一種殼聚糖或羧甲基殼聚糖功能化納米硒復(fù)合物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種殼聚糖或羧甲基殼聚糖功能化納米砸復(fù)合物的制備方法，屬納米材料技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]殼聚糖因其來源廣、用途大、容易獲得而廣受關(guān)注，在食品、化工領(lǐng)域均有廣泛的用途，此外，殼聚糖及其衍生物羧甲基殼聚糖因其分子結(jié)構(gòu)上有豐富的羥基和氨基易于進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)而賦予多種功能。
[0003]隨著人民生活水平的不斷提高，高效、多功能復(fù)合型保健品的開發(fā)成為當(dāng)下研宄的熱點。砸是人體必需的微量元素，被稱為“抗癌之王”，對人類和其它動物的生長、發(fā)育及疾病的發(fā)生密切相關(guān)。研宄表明，缺砸會引發(fā)諸如癌癥、心臟病、關(guān)節(jié)炎和免疫系統(tǒng)功能紊亂等多種病癥，砸能夠通過降低腫瘤擴散的速度，同時加快癌細(xì)胞凋亡的速度來抑制致癌物的影響，適量補砸可以預(yù)防癌癥，降低癌癥發(fā)病率。在美國，對8000人進(jìn)行長達(dá)十年的補砸研宄，結(jié)果表明，砸可以顯著降低肺癌、腸癌、胃癌、血癌等癌癥的發(fā)病率，因此砸被稱為“營養(yǎng)性防癌劑”。隨著年齡增加，人體產(chǎn)生抗氧化的能力逐漸降低，對自由基損害的防御能力下降，導(dǎo)致衰老加速，大量臨床研宄表明，砸作為抗氧化劑，進(jìn)入人體后可迅速清除體內(nèi)的自由基，從而可有效防御自由基對細(xì)胞的損害，有抗衰老的功能。
[0004]目前，砸的補充常以亞砸酸鈉，砸酸鈉，砸代蛋氨酸的形式添加于許多食品補充劑中。砸納米粒子(SeNPs)因其生物利用度高，毒性低和抗癌活性顯著的特性而成為新的研宄熱點。國家衛(wèi)生部已批準(zhǔn)納米砸膠囊為保健食品(衛(wèi)食健字1998第134號)，幾種制備納米砸的方法已獲國家發(fā)明專利(授權(quán)公告號CN 101544359 A ；CN 102228469 B ；CN103420344 A)。研宄表明砸的生物利用度、抗腫瘤活性隨其納米尺度的改變而相差很大，通常合成的表面沒有功能化的SeNPs極易聚集沉淀，這已成為限制SeNPs應(yīng)用的瓶頸。因此，制備粒徑小、分布窄的SeNPs，并利用多糖對其表面進(jìn)行功能化修飾，以期獲得穩(wěn)定性好的砸納米粒子，成為當(dāng)下研宄的熱點。
[0005]糖類是一切生物體維持生命活動所需能量的主要來源，殼聚糖是陽離子聚合物，是自然界中少見的天然帶正電荷生物高分子聚合物，來源豐富，價格低廉；羧甲基殼聚糖是一種水溶性殼聚糖的衍生物，即在殼聚糖殘基的C6-OH上發(fā)生取代，殼聚糖或羧甲基殼聚糖分子鏈上都具有豐富的羥基和氨基使其具有良好的組織相容性，生物可降解性，因此，殼聚糖及其衍生物常用于吸附、包埋活性成分來提高活性成分的利用率?，F(xiàn)有關(guān)于納米砸多糖的復(fù)合物的文獻(xiàn)報道都是先利用多糖靜電吸附無機砸前體，再采用還原劑還原合成納米砸，該方法制備的納米砸粒徑較大且分布不均勻。
[0006]針對以上問題，我們創(chuàng)新合成方法，先制備粒徑較小且分布均勻的納米砸，分離純化納米砸后用殼聚糖或羧甲基殼聚糖對其表面進(jìn)行功能化修飾，獲得粒徑小且分布均勻，穩(wěn)定性好的殼聚糖或羧甲基殼聚糖納米砸復(fù)合物，該方法提高了砸納米粒子的生物利用度和生物相容性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是通過新型的綠色合成方法制備一種經(jīng)多糖功能化修飾的納米砸多糖復(fù)合物，其合成方法簡單，原料來源豐富，制備獲得的納米砸多糖復(fù)合物具有穩(wěn)定性好、粒徑分布窄、分散性好的特點。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案為:
[0009]一種殼聚糖或羧甲基殼聚糖功能化納米砸復(fù)合物的制備方法，以亞砸酸鈉為砸源，碘化鉀為穩(wěn)定劑，抗壞血酸為還原劑，殼聚糖或羧甲基殼聚糖為表面修飾劑綠色制備表面功能化的納米砸復(fù)合物。
[0010]具體步驟包括:
[0011](I)將一定濃度的亞砸酸鈉溶液與一定濃度的碘化鉀溶液按1:1 (v/v)混合，加入亞砸酸鈉溶液20?40 (v/v)倍的水，攪拌均勻；
[0012](2)加入與亞砸酸鈉溶液等體積的一定濃度的抗壞血酸溶液，進(jìn)行反應(yīng)；
[0013](3)靜置老化；
[0014](4)離心后除去上清液，水洗和醇洗除去未反應(yīng)的雜質(zhì)；
[0015](5)納米砸粒子重新分散成溶膠，分別添加不同濃度梯度的殼聚糖或羧甲基殼聚糖獲得不同表面功能化納米砸復(fù)合物溶膠。
[0016]優(yōu)選的，所述亞砸酸鈉溶液的濃度為10?30毫摩爾每升，所述碘化鉀溶液的濃度為20?40暈?zāi)柮可?br>[0017]優(yōu)選的，所述抗壞血酸溶液濃度為50?70毫摩爾每升，反應(yīng)時間為20?40分鐘。
[0018]優(yōu)選的，所述靜置老化的時間為24小時，得淺紅色透明膠體溶液。
[0019]優(yōu)選的，所述離心為在轉(zhuǎn)速為8000?10000轉(zhuǎn)每分鐘的條件下離心20?40分鐘。
[0020]優(yōu)選的，所述殼聚糖或羧甲基殼聚糖濃度梯度分別為
0.01，0.08，0.16，0.32，0.48，0.64 毫克每毫升。
[0021]一種殼聚糖或羧甲基殼聚糖功能化納米砸復(fù)合物，采用上述的方法制備而成。
[0022]本發(fā)明的有益效果:
[0023]本發(fā)明先通過簡單溫和的實驗條件大批量綠色合成穩(wěn)定性好、粒徑分布窄、生物活性高的表面功能化的球形納米砸粒子。本發(fā)明先以亞砸酸鈉為砸源，碘化鉀為穩(wěn)定劑，抗壞血酸為還原劑，合成粒徑為50nm的SeNPs，隨后通過離心、水洗、醇洗獲得純化的納米砸粒子，用殼聚糖或羧甲基殼聚糖溶液對納米砸的表面改性，不僅提高了砸納米溶膠的穩(wěn)定性，而且其表面經(jīng)過功能化修飾，獲得帶相反電荷的多糖納米砸粒子，提高了砸納米粒子的生物相容性。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)的不同之處在于:先綠色合成單分散的SeNPs，純化后用殼聚糖或羧甲基殼聚糖溶液對其表面改性；而現(xiàn)有技術(shù)中都是亞砸酸鈉先被多糖的溶液通過靜電吸附分散，再用抗壞血酸還原，還原的SeNPs粒徑分布不均勻，純化SeNPs手段繁瑣復(fù)雜，而且不能大批量的合成，影響了 SeNPs的進(jìn)一步應(yīng)用。
【附圖說明】
[0024]圖1納米砸溶膠的透射電鏡(TEM)圖(a)，單個粒子的高分辨率透射電鏡(HRTEM)(b)及選擇性區(qū)域衍射圖(SAED) (C)，單個粒子的能譜分析圖(EDX) (d)o
[0025]圖2納米復(fù)合物溶膠的紫外-可見光譜圖(SeNPs砸納米粒子，CS-SeNPs殼聚糖復(fù)合砸納米粒子，CCS-SeNPs羧甲基殼聚糖復(fù)合納米砸)。
[0026]圖3不同濃度納米復(fù)合物溶膠的光散射(DLS)粒徑圖以及Zeta電位圖。
[0027]圖4 納米復(fù)合物紅外光(FT-1R)譜圖 A (CCS-SeNPs)，B (CCS)，C (CS-SeNPs)和D(CS)。
【具體實施方式】
[0028]下面通過實例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容和效果。
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