一種用于治療淺表性胃炎的藏藥組合物及其應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療淺表性胃炎的藏藥組方，屬于藏藥領域。
【背景技術】
[0002] 慢性淺表性胃炎（CSG)是由各種不同病因引起的胃黏膜病變，以胃黏膜層中漿細 胞及淋巴細胞等慢性炎癥細胞浸潤為主要表現(xiàn)，并伴有胃黏膜的萎縮性改變，是臨床上最 多見的慢性胃病，目前尚無特效的治療方法。
[0003] 六味安消散是藏醫(yī)學經(jīng)典驗方，已有100多年的歷史，目前收載于《中國藥典》 2010年版一部。其配方組成為藏木香50g、大黃200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、訶子 150g、堿花300g，主要用于脾胃不和、積滯內停所致的胃痛脹滿、消化不良、便秘、痛經(jīng)。堿花 為主含碳酸鈉的分枝狀結晶，可消滯，用于胃寒，消化不良。六味安消散方中堿花用量很大， 為主藥。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明的一個目的是提供一種用于治療慢性淺表性胃炎的藏藥組合物。
[0005] 本發(fā)明所述的藏藥組合物，由下列重量份的原料藥制成的活性組分組成：藏木香 50份、大黃200份、山奈100份、煅北寒水石250份、訶子150份。
[0006] 本發(fā)明的活性組分可以是所述原料藥粉碎后的細粉；也可以將所述原料藥中的藏 木香、大黃、山奈、訶子采用常規(guī)方法提取、干燥后，加入煅北寒水石，共同粉碎成細粉制得。
[0007] 本發(fā)明的另一個目的是提供所述藏藥組合物在制備治療慢性淺表性胃炎藥物中 的應用。可在所述的藏藥組合物的活性組分中加入制備不同劑型時藥劑學允許的各種常規(guī) 輔料，如崩解劑、潤滑劑、粘合劑等以常規(guī)的中藥制劑方法，制備成任何一種常用口服劑型， 如散劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、片劑等。
[0008] 本發(fā)明的有益效果：
[0009] 通過對大鼠慢性淺表性胃炎的藥效學試驗表明，模型大鼠使用本發(fā)明的藏藥組合 物后，體重有顯著的增長，與正常組無差異（P> 0.05);能有效抑制胃黏膜炎癥而減少胃黏 膜病理性損傷，促進胃循環(huán)血流量，降低血清GAS的含量，抑制G細胞活化，從而減少胃酸分 泌，保護胃黏膜損傷部位，本組方用于治療慢性淺表性胃炎有良好的效果。
【附圖說明】
[0010] 圖1為正常大鼠胃黏膜電鏡掃描圖；
[0011] 圖2為CSG模型大鼠胃黏膜電鏡掃描圖；
[0012] 圖3為維酶素片治療CSG大鼠胃黏膜電鏡掃描圖；
[0013] 圖4為六味安消散治療CSG大鼠胃黏膜電鏡掃描圖；
[0014] 圖5為新組方1組治療CSG大鼠胃黏膜電鏡掃描圖；
[0015] 圖6為新組方2組治療CSG大鼠胃黏膜電鏡掃描圖。
【具體實施方式】
[0016] 實施例1
[0017] 取藏木香50g、大黃200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、訶子150g，共同粉碎成 細粉，混勻，分裝，即得散劑1。
[0018] 實施例2
[0019] 藏木香50g、大黃200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、訶子150g。以上5味，除 北寒水石（煅）外，其余藏木香等4味，加水煎煮2次，第一次2小時，第二次1小時，濾過， 濾液合并，濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，干燥，加入北寒水石（煅），共同粉碎成細粉， 混勻，分裝，即得散劑2。
[0020] 實驗例、對大鼠慢性淺表性胃炎的藥效學試驗
[0021] 1試驗材料
[0022] 1. 1 動物
[0023] SD大鼠，體重200±20g，SPF級，雌雄各半，6周齡，由山東中醫(yī)藥大學實驗動物中 心提供。
[0024] 1. 2藥品及試劑
[0025] 維酶素片（批號：141009,北海陽光藥業(yè)有限公司）；大鼠胃泌素（GAS)試劑盒（批 號：201209)、大鼠胃動素（MTL)elisa試劑盒（批號：201209,Bio-swamp公司）；胃蛋白酶 測試盒（批號：20121011，南京建成生物工程研宄所）；水合氯醛（批號：20101002,天津市 科密歐化學試劑開發(fā)中心）；2,4,6_三硝基酚（批號：20110904,廣州化學試劑廠）；PBS緩 沖液試劑包（批號：AR0030,博士德生物工程有限公司）。各藥材均由金訶藏藥股份有限公 司提供。其它試劑均為分析純或采用分析純臨時配置。
[0026] 1. 3主要儀器
[0027] UV-2450型島津紫外分光光度計；島津AUW220D電子天平；YP10002小動物電子 稱（上海佑科儀器儀表有限公司）；HC3018R高速冷凍離心機（安徽中科科學儀器有限公 司）；TDL-40B低速大容量離心機（上海安亭科學儀器廠）；ML191激光多普勒血流計、 Powerlabl6/30十六道生理信號采集系統(tǒng)（澳大利亞Adinstruments公司）；6219酸度計 (上海任氏電子有限公司）；EG1160組織病理包埋儀、RM2135組織病理切片機（德國Leica 公司）；ECLIPSETi-S電子顯微鏡（日本Nikon公司）；BH-2光學顯微鏡（日本Olympus公 司）；S-3000N掃描電鏡（日本Hitachi公司）；iMARK酶標儀（美國Bio-Rad公司）。
[0028] 2試驗方法
[0029] 2. 1大鼠慢性淺表性胃炎（CSG)模型復制
[0030] SPF級SD大鼠，200±20g，雌雄各半。適應性飼養(yǎng)7天后，剔除不合格動物，隨機 分為正常對照組，模型復制組。模型復制組每天0. 02%氨水自由飲用，同時配合饑飽失常 (1天禁食，2天飽食）復制慢性淺表性胃炎模型。分別于造模開始后在第60d、80d、100d隨 機抽取大鼠進行胃組織病理學檢測，以出現(xiàn)CSG胃組織的病理改變判定模型復制成功，于 造模后100天模型復制成功。
[0031] 2. 2分組及給藥模型復制組大鼠隨機分組：新組方1組（實施例1所得散劑1);新 組方2組（實施例2所得散劑2);六味安消散組；陽性藥物維酶素片對照組；模型對照組， 并和正常對照組一同進入試驗。正常對照組及模型對照組每天灌胃與藥物組等體積水，其 它組分別灌胃相應藥物溶液，連續(xù)灌胃30天，每天一次，2. 0ml/100g體重。給藥量分別為：
[0032] 維酶素片對照組：0? 035g/100g
[0033] 新組方1組及新組方2組：0. 09g原藥材/100g
[0034] 六味安消散組：0? 09g/100g
[0035] 2. 3統(tǒng)計與分析
[0036] 結果以，；！S表示，數(shù)據(jù)釆用SPSS17. 0軟件進行分析。
[0037] 3評價指標
[0038] 3. 1大鼠一般生理狀況及體重變化觀察
[0039] 給藥期間，每天觀察大鼠飲食、進水情況及動物一般生理狀況，記錄異常表現(xiàn)，測 定給藥后15、30天大鼠體重。以體重凈增加值為評價指標，按以下公式計算：
[0040] 體重凈增加（Ag)=給藥后體重一給藥前體重。
[0041] 3. 2胃黏膜損傷情況觀察
[0042] 幽門環(huán)下0. 3cm處結扎腸管，由食道向胃腔注入lOmlpH7. 2-7. 6的PBS溶液，隨 即食道結扎，取出胃并浸泡于冰水中。15min后沿胃大彎剪開暴露胃腔，去除內容物，記錄胃 黏膜損傷情況。胃黏膜損傷率（％ )=胃黏膜損傷面積/胃黏膜總面積*100%
[0043] 3. 3胃組織病理檢查
[0044] 實驗周期結束后，處死大鼠，胃組織用10%甲醛溶液固定并進行常規(guī)石蠟包埋， 切片，經(jīng)HE染色，以慢性炎癥程度、活動性程度、變形及間質充血水腫程度三個作為評分指 標，每項均為正常（_)、輕度（+)、中度（++)、重度（+++)，最終以胃體部和幽門部兩者評分之 和為炎性評分結果：
[0045] 正常0分；輕度1-4分；中度5-8分；重度9分以上
[0046] 3. 4胃黏膜掃描電鏡觀察
[0047] 沿胃大彎剪開后取0. 5cm2幽門部，pH7. 2-7. 6PBS緩沖鹽溶液振蕩洗滌3次，每次 3min，隨即放入2. 5%戊二醛溶液中，4°C固定4h以上。隨后，胃組織梯度酒精脫水、醋酸異 戊酯置換，真空干燥、噴金，S-3000N掃描電鏡下觀察，記錄500、1000、2000倍下胃黏膜及上 皮細胞形態(tài)。
[0048]3. 5胃黏膜上皮細胞功能評價
[0049] 胃組織石蠟切片后，釆用阿利新蘭-糖蛋白結合法（AB-PAS)染色，高倍生物顯微 鏡下（400X)，記錄幽門部和幽門部各區(qū)3個獨立觀察面（每個觀察面至少有6個以上連續(xù) 直線排列的表面上皮細胞）。顯微鏡及軟件觀察上皮細胞粘蛋白分泌狀態(tài)，其中酸性黏液呈 藍色（IPP軟件以紅色標記），混合性黏液呈紫紅色（IPP軟件黃色標記）和上皮細胞呈淡紅 色（IPP軟件以綠色標記）。按以下公式計算上皮細胞粘蛋白指數(shù)和酸性粘蛋白指數(shù)：
[0050] 上皮細胞粘蛋白指數(shù)（％ )=(酸性黏液面積+混合黏液面積/上皮細胞面 積）X100%
[0051] 酸性粘蛋白指數(shù)（％ )=(酸性黏液面積/上皮細胞面積）X100%
[0052] 3. 6胃蛋白酶活性及pH測定
[0053] 大鼠用10%水合氯醛（0. 35ml/100g)麻醉后仰位姿勢，墊高頭部以高于胃位置， 幽門下0. 3cm處結扎。5小時后，剪開結扎處并用10ml離心管收集5小時胃液，4000rpm/ min離心15min，吸取上清液測量體積并轉入2.OmlEP管，離心lOmin，取上清液按試劑盒說 明書測定胃蛋白酶活性，酸度計及精密pH試紙測定pH值。
[0054] 3. 7胃微循環(huán)血流量測定
[0055] 大鼠麻醉后仰位姿勢，左最后助骨下0. 3-0. 5cm被毛，剪開皮膚及肌肉層，剪短胃 小彎處系膜充分暴露胃體，在胃左動脈食管支3-4間用激光多普勒血流計針式探頭測定胃 體部微循環(huán)血流量（測試時，生理鹽水紗布保持胃體濕潤），在胃體部與幽門部交界處（避 開大動脈、靜脈），測定幽門部血流量。
[0056] 3. 8胃泌素（GAS)、胃動素（