一種獼猴采精方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種獼猴采精方法。
【背景技術(shù)】
[0002]電刺激采精法是目前國內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的獼猴精液采集方法，分為陰莖電刺激法和直腸探子法兩種。傳統(tǒng)電刺激采精法需要麻醉，會對采精造成一定的影響且造成相當(dāng)?shù)陌踩L(fēng)險。另外在電刺激采精的過程中容易對動物的身體造成傷害和痛苦，因而不完全符合動物福利的要求。當(dāng)前振動法采精技術(shù)已經(jīng)在人類和狨猴上取得了成功，此技術(shù)具有非麻醉、操作簡便、采精效率高以及無創(chuàng)傷、無痛苦等優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是一種良好的采精方法。但由于獼猴屬動物性格敏感，在非麻醉狀態(tài)下警覺性強(qiáng)且具有較強(qiáng)的攻擊性，因此之前一直沒有獼猴成功使用非麻醉的采精技術(shù)采集精液的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的為消除電刺激采精技術(shù)對獼猴造成的傷害和不良影響，提供一種獼猴采精方法。所述的采精方法適用于食蟹猴、恒河猴等獼猴屬非人靈長類動物的精液采集。所述的采精技術(shù)操作時不需要對獼猴進(jìn)行麻醉，避免了由麻醉引起的安全風(fēng)險和對采精的不良影響。通過訓(xùn)練使獼猴在非麻醉的保定過程中處于溫順的低應(yīng)激狀態(tài)。非電脈沖刺激，在采精過程中基本無創(chuàng)傷，也不會對動物造成明顯的痛苦。同時通過本技術(shù)采集的精液的品質(zhì)比傳統(tǒng)方法所采集的精液好。
[0004]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種獼猴采精方法，該方法采用振動采精儀一臺，振動接觸棒，消毒過的離心管，移液器，鑷子一把，恒溫水浴鍋一個，猴頸圈一個，猴椅一臺，采精方法運(yùn)用非麻醉保定方法振動刺激采精，具體操作步驟如下:
[0005]I)將經(jīng)過適應(yīng)訓(xùn)練的佩戴了猴頸圈的獼猴置于猴椅上，把猴頸圈固定于相應(yīng)的卡槽中，獼猴面向前方，暴露生殖器部位，實(shí)現(xiàn)獼猴的保定；
[0006]2)獼猴保定好后，用溫生理鹽水潤濕的無菌棉小心擦洗獼猴的陰莖龜頭部，防止精液被污染；
[0007]3)用鑷子夾持一個滅菌擦拭物，在龜頭和陰莖根部間反復(fù)輕輕擦拭I?2min ;
[0008]4)采用振動采精儀對獼猴進(jìn)行刺激，采精儀的振動幅度始終設(shè)置為3mm，先以頻率90Hz，用振動接觸棒以打圈的方式刺激獼猴的陰囊中線部位和附睪，刺激時間為5min ;然后以頻率100Hz，以陰莖為中心，以打圈的形式刺激周圍的部位，刺激時間為3min ;最后以頻率110?120Hz，集中刺激陰莖體部和包皮結(jié)合處，刺激時間為2min ;整個刺激過程中，米精儀都不接觸龜頭；
[0009]5)獼猴射精后，將膠塊部分轉(zhuǎn)移到離心管中，液體部分用移液槍移吸取也轉(zhuǎn)移到離心管中，獲得獼猴精液；然后置于37°C的恒溫水浴鍋中備用，獼猴采精頻率每周最多2次，注意適當(dāng)補(bǔ)充營養(yǎng)。
[0010]步驟I)中所述的適應(yīng)訓(xùn)練為:實(shí)驗(yàn)前I?2周開始為需要進(jìn)行采精的獼猴佩戴猴頸圈；佩戴猴頸圈后，每天把獼猴安置到猴椅上進(jìn)行保定，保定時間從5min開始，并不斷延長至30min，保定結(jié)束后把獼猴放回籠子里；保定的操作每天重復(fù)3?4次，保定前后和過程中都給獼猴喂吃新鮮水果或者堅(jiān)果作為獎勵，使獼猴消除對保定的恐懼和反抗；使獼猴都能在低應(yīng)激狀態(tài)下接受猴椅保定，且不會有明顯的反抗和攻擊行為。
[0011]所述的獼猴為獼猴屬非人靈長類動物，優(yōu)選為食蟹猴或恒河猴。
[0012]步驟I)過程中獼猴若出現(xiàn)排尿，立即用溫生理鹽水潤濕的無菌棉球擦洗干凈。
[0013]步驟3)中所述的滅菌擦拭物為滅菌棉球或滅菌絨布中的一種。
[0014]步驟3)中的擦拭過程中若獼猴有射精即可停止，收集精液。
[0015]步驟4)中若獼猴沒有射精，則略作休息后，重復(fù)步驟4) 一次，累計(jì)刺激時間不超過20min ;若累計(jì)刺激時間超過20min沒有射精，可以認(rèn)為這一次采精失敗，休息一天再重復(fù)刺激。
[0016]步驟4)所述的振動接觸棒由0.5ml或1.5ml的EP (eppendorf)管加工而成，具體為:把EP管的管蓋去除，并把用于接觸獼猴生殖器的管口端打磨光滑，EP管的底部外壁刻上螺紋后安裝在振動采精儀的卡槽里。
[0017]通過訓(xùn)練使獼猴能在低應(yīng)激水平下接受非麻醉保定；所用的猴椅和猴頸圈可以根據(jù)獼猴體重選擇成不同型號；采精儀振動探頭為改裝的，可以根據(jù)需求不同做成適合需要的長度；采精的過程中獼猴的表現(xiàn)很安靜舒適，不需要麻醉。
[0018]通過適應(yīng)訓(xùn)練降低獼猴的應(yīng)激水平，用猴椅和猴頸圈代替麻醉保定，由麻醉引起的安全風(fēng)險和對采精的不良影響。使用振動刺激代替電脈沖刺激，因而在采精過程中不會造成創(chuàng)傷和疼痛。使采精過程，獼猴處于近似自然交配的狀態(tài)，因此所采集的精液的品質(zhì)也與自然射精無異，可以用于獼猴人工授精，精子冷凍保存，轉(zhuǎn)基因和基因敲除獼猴的創(chuàng)制，生殖毒理學(xué)和生殖生物學(xué)研宄，充分發(fā)揮優(yōu)良雄性獼猴的繁殖效率，也有利于保存優(yōu)良獼猴的遺傳物質(zhì)。
[0019]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:
[0020]本發(fā)明的獼猴采精方法可以用于獼猴人工授精，精子冷凍保存，轉(zhuǎn)基因和基因敲除獼猴的創(chuàng)制，生殖毒理學(xué)和生殖生物學(xué)研宄，充分發(fā)揮優(yōu)良雄性獼猴的繁殖效率，也有利于保存優(yōu)良獼猴的遺傳基因；采集的精液的量更多，質(zhì)量更好；避免了麻醉對獼猴傷害和采精過程的影響；此采精方法操作簡單、快速，對獼猴溫和無創(chuàng)傷，更符合動物福利保護(hù)的要求。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0022]實(shí)施例1
[0023]選取10只成年的健康雄性獼猴，提前I周佩戴猴頸圈進(jìn)行適應(yīng)訓(xùn)練。
[0024]實(shí)驗(yàn)所用的振動米精儀為:abattery-operated FertiCare personal vibrator(Multicept, Rungsted, Denmark)。
[0025]本發(fā)明提供了一種獼猴采精方法，該方法采用振動采精儀一臺，振動接觸棒，消毒過的離心管，移液器，鑷子一把，恒溫水浴鍋一個，猴頸圈10個，猴椅一臺，采精方法運(yùn)用非麻醉保定方法振動刺激采精，具體操作步驟如下:
[0026]I)將經(jīng)過適應(yīng)訓(xùn)練的佩戴了猴頸圈的獼猴置于猴椅上，把猴頸圈固定于相應(yīng)的卡槽中，獼猴面向前方，暴露生殖器部位，實(shí)現(xiàn)獼猴的保定；
[0027]2)獼猴保定