一種載鹽酸多西環(huán)素的gtr/gbr復(fù)合膜片及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種載藥GTR/GBR復(fù)合膜及其制備方法，具體涉及一種載鹽酸多西環(huán)素的多層GTR/GBR復(fù)合膜及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]種植體周圍炎是種植體周圍軟硬組織的炎癥，發(fā)病率在28%-56%。與傳統(tǒng)刮治及局部用藥相比，膜誘導(dǎo)組織再生術(shù)、骨移植術(shù)能有效地填補(bǔ)骨缺損，改善軟組織形態(tài)，增加種植體周圍骨組織新生骨量和再次骨結(jié)合率，種植體的穩(wěn)固性得到提高。
[0003]口腔作為一個有菌環(huán)境，細(xì)菌定植于種植體表面影響種植體與周圍骨組織骨結(jié)合的形成，同時給種植體周圍炎的治療效果帶來極大的負(fù)面影響。以抗生素為主的藥物治療是抑制細(xì)菌在種植體表面定植，改善種植體周圍炎癥的有效途徑。與口服給藥的眾多缺點(diǎn)相比，局部用藥成為種植體周圍炎及牙周病藥物治療的主流方向。
[0004]引導(dǎo)組織再生(Guide Tissue Regenerat1n，GTR)技術(shù)是80年代末90年代初發(fā)展起來的一項(xiàng)新技術(shù)。其原理是利用膜的物理屏障功能將病損區(qū)與周圍組織隔離。該技術(shù)最初用于牙周病治療的動物實(shí)驗(yàn)及臨床研究，隨后又被用于促進(jìn)骨組織的修復(fù)、再生(即誘導(dǎo)骨組織再生技術(shù)，Guide Bone Regenerat1n，GBR)。它的應(yīng)用為牙周病的治療、牙種植區(qū)骨量不足及其它骨缺損的修復(fù)、骨折的愈合提供了一個新的有效途徑。載藥GTR/GBR膜片是一種將局部藥物治療與GTR/GBR技術(shù)的結(jié)合的應(yīng)用。如何降低藥物的突釋效應(yīng)、延緩藥物的釋放速率，提高載藥膜片的組織親合性，是載藥GTR/GBR膜的設(shè)計與制備難點(diǎn)，也是目前的研究熱點(diǎn)。序列靜電紡絲技術(shù)是傳統(tǒng)靜電紡絲的一種發(fā)展，可以實(shí)現(xiàn)不同加載物質(zhì)定向、有序釋放。其產(chǎn)品具有納米級的纖維細(xì)度、超高的比表面積和相互連通的多孔隙三維結(jié)構(gòu)，能夠最大化的仿生細(xì)胞外基質(zhì)的纖維網(wǎng)絡(luò)。
[0005]已有學(xué)者將藥物溶于有機(jī)高分子溶液中，通過靜電紡絲的方法制備載藥納米纖維。電鏡觀察纖維具有表面均勻光滑、比表面積大、孔隙率高等優(yōu)點(diǎn)，同時體外釋放實(shí)驗(yàn)中，纖維對藥物的包裹可以限制藥物的釋放速度。隨后Zamani M, Chaturvedi T P，等人將苯甲酸甲硝唑通過混紡的形式載入納米纖維中，多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以無定形態(tài)分散于纖維中的藥物對牙周病致病菌均具有良好的抗菌作用，且藥物呈持續(xù)釋放，對牙周病治療的治療具有一定的效果。然而，40% -50%的藥物初期突釋，又一定程度上抑制細(xì)胞的生長與增殖，藥物初期突釋的問題到目前依舊沒有得到解決，使該技術(shù)的應(yīng)用受到很大的限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種載鹽酸多西環(huán)素的多層GTR/GBR復(fù)合膜及其制備方法，該多層GTR/GBR復(fù)合膜組織親和性高，能夠?qū)崿F(xiàn)藥物持續(xù)穩(wěn)定的釋放，且能夠有效降低藥物突釋效應(yīng)。該制備方法，操作簡單，能夠?qū)崿F(xiàn)不同加載物質(zhì)定向、有序釋放。
[0007]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
[0008]—種載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片，該GTR/GBR復(fù)合膜片為上表層、下表層及芯層的三層結(jié)構(gòu)，上、下表層和芯層均通過序列靜電紡絲制成，上表層和下表層是由天然高分子材料與合成高分子材料的混合液制成，芯層為合成高分子材料載鹽酸多西環(huán)素的溶液制成的膜片層。
[0009]上表層和下表層是由表層電紡絲溶液制成；表層電紡絲溶液是將聚己內(nèi)酯與明膠按1:(0.2?I)的質(zhì)量比混合后溶于六氟異丙醇中配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%?12%溶液。
[0010]芯層是由芯層電紡絲溶液制成；芯層電紡絲溶液是將聚己內(nèi)酯與鹽酸多西環(huán)素按1: (0.1?0.25)的質(zhì)量比混合后溶于六氟異丙醇中，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%?12%的溶液。
[0011]所述聚己內(nèi)酯的平均分子量為8?10萬。
[0012]本發(fā)明還公開了一種載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片的制備方法，包括以下步驟:
[0013]I)將聚己內(nèi)酯與明膠按1: (0.2?I)的質(zhì)量比混合后溶于六氟異丙醇中，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%?12%的表層電紡絲溶液，超聲脫氣5?8min ;
[0014]2)將聚己內(nèi)酯與鹽酸多西環(huán)素按1: (0.1?0.25)的質(zhì)量比混合后溶于六氟異丙醇中，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%?12%的芯層電紡絲溶液，超聲脫氣5?8min ；
[0015]3)將步驟I)和步驟2)制得的表層電紡絲溶液和芯層電紡絲溶液分別注入靜電紡絲設(shè)備的兩個注射器內(nèi)，進(jìn)行單軸序列靜電紡絲，制得載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR三層復(fù)合膜片；
[0016]單軸序列靜電紡絲的具體順序?yàn)?先用表層電紡絲溶液電紡2h，再用芯層電紡絲溶液電紡4h，最后用表層電紡絲溶液電紡2h。
[0017]在進(jìn)行單軸序列靜電紡絲時，靜電紡絲的條件為:針頭為19G針頭，電壓為10?20kv，針頭與接收板距離為10?20cm，表層電紡絲溶液和芯層電紡絲溶液的給液速度為
0.5 ?1.5mL/h。
[0018]所述聚己內(nèi)酯的平均分子量為8?10萬。
[0019]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果:
[0020]本發(fā)明的載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片為三層膜片結(jié)構(gòu)，三層膜片通過序列靜電紡絲的方法一步制成，各層之間緊密結(jié)合，上、下表層的由天然高分子材料與合成高分子材料的混合液制成，添加了天然高分子材料后能夠提高組織與膜片的親和性；且上、下雙表層膜片結(jié)構(gòu)作為一種柵欄樣的屏障，能夠有效避免組織與大量藥物接觸，有效的調(diào)控藥物的釋放速度，實(shí)現(xiàn)藥物持續(xù)、穩(wěn)定釋放。而芯層的合成高分子一方面作為藥物載體負(fù)載多西環(huán)素，另一方面具有較好力學(xué)強(qiáng)度的合成高分子材料可以彌補(bǔ)天然高分子材料在強(qiáng)度方面的不足。芯層中攜帶的鹽酸多西環(huán)素隨著分子的擴(kuò)散作用及表面層纖維的降解持久穩(wěn)定的釋放，殺滅、抑菌組織周圍的致病菌，為組織的修復(fù)與再生提供一個良好的無菌環(huán)境。
[0021]進(jìn)一步地，本發(fā)明的GTR/GBR復(fù)合膜片以聚己內(nèi)酯與明膠(PCL/Ge)為雙表層，以載鹽酸多西環(huán)素的聚己內(nèi)酯纖維為芯層，天然高分子Ge的加入提高了合成高分子材料的組織親和性，有利于細(xì)胞在纖維表的附著與生長。在繼承載藥納米纖維的各項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)的同時，雙表層的纖維既可以提高膜片的組織親合性，又可以作為一種屏障調(diào)控藥物的釋放速度。同時芯層的合成高分子材料可以作為一種支撐，彌補(bǔ)天然高分子材料力學(xué)方面的不足，提高膜片的力學(xué)強(qiáng)度。
[0022]本發(fā)明公開的載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片的制備方法利用單軸靜電紡絲法制備三層結(jié)構(gòu)的復(fù)合膜片，先用表層電紡絲溶液電紡2h，再用芯層電紡絲溶液電紡4h，最后用表層電紡絲溶液電紡2h，該電紡順序能夠?qū)崿F(xiàn)連續(xù)電紡，能夠充分保證復(fù)合膜片的三層結(jié)構(gòu)各層之間緊密結(jié)合，操作容易，能夠?qū)崿F(xiàn)不同加載物質(zhì)定向、有序釋放。
【附圖說明】
[0023]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1制得的載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片的掃描電鏡照片;
[0024]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1制得的載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片與單純混紡的單層載藥膜片的藥物釋放曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0025]下面結(jié)合具體的實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，所述是對本發(fā)明的解釋而不是限定。
[0026]本發(fā)明的采用的技術(shù)方案，如下:
[0027]—種具有生物抑菌活性的載藥GTR/GBR復(fù)合膜片，是以高子聚合物為載體，利用靜電紡絲的方法，簡單、有效的實(shí)現(xiàn)藥物與載體的結(jié)合。所述的高分子材料平均分子量為8?10萬的聚己內(nèi)酯，較其他合成高分子材料具有較高的生物安全性，避免產(chǎn)生周圍局部的酸性環(huán)境，更有利于組織的再生與修復(fù)。
[0028]所加載的藥物為鹽酸多西環(huán)素，其廣泛應(yīng)用于牙周病治療的藥物，對牙周病治療已具有較為成熟的研究；
[0029]采用單軸序列靜電紡絲(連續(xù)電紡)的方法制備三層復(fù)合膜片:芯層為載藥膜片，用于加載儲備藥物；表層為天然高分子與合成高分子的混合物，利于提高膜片的組織親合性；同時多孔的表層纖維形成一種柵欄樣屏障，有效的控制芯層藥物的釋放速度，達(dá)到藥物緩釋的目的。
[0030]具體制作方法，包括以下步驟:
[0031](I)將不同比例的天然高分子材料與合成高分子共同溶于有機(jī)溶劑，形成表層的電紡絲溶液；
[0032](2)將合成高分子材料與不同比例的藥物共同溶于有機(jī)溶劑，制備芯層的電紡絲溶液；
[0033](3)將兩種溶液分別注入兩個注注射器內(nèi)，以一定的順序及電紡絲時間進(jìn)行連續(xù)電紡，形成三層復(fù)合膜片。
[0034](4)液氮冷凍淬斷，電鏡觀察，檢測三層膜片結(jié)構(gòu)。
[0035]實(shí)施例1
[0036]—種載鹽酸多西環(huán)素的GTR/GBR復(fù)合膜片的制備方法，包括以下步驟:
[0037]I)將明膠與平均分子量為8萬的聚己內(nèi)酯按1:1的質(zhì)量比混合后溶于六氟異丙醇中，配成質(zhì)量