一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-環(huán)糊精包合 物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿德呋啉是新一代的化工合成的抗球蟲藥物，其主要結(jié)構(gòu)與其他抗球蟲藥物不 同：與其他抗球蟲藥無(wú)交叉耐藥性。實(shí)驗(yàn)室研究證實(shí)，阿德呋啉具有廣譜抗球蟲活性，對(duì)各 種小腸球蟲都有抑制和殺滅作用，是一種高效、廣譜、低毒的抗球蟲藥。
[0003] 阿德呋啉通過干擾球蟲的嘌呤代謝而發(fā)揮抗球蟲作用。抗球蟲活性主要集中在球 蟲的無(wú)性生殖期，對(duì)卵囊的孢子化也有一定的抑制作用。阿德呋啉在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)肝臟中藥 酶的作用下，可氧化成阿德呋啉_氮-氧化物，其氧化物的抗球蟲活性比原藥強(qiáng)。
[0004] 阿德呋啉是一種新型廣譜抗球蟲藥物，與其他抗球蟲藥無(wú)交叉耐藥性，但在使用 時(shí)也應(yīng)注意穿梭給藥和輪換給藥。
[0005] 阿德呋啉有以下特點(diǎn)： (1)廣譜抗球蟲：本品對(duì)臨床常見小腸球蟲和盲腸球蟲等均有良好的抑殺效果。
[0006] (2)療效確切：本品作為新型廣譜抗球蟲藥物，與其他抗球蟲藥物不存在交叉耐藥 性，因此本品對(duì)臨床常見球蟲病均有著較好的控制效果。（3)促生長(zhǎng)作用：可以提高營(yíng)養(yǎng)物 質(zhì)的吸收作用，促進(jìn)盲腸和大腸內(nèi)纖維素發(fā)酵生成揮發(fā)性脂肪酸。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明目的在于克服阿德呋啉現(xiàn)有劑型在使用時(shí)的不足，提供一種能夠溶于水、 且毒性低的阿德呋啉新劑型。
[0008] 本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-P _環(huán)糊精包合物的 制備方法。
[0009] 本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下： 一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-(6-環(huán)糊精包合物的制備方法，其特征是由重量比為 阿德呋啉：羥丙基-(6-環(huán)糊精：PVP (聚乙烯吡咯烷酮）：聚乙二醇（PEG):泊洛沙姆 =30 : (60-70) : (0.5-1) : (0.15-0.5) : (0.2-0. 5)的原料制成，并按如下步驟進(jìn)行： (1) 將干燥后的聚乙二醇（PEG)、泊洛沙姆粉碎后制成150-200目粉； (2) 在裝有球形冷凝管的三口燒瓶中，將羥丙基-P -環(huán)糊精與有機(jī)溶劑按質(zhì)量體積比 (60g~70g) : (80 mL ~120mL)混合，在60~80°C水浴條件下攪拌至溶解； (3) 將PVP、聚乙二醇（PEG)、泊洛沙姆用乙醇溶解后加入步驟（3)的溶液中； (4) 稱取阿德呋啉用冰醋酸溶解，緩慢加入步驟（3)的溶液中，在60~80°C水浴條件下 攬摔 20~60min ; (5) 將步驟（4)的包被液減壓蒸餾收回溶劑，蒸至濃漿狀停止蒸餾，減壓干燥，收集產(chǎn) 品，粉碎得抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-環(huán)糊精包合物。
[0010] 較好地，步驟（2 )中的有機(jī)溶劑為冰醋酸、DMF (二甲基甲酰胺)、DMAC (二甲基乙 酰胺)、無(wú)水甲醇、95v%乙醇或無(wú)水乙醇； 所述的PVP為PVPkl7、PVPk30、PVPk60中的一種或兩種的混合，聚乙二醇為聚乙二醇 4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一種或兩種的混合； 步驟（4)中阿德呋啉冰醋酸溶液的加入方法為恒壓滴液漏斗加入或采用其它緩慢加入 的裝置分批或連續(xù)緩慢地加入。
[0011] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為： 首先，增加阿德呋啉的溶解度，可以提高其生物利用度，也為新劑型的開發(fā)和與其他藥 物的合理配伍奠定基礎(chǔ)； 其次，增加其安全范圍，降低阿德呋啉的毒性，可以增加其使用的安全劑量，減少中毒 事件的發(fā)生； 再次，通過增加其溶解度提高了生物利用度，使其在胃腸道內(nèi)緩慢釋放，可以延長(zhǎng)其半 衰期，維持較長(zhǎng)時(shí)間的血藥濃度。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 下面將通過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)的介紹。
[0013] 實(shí)施例1 一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-0 _環(huán)糊精包合物的制備方法，包括如下步驟： (1) 先將干燥后的聚乙二醇（PEG4000) 0. 5g、泊洛沙姆0. 2g粉碎后制成200目粉； (2) 在裝有球形冷凝管的三口燒瓶中將羥丙基-P -環(huán)糊精70g與SOmL冰醋酸混合，在 60°C水浴條件下攪拌至溶解； (3) 將PVPkl7 0. 5g和步驟（1)所得物用50mL 95v%乙醇溶解后緩慢加入步驟（2)的 溶液中； (4) 再稱取阿德呋啉30g，用冰醋酸40mL溶解后，用恒壓漏斗滴入到步驟（3)溶液中， 在60°C水浴條件下攪拌30min ; (5) 包被結(jié)束后，將包被液減壓蒸餾回收溶劑，蒸至濃漿狀停止蒸餾，減壓干燥，收集 產(chǎn)品，粉碎得阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物。
[0014] 實(shí)施例2 一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物的制備方法，包括如下步驟： (1) 先將干燥后的聚乙二醇（PEG6000) 0. 15g、泊洛沙姆0. 5g粉碎后制成150目粉； (2) 在裝有球形冷凝管的三口燒瓶中，將羥丙基-P -環(huán)糊精60g與IOOmLDMF混合，在 70°C水浴條件下攪拌至溶解； (3) 將PVPk30 Ig和步驟（1)所得物用60mL 95v%的乙醇溶解后緩慢加入步驟（2)的 溶液中； (4) 再稱取阿德呋啉30g，用冰醋酸50mL溶解，緩慢加入到步驟（3)的溶液中，在80°C 水浴條件下攪拌20min ; (5) 包被結(jié)束后，將包被液減壓蒸餾回收溶劑，蒸至濃漿狀停止蒸餾，減壓干燥，收集產(chǎn) 品，粉碎得阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物。
[0015] 實(shí)施例3 一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物的制備方法，包括如下步驟： (1) 先將干燥后的聚乙二醇（PEG8000) 0. 3g、泊洛沙姆0. 3g粉碎后制成200目粉； (2) 在裝有球形冷凝管的三口燒瓶中，將羥丙基-P -環(huán)糊70g與120mL無(wú)水乙醇混合， 在80°C水浴條件下攪拌至溶解； (3) 將PVPk60 0. 8g和步驟（1)所得物用70mL 95v%的乙醇溶解后緩慢加入步驟（2) 的溶液中； (4) 再稱取阿德呋啉30g，用冰醋酸60mL溶解，緩慢加入到步驟（3)的溶液中，在70°C 水浴條件下攪拌60min ; (5) 包被結(jié)束后將包被液減壓蒸餾回收溶劑，蒸至濃漿狀停止蒸餾，減壓干燥，收集產(chǎn) 品，粉碎得阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物。
[0016] 本發(fā)明所制備出的阿德呋啉羥丙基-環(huán)糊精包合物采用高效液相色譜法視差 折光檢測(cè)器檢測(cè)，包合率在98%以上。
[0017] 試驗(yàn)例：阿德呋啉包合物對(duì)人工感染雞球蟲病的療效試驗(yàn) 1材料與方法 I. 1試驗(yàn)雞選擇與分組：選擇剛出殼的羅曼蛋雞雛雞1200羽，飼喂不含任何藥物的飼 料，自由飲水，無(wú)球蟲飼養(yǎng)至20日齡，經(jīng)糞檢確認(rèn)無(wú)球蟲卵囊后供試驗(yàn)用，隨機(jī)分為4組，阿 德呋啉包合物組300羽、普通阿德呋啉粉劑組300羽、陽(yáng)性對(duì)照組300羽，陰性對(duì)照組300 羽，試驗(yàn)組按照100g阿德呋啉包合物和普通阿德呋啉粉劑拌料50-100kg飼料飼喂，對(duì)照組 飼喂基礎(chǔ)日糧。
[0018] 1.2試驗(yàn)藥物阿德呋啉包合物(實(shí)施例1)，普通阿德呋啉粉劑，河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥 業(yè)有限公司生產(chǎn)。
[0019] 1. 3人工感染及給藥方法：人工給實(shí)驗(yàn)組接種球蟲卵囊前24h，給各實(shí)驗(yàn)組拌料 給藥，連續(xù)用藥7d，陽(yáng)性對(duì)照組感染不給藥，陰性對(duì)照組不感染不給藥。
[0020] 1.4試驗(yàn)期限及臨床觀察：試驗(yàn)期為7 d，每日觀察雞的發(fā)病情況，記錄血便和死 亡數(shù)等。人工感染后第7至第8天，將各組雞分別稱重并全部撲殺，觀察并記錄試驗(yàn)雞的增 重及盲腸和小腸病變情況。
[0021] 1.5藥效判定標(biāo)準(zhǔn) 1. 5. 1相對(duì)增重率：試驗(yàn)開始及結(jié)束時(shí)分別稱雞只體重，計(jì)算平均增重和相對(duì)增重率。 以不感染不給藥組在試驗(yàn)期間相對(duì)增重率為100%，計(jì)算其他各組的相對(duì)增重率，相對(duì)增重 率X 100即為相對(duì)增重率得分。1.5.2存活率：記錄各組死亡雞數(shù)，算出死亡率及存活 率。1.5.3病變值：感染后第8天宰殺各組全部雞只，參照設(shè)計(jì)的病變記分法，記錄每只 雞的病變記分，將每組各雞的病變記分相加得病變值總分。腸道正常、無(wú)肉眼可見病變記 〇分，有少量散在病變記1分，較多稀疏病變記2分，有融合性大面積病變記3分，病變 廣泛融合、腸壁增厚記4分。
[0022] 1.5.4卵囊值：根據(jù)卵囊比數(shù)計(jì)算卵囊值(表1)。卵囊比數(shù)（％ )=(各試驗(yàn) 組卵囊數(shù)/感染不給藥卵囊數(shù)）X100。
[0023] 1.5.5抗球蟲指數(shù)(ACI) :ACI =(存活率+相對(duì)增重率）-(病變值+卵囊值)。 ACI < 120，為無(wú)效；ACI在120~160范圍內(nèi)，為低效;ACI在160~180之間，為中效； ACI > 180,為高效。
[0024] 2 結(jié)果 2.1臨床觀察感染不給藥組雞感染卵囊后，逐漸出現(xiàn)采食減少、羽毛蓬亂、精神差、 昏睡等反應(yīng)，第5天起，有血便出現(xiàn)，第6~7天開始死亡。死亡雞經(jīng)剖檢發(fā)現(xiàn)，盲腸腫大， 有血水郁積，盲腸和小腸上有出血點(diǎn)；陰性對(duì)照組無(wú)臨床癥狀和死亡。 2. 2抗球蟲療效試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0025] 表1阿德呋啉包合物對(duì)人工感染雞球蟲病的防治效果
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-0 -環(huán)糊精包合物的制備方法，其特征在于，由重 量比為阿德呋啉：羥丙基-(6-環(huán)糊精：PVP :聚乙二醇：泊洛沙姆=30 : (60-70): (0. 5-1) : (0. 15-0. 5) : (0. 2-0. 5)的原料制成，并按如下步驟進(jìn)行制備： (1) 將干燥后的聚乙二醇、泊洛沙姆粉碎后制成150-200目粉； (2) 將羥丙基-P -環(huán)糊精與有機(jī)溶劑按質(zhì)量體積（60g~70g) : (80mL~120mL)混合，在 60~80°C水浴條件下攪拌至溶解； (3) 將PVP、聚乙二醇、泊洛沙姆用乙醇溶解后加入步驟（2)所得的溶液中； (4) 稱取阿德呋啉用冰醋酸溶解，加入步驟（3)所得的溶液中，在60~80°C水浴條件下 攪拌20~60min，獲得包被液； (5) 將步驟（4)所得的包被液進(jìn)行減壓濃縮、減壓干燥，收集產(chǎn)品，粉碎得阿德呋啉羥丙 基-(6-環(huán)糊精包合物。2. 根據(jù)權(quán)利要求書1所述抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-P _環(huán)糊精包合物的制備方法，其 特征在于所述的PVP為PVPk 17、PVPk30、PVPk60中的一種或兩種的混合，聚乙二醇為聚乙二 醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一種或兩種的混合。3. 根據(jù)權(quán)利要求書1所述抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-P _環(huán)糊精包合物的制備方法，其 特征在于，步驟（2)中的有機(jī)溶劑為冰醋酸、DMF、DMAC、無(wú)水甲醇、95v%乙醇或無(wú)水乙醇。4. 根據(jù)權(quán)利要求書1所述抗球蟲用阿德呋啉羥丙基-P _環(huán)糊精包合物的制備方法，其 特征在于，步驟（4)中阿德呋啉用冰醋酸溶解后加入步驟（3)所得的溶液中的方法為恒壓 滴液漏斗加入。
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗球蟲藥物阿德呋啉羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的制備方法。該方法以羥丙基-β-環(huán)糊精、PVP、聚乙二醇（PEG）、泊洛沙姆為主分子，阿德呋啉為客分子，在冰醋酸溶液中主分子與客分子進(jìn)行包被，包被結(jié)束將混合溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，減壓干燥，粉碎得白色粉末狀阿德呋啉羥丙基-β-環(huán)糊精包合物。該包合物制備方法具有包合率高、包合時(shí)間短、包合成本低及包合物的水溶性好等優(yōu)點(diǎn)，所得包合物不但使阿德呋啉的溶解度大大增加，且可以降低阿德呋啉的毒性，可以用來制作阿德呋啉的可溶性粉劑或者水溶液制劑。
【IPC分類】A61K31/52, A61K47/32, A61K47/48, A61K47/34, A61P33/02
【公開號(hào)】CN105079819
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510584276
【發(fā)明人】郭芳茹, 張遂平, 劉釗鋒, 章四新, 吳勝耀, 楊慧敏, 郭菊, 劉楊, 王菊萍, 牛詠梅
【申請(qǐng)人】河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年9月15日