專(zhuān)利名稱：用作甾族化合物c17-20裂解酶抑制劑的δ的制作方法
據(jù)估計(jì)，75％的前列腺癌對(duì)雄激素的水平更具體地說(shuō)是睪酮的水平敏感(Van WauWe，J.P.和Janssen，P.A.J.，J.Med.Chem.，(1989)，32，2233)。人們很好地證明了血清睪酮水平的降低可用于治療這類(lèi)前列腺癌。在臨床實(shí)踐中，這種治療已經(jīng)通過(guò)例如睪丸切除術(shù)或通過(guò)二乙基己烯雌酚療法得以完成。然而，第一種途徑往往是心理學(xué)上不能接受的，而第二種途徑伴隨有大量的副作用。
細(xì)胞色素P-45017α單加氧酶系統(tǒng)催化C21甾族化合物的17α-羥基化作用并且還催化C17-20鍵的氧化裂解。(Blohm，T.R.等人，Biochem.BiophYs.Res.Commun.，(1989)，162.1571)。更具體地說(shuō)，細(xì)胞色素P-45017α的甾族化合物C17-20裂解酶活性催化C21甾族化合物孕烯醇酮和孕酮轉(zhuǎn)化成C19甾族化合物脫氫表雄酮和雄烯二酮，它們是雄激素、5α-二氫睪酮和睪酮的前體。然后雄烯二酮和睪酮又是雌激素、雌酮和雌二醇的前體。因此，甾族化合物C17-20裂解酶的抑制作用可以降低雄激素以及雌激素的形成。根據(jù)這個(gè)作用結(jié)果，人們正在擴(kuò)大尋找對(duì)甾族化合物C17-20裂解酶有效的并具有選擇性的抑制劑。(Laughton.C.A.和Neidle，S.，Biochem.Bioph Ys.Res.Commun.，(1990)，171，1160)。C17-20裂解酶抑制劑能用于治療各種雄激素依賴性障礙。更具體地說(shuō)，此類(lèi)化合物將用于治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫須以及女子男性化和多毛癥(婦女)。此外，C17-20裂解酶抑制劑還能用于治療雌激素依賴性障礙，例如雌激素依賴性乳腺癌。
因此，鑒于與二乙基己烯雌酚療法或睪丸切除術(shù)相關(guān)的缺陷，對(duì)甾族化合物C17-20裂解酶的有效抑制劑的探索正在進(jìn)行。本發(fā)明涉及C17雜環(huán)甾族化合物并且還涉及一種使用此類(lèi)化合物作為有效的甾族化合物C17-20裂解酶抑制劑的方法。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種雄激素依賴性障礙的治療方法。
本發(fā)明涉及具有以下通式I的化合物或其一種藥物學(xué)可接受的鹽和/或溶劑化物 式I其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；并且Y是S、O、或NR；其中R、R1和R2各自獨(dú)立地是氫或C1-C4烷基。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種對(duì)需要治療的患者抑制其甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式II化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽 式II其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基。
此外，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種對(duì)需要治療的患者抑制其甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式(I)的化合物。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式(I)或者式(II)的化合物。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“C1-C4烷基”是指一種1至4個(gè)碳原子的飽和直鏈或支鏈的烴基。包括在這個(gè)術(shù)語(yǔ)范圍內(nèi)的有甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等等。術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵”指的是氯、溴或碘原子。
術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”指一種化合物，它由被相同鍵結(jié)合的相同原子組成但具有不可互換的不同的三維結(jié)構(gòu)。這種三維結(jié)構(gòu)稱為構(gòu)型。
這些式(I)和(II)的化合物可以不同的立體異構(gòu)構(gòu)型存在，這一點(diǎn)人們都清楚。特別應(yīng)當(dāng)清楚的是這些立體異構(gòu)體包含在本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍內(nèi)。
術(shù)語(yǔ)“藥物學(xué)可接受的鹽”指達(dá)到所需要效果的給藥劑量基本無(wú)毒且并不能單獨(dú)擁有顯著藥理學(xué)活性的那些鹽類(lèi)。包含在此術(shù)語(yǔ)范圍內(nèi)的鹽類(lèi)是氫溴化物、氫氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、乳酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、α-氧代戊二酸鹽、谷氨酸鹽、天冬氨酸鹽、馬來(lái)酸鹽、羥馬來(lái)酸鹽、丙酮酸鹽、苯乙酸鹽、苯甲酸鹽、對(duì)氨基苯甲酸鹽、鄰氨基苯甲酸鹽、對(duì)羥基苯甲酸鹽、水楊酸鹽、羥乙烷磺酸鹽、亞乙基二磺酸鹽、鹵苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、萘磺酸鹽、磺胺酸鹽等等。這些鹽可以水合的、溶劑化或大體上無(wú)水的任何一種形式存在。優(yōu)選溴氫化物為式I化合物的藥物學(xué)可接受的鹽。
術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”指求(I)化合物或式(I)的藥物學(xué)可接受的鹽，其中適宜溶劑的分子摻入到晶體點(diǎn)陣中。適宜的溶劑在用溶劑化物達(dá)到所需要效果的給藥劑量基本無(wú)毒。適宜溶劑的實(shí)例為乙醇等。
結(jié)構(gòu)A描述了通常甾族化合物的骨架結(jié)構(gòu)和相應(yīng)的偏號(hào)體系； 由式Ia和Ib定義的式I化合物可以通過(guò)如方案I和II所描述的方法制備，除非另外指出，所有的取代基都如前定義。試劑和起始原料對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)可以很容易地得到。
方案1 式Ib 式Ia在方案I步驟A中，由結(jié)構(gòu)(1)描述的甾族化合物經(jīng)過(guò)溴化反應(yīng)得到由結(jié)構(gòu)(2)描述的溴化了的甾族化合物。
例如，一種適當(dāng)取代的甾族化合物(1)，如孕烯醇酮，溶解于如甲醇這樣的適宜有機(jī)溶劑中并且用過(guò)量的溴化銅(II)處理。混合物加熱回流約2至24小時(shí)。冷卻后，過(guò)濾反應(yīng)物并且用本領(lǐng)域公知的技術(shù)如提取方法及再結(jié)晶作用分離并純化產(chǎn)物。例如，濾液在真空下還原，殘余物溶于適宜有機(jī)溶劑如二氯甲烷中并且用水、半飽和含水碳酸氫鈉及鹽水漂洗有機(jī)物。然后有機(jī)物經(jīng)過(guò)如無(wú)水硫酸鈉這樣的適宜干燥劑干燥、過(guò)濾并真空濃縮。然后殘余物從適宜有機(jī)溶劑如丙酮中重結(jié)晶得到溴化了的甾族化合物(2)在方案I中，步驟B的溴化甾族化合物(2)經(jīng)過(guò)用適宜的脲、硫脲或胍處理的環(huán)化/消去反應(yīng)得到C17雜環(huán)甾族化合物，這個(gè)化合物由式Ia描述，其中式I中的X是OH。適宜的脲類(lèi)、硫脲類(lèi)或胍類(lèi)是脲、硫脲、胍、1-甲基-2-硫脲、芐脲，1-乙基胍等。
例如，溴化的甾族化合物(2)懸浮于一種適宜有機(jī)溶劑如乙醇中。用過(guò)量的適宜脲、硫脲或胍處理懸浮液并且加熱回流大約1.5小時(shí)。大約一半的溶劑在回流過(guò)程中被蒸出。反應(yīng)液冷卻至室溫、過(guò)濾并且用適宜有機(jī)溶劑如乙醇洗滌固體。所得的固體在高真空下干燥得到式Ia的C17雜環(huán)甾族化合物。
方案I中，步驟C的式Ia的C17雜環(huán)甾族化合物被氧化成由式Ib描述的C17雜環(huán)甾族化合物的酮衍生物。
例如，在惰性環(huán)境下如在氮?dú)猸h(huán)境中，將草酰氯溶于如二氯甲烷這樣的適宜有機(jī)溶劑中。溶液冷卻至大約-55℃并且邊攪拌溶液邊逐滴加入大約1.2當(dāng)量的二甲基亞砜。攪拌約3分鐘后，將溶于適宜有機(jī)混合溶劑如二氯甲烷/二甲基亞砜(2∶1)的約0.33當(dāng)量的式Ia的C17雜環(huán)甾族化合物，逐滴慢慢加入反應(yīng)液中。加入完畢后反應(yīng)液在-55℃下攪拌約30分鐘。加入一種過(guò)量的適宜的堿如三乙胺，并且大約過(guò)5分鐘后將反應(yīng)物加熱至室溫。然后利用本領(lǐng)域公知的技術(shù)分離并純化反應(yīng)產(chǎn)物，例如用提取方法和急驟層析法。例如，反應(yīng)物用二氯甲烷稀釋、用稀釋的碳酸氫鈉、鹽水漂洗，在無(wú)水硫酸鎂上干燥、過(guò)濾并且真空濃縮。然后由使用有機(jī)溶劑的適宜混合洗脫液的急驟層析法純化殘余物，例如在硅膠固定相上使用乙酸乙酯/己烷。純化的產(chǎn)物接下來(lái)可以從適宜混合溶劑如乙酸乙酯/己烷中再結(jié)晶得到式Ib描述的C17雜環(huán)甾族化合物。
或者用另一種方法，在方案II中式Ia和Ib的化合物可以由結(jié)構(gòu)(3)描述的起始原料制備。
方案II
例如在方案II中，步驟A，一種適當(dāng)取代的甾族化合物(3)，如16-脫氫孕烯醇酮溶于適宜有機(jī)溶劑如四氫呋喃中，并且用過(guò)量的5，5-二溴巴比土酸處理。加入濃縮的含水溴化氫并加熱反應(yīng)物回流大約1小時(shí)。冷卻后，真空濃縮反應(yīng)物。用如前面方案I步驟A中描述的提取技術(shù)和再結(jié)晶作用分離并純化產(chǎn)物，得到由結(jié)構(gòu)(4)所描述的溴化了的甾族化合物。
方案II中的步驟B，用適宜的脲或硫脲處理溴化的甾族化合物(4)對(duì)其進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，得到由式Ia描述的C17雜環(huán)甾族化合物，其中式I中的X是OH。
例如，將溴化了的甾族化合物(4)懸浮于適宜有機(jī)溶劑如乙醇中。加入過(guò)量的適宜脲或硫脲并且加熱反應(yīng)物回流大約1小時(shí)。在回流過(guò)程中大約一半的溶劑被蒸出。反應(yīng)物冷卻至室溫并過(guò)濾反應(yīng)物。用乙醇漂洗固體，高真空干燥并從適宜溶劑如乙醇中再結(jié)晶，得到由式Ia所描述的C17雜環(huán)甾族化合物。
由式Ia描述的C17雜環(huán)甾族化合物接下來(lái)被氧化成如前面方案I步驟C中的式Ib描述的C17雜環(huán)甾族化合物。
式II的化合物的制備如方案III所描述。除非有另外的說(shuō)明，所有的取代基均如前定義。試劑和起始原料對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)能夠很容易地獲得。
方案III
方案III的步驟A中，由結(jié)構(gòu)(5)描述的甾族化合物上的3-羥基取代基被一種適宜的保護(hù)基保護(hù)起來(lái)，得到由結(jié)構(gòu)(6)描述的被保護(hù)的甾族化合物。用于羥基取代基的適宜保護(hù)基，這類(lèi)基團(tuán)的制備方法和裂解方法都在Y.W.Greene的“Protective Groups inOrgnic SYnthesis”，John WileY and Sons，Inc.，1981，Chapber2中有所描述。
例如，在惰性氣氛如氮?dú)猸h(huán)境下，將甾族化合物(5)如脫氫異雄酮溶于適宜有機(jī)溶劑中，如二甲基甲酰胺中。1當(dāng)量適宜的保護(hù)基試劑如叔丁基二甲基甲硅烷氯化物加入到溶液中。加入稍微過(guò)量的適宜有機(jī)堿如三乙胺連同一定催化量的4-二甲基氨基吡啶。反應(yīng)物在室溫下攪拌1到2天。通過(guò)如提取方法和急驟層析法這些本領(lǐng)域公知的技術(shù)對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離和純化。例如用水稀釋反應(yīng)物并且通過(guò)過(guò)濾收集固體。接著將固體溶于適宜有機(jī)溶劑如乙酸乙酯中，用稀鹽酸、半飽和碳酸氫鈉、鹽水漂洗，通過(guò)無(wú)水硫酸鎂進(jìn)行干燥，過(guò)濾并真空濃縮。然后用急驟層析法純化殘余物得到被保護(hù)的甾族化合物(6)，其中急驟層析法是在適宜的固定相如硅膠上使用如乙酸乙酯/己烷這樣的適宜洗脫液。
方案III步驟B，被保護(hù)的甾族化合物(6)經(jīng)過(guò)由W描述的雜環(huán)的加成得到由結(jié)構(gòu)(7)描述的C17甾族化合物。
例如，在惰性氣氛如氮?dú)猸h(huán)境下，將過(guò)量的適當(dāng)取代的雜環(huán)溶于適宜的無(wú)水有機(jī)溶劑中，如四氫呋喃中。適當(dāng)取代的雜環(huán)實(shí)例有噻吩、呋喃、3-溴噻吩、3-溴呋喃及類(lèi)似物。在-78℃到室溫下向反應(yīng)物中一滴滴加入適宜的烷基鋰如正丁基鋰，產(chǎn)生相應(yīng)的鋰化雜環(huán)。然后攪拌反應(yīng)物約15分鐘并且在反應(yīng)物中加入上面步驟A中制備的被保護(hù)的甾族化合物(6)?？蛇x擇地，可以在-78℃至室溫下向被保護(hù)的甾族化合物(6)的溶液中加入鋰化雜環(huán)溶液。反應(yīng)物攪拌約4小時(shí)然后再用本領(lǐng)域公知的技術(shù)，如提取方法和急驟層析法分離并純化產(chǎn)物。例如，用適宜有機(jī)溶劑如乙醚稀釋反應(yīng)物，用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，通過(guò)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。用在適宜固定相如硅膠上使用適宜洗脫液如乙酸乙酯/己烷的急驟層析法對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到C17雜環(huán)甾族化合物(7)。
方案III步驟C中，C17雜環(huán)甾族化合物(7)經(jīng)過(guò)脫水/脫保護(hù)反應(yīng)得到由式IIa描述的脫水/脫保護(hù)C17甾族化合物。
例如，在氮?dú)猸h(huán)境下將C17雜環(huán)甾族化合物(7)溶于有過(guò)量4N鹽酸的1，4-二噁烷溶液中。反應(yīng)物攪拌30分鐘到4小時(shí)并且用象提取方法和急驟層析法或再結(jié)晶作用這些本領(lǐng)域公知的技術(shù)對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行發(fā)離和純化。例如，用如二氯甲烷這樣的適宜有機(jī)溶劑稀釋反應(yīng)物，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，通過(guò)無(wú)水硫醇鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)從適宜溶劑如含水甲醇或含水丙酮中的再結(jié)晶作用純化殘余物，得到式Ha的脫水/脫保護(hù)C17雜環(huán)甾族化合物。可選擇地，可以用在適宜固定相如硅膠上使用適宜洗脫液如乙酸乙酯/己烷的急驟層析法純化殘余物，得到式IIa的脫水/脫保護(hù)C17雜環(huán)甾族化合物。
方案III步驟D中，式IIa的脫水/脫保護(hù)C17雜環(huán)甾族化合物上的3-羥基取代基，以和前面在方案I步驟C中描述的反應(yīng)過(guò)程相類(lèi)似的方式被氧化，生成由式IIb描述的C17雜環(huán)甾族化合物的3-酮衍生物。
由式(I)和式(II)的立體異構(gòu)體包括的構(gòu)型對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)很容易制備，這一點(diǎn)是清楚的。
以下的實(shí)施例表示如方案I、II和III描述的典型的合成實(shí)例。應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是這些實(shí)施例僅僅是舉證性的而并不以任何形式限制本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例所用到的下列術(shù)語(yǔ)表示的意思是“eq”指當(dāng)量，“g”指克，“mg”指毫克，“mmol”指毫摩爾，“mL”指毫升，“℃”指攝氏度，“TLC”指薄層色譜法，“Rf”指保留系數(shù)且“σ”指低場(chǎng)于四甲基硅烷的百萬(wàn)份數(shù)。
實(shí)施例1a (3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH的制備方案I，步驟A孕烯醇酮(1.58g，5.00mmol)溶解于甲醇(180mL)并且用溴化銅(II)(6.7g，30.0mmol)處理。加熱反應(yīng)物回流24小時(shí)。冷卻后，過(guò)濾反應(yīng)物并在真空下濃縮濾液。溶解殘余物于二氯甲烷(75mL)中并用水(125mL)洗滌。用二氯甲烷(25(mL)提取含水洗滌物，合并有機(jī)相并用半飽和碳酸氫鈉(2×100mL)漂洗接著再用鹽水(50mL)漂洗。經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相、過(guò)濾并真空濃縮得到黃色油狀泡沫(2.3g)。通過(guò)從丙酮中再結(jié)晶作用泡沫得以純化，得到白色結(jié)晶狀固體21-溴-2β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(428mg)。(參見(jiàn)NumazaWa，M.和Nagaoka，M.，J.Org.Chem.(1985)，50，81關(guān)于制備所述化合物的文獻(xiàn))。方案I，步驟B將21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(638mg，1.50mmol)懸浮于乙醇(25mL)中并加入硫脲(126mg，1.65mmol)。反應(yīng)物加熱回流1.5小時(shí)讓半數(shù)的溶劑蒸出。將反應(yīng)物冷卻至室溫并且過(guò)濾。用乙醇(2×1mL)洗滌沉淀物。在高真空下干燥所得的白色固體，得到標(biāo)題化合物(369mg)，熔點(diǎn)255-260℃(分解)。對(duì)C22H30N2OS·HBr·CH3CH2OH計(jì)算分析C，57.94；H，7.49；N，5.63；S，6.44.得到C，57.54；H，7.31；N，5.66；S，6.84.
C，57.61；H，7.35；N，5.65.
實(shí)施例1b(3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH的制備方案II，步驟A16-脫氫孕烯醇酮(5.00g，15.90mmol)和5，5-二溴巴比土酸(4.55g，15.90mmol)溶于四氫呋喃(60mL)中。向攪拌的溶液中加入濃縮的含水溴化氫(100μL 48％溶液)并且加熱反應(yīng)物回流1小時(shí)。稍微冷卻然后真空濃縮產(chǎn)生棕色油狀泡沫。溶解殘余物于二氯甲烷(350mL)中，用50％飽和碳酸氫鈉(2×200mL)、鹽水(125mL)漂洗，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥、過(guò)濾并真空濃縮得到橙棕色固體21-溴-3β-17-羥基孕-5，16-二烯-20-酮(6.53g)，其中稍微帶有起始物質(zhì)。方案II，步驟B將21-溴-3β-羥基孕-5，16-二烯-20-酮(16mmol)懸浮于乙醇(260mL)中并且加入硫脲(1.33g，17.5mmol)。加熱反應(yīng)物回流1小時(shí)且蒸發(fā)掉大約半數(shù)的溶劑。使反應(yīng)物冷卻至室溫。過(guò)濾收集固體并在高真空下干燥，得到為亮黃色固體的標(biāo)題化合物(3.62g)。濾液濃縮至大約20mL作為第二批物質(zhì)，高真空下干燥并和第一批物質(zhì)合并總共得到4.25g。將其從乙醇中再結(jié)晶得到呈白色晶體狀固體的標(biāo)題化合物(2.77g)，，熔點(diǎn)258-260℃(分解)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.85(寬 單峰，2H)，6.81(s，1H)，6.28(dd，1H，J＝1.9，3.3Hz)，5.29(寬雙峰，1H，J＝4.7hz)，3.43(q，2H，J＝7.0Hz)，3.32-3.18(m，1H)，1.05(t，3H，J＝7.0Hz)，0.99(s，3H)，0.94(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ169.4，142.5，141.6，135.6，131.0，120.1，102.0，69.9，56.4，55.9，49.7，46.1，42.2，36.8，36.2，34.4，31.3，31.2，30.8，29.7，20.4，19.0，18.5，15.8；MS(CI，CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)371(MH+，76)，370(33)，369(34)，353(100)，83(26)，81(27).
實(shí)施例2 17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案I，步驟C在氮?dú)猸h(huán)境下將草酰氯(在二氯甲烷中的2.0M溶液，8.86mL，17.73mmol)溶于二氯甲烷(65mL)并且將溶液冷卻至-55℃。一滴滴加入二甲基亞砜(1.47mL，20.68mmol)且攪拌3分鐘。將實(shí)施例1a或1b制備的、溶于二氯甲烷(20mL)和二甲基亞砜(10mL)中的(3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH(2.94g，5.91mmol)4分鐘內(nèi)緩慢加入反應(yīng)液中，并且攪拌30分鐘。然后加入三乙胺(5.77mL，41.36mmol)并在5分鐘的攪拌之后將反應(yīng)物升溫至室溫。用二氯甲烷(180mL)稀釋并用稀碳酸氫鈉(4×225mL)和3∶1的鹽水/飽和碳酸氫鈉(200mL)洗滌。經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)相、過(guò)濾并真空濃縮得到棕色泡沫。用急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，硅膠)純化接著從乙酸乙酯/己烷中再結(jié)晶，在56℃下高真空干燥2小時(shí)后得到呈淡橙色固體的標(biāo)題化合物(135mg)，(Rf＝0.38，50％乙酸乙酯/己烷，SiO2)；1H NMR(DMSO-d6)δ6.85(寬單峰，2H)，6.45(s，1H)，6.06(寬三峰，1H，J＝1.9，3.0Hz)，5.35-5.31(m，1H)，3.43(dq，1H，J＝2.6，15.9Hz)，2.67(dd，1H，J＝1.8，16.0Hz)，1.21(s，3H)，0.97(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)369(MH+，100)，368(23)；HRMS C22H29N2OS(MH+)計(jì)算值369.2001，觀測(cè)值369.1989.
實(shí)施例3 (3β)-17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr的制備方案I，步驟B將實(shí)施例1a步驟A中制備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(250mg，0.59mmol)懸浮于無(wú)水乙醇(15mL)，加入1-甲基-2-硫脲(64mg，0.71mmol)并回流75分鐘使溶劑濃縮至大約7mL。追加回流1小時(shí)。使反應(yīng)物冷卻至室溫，過(guò)濾并且用乙醇(2×1ml)漂洗沉淀物。收集白色固體并高真空干燥得到作為HBr鹽的標(biāo)題化合物(152mg)，熔點(diǎn)256-259℃(分解)；1H NMR(DMSO-d6)δ6.86(寬單峰單峰，1H)，6.38(s，1H)，6.38(dd，1H，J＝1.9，3.1Hz)，5.30(寬雙峰 ，1H，J＝4.9Hz)，3.33-3.20(m，1H)， 3.02(s，3H)，1.00(s，3H)，0.95(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ169.3，142.7，141.6，135.6，131.5，120.1，101.7，69.9，56.5，49.8，46.3，42.2，36.8，36.2，34.4，32.5，31.4，31.2，30.9，29.8，20.5，19.0，15.9；MS(CI/CH4)m/z(rel.相對(duì)強(qiáng)度)385(MH+，80)，367(100)，83(58)，81(60)；HRMSC23H33N2O6(MH+)計(jì)算值385.2314，觀測(cè)值385.2296.
實(shí)施例4 17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案I，步驟C用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例3所制備的(3β)-17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例5 (3β)-17-〔2-氨基-4-噁唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr的制備方案I，步驟B實(shí)施例1a所制備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(1.50mmol)懸浮于乙醇(25mL)中并加入脲(1.65mmol)。反應(yīng)物加熱回流1.5小時(shí)使半數(shù)的溶劑蒸發(fā)掉。使反應(yīng)物冷卻至室溫并過(guò)濾。用乙醇洗滌沉淀物并在高真空下干燥固體得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例6 17-(2-氨基-4-噁唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案I，步驟C用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例5中制備的(3β)-17-(2-氨基-4-噁唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例7 (3β)-17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇HBr的制備方案I，步驟B實(shí)施例1中制備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(1.50mmol)懸浮于乙醇(25mL)中并加入胍(1.65mmol)。反應(yīng)物加熱回流1.5小時(shí)使半數(shù)的溶劑蒸發(fā)掉。將反應(yīng)物冷卻至室溫并過(guò)濾。用乙醇洗滌沉淀物并在高真空下干燥固體，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例8 17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案I，步驟C用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例7中制備的(3β)-17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例9 (3β)-17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的制備方案III，步驟A在氮?dú)猸h(huán)境下將脫氫異雄酮(10.0g，34.67mmol)溶于二甲基甲酰胺(DMF，150mL)。在室溫、攪拌下加入氯化叔丁基二甲基硅烷(5.23g，34.67mmol)、三乙胺(5.32mL，38.14mmol)和一定催化量的4-二甲基氨基吡啶(0.21g，1.73mmol)。2天后將反應(yīng)物傾入正在快速攪拌的水(1.5L)中。過(guò)濾白色固形物并用水(2×50mL)洗滌。用乙酸乙酯(350mL)溶解該固形物并且用0.5N鹽酸(2×150mL)、半飽和碳酸氫鈉(2×150mL)和鹽水(100mL)洗滌。有機(jī)相通過(guò)無(wú)水硫酸鎂干燥、過(guò)濾并真空濃縮。用急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，15∶85，硅膠)純化殘余物，得到白色固體(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(12.60g)，Rf＝0.78(乙酸乙酯/己烷，1∶1，硅膠)，熔點(diǎn)146-148℃。方案III，步驟B在氮?dú)猸h(huán)境下將噻吩(0.66mL，8.25mmol)溶于無(wú)水四氫呋喃(1.5mL)。慢慢加正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，4.69mL，7.5mmol)到正在攪拌的溶液中(放熱反應(yīng))。室溫下攪拌15分鐘并且加入上面步驟A中制備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(604mg，1.50mmol。攪拌反應(yīng)物4小時(shí)然后用乙醚(100mL)稀釋。用0.5N鹽酸(45mL)、飽和碳酸氫鈉(45mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥、過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，10∶90，硅膠)接著用從含水丙酮中再結(jié)晶作用純化殘余物，得到蘭色固態(tài)的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(2-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇，Rf＝0.27(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)，熔點(diǎn)164-168℃。方案III，步驟C在氮?dú)猸h(huán)境下用溶于1，4-二噁烷(4mL)中的4N鹽酸化合如上面方案III步驟B中制備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(2-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.22g，0.45mmol)。室溫下攪拌反應(yīng)物25分鐘。然后將反應(yīng)物傾入二氯甲烷/飽和碳酸氫鈉(50mL∶30mL)中并且分離出各層。有飽和碳酸氫鈉(2×30mL)、鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。殘余物通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，30∶70，硅膠)得以純化，獲得白色固態(tài)的標(biāo)題化合物(0.11g)，Rf＝0.39(乙酸乙酯/己烷，35∶65，硅膠)，熔點(diǎn)190-195℃(分解)；1H NMR(CDCl3)δ7.14(dd，1H，J＝1.0，5.1Hz)，7.03(寬雙峰，1H，J＝3.5Hz)，6.97(dd，1H，J＝3.6，5.1Hz)，5.98(dd，1H，J＝2.0，3.2Hz)，5.41-5.37(m，1H)，3.60-3.47(m，1H)，1.07(s，3H)，1.03(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)355(MH+，75)，337(100).
實(shí)施例10 17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案III，步驟D用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例9中制備的(3β)-17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例11 (3β)-17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的制備方案III，步驟B在氮?dú)猸h(huán)境下將呋喃(0.60mL，8.25mmol)溶于無(wú)水四氫呋喃(15mL)并且冷卻至大約0℃。慢慢往溶液中加入正丁基鋰(1.6M溶于己烷的溶液，4.69mL，7.5mmol)。5分鐘后將溶液升溫至室溫。在室溫下15分鐘之后，邊攪拌邊往反應(yīng)物中加入實(shí)施例9步驟A中制備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(604mg，1.50mmol，溶于6mL四氫呋喃中)。過(guò)2小時(shí)后用乙醚(100mL)稀釋反應(yīng)物并且用0.5N鹽酸(45mL)、飽和碳酸氫鈉(2×45mL)、鹽水(45mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥、過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)純化殘余物然后從含水甲醇中再結(jié)晶，在高真空度下經(jīng)回流乙醇干燥3小時(shí)，得到(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(2-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(302g)，Rf＝0.25(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)，熔點(diǎn)129-133℃。方案III，步驟C在氮?dú)猸h(huán)境下，用溶于1，4-二噁烷(15mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中制得的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(2-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(3mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)物20分鐘。然后將反應(yīng)物傾入二氯甲烷/飽和碳酸氫鈉(200mL∶100mL)并分離出各層。用飽和碳酸氫鈉(100mL)、鹽水(100mL)洗滌有機(jī)層、經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，25∶75，硅膠)純化殘余物，得到呈白色固體的標(biāo)題化合物，Rf＝0.24(乙酸乙酯/己烷3∶7，硅膠)，熔點(diǎn)105-116℃；1H NMR(CDCl3)δ7.35(d，1H，J＝1.8Hz)，6.36(dd，1H，J＝1.8，3.3Hz)，6.27(d，1H，J＝3.3Hz)，6.07(dd，1H，J＝2.1，3.3Hz)，5.41-5.36(m，1H)，3.61-3.48(m，1H)，1.07(s，3H)，0.99(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度) 339(MH+，55)，338(42)，337(36)，321(100)；HRMS C23H31O2(MH+)計(jì)算值339.2324，觀測(cè)值339.2328.
實(shí)施例12 17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案III，步驟D用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例11中制備的(3β)-17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇中制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例13 (3β)-17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的制備方案III，步驟B在氮?dú)猸h(huán)境下將正丁基鋰(溶于己烷的1.6M溶液，7.81mL，12.5mmol)溶于四氫呋喃(20mL)并冷卻至-78℃。向溶液中一滴滴地加入3-溴噻吩(1.17mL，12.5mmol)。反應(yīng)物攪拌30分鐘然后再加入預(yù)先冷卻的(-78℃)、溶于四氫呋喃(20-mL)、實(shí)施例9步驟A中制備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(1.01g，2.50mmol)的溶液，1.5小時(shí)后將反應(yīng)物傾入乙醚/0.5N鹽酸(150mL∶65mL)中并分離出各層。用0.5N鹽酸(50mL)、飽和碳酸氫鈉(20mL)、鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。殘余物通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)純化，獲得呈白色固體的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(3-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.88g)，Rf＝0.25(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)，熔點(diǎn)176-178℃。方案III，步驟C在氮?dú)猸h(huán)境下，用溶于1，4-二噁烷(5mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中制備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(3-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.25g，0.51mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)物40分鐘。然后用二氯甲烷(35mL)稀釋反應(yīng)物。用飽和碳酸氫鈉(50mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)從丙酮中的再結(jié)晶作用純化殘余物，得到呈白色固體的標(biāo)題化合物(0.123g)，Rf＝0.35(乙酸乙酯/己烷，35∶65，硅膠)，熔點(diǎn)215-219℃；1H NMR(CDCl3)δ7.26-7.23(m，1H)，7.19(s，1H)，7.19-7.17(m，1H)，5.93(dd，1H，J＝1.9，3.2Hz)，5.42-5.36(m，1H)，3.61-3.43(m，1H)，1.07(s，3H)，1.03(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)355(MH+，77)，354(35)，353(25)，337(100).
實(shí)施例14 17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案III，步驟D用與實(shí)施例2類(lèi)似的方式，從實(shí)施例13中制得的(3β)-17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇中制備本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例15 (3β)-17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的制備方案III，步驟B在氮?dú)猸h(huán)境下將正丁基鋰(溶于己烷的1.6M溶液，15.63mL，25.00mmol)溶于無(wú)水四氫呋喃(30mL)并冷卻至-78℃。一滴滴加3-溴呋喃(2.25mL，25.00mol)于溶液中。反應(yīng)物攪拌30分鐘并且向反應(yīng)物中加入溶于四氫呋喃的、實(shí)施例19步驟A中制備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(2.01g，5.00mmol)的經(jīng)冷卻的溶液(-78℃)。攪拌1.5小時(shí)，傾入乙醚/0.5N鹽酸(300mL∶125mL)中。分離出各層，用0.5N鹽酸(125mL)、飽和碳酸氫鈉(3×75mL)、鹽水(75mL)洗滌有機(jī)層，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥、過(guò)濾并真空濃縮。殘余物純化是通過(guò)急驟層析(乙酸乙酯/己烷，10∶90，硅膠)，得到呈白色固體的產(chǎn)物2.03g。從含水丙酮中再結(jié)晶0.2g產(chǎn)物，得到呈白色固體的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(3-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.12g，Rf＝0.19(乙酸乙酯/己烷，1∶9，硅膠)，溶點(diǎn)156-158℃。方案III，步驟C在氮?dú)猸h(huán)境下，用溶于1，4-二噁烷(35mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中制備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷〕氧基〕-17-(3-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(2.50g，5.31mmol)。室溫下攪拌化合物40分鐘，然后用二氯甲烷(150mL)稀釋反應(yīng)物。用水(35mL)、飽和碳酸氫鈉(2×50mL)、鹽水(30mL)洗滌有機(jī)層，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮。通過(guò)急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，3∶7，硅膠)純化殘余物，得到1.05g的呈白色固體的產(chǎn)物。從含水丙酮中再結(jié)晶部分產(chǎn)物并且在高真空度下經(jīng)回流乙醇干燥4小時(shí)，得到呈白色晶狀固體的標(biāo)題化合物，Rf＝0.43(乙酸乙酯/乙烷，35∶65，硅膠)，熔點(diǎn)186-189℃；1H NMR(CDCl3)δ7.47(寬單峰 ，1H)，7.36(t，1H，J＝1.7Hz)，6.48(dd，1H，J＝0.8，1.8Hz)，5.83(dd，1H，J＝1.9，3.2Hz)，5.41-5.37(m，1H)，3.60-3.48(m，1H)，1.07(s，3H)，0.96(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)339(MH+，68)，338(55)，337(28)，321(100)；HRMS C23H31O2(MH+)計(jì)算值339.2324，觀測(cè)值339.2304.
實(shí)施例16 17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的制備方案III，步驟D用與實(shí)施例2類(lèi)似的方法，從實(shí)施例15中制備的(3β)-17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇制備本標(biāo)題化合物。
本發(fā)明提供了一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。此外，本發(fā)明還提供了一種治療患雌激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。
患雄激素依賴性障礙的患者，例如患前列腺癌、良性前列腺增生、男性方式脫發(fā)、女子男性化和多毛癥的患者可以從象式(I)或式(II)化合物這樣的C17-20裂解酶抑制劑中受益。患雌激素依賴性乳腺癌的患者也可以從象式(I)或式(II)化合物這樣的C17-20裂解酶抑制劑中受益。
正如這里所使用的，術(shù)語(yǔ)“患者”指患有或有危險(xiǎn)患有雄激素依賴性障礙的溫血?jiǎng)游铮绮溉閯?dòng)物。應(yīng)當(dāng)清楚的是，人類(lèi)、小鼠和鼠類(lèi)都包括在術(shù)語(yǔ)“患者”的范圍內(nèi)。
給患者施用式(I)或式(II)的化合物會(huì)抑制患者體內(nèi)甾族化合物C17-20裂解酶活性。因此，用式(I)或式(II)的化合物治療患者可以抑制雄激素依賴性障礙或雌激素依賴性障礙。
患者需要用一種抑制甾族化合物C17-20裂解酶的試劑，例如式(I)或式(II)的化合物進(jìn)行治療。對(duì)患有某些雄激素依賴性障礙的患者，甾族化合物C17-20裂解酶活性的提高被看作是其病癥發(fā)展的促進(jìn)因素。
基于標(biāo)準(zhǔn)臨床和實(shí)驗(yàn)的測(cè)試及操作，作為本技術(shù)領(lǐng)域?qū)I(yè)人員的護(hù)理診斷者能夠很容易地判斷出哪些患者需要用甾族化合物C17-20裂解酶的抑制劑來(lái)治療，例如用式(I)或式(II)的化合物。
有效抑制量的式(I)或式(II)化合物是指這樣的劑量，即單或多劑量給患者用藥后，該劑量可有效地提供對(duì)甾族化合物C17-20裂解酶的抑制作用。
作為本技術(shù)領(lǐng)域?qū)I(yè)人員的護(hù)理診斷者通過(guò)應(yīng)用公知技術(shù)及通過(guò)在類(lèi)似情況下得到的觀察結(jié)果，可以很容易地確定式(I)或式(II)化合物的有效抑制量。在確定有效量或劑量時(shí)，護(hù)理診斷者要考慮很多因素，包括但不僅限于哺乳動(dòng)物的種類(lèi)；它的大小、年齡和一般健康狀況；所涉及的特定雄激素依賴性障礙；病癥的程度或病癥的困難或嚴(yán)重性；單個(gè)患者的反應(yīng)；服用的特定化合物；給藥方式；服用制品的生物利用率特征；所選擇的劑量方案；伴隨藥物的使用；以及其它相關(guān)的情況。
有效抑制量的式(I)或式(II)化合物預(yù)計(jì)為約每天每公斤體重0.625毫克(mg/kg/天)到約62.5mg/kg/天。優(yōu)選的用量預(yù)計(jì)為約5到約30mg/kg/天。
在有效治療患者的過(guò)程中，有效量的式(I)或式(II)的化合物可以任何一種形式或方式給藥，該形式或方式能使化合物成為生物可利用的，包括口服和腸胃外途徑。例如式(I)或式(II)的化合物可以通過(guò)口服、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮膚、鼻內(nèi)、直腸等方式給藥。一般優(yōu)選口服給藥和靜脈內(nèi)給藥方式。制備制劑的專(zhuān)業(yè)人員根據(jù)所選化合物的特殊性質(zhì)、所要治療的病癥、病癥的階段及其它相關(guān)情況，可以很容易地選擇合適的給藥形式和給藥方式。
化合物可以單獨(dú)或以和藥物學(xué)可接受的載體或賦形劑結(jié)合的藥物組合物形式給藥，其中載體或賦形劑的比例和性質(zhì)要根據(jù)所選化合物的溶解性和化學(xué)特性、選擇的給藥途徑、標(biāo)準(zhǔn)藥物學(xué)實(shí)驗(yàn)而確定。為了達(dá)到穩(wěn)定、便于結(jié)晶、增加溶解性等等目的，可以將本發(fā)明的化合物(盡管其自身是有效的)以它們的藥物學(xué)可接受的酸加成鹽形式配制及給藥。
在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包括與一種或多種惰性載體混合或者和其締合的式(I)或式(II)化合物的多種組合物。這些組合物用作，例如檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、制造大批量貨物的捷徑、或藥物組合物。式(I)或式(II)化合物的可檢測(cè)量是指通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知和理解的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法和技術(shù)很容易測(cè)定的量。式(I)或式(II)化合物的可檢測(cè)量通常會(huì)從約組合物重量的0.001％到75％。惰性載體可以是任何不降解或者不和式(I)或式(II)化合物共價(jià)反應(yīng)的物質(zhì)。適宜的惰性載體的實(shí)例有水，如通常在高效液相色譜(HPLC)分析中使用的那些含水緩沖劑；有機(jī)溶劑，例如乙腈、乙酸乙酯、乙烷等等；及藥物學(xué)可接受的載體或賦形劑。
更具體地說(shuō)，本發(fā)明提供了多種藥物組合物，該組合物包括有效抑制量的與一種或多種藥物學(xué)可接受的載體或賦形劑混合或者締合的式(I)或式(II)化合物。
用藥物學(xué)領(lǐng)域公知的方式制備藥物組合物。載體或賦形劑可以是用作活性成分的賦形劑或介質(zhì)的固體、半固體或液體物質(zhì)。適宜的載體或賦形劑是本領(lǐng)域公知的。藥物組合物可適于口服或非腸道使用，包括局部使用，還可以給患者以片劑、膠囊、栓劑、溶液、懸液等等形式給藥。
本發(fā)明的化合物，例如可以與稀釋劑或可食用載體口服給藥?？梢詫⑺鼈儼朊髂z膠囊或者壓成片劑。為了達(dá)到口服治療給藥的效果，化合物可以和賦形劑結(jié)合并且其使用的形式有片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸液、糖漿劑、糯米紙囊劑、咀嚼用膠等等。這些制劑應(yīng)該含有至少4％的活性成分即本發(fā)明化合物，但可以根據(jù)特定形式有所變化，適宜的變化在4％至約70％單位重量之間。本發(fā)明化合物在組合物中的含量應(yīng)當(dāng)可以獲得適宜的劑量。優(yōu)選的本發(fā)明組合物和制劑制備成口服劑量單位形式含有5.0-300毫克本發(fā)明化合物。
片劑、丸劑、膠囊、錠劑等還可以含有一種或多種以下佐劑粘合劑，如微晶纖維素、黃蓍樹(shù)膠或明膠；賦形劑如淀粉或乳糖；崩解劑，如藻酸、Primogel、玉米淀粉等等；潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂或SteroteX；滑移劑如膠體二氧化硅；以及加入甜味劑如蔗糖或糖精或者加入調(diào)味劑，例如薄荷、水楊酸甲酯或桔子香精。當(dāng)劑量單位形式是膠囊時(shí)，除了以上類(lèi)型物質(zhì)外，還可以含有如聚乙二醇或脂肪油這樣的液體載體。其它劑量單位形式可以含有其它不同物質(zhì)，其改變劑量單位的物理形式，例如用作包衣的物質(zhì)。因此，片劑或丸劑可以用糖、紫膠或其它腸包衣劑包衣。除本發(fā)明化合物外，糖漿劑可以含有作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染色劑和著色劑及香料。制備這些不同組合物所用的物質(zhì)在其用量上必須具有藥物學(xué)純度并且是無(wú)毒的。
為了達(dá)到非腸道治療給藥的目的，包括局部給藥，本發(fā)明的化合物可以摻入一種溶液或懸液中。這些制劑中至少應(yīng)包含0.1％的本發(fā)明化合物，但可以在0.1和約50％制劑重量之間變化。這種組合物中存在本發(fā)明化合物的量是能獲得適宜劑量的量。優(yōu)選的本發(fā)明組合物和制劑制備成非腸道劑量單位含有5.0-100毫克本發(fā)明化合物。
溶液或懸液還可以包括一種或多種以下佐劑無(wú)菌稀釋劑，如注射用水、0.6％食鹽水、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如芐醇或羥苯甲酸甲酯；抗氧化劑如抗壞血酸或者亞硫酸氫鈉；螯合劑，如乙二胺四乙酸；緩沖劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽以及用來(lái)調(diào)節(jié)張力的介質(zhì)例如氯化鈉或葡萄糖。非腸道制劑可以裝入安瓿瓶、一次性注射器或者玻璃或塑料作的多劑量小瓶。
正如任何一組擁有特定同類(lèi)功效的結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物那樣，式(I)和式(II)的化合物在其應(yīng)用過(guò)程中優(yōu)選某些組及某些構(gòu)型。
一般優(yōu)選其中X是OH的式(I)化合物。其中Y是S的式(I)化合物也常常優(yōu)選。往往優(yōu)選其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵的式(I)化合物。
通過(guò)優(yōu)選其中X是OH的式(II)化合物。其中W是3-呋喃基的式(II)化合物也往往是優(yōu)選的。常常優(yōu)選其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵的式(II)化合物。
以下序列列舉了根據(jù)本發(fā)明的化合物1)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH；2)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；3)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；4)17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；5)17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3-酮；6)17-(2-氨基-4-噁唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；
7)17-(2-氨基-4-噁唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；8)17-(2-氨基-4-咪唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；9)17-(2-氨基-4-咪唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；10)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；11)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；12)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；13)17-(2-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；14)17-(2-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；15)17-(3-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；16)17-(3-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；17)17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；18)17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
以下的研究舉例說(shuō)明了式(I)和式(II)化合物的效用。應(yīng)當(dāng)清楚這些研究?jī)H起舉證作用而不以任何形式限制本發(fā)明的范圍。這里所使用的下列術(shù)語(yǔ)具有指明的意思“mM”指毫摩爾濃度；“μM”指微摩爾濃度；“單位”指國(guó)際接受的蛋白質(zhì)測(cè)量單位；“S.D.”指標(biāo)準(zhǔn)偏差；“ηmol”指納摩爾；“μg”指微克；“ηg”指納克；“μL”是指微升；“mCi”指毫居里；“μCi”指微居里。體外活性利用體外分析法，用來(lái)自人類(lèi)或cynomolgus猴睪丸組織的酶微粒體制品確定作為甾族化合物C17-20裂解酶抑制劑的式(I)和式(II)化合物的活性。人測(cè)驗(yàn)對(duì)象從治療睪丸切除術(shù)中獲得。從人或cynomolgus猴的組織中分離微粒體。待測(cè)化合物溶于二甲基亞砜并用0.05M pH7.4的磷酸鉀緩沖液稀釋至測(cè)試化合物所需要的濃度。試樣包括由1mM NADPH、5mm葡糖-6-磷酸酯、1IU/mL葡糖-6-磷酸脫氫酶及微粒體蛋白質(zhì)組成的總體積為0.2mL的NADPH再生系統(tǒng)。對(duì)照試樣中含有包括二甲基亞砜在內(nèi)的所有成分，但不包含測(cè)試化合物。所有試樣進(jìn)行兩次測(cè)定。用20至62μg/mL微粒體蛋白質(zhì)、緩沖劑和以上描述的NADPH再生系統(tǒng)在34℃下與測(cè)試化合物一起培養(yǎng)0或40分鐘以測(cè)定時(shí)間依賴性C17-20裂解酶的失活。然后取出180μL的等分試樣并且添加7-3H-17α-羥基孕烯醇酮(11.2mCi/mmole；0.2μCi每份試樣)再加入未標(biāo)記的17α-羥基孕烯醇酮使每份試樣的底物總濃度為1.0μM或0.3μM后并緊接著在34℃下培養(yǎng)6分鐘來(lái)檢測(cè)酶活性。為了測(cè)定由測(cè)試化合物產(chǎn)生的可逆抑制作用，將底物即7-3H-17α-羥基孕烯醇酮(11.2mCi/mmole；0.20μCi每份試樣)外加未標(biāo)記的17α-羥基孕烯醇酮加入到其它試樣成分中以達(dá)到0.3μM(＝Km)最終濃度并開(kāi)始反應(yīng)。全部試樣在34℃下培養(yǎng)6分鐘。加入5mL的氯仿/甲醇(2∶1)終止各個(gè)檢測(cè)。這時(shí)還要加入代表底物和產(chǎn)物的載體甾族化合物17α-羥基孕烯醇酮、脫氫表雄酮和雄-5-烯-3β，17β-二醇以及0.8mL的蒸餾去離子水。用Moore和Wilson的方法提取甾族化合物(Methods in EnzY mol.，eds.O′MalleY，B.W.and Hardman，J.G.36，1975，pp.466-474)。使用氮?dú)庹舭l(fā)含有甾族化合物的有機(jī)相，殘余物溶于己烷中的18％四氫呋喃(v/v)并且通過(guò)在Si60(5μM)柱(250×4mm)上的HPLC分離甾族化合物，其中使用了18-22％在己烷中的四氫呋喃(v/v)的梯度。用Padio-metric Model HS或Model A515 Flo-One檢測(cè)器測(cè)定甾族化合物峰的放射性。
每個(gè)檢測(cè)的酶活性可以從底物轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物的百分比計(jì)算出來(lái)，且計(jì)算出的結(jié)果以對(duì)照物的抑制百分比來(lái)表示。IC50值的測(cè)定是通過(guò)將這些數(shù)據(jù)代到兩參數(shù)劑量-反應(yīng)方程中進(jìn)行的。當(dāng)式(I)和(II)的化合物用以上過(guò)程進(jìn)行測(cè)試時(shí)，其結(jié)果可見(jiàn)以下的表1、表2和表3。表1篩選由17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH引起的人睪丸C17-20裂解酶的時(shí)間依賴性抑制

表2篩選由17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的時(shí)間依賴性抑制以及由17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的抑制

表3篩選由不同式(II)化合物引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的抑制

權(quán)利要求
1.一種下式的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽及/或溶劑化物， 其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；以及Y是S、O或NR；其中R，R1和R2各自獨(dú)立是氫及C1-C4烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是OH。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中Y是S。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物是17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
10.一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽， 其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中X是OH。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中W是3-呋喃基。
13.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中化合物是17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
14.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中化合物是17-(2-(呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
15.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中化合物是17-3-(噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
16.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中化合物是17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
17.一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中X是OH。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中Y是S。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
23.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
24.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
25.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中化合物是17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
26.一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說(shuō)的患者施用有效抑制量的權(quán)利要求1或10的化合物。
27.一種藥物組合物，它含有與惰性載體混合或者締合的可檢測(cè)量的權(quán)利要求1的化合物。
28.一種藥物組合物，它含有抑制甾族化合物C17-20裂解酶活性有效量的權(quán)利要求1的化合物，其中所說(shuō)的化合物和一種或多種藥物學(xué)可接受的載體或賦形劑相混合或者相締合。
29.一種藥物組合物，它含有抑制甾族化合物C17-20裂解酶活性有效量的權(quán)利要求10的化合物，其中所說(shuō)的化合物和一種或多種藥物學(xué)可接受的載體或賦形劑相混合或者相締合。
30.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物作為藥物活性化合物的應(yīng)用。
31.權(quán)利要求1-16中任一權(quán)利要求的化合物用于抑制甾族化合物C17-20裂解酶的應(yīng)用。
32.權(quán)利要求1-16中任一權(quán)利要求的化合物用于治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫發(fā)、女子男性化或多毛癥的應(yīng)用。
33.權(quán)利要求1-16中任一權(quán)利要求的化合物用于治療雌激素依賴性乳腺癌的應(yīng)用。
34.權(quán)利要求1-16中任一權(quán)利要求的化合物選擇性地和藥物學(xué)可接受的載體結(jié)合用于制備藥物組合物，該藥物組合物用來(lái)治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫發(fā)、女子男性化或多毛癥。
35.權(quán)利要求1-16中任一權(quán)利要求的化合物選擇性地和藥物學(xué)可接受的載體結(jié)合用于制備藥物組合物，該藥物組合物用來(lái)治療雌激素依賴性乳腺癌。
36.一種下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽及/或溶劑化物的制備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S、O或NR；其中R、R1和R2各自獨(dú)立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物與適宜的脲、硫脲或胍反應(yīng)， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
37.一種下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽及/或溶劑化物的制備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S、O或NR；其中R、R1和R2各自獨(dú)立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物氧化， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
38.一種下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽及/或溶劑化物的制備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S或者O；其中R、R1和R2各自獨(dú)立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物與適宜的脲或者硫脲反應(yīng)， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
39.一種下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽的制備方法， 其中，表示單鍵或雙鍵；且W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基；該方法包括氧化下式的化合物， 式中的和W如上定義。
40.一種下式化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽的制備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基，該方法包括用4N的鹽酸處理下式的化合物， 式中的Pg是一種適宜的保護(hù)基團(tuán)；以及和W如上定義。
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作甾族化合物C
文檔編號(hào)A61K31/58GK1133596SQ94193950
公開(kāi)日1996年10月16日 申請(qǐng)日期1994年9月29日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月27日
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