亞甲藍(lán)溫敏水凝膠及其制備和解剖性肝切除術(shù)中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種在精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)中使用的染色劑。更具體地說，本發(fā)明涉 及一種用在精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)中的亞甲藍(lán)溫敏水凝膠及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)是肝癌肝切除術(shù)的最理想術(shù)式，精確界定肝臟切除的界面是 解剖性肝切除術(shù)的核心。精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)由于沿著肝臟的肝段或肝葉的間隙進(jìn)行肝實(shí) 質(zhì)離斷，有助于減少術(shù)中出血；同時(shí)，因?yàn)楦伟┚哂醒刂闪龈味伍T靜脈支進(jìn)行播散的生物 學(xué)特性，易侵犯癌旁門靜脈，形成隱性門靜脈癌栓和在該段門靜脈支配區(qū)域形成衛(wèi)星灶，解 剖性肝（段）切除符合肝癌的根治原則。然而由于肝葉、肝段之間缺乏明確的解剖標(biāo)記、形 態(tài)不規(guī)則、變異很大，因此較難確定精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù)的界面。國際上最早由Makuuchi 教授采用術(shù)中超聲引導(dǎo)下向目標(biāo)肝段的門靜脈支注射亞甲藍(lán)的染色技術(shù)，而Takasaki教 授采用先阻斷Glisson蒂后肝表面出現(xiàn)缺血的界限，據(jù)此界限進(jìn)行肝切除術(shù)，但是肝段、葉 之間的界限并不是平面，而是不規(guī)則的形狀，這兩種技術(shù)只能在肝臟的表面明確肝段、葉的 界限，均無法明確肝段、葉或者半肝間在肝實(shí)質(zhì)內(nèi)的分界。在前期的臨床工作中改進(jìn)操作方 法，創(chuàng)造性采用肝蒂注射亞甲藍(lán)后結(jié)扎染色的新方法，明顯改善肝臟表面和實(shí)質(zhì)內(nèi)的分界， 顯著提高了切除的精準(zhǔn)度。
[0003] 然而，臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)亞甲藍(lán)代謝快，肝組織染色較淺，染色不均勻而且褪色快，進(jìn) 入肝實(shí)質(zhì)離斷時(shí)，往往已無法判斷界限。因此，手術(shù)中常常需要多次注射，注射過程中常常 溢出至局部手術(shù)，吸引器不易吸干凈，嚴(yán)重影響手術(shù)操作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問題或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu)點(diǎn)。
[0005] 本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種能在解剖性肝切除手術(shù)中染色更均勻、持久、使 肝段、葉在肝實(shí)質(zhì)內(nèi)的界限更明顯樣的亞甲藍(lán)溫敏水凝膠，其能夠通過向擬切除肝葉或肝 段的門靜脈內(nèi)注射給藥，以期達(dá)到擬切除肝組織內(nèi)亞甲藍(lán)穩(wěn)定、緩慢釋放、持久染色的效 果，從而實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)解剖性肝切除。
[0006] 本發(fā)明還有一個(gè)目的是通過動(dòng)態(tài)高壓微射流超微化方法對亞甲藍(lán)進(jìn)行了預(yù)處理， 使得亞甲藍(lán)在溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯共聚物表面均勻分散，提 高了亞甲藍(lán)的比表面積，以便獲得更好的染色效果。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種亞甲藍(lán)溫敏水凝膠，其 中，所述水凝膠為負(fù)載有亞甲藍(lán)的溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯凝膠。
[0008] 優(yōu)選的是，其中，所述亞甲藍(lán)與溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯 凝膠的重量份數(shù)比為15 : 85~20 : 80。
[0009] 優(yōu)選的是，其中，所述亞甲藍(lán)與溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯 凝膠的重量份數(shù)比為18 : 82。
[0010] 本發(fā)明的目的還可以進(jìn)一步包括亞甲藍(lán)溫敏水凝膠的制備方法，該制備方法包括 步驟：
[0011] 1)共聚物的制備：稱取一定量的混旋丙交酯DL-LA、乙交酯GA以及聚乙二醇 PEG1500分別置于35~40°C的烘箱中干燥1. 5h，再于120~140°C的烘箱中干燥0. 5h，干 燥結(jié)束后混合裝入干燥的50mL的西林瓶中，并加入催化劑異辛酸亞錫，所述催化劑異辛酸 亞錫的用量為原料總質(zhì)量的〇. 2wt%，然后將西林瓶放入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行干燥，冷凍干燥溫 度為-10~-30°C，干燥時(shí)間為1. 5~2. 0h，待抽成真空后壓蓋取出，用青霉素瓶電動(dòng)乳蓋 機(jī)乳蓋封口，于120~135°C下反應(yīng)13~14h，所得產(chǎn)物用5°C的純凈水溶解，加熱至75~ 80°C使共聚物沉淀后棄去水層，反復(fù)操作3次以去除未反應(yīng)的單體以及低分子的水溶性物 質(zhì)，所得共聚物冷凍干燥25~28h即得純化的溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯 丙交酯PLGA-PEG-PLGA共聚物，通過調(diào)節(jié)原料比例和PEG1500的分子量，制備具有不同相變 溫度和釋放速率的溫敏PLGA-PEG-PLGA共聚物藥物載體；
[0012] 2)空白凝膠的制備：在25°C室溫下，用分析天平稱取適量溫敏PLGA-PEG-PLGA共 聚物于容量瓶中，加入去離子水溶解，定容到所需體積，配制成共聚物的質(zhì)量濃度為20%的 溶液，磁力緩慢攪拌下使其分散均勻，放入4°C冰箱冷藏48~50h，使共聚物充分溶脹、分散 均勾，直到共聚物完全溶解得到澄清溶液，用0. 22ym濾膜過濾制得PLGA-PEG-PLGA空白凝 膠溶液；
[0013] 3)亞甲藍(lán)預(yù)處理：采用動(dòng)態(tài)高壓微射流超微化技術(shù)，剪切、破碎和均質(zhì)亞甲藍(lán)粉 末，其中超微化的工作壓力為150~180MPa，工作溫度為20~25°C;
[0014] 4)亞甲藍(lán)PLGA-PEG-PLGA溫敏水凝膠的制備：在25°C室溫下，用分析天平稱取適 量亞甲藍(lán)粉于容量瓶中，以所述步驟2)配制的PLGA-PEG-PLGA空白凝膠溶液為溶劑，加入 經(jīng)所述步驟3)預(yù)處理的亞甲藍(lán)粉末，超聲處理，超聲頻率為2~8kHz，超聲時(shí)間為5~10 分鐘，超聲結(jié)束后的混合液置于4°C冰箱溶脹24~28h至形成均勻的溶液，用0. 22ym濾膜 過濾制得亞甲藍(lán)PLGA-PEG-PLGA溫敏水凝膠。
[0015] 優(yōu)選的是，其中，所述步驟1)中反應(yīng)原料冷凍干燥溫度為-20°C，干燥時(shí)間為 2. 0h〇
[0016] 優(yōu)選的是，其中，所述步驟1)中所得共聚物冷凍干燥的溫度為-50°C，冷凍干燥時(shí) 間為26h。
[0017] 優(yōu)選的是，其中，所述步驟3)中超微化的工作壓力為160MPa，工作溫度為25°C。
[0018] 優(yōu)選的是，其中，所述步驟4)中超聲處理的超聲頻率為6kHz，超聲時(shí)間為8min。
[0019] 本發(fā)明的目的還可以進(jìn)一步由所述亞甲藍(lán)溫敏水凝膠用于精準(zhǔn)解剖性肝切除術(shù) 中的肝組織染色的應(yīng)用來實(shí)現(xiàn)。
[0020] 本發(fā)明至少包括以下有益效果：
[0021] 1、由于將亞甲藍(lán)負(fù)載到溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯凝膠 上，因此能夠使其具有穩(wěn)定、緩慢釋放、持久染色的效果，從而實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)解剖性肝切除；
[0022] 2、由于通過動(dòng)態(tài)高壓微射流超微化方法對亞甲藍(lán)進(jìn)行了預(yù)處理，使得亞甲藍(lán)在溫 敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯共聚物表面均勻分散，提高了亞甲藍(lán)的比 表面積，以便獲得更好的染色效果；
[0023] 3、由于在制備PLGA-PEG-PLGA共聚物時(shí)，通過調(diào)節(jié)原料比例和PEG的分子量，使載 藥系統(tǒng)具有合適的相變溫度和釋放速率。
[0024] 本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本 發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【附圖說明】
[0025] 圖1為本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中亞甲藍(lán)溫敏水凝膠制備和解剖性肝切除術(shù)中的應(yīng) 用的流程示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文 字能夠據(jù)以實(shí)施。
[0027] 圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的一種實(shí)現(xiàn)形式，示出了亞甲藍(lán)溫敏水凝膠的制備過程。 其中包括：
[0028] 1)共聚物的制備：稱取一定量的混旋丙交酯DL-LA、乙交酯GA以及聚乙二醇 PEG1500分別置于35~40°C的烘箱中干燥1. 5h，再于120~140°C的烘箱中干燥0. 5h，干 燥結(jié)束后混合裝入干燥的50mL的西林瓶中，并加入催化劑異辛酸亞錫，所述催化劑異辛酸 亞錫的用量為原料總質(zhì)量的〇. 2wt%，然后將西林瓶放入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行干燥，冷凍干燥溫 度為-10~-30°C，干燥時(shí)間為1. 5~2. 0h，待抽成真空后壓蓋取出，用青霉素瓶電動(dòng)乳蓋 機(jī)乳蓋封口，于120~135°C下反應(yīng)13~14h，所得產(chǎn)物用5°C的純凈水溶解，加熱至75~ 80°C使共聚物沉淀后棄去水層，反復(fù)操作3次以去除未反應(yīng)的單體以及低分子的水溶性物 質(zhì)，所得共聚物冷凍干燥25~28h即得純化的溫敏聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯 丙交酯PLGA-PEG-PLGA共聚物，通過調(diào)節(jié)原料比例和PEG1500的分子量，制備具有不同相變 溫度和釋放速率的溫敏PLGA-PEG-PLGA共聚物藥物載體；
[0029] 2)空白凝膠的制備：在25°C室溫下，用分析天平稱取適量溫敏PLGA-PEG-PLGA共 聚物于容量瓶中，加入去離子水溶解，定容到所需體積，配制成共聚物的質(zhì)量濃度為20%的 溶液，磁力緩慢攪拌下使其分散均勻，放入4°C冰箱冷藏48~50h，使共聚物充分溶脹、分散 均勾，直到共聚物完全溶解得到澄清溶液，用0. 22ym濾膜過濾制得PLGA-PEG-PLGA空白凝 膠溶液；
[0030] 3)亞甲藍(lán)預(yù)處理：采用動(dòng)態(tài)高壓微射流超微化技術(shù)，剪切、破碎和均質(zhì)亞甲藍(lán)粉 末，其中超微化的工作壓力為150~180MPa，工作溫度為20~25°C;
[0031] 4)亞甲藍(lán)PLGA-PEG-PLGA溫敏水凝膠的制備：在25°C室溫下，用分析天平稱取適 量亞甲藍(lán)粉于容量瓶中，以所述步驟2)配制的PLGA-PEG-PLGA空白凝膠溶液為溶劑，加入 經(jīng)所述步驟3)預(yù)處理的亞甲藍(lán)粉末，超聲處理，超聲頻率為2~8kHz