頭頭狀。蒴果橢圓形，有3條隆起棱線。種 子呈三棱狀半圓形，漢棕色。花期夏秋。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種紫鴨跖草提取物，其制備方法和液相分析方法，含有 該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備降血糖藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種紫鴨跖草提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的紫鴨跖草80~90份和干燥的黨參10~ 20份，混合粉碎，用75 %乙醇溶液熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃 縮液；(b)將步驟（a)所得乙醇提取濃縮液用水稀釋，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的 正丁醇萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正 丁醇萃取物用水溶解，過濾，用大孔樹脂富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積除去 大極性成分，再用75%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75%洗脫液，減壓濃縮即得。
[0008] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次制備的提取物的批間差 異，所述提取物的液相分析方法為：
[0009] 色譜柱：AgilentZorbaxExtent_C18 柱（4. 6mmX250mm，5ym);
[0010] 流動(dòng)相：A為乙腈，B為0? 5%磷酸溶液；
[0011] 梯度洗脫程序：0 ~5min，A10%-15%;5 ~lOmin，A15%-48%;10 ~25min， A48%- 78% ;25 ~30min，A78%- 10% ;
[0012] 流動(dòng)相流速：1.OmL?minS檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm;柱溫：35°C;進(jìn)樣量：10yL。
[0013] 藥物制劑，含有治療有效量的所述提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0014] 所述的提取物在制備降血糖藥物中的應(yīng)用。
[0015] 所述的藥物制劑在制備降血糖藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0017] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明紫鴨跖草提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對(duì)人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0018] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0019] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對(duì)干燥的紫鴨跖草和黨參進(jìn)行提取、除雜、富集處理， 能得到具有降血糖作用的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指 紋圖譜，用于控制不同批次制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0020] 圖1為紫鴨跖草提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0022] 實(shí)施例1 :紫鴨跖草提取物①制備（85份紫鴨跖草，15份黨參）
[0023] 藥材來源：紫鴨跖草和黨參購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)。
[0024] 主要試劑：食品級(jí)乙醇購(gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)AB-8大孔樹脂購(gòu) 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA;85 %磷酸為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0025] 制備方法：將8. 5kg干燥紫鴨跖草根莖和1. 5kg干燥黨參混合粉碎，用75 %乙醇 溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所 得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽 和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱 體積1. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)除去大極性成分，再用75% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集75 %洗脫液，減壓濃縮，即得紫鴨跖草提取物約150g。
[0026] 實(shí)施例2 :紫鴨跖草提取物②制備（80份紫鴨跖草，20份黨參）
[0027] 制備方法：將8. 0kg干燥紫鴨跖草根莖和2. 0kg干燥黨參混合粉碎，用75 %乙醇 溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所 得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽 和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱 體積1. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)除去大極性成分，再用75% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集75 %洗脫液，減壓濃縮，即得紫鴨跖草提取物約150g。
[0028] 實(shí)施例3 :紫鴨跖草提取物③制備（90份紫鴨跖草，10份黨參）
[0029] 制備方法：將9. 0kg干燥紫鴨跖草根莖和1. 0kg干燥黨參混合粉碎，用75 %乙醇 溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所 得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽 和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱 體積1. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)除去大極性成分，再用75% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集75 %洗脫液，減壓濃縮，即得紫鴨跖草提取物約150g。
[0030] 實(shí)施例4 :紫鴨跖草提取物④制備（75份紫鴨跖草，25份黨參）
[0031] 制備方法：將7. 5kg干燥紫鴨跖草根莖和2. 5kg干燥黨參混合粉碎，用75%乙醇 溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所 得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽 和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱 體積1. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)除去大極性成分，再用75% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集75 %洗脫液，減壓濃縮，即得紫鴨跖草提取物約150g。
[0032] 實(shí)施例5 :紫鴨跖草提取物⑤制備（95份紫鴨跖草，5份黨參）
[0033] 制備方法：將9. 5kg干燥紫鴨跖草根莖和0. 5kg干燥黨參混合粉碎，用75 %乙醇 溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所 得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽 和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱 體積1. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)除去大極性成分，再用75% 乙醇洗脫10個(gè)柱體積（15L)，收集75 %洗脫液，減壓濃縮，即得紫鴨跖草提取物約150g。
[0034] 實(shí)施例6 :液相色譜分析
[0035] 供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物5mg至50mL棕色容量瓶中，加 30mL10 %乙腈水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加10 %乙腈水溶液定容。分析方法如 下：
[0036] 高效液相色譜儀：Agilent1260,二元栗；
[0037] 色譜柱：AgilentZorbaxExtent_C18 柱（4. 6mm