一種垃圾微生物除臭劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種垃圾微生物除臭劑的制備方法。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國垃圾增長率達(dá)到10%以上，每年產(chǎn)生近1.5億噸。目前，國內(nèi)城市生活垃圾積存量已高達(dá)70億噸，占地約80多萬畝，其中80%?90%來自大中城市，平均每人每天產(chǎn)生的垃圾量約為1.2千克，但其處理率僅為50%左右。垃圾成份復(fù)雜，在收集轉(zhuǎn)運(yùn)、堆放過程中產(chǎn)生大量的有毒有害惡臭氣體，不僅污染空氣，對(duì)生態(tài)環(huán)境造成影響，還會(huì)導(dǎo)致人、畜疾病的傳播，影響居民的正常生活和身體健康，也給環(huán)衛(wèi)工人造成極大的危害。因此很有必要對(duì)垃圾進(jìn)行除臭。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，而提供一種垃圾微生物除臭劑的制備方法，高效降解垃圾惡臭并抑制其它腐敗物的產(chǎn)生，對(duì)垃圾填埋場(chǎng)起到原位修復(fù)作用，保護(hù)大氣環(huán)境和人們身體健康。
[0005]本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
一種垃圾微生物除臭劑的制備方法，包括如下步驟:
(1)制備植物乳桿菌發(fā)酵液；
(2)制備產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液；
(3)將步驟(I)和步驟(2)制備出的植物乳桿菌發(fā)酵液和產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液按體積
1.5?2.0: I的比例充分混合。
[0006]所述植物乳桿菌發(fā)酵液的制備步驟如下:
al、菌種活化，是將植物乳桿菌置于MRS培養(yǎng)基中經(jīng)斜面菌種活化得到活化的新鮮菌種；所述MRS培養(yǎng)基即乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基；
a2、種子瓶培養(yǎng)，是取步驟al中活化的新鮮菌種接種到種子瓶中的種子液體培養(yǎng)基，37°C恒溫培養(yǎng)28 h后，終止培養(yǎng)，制成接種液；
a3、發(fā)酵罐培養(yǎng)，是將經(jīng)步驟a2中處理后的接種液接種到發(fā)酵罐中培養(yǎng)基，所述發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的70?80%，其中接種液占所述培養(yǎng)基中的I?2%，所述發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度設(shè)置在35 0C?37°C，罐壓設(shè)置在0.03?0.05 MPa之間。
發(fā)酵罐培養(yǎng)基為:按體積比蛋白胨1.0%，葡萄糖1.0?1.5%，酵母浸膏0.3?0.5%，硫酸錳0.025%,乙酸鈉0.3?0.5%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.05%，其余為水，pH 6.2?6.6。
[0007]植物乳桿菌發(fā)酵液的制備步驟中，發(fā)酵終點(diǎn)為發(fā)酵液的活菌數(shù)在3.0X 18?
5.0X108cfu/mL 之間。
[0008]所述產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液的制備步驟如下: bl、菌種活化，是將產(chǎn)朊假絲酵母置于PDA培養(yǎng)基中經(jīng)斜面菌種活化得到活化的新鮮菌種；
b2、搖瓶種子培養(yǎng)，是將步驟bl中活化的新鮮菌種接種到搖瓶種子培養(yǎng)基中，所述搖瓶的轉(zhuǎn)速為150 rpm，并且將所述搖瓶置于30°C恒溫中培養(yǎng)24 h后，終止培養(yǎng)，制成接種液；
b3、發(fā)酵罐培養(yǎng)，是將步驟b2中處理后的接種液接種到發(fā)酵罐中，所述發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的60?70%，其中接種液占培養(yǎng)基體積的0.3?0.5%，所述發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度設(shè)置在28 0C?30 0C,并且發(fā)酵罐中培養(yǎng)基以150?180 rpm的攪拌速度培養(yǎng)，其中發(fā)酵罐的罐壓設(shè)置在0.03?0.05 MPa之間。
[0009]所述產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液中，經(jīng)過發(fā)酵罐40?42小時(shí)發(fā)酵完畢后發(fā)酵液的含菌數(shù)將再8.0X 17?3.0X 10 8 cfu/mL之間；其中發(fā)酵罐培養(yǎng)基為:按體積比，葡萄糖4.0%，硫酸銨2.0%，酵母粉0.25%，磷酸二氫鉀0.1%，氯化鈉0.01%,硫酸鎂0.05%,其余為水，pH6.0 ?6.5 ;
上述斜面菌種是指將培養(yǎng)基裝在試管內(nèi)，經(jīng)過高溫滅菌以后，培養(yǎng)基擺成斜坡式，因而稱之為斜面菌種。
[0010]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下:
(1)本發(fā)明是由2種相互間無明顯拮抗作用的微生物組成；
(2)本發(fā)明可有效降解氨與硫化氫氣體；
(3)本發(fā)明還含有除臭微生物在發(fā)酵生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的多種生物活性因子，可以有效抑制腐敗微生物的生理活性，破壞蚊蠅的孵化。因此本產(chǎn)品能有效降解垃圾的臭味，滅除蚊蠅的作用；而且本產(chǎn)品無任何毒副作用，無異味，不危害人的健康，不產(chǎn)生垃圾和二次污染。使用后對(duì)垃圾場(chǎng)周邊的環(huán)境有明顯的改善。
[0011]本發(fā)明的垃圾微生物除臭劑經(jīng)湖南省產(chǎn)商品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究所檢驗(yàn)，所檢項(xiàng)目腐蝕性和糞大腸菌群數(shù)、砷及其化合物、鎘及其化合物、鉛及其化合物、鉻及其化合物、汞及其化合物分別符合GB/T21241-2007《衛(wèi)生潔具清洗劑》和GB20287-2006《農(nóng)用微生物菌劑》標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的垃圾微生物除臭劑還經(jīng)衡陽市環(huán)境監(jiān)測(cè)站對(duì)H2S和NH3的監(jiān)測(cè)以及湖南省微生物研究所檢測(cè)中心對(duì)總有效菌數(shù)的試驗(yàn),均已達(dá)到合格要求。因此,本發(fā)明產(chǎn)品技術(shù)成熟，環(huán)保性能好。
【附圖說明】
[0012]圖1為本發(fā)明工藝流程圖；
圖2為制備植物乳桿菌發(fā)酵液的工藝流程圖；
圖3為制備產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液的工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]參見圖1、圖2、圖3所示的垃圾微生物除臭劑的制備方法，其步驟如下:
(1)制備植物乳桿菌發(fā)酵液；
(2)制備產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液；
(3)將步驟(I)和步驟(2)制備出的植物乳桿菌發(fā)酵液和產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液按體積1.5?2.0: I的比例充分混合。
[0014]所述植物乳桿菌發(fā)酵液的制備步驟如下:
al、菌種活化，是將植物乳桿菌置于MRS培養(yǎng)基中經(jīng)斜面菌種活化得到活化的新鮮菌種一；所述MRS培養(yǎng)基即乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基；
a2、種子瓶培養(yǎng)，是取步驟al中活化的新鮮菌種接種到種子瓶中的種子液體培養(yǎng)基，37°C恒溫培養(yǎng)28 h后，終止培養(yǎng)，制成接種液；
a3、發(fā)酵罐培養(yǎng)，是將經(jīng)步驟a2中處理后的接種液接種到發(fā)酵罐中培養(yǎng)基，所述發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的70?80%，其中接種液占所述培養(yǎng)基中的I?2%，所述發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度設(shè)置在35 0C?37°C，罐壓設(shè)置在0.03?0.05 MPa之間。
發(fā)酵罐培養(yǎng)基為:按體積比蛋白胨1.0%，葡萄糖1.0?1.5%，酵母浸膏0.3?0.5%，硫酸錳0.025%,乙酸鈉0.3?0.5%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.05%，其余為水，pH 6.2?6.6。
[0015]植物乳桿菌發(fā)酵液的制備步驟中，發(fā)酵終點(diǎn)為發(fā)酵液的活菌數(shù)在3.0X 18?
5.0X108cfu/mL 之間。
[0016]所述產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液的制備步驟如下:
bl、菌種活化，是將產(chǎn)朊假絲酵母置于PDA培養(yǎng)基中經(jīng)斜面菌種活化得到活化的新鮮囷種，制成接種液；
b2、搖瓶種子培養(yǎng)，是將步驟bl中活化的新鮮菌種接種到搖瓶種子培養(yǎng)基中，所述搖瓶的轉(zhuǎn)速為150 rpm，并且將所述搖瓶置于30°C恒溫中培養(yǎng)24 h后，終止培養(yǎng)；
b3、發(fā)酵罐培養(yǎng)，是將步驟b2中處理后的接種液接種到發(fā)酵罐中，所述發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的60?70%，其中接種液占培養(yǎng)基體積的0.3?0.5%，所述發(fā)酵罐中發(fā)酵溫度設(shè)置在28 0C?30 0C,并且發(fā)酵罐中培養(yǎng)基以150?180 rpm的攪拌速度培養(yǎng)，其中發(fā)酵罐的罐壓設(shè)置在0.03?0.05 MPa之間。
[0017]所述產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵液中，經(jīng)過發(fā)酵罐40?42小時(shí)發(fā)酵完畢后發(fā)酵液的含菌數(shù)將再8.0X 17?3.0X 10 8 cfu/mL之間；其中發(fā)酵罐培養(yǎng)基為:按體積比，葡萄糖4.0%，硫酸銨2.0%，酵母粉0.25%，磷酸二氫鉀0.1%，氯化鈉0.01%,硫酸鎂0.05%,其余為水，pH
6.0 ?6.5 ;
實(shí)施例1
1.植物乳桿菌發(fā)酵物的制備
斜面菌種活化:取冰箱保存植物乳酸菌斜面菌種，無菌操作接種于新鮮試管MRS培養(yǎng)基中，經(jīng)斜面培養(yǎng)，37°C恒溫培養(yǎng)過夜，制成新鮮試管斜面菌種。所述MRS培養(yǎng)基:按體積比，蛋白胨，1% ;牛肉膏，1% ;酵母膏，0.5% ;檸檬酸氫二銨，0.2% ;葡萄糖，2% ;吐溫80，
0.1% ;乙酸鈉，0.5% ;磷酸氫二鉀，0.2% ;硫酸鎂，0.058% ;硫酸錳，0.025% ;瓊脂，1.5%?
2.0% ;其余為水；pH 6.2?6.6。
[0018]種子瓶培養(yǎng):取活化的新鮮試管斜面菌種一環(huán)，接種于種子瓶中的種子液體培養(yǎng)基中，裝量為250 mL/500 mL，37°C恒溫培養(yǎng)28 h后，終止培養(yǎng)，制成接種液；所述的種子瓶中的液態(tài)培養(yǎng)基是不加瓊脂的MRS培養(yǎng)基。
[0019]發(fā)酵罐培養(yǎng):將上述接種液接種到發(fā)酵罐中培養(yǎng)基，發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的70%，接種量占培養(yǎng)基體積的1%，發(fā)酵溫度37°C，罐壓保持在0.03-0.05MPa。發(fā)酵終點(diǎn)為發(fā)酵液的活菌數(shù)在5.0X108cfu/ml之間。放罐樣用平板計(jì)數(shù)法測(cè)定總菌數(shù)。發(fā)酵罐培養(yǎng)基:按體積比，蛋白胨1.0%，葡萄糖1.0%，酵母粉0.3?0.5%，硫酸錳0.025%,乙酸鈉0.3?
0.5%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.05%，其余為水，pH 6.2?6.6。
[0020]2.產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵物的制備斜面菌種活化采用PDA培養(yǎng)基；
取活化的新鮮斜面菌種一環(huán)，接種于種子瓶中的液體培養(yǎng)基中，裝量為100 mL/500mL，轉(zhuǎn)速為150 rpm，30°C恒溫培養(yǎng)24 h后，終止培養(yǎng)，制成培養(yǎng)基；所述種子瓶中的液態(tài)培養(yǎng)基為:按體積比，葡萄糖2%，蛋白胨2%，酵母浸膏1%，其余為水，pH 6.0?6.5。
[0021]發(fā)酵罐培養(yǎng):將上述接種液接種到發(fā)酵罐中培養(yǎng)基，發(fā)酵罐中培養(yǎng)基裝量為總體積的60%，接種量占培養(yǎng)基體積的0.3%，發(fā)酵溫度30 0C,通空氣180 rpm攪拌培養(yǎng)，通氣體積與