液再置入 雙效真空濃縮器中，濃縮至每1ml含0.1 g生藥量，為組分2。將組分1和組分2的合并，加 入珍珠粉末1300g，調(diào)和基質(zhì)，成凝膠劑；所述基質(zhì)選自：聚山梨酯-80、三乙醇胺、丙二醇， 半合成脂肪酸甘油酯、泊洛沙姆、聚乙二醇、羊毛脂中的一種或多種，調(diào)成眼霜用紫外線滅 菌裝瓶。
[0060] 藥理學(xué)毒性試驗(yàn)
[0061] 毒理學(xué)試驗(yàn)：
[0062] 試驗(yàn)例1 :本發(fā)明急性毒性試驗(yàn)
[0063] 一、試驗(yàn)材料：
[0064] 動(dòng)物：昆明種小鼠，體重21_24g，雌雄各半，山東大學(xué)生物試驗(yàn)室育種。
[0065] 藥物：本發(fā)明眼霜。
[0066] 二、方法：
[0067] 1、LD50計(jì)算：采用改良寇氏法，將小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半，將洗 液劑溶解，配成最大濃度，按小鼠最大允許容量給藥，所給劑量按生藥量依次為18,14. 4， 11.5,9.2,7.4&.1^-1)，在動(dòng)物禁食（不禁水）18小時(shí)后，一日內(nèi)分兩次給藥（間隔半小 時(shí)），每次〇. 5ml，觀察動(dòng)物死亡情況。
[0068] 2、最大耐受劑量測(cè)定（MTD值）：取小鼠20只，雌雄各10只。將片劑加蒸餾水溶解， 配成最高濃度，按動(dòng)物的最大耐受量，以注射灌喂器能抽動(dòng)為準(zhǔn)。在動(dòng)物禁食（不禁水）18 小時(shí)后，一日內(nèi)分兩次給藥（間隔半小時(shí)），每次〇. 5ml (每ml含生藥0. 36g)，總藥量為18g 生藥/kg. d，相當(dāng)臨床成人50Kg體重用量的300倍。給藥后連續(xù)觀察7天。
[0069] 三、試驗(yàn)結(jié)果：
[0070] 在LD50計(jì)算中當(dāng)用最大允許濃度和最大允許容量給予小鼠時(shí)（18g/Kg. d)，未見(jiàn) 小鼠死亡，即未測(cè)出LD50,只可求最大耐受劑量，在7天觀察期中，動(dòng)物其食欲、活動(dòng)、毛色、 精神狀態(tài)等皆正常，發(fā)育正常，未見(jiàn)有死亡。即選用相當(dāng)于臨床劑量的300倍藥量，并無(wú)不 良反應(yīng)發(fā)生，表明急性毒性極小，MTD > 18g/Kg. d。
[0071] 試驗(yàn)例2 :本發(fā)明急性皮膚刺激試驗(yàn)報(bào)告
[0072] 1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簷z測(cè)本發(fā)明對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚的刺激/腐蝕作用和強(qiáng)度
[0073] 2、材料和方法：
[0074] 2. L受試物名稱：本發(fā)明眼霜（實(shí)施例方法1制得）
[0075] 2. 2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：壹級(jí)大耳白種家兔，10只，雌性，體重2. 1-2. 3kg ;由青島大學(xué)醫(yī)學(xué) 院生物系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；
[0076] 2. 3.試驗(yàn)方法：
[0077] 選用皮膚完好的健康家兔10只，于試驗(yàn)前24小時(shí)將其背部脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去 毛面積左、右各約4cmX4cm。試驗(yàn)時(shí)取受試物0. 2ml涂于2. 5cmX2. 5cm的二層紗布上，敷 貼于一側(cè)去毛皮膚表面，油紙覆蓋，膠布固定。另一側(cè)皮膚作為空白對(duì)照。封閉4小時(shí)后， 去除覆蓋物，并用溫水清洗去殘留受試物，于去除受試物后的1、24和48小時(shí)觀察涂抹部位 皮膚反應(yīng)，并評(píng)分。
[0078] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚未出現(xiàn)任何紅斑，紅腫，發(fā)炎現(xiàn)象。
[0079] 4、小結(jié)：根據(jù)《（消毒技術(shù)規(guī)范》（1999)中皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判定，本發(fā)明軟 膏劑對(duì)動(dòng)物皮膚刺激強(qiáng)度屬無(wú)刺激性。
[0080] 實(shí)施例3 :陰道粘膜刺激試驗(yàn)結(jié)果
[0081] 1.試驗(yàn)方法：
[0082] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢疫3天后，選用18只上述健康家兔，隨機(jī)分為三組，每組各6只，分別 為：空白對(duì)照、賦形劑對(duì)照、本發(fā)明眼霜。分別用適當(dāng)大小的滅菌棉條浸以滅菌生理鹽水和 受試物置于賦形劑對(duì)照組和受試物組動(dòng)物陰道內(nèi)，與陰道粘膜接觸6小時(shí)，24小時(shí)后處死 動(dòng)物。取出局部陰道組織，觀察病變情況。
[0083] 2、試驗(yàn)結(jié)果：陰道粘膜刺激試驗(yàn)結(jié)果
[0085] 實(shí)施例4 :皮膚過(guò)敏試驗(yàn)結(jié)果
[0086] 用本發(fā)明眼霜，進(jìn)行誘導(dǎo)和激發(fā)接觸試驗(yàn)，在24小時(shí)和48小時(shí)后觀察試驗(yàn)小鼠， 均不見(jiàn)皮膚有紅斑及水腫等現(xiàn)象，與陰性對(duì)照組無(wú)差異。結(jié)果表明，該膏劑對(duì)皮膚反應(yīng)強(qiáng)度 近于零，即無(wú)皮膚變態(tài)反應(yīng)。
[0087] 實(shí)施例5 :長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)資料
[0088] 1、實(shí)驗(yàn)方法
[0089] 將豚鼠隨機(jī)份成4組，每組15只。在豚鼠背部脊柱兩側(cè)將脫毛劑均勻涂上，使其 脫毛范圍約40平方厘米。洗凈脫毛劑，觀察24小時(shí)后每組豚鼠分別涂本發(fā)明眼霜0. 2、0. 4 和0. 8ml，分別含生藥92、184和368mg，另一組涂溶媒0. 8ml每日二次，連續(xù)30天，觀察豚 鼠的一般情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動(dòng)物進(jìn)行血液學(xué)、血液生化及病理學(xué)檢查。
[0090] 2、結(jié)果
[0091] 上述三組用藥豚鼠軀干去毛區(qū)，未見(jiàn)局部皮膚有水腫、充血、紅斑、出血點(diǎn)及潰瘍。 用藥組與對(duì)照組動(dòng)物毛發(fā)色澤、攝食、四肢活動(dòng)等對(duì)照組無(wú)明顯差異，血液生化檢查，用藥 組與對(duì)照組均在正常范圍。病理組織學(xué)檢查，實(shí)驗(yàn)各組心、肝、腎及局部皮膚均未見(jiàn)明顯病 變。提示，本發(fā)明中藥眼霜長(zhǎng)期用藥對(duì)局部皮膚及全身重要臟器均未見(jiàn)明顯的毒性作用。
[0092] 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0093] 一、本發(fā)明的微循環(huán)實(shí)驗(yàn)方法：
[0094] 1、材料與方法：取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，每組10只（雌雄各半），對(duì)照組每鼠 右耳涂生理鹽水少許；陽(yáng)性對(duì)照組每鼠右耳給予市售佰草集新恒美緊膚眼霜15ml (上海佰 草集化妝品有限公司出品），受試組為本發(fā)明外用眼霜15ml。15min后腹腔注射0. 1%戊巴 比妥鈉0. lml/lOg麻醉動(dòng)物，隨后尾靜脈注射0. 1%腎上腺素0. lmL/10g，立即觀察小鼠右 耳微動(dòng)靜脈口徑（μπι)及0. 2mm2毛細(xì)血管網(wǎng)點(diǎn)數(shù).t檢驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).
[0095] 2結(jié)果與討論
[0096] 2. 1.對(duì)微循環(huán)的影響
[0097] 與對(duì)照組相比，受試組1對(duì)小鼠毛細(xì)血管開(kāi)放數(shù)有明顯增多（P<0.01);受試組2 對(duì)微靜脈口徑和毛細(xì)血管開(kāi)放數(shù)有顯著增加 （P < 〇. 01);受試組3對(duì)小鼠微動(dòng)、靜脈口徑 及毛細(xì)血管開(kāi)放數(shù)皆有增加（P< 0.01);說(shuō)明受試藥能改善微循環(huán)，有活血化瘀作用（表 1)〇
[0098] 表1、本發(fā)明眼膜對(duì)小鼠微動(dòng)、靜脈口徑及毛細(xì)血管開(kāi)放數(shù)的影響
[0100] 二、對(duì)巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0101] 取健康小鼠30只，隨機(jī)分成3組，即空白對(duì)照組、佰草集新恒美緊膚眼霜陽(yáng)性對(duì)照 組、本發(fā)明眼霜組，每組10只，雌雄各半，陽(yáng)性對(duì)照組和本發(fā)明組分別涂抹，空白對(duì)照組涂 抹等劑量的生理鹽水，連續(xù)給藥7天，于末次給藥后0. 5小時(shí)，在小鼠左耳內(nèi)外測(cè)涂巴豆油 致炎劑（2%巴豆油，20%無(wú)水乙醇，5%蒸餾水，73%乙醚）0.1 ml致炎，致炎后4小時(shí)用打孔 器（孔徑6_)打下左、右耳片，稱重，以左右耳片重量差作為腫脹程度，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0102] 表2對(duì)巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的影響（X土SD)

[0105] 注：與對(duì)照組比較：#P < 0. 01 ;與陽(yáng)性對(duì)照組比較：#P < 0. 05 ;由上表實(shí)驗(yàn)結(jié)果 可以看出，本發(fā)明眼霜具有更好的消腫藥理作用。
[0106] 三.對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響
[0107] 取健康大鼠30只，體重180-220g，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、佰草集新恒美緊膚眼霜 陽(yáng)性對(duì)照組、本發(fā)明眼霜組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。陽(yáng)性對(duì)照組和本發(fā)明藥物組 分別每日涂抹0. 2g，空白對(duì)照組給予同劑量的生理鹽水涂抹，連續(xù)給藥7天，于末次給藥后 30分鐘，分別在大鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜膠混懸液0.1 ml/只致炎，分別于致炎前 和致炎后15、30、60、120、240分鐘測(cè)大鼠右后足跖的周長(zhǎng)，并計(jì)算腫脹率【腫脹率=(致炎 后足跖周長(zhǎng)-致炎前足跖周長(zhǎng)）/致炎前足跖周長(zhǎng)X 100%】；結(jié)果見(jiàn)表3。
[0108] 表3對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響（X土SD)
[0110] 注：與對(duì)照組比較：#P < 0. 01 ;與陽(yáng)性對(duì)照組比較：#P < 0. 05 ;由上表實(shí)驗(yàn)結(jié)果 可以看出，本發(fā)明藥物組具有更好的消腫祛瘀的藥理作用。
[0111] 3 討論
[0112] 中醫(yī)理論認(rèn)為大部分眼袋，眼部浮腫的發(fā)生與肝腎虛有關(guān)，肝腎虛后，腎精不能養(yǎng) 肝血，而"肝開(kāi)竅于目"，最終因精血虧損，表現(xiàn)在雙眼上就形成上下眼皮浮腫，眼袋很大。而 現(xiàn)代研宄也證實(shí)眼袋是由于經(jīng)常熬夜，情緒不穩(wěn)定，眼部疲勞、衰老，導(dǎo)致靜脈血管血流速 度過(guò)于緩慢，眼部皮膚紅血球細(xì)胞供氧不足，靜脈血管中二氧化碳及代謝廢物積累過(guò)多，形 成慢性缺氧，血液較暗并形成滯留以及造成眼部眼袋、眼部浮腫的出現(xiàn)，這與中醫(yī)理論是相 吻合的。
[0113] 眼周的肌膚格外嬌嫩，眼睛四周的皮膚只含有少量的脂肪，且眼皮是人體最薄的 皮膚，非常脆弱，易水腫，很容易長(zhǎng)出皺紋，并隨著年齡的增長(zhǎng)而不斷加深。出現(xiàn)眼角皺紋不 難去除，因?yàn)榻琴|(zhì)層比較薄弱，恢復(fù)的快。那么，怎樣去除眼角皺紋呢.
[0114] 眼袋是由于皮膚松弛所造成的。這種認(rèn)識(shí)有很大的代表性。經(jīng)過(guò)論證，也是眼袋 產(chǎn)生的主要原因。所以，提升皮膚緊致度是主要的改善途徑。比較理想的方式是口服膠原 蛋白。但是不要奢望在短時(shí)間內(nèi)徹底改善，因?yàn)檠鄞男迯?fù)是需要一定的過(guò)程的。
[0115] 化妝品能矯治眼袋。這要從兩個(gè)方面來(lái)分析，如果是"功能性"眼袋，也就是說(shuō)眼 袋時(shí)而明顯，時(shí)而不明顯。適當(dāng)應(yīng)用營(yíng)養(yǎng)霜類化妝品對(duì)于防止眼袋的加重是能起到一定作 用的。而一旦眼袋是"病理性"的，也就是組織結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，而且眼袋長(zhǎng)期顯現(xiàn)，并逐漸 加重。如果想通過(guò)化妝品來(lái)矯正，那完全是徒勞的。對(duì)眼睛保養(yǎng)必須提前做好，眼袋除極 少病理性因素外生理因素占絕大部分，大量女性在身體狀況的情況下忽視對(duì)眼睛保養(yǎng)的需 求，導(dǎo)致開(kāi)始發(fā)生衰老后速度非常之快，在衰老之前有意識(shí)的進(jìn)行養(yǎng)護(hù)