一種游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物的應(yīng)用，屬于生物技術(shù)和醫(yī)藥 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 非酒精性脂肪肝（NAFLD)已成為我國(guó)發(fā)病率最高的肝病之一。2005年，上海的調(diào) 查顯示NAFLD發(fā)病率已達(dá)到15%。2012年有報(bào)道顯示，在香港NAFLD的發(fā)病率高達(dá)27. 3%， 其中3. 7%顯示有進(jìn)展期肝纖維化，其肝硬化程度和體重指數(shù)及轉(zhuǎn)氨酶無(wú)關(guān)。隨著高脂肪飲 食人群增多，脂肪肝發(fā)病率還在逐年升高。
[0003] NAFLD是一種多階段的慢性疾病，伴有多種并發(fā)癥： (1) 單純性脂肪肝通常是一種可逆的代謝綜合征，是肝受到的"第一次打擊"，此后較易 受到藥物、毒物、酒精、缺血的"第二次打擊"，導(dǎo)致其他類(lèi)型肝??；單純性脂肪肝通常因肥 胖發(fā)生，但其分子機(jī)制不明，所以，脂肪肝和脂肪代謝紊亂的關(guān)系仍需進(jìn)一步研究； (2) 研究顯示，有20%以上的單純性脂肪肝發(fā)展為非酒精脂肪性肝炎，已明確為隱源性 肝硬化和肝癌的重要前期病變，其發(fā)展的分子機(jī)制可能包括線(xiàn)粒體功能異常和炎癥反應(yīng)等 等； (3) 脂肪肝患者高脂血癥、糖尿病和高血壓發(fā)生率增加，最終發(fā)生冠心病、腦中風(fēng)的概 率也會(huì)顯著增加，其健康生存時(shí)間和總生存時(shí)間受到脂肪肝的影響。
[0004] 目前脂肪肝的治療主要是改善生活方式，執(zhí)行困難，而歐洲和美國(guó)FDA沒(méi)有批準(zhǔn) 治療單純性脂肪肝的藥物，所以找到治療可逆的單純性脂肪肝的靶點(diǎn)，防止后續(xù)嚴(yán)重疾病 的發(fā)生已經(jīng)成為目前醫(yī)學(xué)二級(jí)預(yù)防的重要任務(wù)。臨床工作中，部分脂肪肝病人由于節(jié)食減 月巴，一段時(shí)間內(nèi)熱量攝入不足，也導(dǎo)致脂肪肝加重。這就提示我們，脂肪肝發(fā)病的重要原因 是：肝攝入血液中主要來(lái)自脂肪組織的長(zhǎng)鏈脂肪酸（Long Chain Fatty Acid, LCFA)合成 脂肪，而機(jī)體不能加以利用。研究表明，血清LCFA升高和肥胖、胰島素抵抗相關(guān)，增加肝糖 異生和甘油三酯生成。LCFA也是細(xì)胞核受體PPAR alfa、beta和delta的配體，影響炎癥 過(guò)程。臨床上，脂肪肝患者肝中60%甘油三酯來(lái)源于血液中LCFA，26%是肝原位合成，15%直 接來(lái)自食物。食物中的脂肪成分能快速影響肝中脂肪含量，高脂肪飲食也能引起人和鼠的 脂肪肝。由此可見(jiàn)，血液中LCFA被大量轉(zhuǎn)運(yùn)入肝是脂肪肝發(fā)生的一個(gè)重要病理過(guò)程。
[0005] 腸道、心臟、脂肪、腎和肝等組織都有長(zhǎng)鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。目前研究較多的脂肪 酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白包括：長(zhǎng)鏈脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP)、FAT/CD36、ACSL和游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 (Free Fatty Acid Transporter，F(xiàn)ATP)。人或小鼠FATP家族都由6個(gè)蛋白組成，F(xiàn)ATP家族 的每個(gè)蛋白都包括AMP結(jié)合域，蛋白之間35%到50%氨基酸是同源序列。在肝中表達(dá)的是 FATP2和FATP5,其氨基酸同源序列超過(guò)70%。高表達(dá)肝FATPs增強(qiáng)了 LCFA的吸收。FATP2在 肝和腎臟都有表達(dá)，具有長(zhǎng)鏈酯酰CoA合成活性，F(xiàn)ATP2敲除小鼠減少了肝和腎臟對(duì)LCFA的 吸收和beta氧化，而且FATP2敲除小鼠發(fā)生一種神經(jīng)退化性?xún)?nèi)分泌疾?。ˋLD)，但是FATP2 敲除不是此疾病的直接原因。FATP5和FATP2-樣也是一個(gè)穿膜蛋白，F(xiàn)ATP5只表達(dá)在肝， 而且在體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)都顯示了 LCFA的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，所以FATP5是一個(gè)合適的基因敲除靶 點(diǎn)。FATP5敲除小鼠減少了肝攝入LCFA，自發(fā)減少了進(jìn)食高脂肪食物，改善了高脂肪食物誘 導(dǎo)的脂肪肝，增強(qiáng)了糖的合成代謝，證實(shí)了 FATP5是小鼠肝胰島素抵抗和高脂肪食物誘導(dǎo) 的脂肪肝形成的關(guān)鍵因素之一。FATP5敲除改變了膽汁中膽酸的成分，抑制了二級(jí)膽酸和 氨基酸的結(jié)合，顯著減少了膽結(jié)石的形成。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)構(gòu)建和純化攜帶FATP5 shRNA的腺 相關(guān)病毒（AAV8)，發(fā)現(xiàn)用此腺相關(guān)病毒敲低肝內(nèi)FATP5表達(dá)，可以預(yù)防和治療小鼠高脂肪 食物誘導(dǎo)的脂肪肝。同時(shí)，F(xiàn)ATP5敲除老年雄性小鼠脂肪肝改善，血內(nèi)睪酮增高，而且常規(guī) 飼養(yǎng)的FATP5敲除雄性小鼠壽命和同條件的野生型小鼠沒(méi)有顯著差別，F(xiàn)ATP5敲除未見(jiàn)慢 性的副作用。所以，F(xiàn)ATP5可能是治療非酒精脂肪肝的理想靶點(diǎn)。
[0006] 最近已見(jiàn)報(bào)道的抑制FATP5的小分子化合物包括鵝去氧膽酸（⑶CA)、熊去氧膽酸 (UDCA)、去氧膽酸（DCA)，鮮有關(guān)于6-beta-乙基-鵝去氧膽酸及其衍生物或其衍生物的無(wú) 毒鹽類(lèi)在抑制游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5方面的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是提供一種游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物在制備抑制游離脂 肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5的藥物或治療非酒精性脂肪肝病的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明所述的游離 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物為6-beta-乙基-鵝去氧膽酸或6-beta-乙基-鵝去氧膽酸 的衍生物或其衍生物形成的藥學(xué)上可接受的無(wú)毒鹽類(lèi)，所述6-beta-乙基-鵝去氧膽酸結(jié) 構(gòu)式如式IA所示，其衍生物具有如式IB所示化學(xué)結(jié)構(gòu)：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物的應(yīng)用，其特征在于：用于制備抑制游 離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5的藥物或治療非酒精性脂肪肝病的藥物，所述小分子抑制物 為6-beta-乙基-鵝去氧膽酸、其衍生物或其衍生物形成的藥學(xué)上可接受的無(wú)毒鹽， 6-beta-乙基-鵝去氧膽酸結(jié)構(gòu)式如式IA所示，其衍生物具有如式IB所示化學(xué)結(jié)構(gòu) ：
其中，&為直鏈或支鏈的C1-C5烷基，1?2為H、F、Cl、Br、I、CH3、-CH 2-CH3之一或者可 使式IB所示的衍生物形成穩(wěn)定可溶性鹽的其他化學(xué)基團(tuán)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述無(wú)毒鹽包括：乙酸酯、己二酸酯、天門(mén) 冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、檸檬酸鹽、 環(huán)己基氨基磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟 磷酸鹽，鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽、磷酸氫鹽、溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、 D-和L-乳酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳 清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽，雙羥萘酸鹽、磷酸鹽、磷酸二氫鹽、焦谷氨酸鹽、蔗糖、硬脂酸鹽、 琥珀酸鹽、單寧酸、D-和L-酒石酸鹽、1-羥基-2-萘甲苯磺酸酯或昔萘酸鹽中的一種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述無(wú)毒鹽為具有所述式IB結(jié)構(gòu)的衍生 物與以下離子或物質(zhì)之一反應(yīng)形成的藥學(xué)上可接受的鹽：A1 3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Na+、K+、精氨 酸、甘氨酸、賴(lài)氨酸、N，N' -二芐基亞乙基二胺，氯普魯卡因，膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲 胺、普魯卡因。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物為片劑、注射劑、口服液、膠囊 齊U、貼劑、噴劑或醫(yī)學(xué)上接受的其他藥物劑型。
5. -種治療非酒精性脂肪肝的藥物，其特征在于：由權(quán)利要求1所述的游離脂肪酸轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白小分子抑制物6-beta-乙基-鵝去氧膽酸和藥學(xué)上接受的輔料組成，其制備方法包 括如下具體步驟： (1) 制劑處方：6-beta-乙基-鵝去氧膽酸IOOg,微晶纖維素240g，可溶性淀粉150g， 滑石粉l〇g ; (2) 按制劑處方稱(chēng)取各原料，將6-beta-乙基-鵝去氧膽酸與可溶性淀粉混勻，再加入 微晶纖維素，用95%乙醇制軟材，過(guò)篩制粒，在低溫50°C干燥，然后整粒，加入滑石粉，混勻， 壓片，每片0. 5g，質(zhì)檢、包裝，即得每片含6-beta-乙基-鵝去氧膽酸IOOmg的片劑。
6. -種抑制游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5的藥物，其特征在于：由權(quán)利要求1所述的游 離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物6-beta-乙基-鵝去氧膽酸和藥學(xué)上接受的輔料組成，其 制備方法包括如下具體步驟： (1)制劑處方：芯材：6-beta-乙基-鵝去氧膽酸IOOg,大豆油300g，囊材：明膠-甘 油-水100g，明膠、甘油、水的重量比為I : 0.4 : 1，制成1000粒軟膠囊； (2)取6-beta-乙基-鵝去氧膽酸加入大豆油中，攪勻使溶解，于軟膠囊機(jī)上壓囊，干 燥，包裝，即得每丸含IOOmg的6-beta-乙基-鵝去氧膽酸的軟膠囊劑。
7. -種抑制游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5的藥物，其特征在于：由權(quán)利要求1所述的游 離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物6-beta-乙基-鵝去氧膽酸和藥學(xué)上接受的輔料組成，其 制備方法包括如下具體步驟： (1)制劑處方：6-beta-乙基-鵝去氧膽酸10g，大豆油250g，大豆卵磷脂10g，泊洛沙 姆60g，苯甲酸鈉4g，阿斯巴甜3g，蒸饋水余量至1000ml。
8. (2)制備方法：將6-beta-乙基-鵝去氧膽酸與大豆卵磷脂加入大豆油中，充分溶 解后得油相，將泊洛沙姆、苯甲酸鈉與阿斯巴甜溶于500ml水中得水相，在高剪切分散乳勻 機(jī)攪拌下將水相慢慢加至油相中，6000rpm攪拌15min得初乳，加水至1000ml，經(jīng)高壓均質(zhì) 機(jī)循環(huán)5次，得乳白色的終乳，充氮灌裝，即得每mL含有IOmg 6-beta-乙基-鵝去氧膽酸 的口服乳劑。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物的應(yīng)用，該游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物為6-beta-乙基-鵝去氧膽酸或6-beta-乙基-鵝去氧膽酸的衍生物或其衍生物形成的藥學(xué)上可接受的無(wú)毒鹽類(lèi)，該游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白小分子抑制物對(duì)游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5（FATP5）的抑制有特異性，可減少肝臟游離脂肪酸吸收，降低肝臟脂肪含量，可用于制備于抑制游離脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FATP5的藥物或治療非酒精性脂肪肝病的藥物，相對(duì)于現(xiàn)有抑制FATP5小分子抑制物具有更好的臨床應(yīng)用效果。
【IPC分類(lèi)】A61P1-16, A61P3-04, A61P5-50, A61K31-575, A61P9-00, A61P9-10, A61P3-10, A61P3-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104523703
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410813328
【發(fā)明人】聶飚, 柳雪花, 鄧飛鴻, 陳金敏, 左俊華
【申請(qǐng)人】聶飚
【公開(kāi)日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年12月24日