含蚯蚓活性蛋白的化妝品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種含蚯蚓活性蛋白的化妝品。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著藥妝品工業(yè)的持續(xù)發(fā)展，研究和開(kāi)發(fā)策略將更多地轉(zhuǎn)向醫(yī)藥類型的產(chǎn)品， 利用先進(jìn)醫(yī)學(xué)技術(shù)的藥妝品已經(jīng)得到了快速發(fā)展，而且這一趨勢(shì)還將會(huì)更加強(qiáng)勁。目前， 美容手術(shù)包括微晶磨皮術(shù)和化學(xué)磨皮術(shù)、肉毒素護(hù)理和激光更新皮膚等，這些方法都能消 除不平滑的皮膚表面、老年斑和細(xì)小的皺紋，然而，大部分消費(fèi)者更加青睞于使用乳霜、乳 液、凝膠、油脂和面膜等化妝品來(lái)美化肌膚。
[0003] 本研究所使用的蚯蚓品種為赤子愛(ài)勝蚓，本品種在分類學(xué)上屬于正蚓科愛(ài)勝屬。 赤子愛(ài)勝蚓繁殖率高、適應(yīng)性強(qiáng)，很適合人工養(yǎng)殖，是目前世界上養(yǎng)殖最為普遍的一個(gè)品 種，其體內(nèi)的藥用成分也十分豐富，所以臨床上的制劑多以赤子愛(ài)勝蚓為原料。隨著生物技 術(shù)的發(fā)展，赤子愛(ài)勝蚓的藥用價(jià)值越來(lái)越多的被人們研究和關(guān)注。
[0004] 蚯蚓的藥用價(jià)值與其體內(nèi)的活性物質(zhì)關(guān)系密切；實(shí)驗(yàn)室前期的研究中發(fā)現(xiàn)蚯蚓活 性蛋白提取物在動(dòng)物水平上能夠促進(jìn)燙傷創(chuàng)面的愈合，在細(xì)胞水平上能夠促進(jìn)纖維細(xì)胞的 增殖和遷移；但是，還未見(jiàn)從蚯蚓中提取抗皺成分的資料，現(xiàn)有技術(shù)中蚯蚓提取物提取工藝 還不是很完善，提取的往往是包含小分子成分的混合物；本發(fā)明的研究的主要任務(wù)是科學(xué) 提取出赤子愛(ài)勝蚓中促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖的活性蛋白，并以其為原料研制出具有抗皺活性 的優(yōu)質(zhì)化妝品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種具有使皮膚柔滑、補(bǔ)水保濕及延緩衰老的作用的含蚯 蚓活性蛋白的化妝品。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的含蚯蚓活性蛋白的化妝品，包括主料和輔料，所述主 料由甘油、透明質(zhì)酸、蘆芭膠、海藻糖、水溶性維生素E、杰馬、蚯蚓活性蛋白、人參提取液和 純化水組成，所述輔料為香精、乳化劑、水溶性霍霍巴油、葡萄籽油、卡波姆、三乙醇胺尿囊 素的一種或兩種以上的組合物。
[0007] 根據(jù)所選輔料的不同，這種面部化妝品可以制成化妝水、祛皺精華、乳液、面霜、面 膜。
[0008] 當(dāng)輔料為香精時(shí)，可以制備化妝水，每100g化妝水中含有1~1. 5g甘油、8~10g1% 的透明質(zhì)酸、〇. 8~lg蘆芭膠、l~2g海藻糖、0. 1~0. 2g水溶性維生素E、0. 3~0. 5g杰馬、4~6g 蚯蚓活性蛋白、4~6g人參提取液、0. 01~0. 02g香精，余量為純化水。
[0009] 所選輔料為香精和水溶性霍霍巴油的組成物時(shí)，可以制備成祛皺精華，每100g祛 皺精華中含有2~3g甘油、20~30gl%透明質(zhì)酸、l~2g蘆芭膠、2~4g海藻糖、0. 1~0. 2g水溶性 維生素E、0. 3~0. 5g杰馬、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g人參提取液、0. 01-0. 02g香精和 2~3g水溶性霍霍巴油，余量為純化水。
[0010] 所選輔料為葡萄籽油、香精、乳化劑和水溶性霍霍巴油的組合物時(shí)，可以制備成乳 液；每100g乳液中含有2~4g甘油、15~20gl%透明質(zhì)酸、2~3g蘆芭膠、3~4g海藻糖、4~5g葡 萄籽油、l~2g水溶性霍霍巴油、0. 4~0. 5g水溶性維生素E、0. 3~0. 5g杰馬、10~20g蚯蚓活性 蛋白、10~20g人參提取液、I. 3~1. 5g乳化劑和0. 01-0. 02g香精，余量為純化水。
[0011] 所選輔料為葡萄籽油、香精、乳化劑和水溶性霍霍巴油的組合物時(shí)，根據(jù)各組分的 配比不同還可以制備成面霜；每100g面霜中含有2~4g甘油、15~20gl%透明質(zhì)酸、2~3g蘆芭 膠、3~4g海藻糖、0. 4~0. 5g水溶性維生素E、0. 3~0. 5g杰馬、10~20g蚯蚓活性蛋白、10~20g 人參提取液、2~3g乳化劑、0. 01-0. 02g香精、4~5g葡萄籽油和l~2g水溶性霍霍巴油，余量 為純化水。
[0012] 所選輔料為卡波姆、香精、三乙醇胺和尿囊素的組合物時(shí)，可以制備成面膜；其中 每100g面膜中含有2~4g甘油、4~6 gl%透明質(zhì)酸、2~3g蘆芭膠、2~3g海藻糖、0. 4~0. 6g水 溶性維生素E、0. 3~0. 5g杰馬、8~10g蚯蚓活性蛋白、10~20g人參提取液、0. 01-0. 02g香精、 0. 2~0. 3g卡波姆、0. 2~3g三乙醇胺和0. 2~0. 3g尿囊素，余量為純化水。
[0013] 優(yōu)選的，所述透明質(zhì)酸為分子量25~100萬(wàn)的透明質(zhì)酸粉末。
[0014] 進(jìn)一步，所述的蚯蚓活性蛋白采用如下步驟提取而成： a、 取清洗干凈的鮮蚯蚓，加入20mmol/L、pH為6. 8~7. 2的磷酸鹽緩沖液，冰浴條件下高 速勻漿，得到蚯蚓勻漿液，并在4°C下靜置2~3h，使蛋白充分溶出； b、 將蚯蚓勻漿液分裝于離心管中，在4°C下，高速離心20~30min，取上清液；在室溫條 件下，加研細(xì)的硫酸銨進(jìn)行鹽析，達(dá)到50%飽和度，使雜蛋白沉淀析出，得鹽析液； c、 將鹽析液分裝于離心管中，在4°C下，高速離心20~30min，取上清液過(guò)0. 45Mm的膜， 取濾液； d、 鹽析所述濾液采用0. 2Mm的中空纖維膜組件超濾的方式除去大分子物質(zhì)，然后用截 留分子量為20k-50k中空纖維膜組件超濾的方式脫鹽，最后冷凍干燥即得所述化妝品用蚯 蚓活性蛋白。
[0015] 本發(fā)明的有益效果是：本方法以新鮮的赤子愛(ài)勝蚓為原料，采用勻漿、離心、鹽析、 微濾、超濾、冷凍干燥等技術(shù)對(duì)其中的活性蛋白進(jìn)行分離純化、采用NIH3T3纖維細(xì)胞進(jìn)行 活性跟蹤，獲得了具有較高增殖活性的蚯蚓活性蛋白；將本發(fā)明方法制備的蚯蚓活性蛋白 應(yīng)用于化妝品，具有使皮膚柔滑、補(bǔ)水保濕及延緩衰老的作用，可作為護(hù)膚品，直接用于皮 膚。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例1:化妝水的制備 配方為： 甘油：Ig 1%透明質(zhì)酸：IOg 蘆芭膠=Ig 海藻糖：2g 水溶性維生素E :0. 2g 杰馬：〇. 4g 蚯蚓活性蛋白：5g 人參提取液：5g 香精：〇. Olg 純化水：75. 39g 方法為：按照以上配方精確稱量甘油，1%透明質(zhì)酸溶液，海藻糖，水溶性維生素E及杰 馬置燒杯中，玻璃棒攪勻后，加入5g人參提取液及5g蚯蚓活性蛋白提取液；繼續(xù)攪拌至均 勻后加純化水75. 39g，全部溶解后加入0.0 lg香精對(duì)化妝品的香型進(jìn)行調(diào)節(jié)，即制得100 g 化妝水。
[0017] 實(shí)施例2:祛皺精華的制備 配方為： 甘油：3g 1%透明質(zhì)酸：25g 蘆芭膠：1. 5g 水溶性霍霍巴油：2g 海藻糖：3g 水溶性維生素E :0. 2g 杰馬：〇. 4g 蚯蚓活性蛋白：15g 人參提取液：15 g 香精：〇2g 純化水：34. 88g 方法為：按照以上配方精確稱量甘油，1%透明質(zhì)酸溶液，蘆芭膠，水溶性霍霍巴油，海 藻糖，水溶性維生素E及杰馬置燒杯中，玻璃棒攪勻后，加入15g人參提取液及15g蚯蚓活 性蛋白提取液，繼續(xù)攪拌至均勻后，加純化水34. 88g，全部溶解后，加入0. 02g香精對(duì)化妝 品的香型進(jìn)行調(diào)節(jié)，即制得100 g祛皺精華。
[0018] 實(shí)施例3:乳液的制備 配方為： 甘油：3g 1%透明質(zhì)酸：20g 蘆芭膠：2g 海藻糖：3g 葡萄籽油：5g 霍霍巴油；Ig 杰馬：〇. 4g 水溶性維生素E:0. 5g 蚯蚓活性蛋白：15g 人參提取液：15g 乳化劑：1. 5g 香精：〇. 〇2g 純化水：33. 58g 方法為：按照以上配方精確稱量甘油，1%透明質(zhì)酸溶液，蘆芭膠，海藻糖，蚯蚓活性蛋 白提取液及人參提取液置燒杯中，玻璃棒攪拌均勻。再按照配方加入葡萄籽油，霍霍巴油， 杰馬，水溶性維E和香精，并加入純化水33. 58g，攪拌均勻后，加入乳化劑大力攪拌至形成 初乳，最后用勻楽機(jī)乳化，即制得100 g乳液。
[0019] 實(shí)施例4:面霜的制備 配方為： 甘油：3g 1%透明質(zhì)酸：20g 蘆芭膠：2g 海藻糖：3g 葡萄籽油：5g 霍霍巴油：Ig 杰馬：〇. 4g 水溶性維生素E :0. 5g 蚯蚓活性蛋白：15g 人參提取液：15g 乳化劑：2. 5g 香精：〇. 〇2g 純化水：32. 58g 方法為：按照以上配方精確稱量甘油，1%透明質(zhì)酸溶液，蘆芭膠，海藻糖，蚯蚓活性蛋 白提取液及人參提取液置燒杯中，玻璃棒攪拌均勻。再按照配方加入葡萄籽油，霍霍巴油， 杰馬，水溶性維E和香精，并加入純化水32. 58g，攪拌均勻后加入乳化劑大力攪拌，即制得 100 g面霜。
[0020] 實(shí)施例5:面膜的制備 配方為： 甘油：3g 1%透明質(zhì)酸：5g 蘆芭膠：2g 卡波姆：〇. 2g 三乙醇胺：0. 2g 海藻糖：2g 水溶性維生素E :0. 5g 尿囊素：0. 2g 杰馬：〇. 4g 蚯蚓活性蛋白：IOg 人參提取液：15g 香精：〇. Olg 純化水