5歲，經(jīng)化驗(yàn)為面部痤瘡，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為++++，連續(xù)使用實(shí) 施例1半個(gè)月，每日一次，半個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)，檢驗(yàn)結(jié)果為癥狀程度變?yōu)?，有明顯好轉(zhuǎn)跡象。
[0027] 病例 10 王XX，女性，患毛囊炎，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為+++，連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例1， 使用10日，每日一次，10日后診斷結(jié)果為癥狀完全消失。
[0028] 病例 11 向XX，女性，經(jīng)診斷為皮膚瘡瘍及瘡瘍不愈，連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例2,使用3個(gè)月，每 日一次，3個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)，不良癥狀均消失不見(jiàn)。
[0029] 病例 12 趙XX染上由馬拉色菌引起的花斑癬，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為++++，連續(xù)使用市 面上的黃皮膚皮膚凝膠一個(gè)月，每三日一次，一個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)，病患嚴(yán)重程度為++++，沒(méi)有 好轉(zhuǎn)跡象；連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例2 -個(gè)月，每日一次，且治療期間隔離，一個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)， 已經(jīng)痊愈。
[0030] 病例 I3 馬X，女性，32歲，經(jīng)化驗(yàn)為馬拉色菌引起的毛囊炎，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為++， 連續(xù)使用市面產(chǎn)品膚癢王兩周，每日一次，兩周后經(jīng)檢測(cè)，檢驗(yàn)結(jié)果為檢驗(yàn)結(jié)果病患嚴(yán)重程 度為++;連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例4兩周，每日一次，兩周后經(jīng)檢測(cè)，癥狀完全消失，且一個(gè)月 后復(fù)查沒(méi)有復(fù)發(fā)跡象。
[0031] 病例 14 趙XX染上由帶狀皰疹病毒引起的水痘，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為++++，連續(xù)使用 市面上的皮膚凝膠馬上好一個(gè)月，每三日一次，一個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)，病患嚴(yán)重程度為++++，沒(méi) 有好轉(zhuǎn)跡象，說(shuō)明市面上的膚得安凝膠不具備抗病毒效果；連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例4 一個(gè) 月，每日一次，且治療期間隔離，一個(gè)月后經(jīng)檢測(cè)，已經(jīng)痊愈。
[0032] 病例 15 馬X，女性，32歲，經(jīng)化驗(yàn)為麻疹病毒引起的麻疹，使用前經(jīng)檢測(cè)病患嚴(yán)重程度為++，連 續(xù)使用市面產(chǎn)品膚癢王兩周，每日一次，兩周后經(jīng)檢測(cè)，檢驗(yàn)結(jié)果為檢驗(yàn)結(jié)果病患嚴(yán)重程度 為++，并無(wú)效果；但是，連續(xù)使用本發(fā)明實(shí)施例3兩周，每日一次，兩周后經(jīng)檢測(cè)，癥狀完全 消失，且一個(gè)月后復(fù)查沒(méi)有復(fù)發(fā)跡象。
[0033] 體外抑菌試驗(yàn) 抑菌試驗(yàn)例I 1、實(shí)驗(yàn)材料 取實(shí)施例二lg，加生理鹽水制成2mL藥液；取實(shí)施例三lg，加生理鹽水制成2mL藥液； 新腳氣膏（市售廣州九福堂生物制藥）制備成20mg/mL溶液（pH6. 5);中藥復(fù)合制劑組 2mL。菌株：紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌、絮狀表皮癬菌均由吉林省疾控中心提供。
[0034] 2、實(shí)驗(yàn)方法 將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基加熱到完全融化，倒在培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿ISmL (下層)，待其凝固。 此外，將融化的LB培養(yǎng)基（葡萄糖肉湯、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽 鹽發(fā)酵管、十六烷三甲基嗅化按瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂培養(yǎng)基，根據(jù)不同的菌種選用不同的培 養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)方法一致。）冷卻到50°C左右混入試驗(yàn)菌，將混有菌的培養(yǎng)基5mL加到已凝固的 培養(yǎng)基上待凝固（上層）。以無(wú)菌操作在培養(yǎng)基表面直接垂直放上牛津杯（內(nèi)徑6mm、外徑 8_、高IOmm的圓形小管，管的兩端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），輕輕加壓，使其與培養(yǎng)基 接觸無(wú)空隙，在杯中加入待檢樣品100 uL，勿使其外溢。加滿(mǎn)后置37°C培養(yǎng)，觀察結(jié)果。結(jié) 果見(jiàn)表1 : 表1:本發(fā)明抑菌活性測(cè)定結(jié)果
實(shí)驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明對(duì)于引起腳氣的紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌、絮狀表皮癬均抑菌率較 尚。
[0035] 抑菌試驗(yàn)例2 -20°C的大腸桿菌接種到種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（OD=O. 6)，取菌液稀釋20 倍后備用。
[0036] 取植物多肽復(fù)方凝膠樣品，投入到含有5ml PBS的離心筒中，分別加入IOOul稀釋 后菌懸液，上下?lián)u晃離心筒，開(kāi)始計(jì)時(shí)，作用2min，往被試樣品內(nèi)投入5ml PBS，充分混勻，然 后取反應(yīng)液，稀釋10倍和100倍后，分別吸取其中的0. 5ml，置于2個(gè)平皿中，用涼至40°C~ 50°C的LB固體培養(yǎng)基15ml作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勾，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，36°C培 養(yǎng)24h，作活菌菌落計(jì)數(shù)。計(jì)算軟膏劑作用2min對(duì)大腸桿菌抑制率。同樣的方法作用5min， lOmin。對(duì)照組采用的是市面上的馬上好軟膏。結(jié)果顯示，作用2min情況下，實(shí)施案例1對(duì) 大腸桿菌抑菌率為92. 84%，實(shí)施案例2對(duì)大腸桿菌抑菌率為88. 66%，實(shí)施案例3對(duì)大腸桿 菌抑菌率為91. 28%，實(shí)施案例4對(duì)大腸桿菌抑菌率為89. 67%，實(shí)施案例5對(duì)大腸桿菌抑菌 率為 90. 98%。
[0037] 由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，5組實(shí)施案例中凝膠劑作用2min后，對(duì)大腸桿菌的抑制率 均可達(dá)85%以上，具有較強(qiáng)的抑菌活性。
[0038] 抑菌試驗(yàn)例3 1.藥液稀釋 取無(wú)菌試管10只，從1-10進(jìn)行編號(hào)，分別于2-10號(hào)管中加無(wú)菌蒸餾水IOml; 取實(shí)施例1所制得的中藥提取物原液20ml置1號(hào)管中，取IOml置2號(hào)管中，混勻，再 從2號(hào)管中取出IOml稀釋液，加入3號(hào)管中，混勻，如此連續(xù)倍比稀釋至第9號(hào)管取出IOml 棄掉，第10號(hào)管只有無(wú)菌蒸餾水作空白對(duì)照。對(duì)照組采用的是市面上的馬上好軟膏。
[0039] 用同樣的方法稀釋實(shí)施例2-4的藥液。
[0040] 2.含藥平板制備 無(wú)菌條件下將不同濃度的中藥提取液原液2ml分別加于9個(gè)平板，然后將己溶化的 M-H瓊脂18ml分別傾注上述9個(gè)平板，混合均勻，使這9個(gè)瓊脂平板實(shí)際分別含中藥提取 液 10%(1:10)、5%(1:20)、2. 5%(1:40)、1. 25%(1:80)、0. 625%(1:160)、0.313%(1:320)、0. 156%(1:640)、0. 078%n:1280)、0. 039%(1:2560); 3. 菌液制備 將耐甲氧西林金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物制成菌液，濃度相當(dāng)于0. 5麥?zhǔn)媳葷峁?4. 菌種的接種 于平板背面注明藥物濃度，用多點(diǎn)接種儀吸取〇. 5ml菌液并將菌液接種于含不同藥物 濃度的瓊脂平板上，以不加藥液的瓊脂平板為對(duì)照，分別作用2min，5min，IOmin計(jì)算抑菌 百分率。
[0041] 由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，5組實(shí)施案例中的中藥提取液作用后，對(duì)耐甲氧西林金黃色 葡萄球菌的抑菌活性均很好，具有較強(qiáng)的抑菌活性。
[0042] 抑菌試驗(yàn)例4 試驗(yàn)前一天將綠膿桿菌接種在普通瓊脂板上，置于37°C恒溫箱中培養(yǎng)24h，用無(wú)菌生 理鹽水配成每毫升約3億個(gè)菌的濁濃度（比濁法)。用無(wú)菌棉簽浸透菌液，將過(guò)量菌液于管 壁處加壓擠出，均勻密集涂布在普通瓊脂平板表面，待菌液干后，用5_打孔器打孔，然后 孔中分別加入實(shí)施例1-5藥液及對(duì)照組，對(duì)照組采用的是市面上的馬上好軟膏，放在恒溫 箱中觀察結(jié)果。
[0043] 抑菌試驗(yàn)例5 采用藥敏試驗(yàn)的平皿打洞法，即用滅菌棉簽蘸取白念球菌液，均勻涂布在營(yíng)養(yǎng)瓊脂板 上，然后用直徑6mm打孔器打孔，去除孔內(nèi)瓊脂并適當(dāng)封存孔，然后孔中分別加入實(shí)施例 1-5藥液及對(duì)照組，對(duì)照組采用的是市面上的馬上好軟膏，放在恒溫箱中觀察結(jié)果。
[0044] 最終結(jié)果制成如下表格，觀察實(shí)施例對(duì)不同的菌種在不同抑菌時(shí)間下的抑菌率， 從而可以觀察得到植物多肽復(fù)方凝膠有較好的抑菌活性。
[0045] 各實(shí)施例對(duì)不同的菌種在不同抑菌時(shí)間下的抑菌率（％)
抑菌試驗(yàn)例6 用植物多肽復(fù)方凝膠，以及市面上的抗菌凝膠黃皮膚(主要成分：苦參，地膚子，蛇床 子）和膚癢王對(duì)臨床分離的馬拉色菌的三種優(yōu)勢(shì)菌種（糠秕馬拉色菌、合軸馬拉色菌、厚皮 馬拉色菌）進(jìn)行體外抗真菌作用的研究，結(jié)果表明植物多肽復(fù)方凝膠對(duì)馬拉色菌有抗真菌 作用，植物多肽復(fù)方凝膠對(duì)馬拉色菌的MIC值范圍為625-20000 y g/ml，糠秕馬拉色菌的 MIC平均值明顯低于合軸及厚皮馬拉色菌，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明糠秕馬拉色菌對(duì)植物 多肽復(fù)方凝膠更敏感，抗菌軟膏馬上好和膚癢王對(duì)馬拉色菌沒(méi)有抑制作用。本實(shí)驗(yàn)證植物 多肽復(fù)方凝膠對(duì)馬拉色菌有抗真菌作用，豐富了植物植物多肽復(fù)方凝膠的抗真菌菌種譜， 進(jìn)一步證明了植物多肽復(fù)方凝膠有市面上其他抗菌軟膏所沒(méi)有的廣譜抗真菌性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種抗菌消炎外用中藥復(fù)方凝膠劑，其特征在于是由以下藥物按重量份數(shù)比制成 的： 楊鐵葉根10-18、紫花地丁 3-12、黃芩4-10、紅花4-10、蛇床子3-8、蒼術(shù)2-6。2. 權(quán)利要求1所述的一種抗菌消炎外用中藥復(fù)方凝膠劑的制備方法，包括以下步驟： 按比例稱(chēng)取楊鐵葉根、紫花地丁、黃芩、紅花、蛇床子、蒼術(shù)，將中藥材放入回流裝置中， 向容器中加入中藥重量10-20倍的水，浸泡l_3h，加熱回流提取1-3次，合并每次煎煮的濾 液，獲得中藥提取液；取2-10份羧甲基纖維素鈉(黏度大于1200mPa. s)溶脹于提取液中，過(guò) 夜；取2-5份冰片溶于3-10份無(wú)水乙醇中，制備成冰片醇溶液；取十二烷基磺酸鈉2-5份、 甘油5-20份、尼泊金乙酯1-3份、冰片醇溶液3-10份加入中藥提取液中，高速攪拌均勻，即 得成品。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明所述的一種抗菌消炎外用中藥復(fù)方凝膠劑及其制備方法，主要由楊鐵葉根、紫花地丁、黃芩、紅花、蛇床子、蒼術(shù)，通過(guò)科學(xué)的炮制工藝制成，本發(fā)明具有廣譜的抑菌活性，特別是針對(duì)引起腳氣、毛囊炎等疾病的細(xì)菌、真菌等均有很強(qiáng)的殺菌效果，又具有促進(jìn)傷口愈合、消除痘印的功效，通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)方中各味藥材相互配伍、協(xié)同揮發(fā)作用,使其成為治療腳氣、皮膚病之良方。
【IPC分類(lèi)】A61K36/86, A61P17/00, A61P31/12, A61P31/10, A61K9/06, A61P31/04
【公開(kāi)號(hào)】CN105079305
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510535123
【發(fā)明人】滕利榮, 王迪, 劉艷, 付珧, 孟慶繁, 逯家輝, 程瑛琨, 王貞佐, 滕樂(lè)生, 謝晶, 張世強(qiáng), 李劍光
【申請(qǐng)人】吉林大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年8月28日