專利名稱：包合配合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種二氯苯胺苯乙酸(diclofenac)或其藥物學(xué)上可接受的鹽與β-環(huán)糊精的包合復(fù)合物或配合物。
二氯苯胺苯乙酸也稱為2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯乙酸或[(鄰-2，6-二氯苯胺基)苯基]乙酸，且它的鹽就是公知的消炎藥劑。
β-環(huán)糊精是一種由七個(gè)α-(1→4)鍵合的D-吡喃葡萄糖單元構(gòu)成的環(huán)狀化合物，且用作復(fù)合劑。
環(huán)糊精的性質(zhì)和大量的包合配合物是人們已知的，且已有詳細(xì)的評(píng)論[見(jiàn)，Szejtli，J.CyclodextrinTechnology(1988)KluwerAcademicPublishers，Dordrecht]。簡(jiǎn)單地說(shuō)，環(huán)糊精是可從商業(yè)上得到的由6、7或8個(gè)吡喃葡萄糖單元構(gòu)成的環(huán)狀低聚糖(相應(yīng)地為α、β和γ-環(huán)糊精)，其特點(diǎn)為呈圓錐狀分子形狀。這個(gè)圓錐形的空腔是疏水性的，而其外部是親水性的。空腔的疏水性質(zhì)賦予該分子具有能與具有適合進(jìn)入主體空腔的尺寸的疏水客體分子一同形成包含配合物的能力。包合配合物可被許多力穩(wěn)定，這些力包括范德瓦耳斯引力和氫鍵。與較小極性(非離子化的)基團(tuán)相比，不太容易包含極性(離子化的)基團(tuán)。
可根據(jù)組分之間的液態(tài)、固態(tài)或半固態(tài)反應(yīng)來(lái)制備環(huán)糊精。液態(tài)方法就是將環(huán)糊精和客體溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┗蛘呷軇┗旌衔镏?，隨后通過(guò)結(jié)晶、蒸發(fā)、噴霧干燥或冷凍干燥來(lái)分離固態(tài)復(fù)合物。在固態(tài)方法中，兩種組分可以過(guò)篩為均勻的粒徑且在具有可選擇性加熱的高能量研磨機(jī)中研磨然后篩選和均化之后，進(jìn)行充分地混合。在半固態(tài)方法中，在有少量合適溶劑存在條件下混合兩種組分，然后將所形成的配合物烘干干燥、篩選和均化。液態(tài)反應(yīng)通常為反應(yīng)的完成提供最佳條件。
合適客體的環(huán)糊精包合配合物導(dǎo)致許多客體性質(zhì)中的物理化學(xué)變化。首先，在環(huán)糊精包合配合物中不存在客體的熔融特性，包合配合物通常在250-300℃之間不熔融，就開(kāi)始分解。第二，配合物的紅外光譜和X-射線粉末衍射圖相對(duì)于純客體或主體和客體的簡(jiǎn)單(非復(fù)雜的)混合物來(lái)說(shuō)是有差別的。第三，可以通過(guò)環(huán)糊精包含配合作用使水不溶性客體成為水溶性的。在許多情況下，通過(guò)包含配合作用使化學(xué)上不穩(wěn)定的客體得到穩(wěn)定。對(duì)于與環(huán)糊精包合配合作用，客體物理化學(xué)性質(zhì)方面的上述變化提供證據(jù)證明了包合配合物代表了獨(dú)特的客體分子的固態(tài)形式。
取決于溶劑情況，被溶解的包合配合物存于非配合的主體和客體以及已配合的主體/客體之間的平衡狀態(tài)?？诜h(huán)糊精-藥物包合配合物一般導(dǎo)致藥物的迅速吸收，這得助于環(huán)糊精，而環(huán)糊精并沒(méi)有明顯被吸收。另外，已經(jīng)表明某些藥物的環(huán)糊精包合配合物減少了腸胃副作用[參見(jiàn)Fromming，K-H&Szejtli，J.CyclodextrinsinPharmacy(1988)，KluwerAcademicPublishers]。因而環(huán)糊精具有如同真正藥物載體一樣的理想性質(zhì)。環(huán)糊精和它們的包合配合物具有良好的流動(dòng)性、粘合性和便于藥片壓制的成型性能。
用環(huán)糊精(CD)藥物分子的微密封已經(jīng)廣泛用于制藥業(yè)，以制備具有改進(jìn)生物利用率的、更穩(wěn)定的藥劑。為了預(yù)測(cè)CD配合物中晶體堆積排列，已經(jīng)進(jìn)行了可獲得結(jié)晶數(shù)據(jù)的系統(tǒng)分析以及考慮它們總的堆積趨勢(shì)，已經(jīng)得出幾個(gè)一般性結(jié)論。
下面的現(xiàn)有技術(shù)對(duì)于環(huán)糊精和二氯苯胺苯乙酸化合物來(lái)說(shuō)是已知的。
(1)已經(jīng)報(bào)道β-環(huán)糊精和個(gè)別的羥烷基醚衍生物能增加二氯苯胺苯乙酸的水溶性。詳見(jiàn)[SolubilizationandStabilizationofNon-SteroidalAntirheumaticswithCyclodextrinsandCyclodextrinEthers，Backensfeld，T.andMueller，B.W.ArchPharm.1990，323，690;InteractionofNSAwithcyclodextrinsandhydroxypropylcyclodextrinderivatives，Backensfeld，T.;Mueller，B.W.andKolter，K.IntJ.Pharm.1991，74，85-93]。
(2)已經(jīng)報(bào)道二氯苯胺苯乙酸與β-環(huán)糊精的相互作用作為溫度和PH值的函數(shù)。見(jiàn)[InclusionComplexesbetweenNonSteroidalAntiinflammatoryDrugsandβ-Cyclodextrin，Orienti，I.，F(xiàn)ini，A，Bertasi，V.andZecchi，V.Eur.J.Pharm.Biopharm.1991，37，110-112]。
上述研究(1和2)取決于相可溶解性分析，該分析包括測(cè)試在各種情況下增加環(huán)糊精的濃度對(duì)過(guò)量的二氯苯胺苯乙酸鈉(diclofenacsodium)的溶解性的影響。沒(méi)有提到固態(tài)包合配合物的制備或分離。
(3)已有人報(bào)道二氯苯胺苯乙酸[diclofenac(acid)]與β-環(huán)糊精的可擴(kuò)散性。見(jiàn)[AvailabilityofNSAIDHβ-CyclodextrinInclusionComplexes，Orienti，I.，Cavallari，C.andZecchi，V.ArchPharm(Weinheim)1989，322，207-211]。根據(jù)以前描述的共沉淀方法制備出這種配合物，此法包括將溶解在乙基醚中的藥物加到環(huán)糊精的水溶液中，攪拌24小時(shí)，冷卻，分離產(chǎn)物，用乙基醚洗滌和干燥。沒(méi)有對(duì)該配合物進(jìn)行定性且化學(xué)計(jì)量?jī)H假定為1∶1。
(4)已經(jīng)通過(guò)從水-有機(jī)物體系中共存結(jié)晶來(lái)制備二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精的包合配合物。參見(jiàn)[Preparingtheinclusioncompoundsorthophenandindomethacinwithbeta-cyclodextrinandtheirderivatographicanalysis，Nekroshus，E.S.andReshetnyak，V.Y.FarmatsiyaMoscow1989，38，29-34]。示差熱分析和薄層色譜法的檢測(cè)結(jié)果為摩爾比為1∶2的藥物-環(huán)糊精包合提供支持。
(5)使用交聯(lián)卵清蛋白和羥丙基甲基纖維素，將二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精的包合配合物配制為微球體。見(jiàn)[AlbuminMicrospheresandBetacyclodextrinInclusionComplexContainingDiclofenacSodium，Devi，S.Getal.IndJ.Pharm.Sci.1992，54，259-261]。對(duì)于游離的二氯苯胺苯乙酸鈉來(lái)說(shuō)，配合物僅有很弱的總體釋放能力，這一點(diǎn)是通過(guò)藥物穿過(guò)滲析膜的擴(kuò)散而測(cè)定的。沒(méi)有描述配合物制備的細(xì)節(jié)，也沒(méi)有描述任何分析方法以證明配合作用。
在上述研究(3和4)中，描述了所謂配合物形成的共沉淀方法。共沉淀方法一般是已知能生產(chǎn)低產(chǎn)量的配合物。見(jiàn)[InclusionCompoundsofNon-SteroidalAntiinflammatoryandotherslightlywatersolubledrugswithα-andβ-CyclodextrinsinPowderedForm;Kurozumi，M.etal.Chem.Pharm.Bull.1975，23，3062-3068]。另外，由于爆炸和麻醉性的危險(xiǎn)，在工業(yè)生產(chǎn)上頻繁使用乙基醚(3和4)是不希望有的。乙基醚包合趨勢(shì)也帶來(lái)在干燥了的配合物中高殘留醚水平的潛在危險(xiǎn)，使該產(chǎn)物不適于醫(yī)藥應(yīng)用。
(7)屬于Australian Commercial Research and DevelopmentLimited的PCT WO90/02141專利公開(kāi)了包括其中至少有一個(gè)C2、C3或C6羥基被NH2取代的氨基環(huán)糊精衍生物的包合配合物，及包括有至少一個(gè)取代基的環(huán)糊精的包合配合物，其中C2、C3或C6羥基被選自一個(gè)特殊的表中的基團(tuán)所取代，配合物活性成分例如是二氯苯胺苯乙酸。另外，這篇文獻(xiàn)涉及一種含有這樣的包合配合物的口服藥物組合物。沒(méi)有特殊公開(kāi)二氯苯胺苯乙酸或二氯苯胺苯乙酸鈉及非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物。
(8)TakedaChemicalIndustriesLimited的歐洲專利申請(qǐng)No.519428公開(kāi)了一種含有微水溶性藥物(例如二氯苯胺苯乙酸化合物)、環(huán)糊精和水溶性有機(jī)溶劑的藥物組合物，專用于注射。其中提到在許多情況下該組合物與環(huán)糊精形成一種包合復(fù)合物。也提到環(huán)糊精可以是β-環(huán)糊精。沒(méi)有公開(kāi)二氯苯胺苯乙酸或二氯苯胺苯乙酸鈉和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物。
(9)TeikokuChemicalIndustriesLimited的日本專利申請(qǐng)JP59084821公開(kāi)了一種制備含有環(huán)糊精的二氯苯胺苯乙酸的持續(xù)釋放制劑。環(huán)糊精對(duì)二氯苯胺苯乙酸的摩爾比是0.05-1.0。可以使用α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精或γ-環(huán)糊精。在制備這種產(chǎn)品時(shí)，將二氯苯胺苯乙酸與環(huán)糊精混合。添加水之后，將該混合物捏合和干燥。此外，將二氯苯胺苯乙酸和環(huán)糊精加到水中，且充分?jǐn)嚢?。在過(guò)濾以后，將過(guò)濾物噴霧干燥或冷凍干燥。沒(méi)有任何跡象表明形成了包合配合物。
(10)WakamotoPharmaceuticalCompanyLimited的日本專利申請(qǐng)JP6016547公開(kāi)了一種消炎眼藥水，它包含有二氯苯胺苯乙酸鈉鹽和至少一種水溶性環(huán)糊精，即取代環(huán)糊精。沒(méi)有任何跡象表明二氯苯胺苯乙酸和環(huán)糊精形成了包合配合物。
(11)PharmatechGmbH的德國(guó)專利申請(qǐng)NO.4207922公開(kāi)了由二氯苯胺苯乙酸鈉和具有0.4取代程度的甲基-β-環(huán)糊精，具有0.6取代程度的甲基-β-環(huán)糊精或者具有0.42取代程度的羥丙基-β-環(huán)糊精水溶性包含配合物。沒(méi)有公開(kāi)二氯苯胺苯乙酸和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物。
ChiesiFarmaceuticiSpA的南非專利NO.84/8156公開(kāi)了通過(guò)吡氧噻嗪(piroxicam)分別與α-、β-或γ-類型的環(huán)糊精的配合作用而得到的化合物，其中吡氧噻嗪與環(huán)糊精的比率在1∶1和1∶10之間。這些化合物可以用于藥物組合物，尤其適用于口服。
ChiesiFarmaceuticiSpA的南非專利NO.91/2282披露了一種新穎的制備吡氧噻嗪-環(huán)糊精配合物的方法，其中將都是粉末狀的吡氧噻嗪和環(huán)糊精在固態(tài)下混合在一起，且可選擇性地脫氣，用帶有充滿蒸汽的研磨室的高能量研磨機(jī)共同研磨所獲得的混合物，在真空條件下干燥所得的產(chǎn)物，然后篩選除去團(tuán)粒。
需要一種新穎的二氯苯胺苯乙酸和環(huán)糊精的包合配合物。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供一種二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物，其中二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受鹽與非取代β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶1。
優(yōu)選地，這種包合配合物包括水，且其中二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽對(duì)非取代β-環(huán)糊精對(duì)水的摩爾比為約1∶1∶5至1∶1∶11。
優(yōu)選地，在20℃下該包合配合物在去離子水中的溶解度大于每毫升10mg的二氯苯胺乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
優(yōu)選地，二氯苯胺苯乙酸是作為二氯苯胺苯乙酸鈉存在于該配合物中。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供一種二氯苯胺乙酸鈉和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物，其中二氨苯胺苯乙酸鈉與非取代的β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶1，且基本上具有附圖3的X-射線粉末衍射圖。
從如同實(shí)施例1中所述的那樣從單晶X射線結(jié)晶分析測(cè)出了晶胞數(shù)據(jù)、空間群數(shù)據(jù)、分?jǐn)?shù)原子坐標(biāo)系以及從如實(shí)施例1所描述的單晶X-射線結(jié)構(gòu)分析所測(cè)定的原子的熱參數(shù)，制出了具有代表性的附圖3的X-射線粉末衍射圖。采用圖表LAZYPULVERIX，在2θ范圍6-40℃內(nèi)從Cu-Kα放射(λ＝1.5418A°)計(jì)算出該圖形。(參見(jiàn)Yvon，N.;Jeitschko，W;andParthe′E.J.(1977)J.Appl.Crystallogr.，10，73-74)。
二氯苯胺苯乙酸鈉和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物優(yōu)選地具有結(jié)構(gòu)式(二氯苯胺苯乙酸鈉)·(β-環(huán)糊精)·11H2O。
優(yōu)選地，這種包合配合物在平行于(001)平面的平面群P6的層內(nèi)結(jié)晶，每一個(gè)連續(xù)層內(nèi)的配合物分子繞C軸旋轉(zhuǎn)與上層內(nèi)的配合物分子偏離60°。
更優(yōu)選地，此配合物基本具有附

圖1所示的結(jié)構(gòu)。
二氯苯胺苯乙酸也可以作為二氯苯胺苯乙酸鉀存在于配合物中。
根據(jù)本發(fā)明的第三方面，提供一種制備二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物的方法，包括以下步驟(a)將二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與β-環(huán)糊精混合。
(b)將適量的水加到步驟(a)的混合物中，同時(shí)用力攪拌直到形成漿糊或淤漿。
(c)如果需要保持漿糊或淤漿的稠度的話，繼續(xù)與又加入的水混合攪拌一段合適的時(shí)間，以形成包合配合物。
(d)干燥步驟(c)的產(chǎn)物。
優(yōu)選地，在步驟(c)中，混合繼續(xù)進(jìn)行一段0.25小時(shí)以上的時(shí)間。
根據(jù)本發(fā)明的第四方面，提供一種制備二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物的方法，包括下列步驟(e)在升溫條件下，將適量的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與適量的非取代β-環(huán)糊精溶解在水中，和(f)將溶液冷卻且在一段時(shí)間內(nèi)蒸發(fā)其中的水便形成了包合配合物。
優(yōu)選地，步驟(e)中的溫度為70℃左右。
優(yōu)選地，步驟(f)中的蒸發(fā)時(shí)間為1小時(shí)以上。
根據(jù)本發(fā)明的第五方面，提供一種藥物組合物，它包含作為活性成分的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物。
此藥物組合物可以配制用于口服。
附圖1是一幅從最初的β-CD面觀察到的本發(fā)明的二氯苯胺苯乙酸鈉-β-環(huán)糊精包合配合物的立體圖。略去氫原子。用虛線表示本說(shuō)明書(shū)中提到的三個(gè)氫鍵;
附圖2是一幅投影圖，它表示一束根據(jù)本發(fā)明的配合物分子的螺旋線排列;
附圖3是一幅具有代表性的、如實(shí)施例1所述的包合復(fù)合物β-環(huán)糊精二氯苯胺苯乙酸鈉十一水合物的X-射線粉末衍射圖;
附圖4A和4B是樣品1(實(shí)施2中的包合配合物)和樣品2(二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精作為化學(xué)計(jì)量的物理混合物)的X-射線粉末衍射圖，該圖型是使用Cu-Kα放射線(λ＝1.5418A°)在粉末衍射X-射線晶體測(cè)角器上在2θ范圍0-32°內(nèi)而直接測(cè)量的;
附圖5是如實(shí)施例6所述的二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精作為化學(xué)計(jì)量的物理混合物形式(實(shí)線)以及一種包合配合物(虛線)的紅外線光譜的一部分;
附圖6描繪了在實(shí)施7的敘述中所使用的二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精的結(jié)構(gòu)和質(zhì)子符號(hào);
附圖7A和7B是從如實(shí)施例7所描述的二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精重水溶液的H1MR光譜處得到的連續(xù)變化(Job)點(diǎn)。附圖7A是與游離β-環(huán)糊精(×10-3ppm)相比有化學(xué)位移差的β-環(huán)糊精3＇和5＇質(zhì)子的連續(xù)變化點(diǎn)，其中BCD是總β-環(huán)糊精濃度(mMol)。附圖7B是與游離二氯苯胺苯乙酸鈉(×10-3ppm)相比有化學(xué)位移差的二氯苯胺苯乙酸B、E、F和H質(zhì)子的連續(xù)變化點(diǎn)，其中DIC是二氯苯胺苯乙的濃度(mMol)，和附圖8描繪了通過(guò)在實(shí)施例7中所述的H1MR實(shí)驗(yàn)所表示的可能的包合模型的能量最低分子模型。
本發(fā)明的關(guān)鍵就是形成了具有某些特定特性的二氯苯胺苯乙酸與非取代的β-環(huán)糊精的包合復(fù)合物或包合配合物。
有各種方法制備這種包合復(fù)合物或包合配合物。制備該包合復(fù)合物或包合配合物的第一種方法就是漿糊的形成。制備該包合復(fù)合物或包合配合物的第二種方法是形成淤漿。下面更詳細(xì)地陳述兩種方法。
漿糊(1)將所需量的預(yù)先篩選過(guò)的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與β-環(huán)糊精混合。
(2)將適量的水，優(yōu)選地去離子純凈水，加到步驟(1)的混合物中，同時(shí)用力攪拌直到達(dá)到漿糊狀粘稠度。
(3)如果需要保持漿糊料或淤漿的稠度的話，繼續(xù)與又加入的水混合或捏合一段適宜的時(shí)間，以形成包合配合物。優(yōu)選進(jìn)行0.25小時(shí)至1小時(shí)。
(4)干燥步驟(3)的產(chǎn)物。
此后，可以篩選上述產(chǎn)物。
淤漿(1)將所需量的預(yù)先篩選過(guò)的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與β-環(huán)糊精混合，可選擇性地與5-15%m/m量的微晶纖維素混合。
(2)將適量的水，優(yōu)選去離子純凈水，加到步驟(1)的混合物中，同時(shí)用力攪拌且可選擇性地加熱直到形成淤漿。
(3)如果需要保持淤漿的稠度，繼續(xù)與又加入的水混合一段適宜的時(shí)間，以形成包合配合物，優(yōu)選進(jìn)行0.25小時(shí)至1小時(shí)。
(4)可選擇性地，使上述淤漿通過(guò)膠體磨。
(5)將此淤漿干燥，優(yōu)選地進(jìn)行噴霧干燥或噴霧成粒以得到產(chǎn)物。
用溶解度數(shù)據(jù)、紅外線光譜儀和X-射線粉末衍射證明復(fù)合作用。
與溶液配位方法相比較(共結(jié)晶或共沉淀，噴霧干燥或冷凍干燥)，本發(fā)明所提的方法其有以下優(yōu)點(diǎn)(ⅰ)不需幾個(gè)小時(shí)、天、星期，在一個(gè)小時(shí)之內(nèi)可得到滿意的配位;
(ⅱ)減少了溶劑的用量;
(ⅲ)產(chǎn)率高;
(ⅳ)由于合適的粒徑分布，具有高的溶解度;
(ⅴ)適于工業(yè)應(yīng)用。
下面給出形成二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽的包合復(fù)合物或配合物的第三種方法。此第三種方法包括下列步驟
(1)在升溫條件下，將適量的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與適量的非取代的β-環(huán)糊精溶解在水中;和(2)冷卻上述溶液且在一段時(shí)間內(nèi)通過(guò)蒸發(fā)其中的水分形成包合配合物(這段時(shí)間可以從1小時(shí)到超過(guò)1天左右)。
本發(fā)明的包合配合物是一種二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物，二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代β-環(huán)糊精的摩爾比按二氯苯胺苯乙酸的游離酸計(jì)算為1∶1，以及優(yōu)選在20℃和PH為5-7的條件下，在去離子水中的溶解度大于每毫升10mg二氯苯胺苯乙酸。
優(yōu)選地，此包合配合物的分子組成是作為藥物學(xué)上可接受的鹽(例如二氯苯胺苯乙酸鈉或二氯苯胺苯乙酸鉀)的一分子二氯苯胺苯乙酸、一分子非取代的β-環(huán)糊精及包含在內(nèi)的5至11個(gè)水分子。
優(yōu)選地，該配合物基本上具有附圖3的或附圖4樣品1的X-射線衍射圖。
可以以藥物組合物形式，例如適用于口服的藥物組合物配制包含配合物。例如藥物組合物可以以適于口服的片劑、膠囊或粉劑形式存在。
下面將給出在β-環(huán)糊精和二氯苯胺苯乙酸鹽(如二氯胺苯乙酸鈉)之間所形成的包合配合物制劑和特性的各種實(shí)施例。
實(shí)施例1在70℃下，2ml蒸餾水中將56mg的二氯苯胺苯乙酸鈉和200mg的β-環(huán)糊精混合直到完全溶解，而制備配合物。然后在12小時(shí)的時(shí)間內(nèi)將上述溶液緩慢冷卻至室溫，然后貯放數(shù)星期，于是該配合物結(jié)晶成具有六方晶系橫斷面的細(xì)小無(wú)色針狀物。必須注意在使用之前沒(méi)有將β-環(huán)糊精干燥，而且從熱解重量分析法得知每一個(gè)β-環(huán)糊精含有大約10.75個(gè)水分子。因而，所使用的二氯苯胺苯乙酸鈉與β-環(huán)糊精的比例是1∶0.85，而且可根據(jù)原材料的水含量調(diào)整重量。如果濃度增加大約四倍的話，配合物能夠更迅速地沉淀。然而，這可以需要β-環(huán)糊精與二氯苯胺苯乙酸鈉的較小比例，以避免β-環(huán)糊精水合物的沉淀。配合物的細(xì)小針狀物在微觀上能夠容易地與從水中分別結(jié)晶為無(wú)色棱晶和薄片(快速結(jié)晶)的β-環(huán)糊精晶體或二氯苯胺苯乙酸鈉晶體區(qū)分。
附圖1詳細(xì)表明了包括氫鍵和藥物陰離子的苯乙酸根殘基與β-CD之間的疏水相互作用的主體-客體相互作用。苯環(huán)完全嵌入β-CD空腔內(nèi)，而一個(gè)羧酸酯氧原子，0(18)，被氫鍵鍵合到同一β-CD分子
的伯羥基上。因而，這個(gè)伯羥基采取+左右式，C(6)--0(6)鍵指向主體空腔，正如通常所觀察的，相比之下六個(gè)剩余的伯羥基則采取-左右構(gòu)象。通過(guò)還存在于二氯苯胺苯乙酸鈉四水合物的晶體結(jié)構(gòu)中的分子內(nèi)的氫鍵N(3)-H(3)···0(19)[N···0]2.829(7) ]來(lái)測(cè)定這個(gè)羧酸酯基團(tuán)的取向。龐大的二氯苯基部分從主體的基面伸出，且被夾在附圖1所示的β-CD分子與一個(gè)直接在上面的、通過(guò)結(jié)晶學(xué)六次螺旋軸相關(guān)聯(lián)的分子之間，這個(gè)龐大的二氯苯基部分的最小尺寸接近于非極性主體空腔的最大有效直徑(7.8 )。Na+離子位于β-CD分子的周?chē)冶蝗齻€(gè)水分子
中的氧原子、一個(gè)β-CD
處于相對(duì)窄的范圍2.716(6)至3.022(7) 內(nèi)，而賦予給β-CD以“圓度”的常規(guī)分子內(nèi)氫鍵表明基本上得以保持。
配合分子的柱狀體(其中之一在附圖2示出)以六角形排列方式堆積且由牽涉及β-CD羥基和水分子的氫鍵的配合物網(wǎng)絡(luò)所結(jié)合在一起。因而配合物在平行于(001)平面的無(wú)限層(平面群P6)內(nèi)結(jié)晶，在每一連續(xù)層中的配合物分子繞C軸旋轉(zhuǎn)與上層中的分子偏離60°。
已經(jīng)通過(guò)熱解重量分析法(TG)和差示掃描量熱法(DSC)對(duì)配合物的熱分解進(jìn)行了研究。
熱解重量分析法表明在25℃和150℃之間有12.02%(重量)損失，這與11個(gè)結(jié)晶水分子相對(duì)應(yīng)。
在低溫X-射線分析中，水分子表現(xiàn)異常好，產(chǎn)生最終值Ucq在0.03-0.08 范圍內(nèi)且表明沒(méi)有無(wú)序跡象。TG示蹤顯示至少在四個(gè)步驟中發(fā)生脫水，其中每一步在DSC示蹤中都伴隨著相應(yīng)的吸熱。根據(jù)晶體中水分子的不同環(huán)境，有可能合理解釋這些觀察結(jié)果，具有弱氫鍵的那些水首先被釋放，而被配位到Na-或以多重氫鍵連接的那些水在質(zhì)量損失的最后階段解吸。TG、DSC和熱顯微術(shù)表明，進(jìn)一步加熱，配合物不熔融，卻在約473K左右開(kāi)始分解。
實(shí)施例2將二氯苯胺苯乙酸鈉(6.6g)和β-環(huán)糊精(23.4g)篩選(30目)且轉(zhuǎn)筒混合。將混合物轉(zhuǎn)移到研缽中。隨后加入去離子水(10-15ml)，同時(shí)用力攪拌以制成均勻的漿糊料。持續(xù)劇烈混合0.5小時(shí)，以確保在整個(gè)操作期間其均勻的漿糊粘稠度。在40℃烘干干燥該混合物。粉碎干燥物且過(guò)30目篩。在粉末混合器中將粉末均化10分鐘。通過(guò)HPLC測(cè)定，該產(chǎn)物含有21%m/m二氯苯胺苯乙酸鈉。產(chǎn)物的水含量在9-11%m/m之間，如通過(guò)KarlFisher滴定法所測(cè)量的。產(chǎn)物的分子組成對(duì)應(yīng)于1分子二氯苯胺苯乙酸鈉，1分子β-環(huán)糊精和在7-10之間的水分子。在光學(xué)顯微鏡下測(cè)量，90%的產(chǎn)物的粒徑小于30微米。該配合物的形態(tài)類似非常細(xì)的破碎的晶狀粒子。
實(shí)施例3在轉(zhuǎn)筒混合器中，將二氯苯胺苯乙酸鈉(841g)、β-環(huán)糊精(3000g)和微晶纖維素(580g)混合10分鐘，然后轉(zhuǎn)移到混合器中。加入純凈的去離子水(10.5升)且用力攪拌混合物0.5小時(shí)以制成均勻的淤漿。該淤漿用膠體磨處理且在下列條件下使用旋轉(zhuǎn)盤(pán)霧化方法立即噴霧干燥入口溫度為150℃;出口溫度為60℃;喂料速率為每小時(shí)5升。通過(guò)HPLC測(cè)定，以89%的產(chǎn)率得到產(chǎn)物(3927g)且產(chǎn)物含有20%m/m二氯苯胺苯乙酸鈉。通過(guò)KarlFisher滴定法測(cè)量，產(chǎn)物的水含量在7-11%m/m之間。因而，產(chǎn)物的分子組成，除微晶纖維素之外，對(duì)應(yīng)于1分子二氯苯胺苯乙酸鈉，1分子β-環(huán)糊精和5-10之間的水分子。在光學(xué)顯微鏡下測(cè)量，90%的產(chǎn)物粒徑小于50微米。該配合物的形態(tài)類似非常細(xì)的球狀無(wú)定形粒子。
實(shí)施例4在室溫條件下，將根據(jù)實(shí)施例2制備的配合物(500mg)加到盛有2ml去離子水的螺旋帽小瓶?jī)?nèi)。將這個(gè)小瓶密封且放置在實(shí)驗(yàn)室振蕩器中。使此混合物搖晃5分鐘，然后平衡24小時(shí)。使上層清液通過(guò)0.22微米的過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，且通過(guò)HPLC分析二氯苯胺苯乙酸的濃度。該配合物的平衡水溶解度相應(yīng)于38mg/ml二氯苯胺苯乙酸鈉。在相同的條件下，沒(méi)有β-環(huán)糊精時(shí)，二氯苯胺苯乙酸鈉的平衡溶解度為5mg/ml。
實(shí)施例5用X-射線粉末衍射法分析在實(shí)施例2中所得的包合配合物的樣品(樣品1)。通過(guò)翻轉(zhuǎn)式混合0.66g二氯苯胺苯乙酸鈉和2.34gβ-環(huán)糊精來(lái)制備化學(xué)計(jì)量的物理混合物。在與樣品1相同的條件下，通過(guò)X-射線粉末衍射法分析物理混合物的樣品(樣品2)。在樣品2中的峰位與二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精的各自衍射圖的總和相一致。當(dāng)與樣品2相比時(shí)，因而，樣品1顯示出完全不同的峰位，且與附圖3所示的圖非常相似。因而，樣品1的X-射線粉末衍射圖的特征在于與二氯苯胺苯乙酸鈉或β-環(huán)糊精兩者都不同的結(jié)晶形式，且可以用來(lái)直接證明包合配合作用。附圖4A和4B表示了樣品1和樣品2的X-射線粉末衍射圖。
實(shí)施例6通過(guò)翻轉(zhuǎn)混合0.66g二氯苯胺苯乙酸鈉和2.34gβ-環(huán)糊精來(lái)制備化學(xué)計(jì)量物理混合物。在碼瑙研缽中，將從實(shí)施例2中得到的配合物樣品(3mg)與300mg溴化鉀(KBr)一起進(jìn)行研磨。擴(kuò)散反射率紅外線輔助裝置中的樣品杯中填有KBr，該樣品作為背景是在使用了具有4cm-1分辨率的16掃描(器)的Perkin-Elmer Paragon 1000儀器上，采用付里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜法進(jìn)行分析的。在扣去背景的相同的條件下測(cè)試KBr/物理混合物和KBr/配合物樣品，且示于附圖5。與物理混合物相比，該配合物顯示了與環(huán)糊精相聯(lián)系的類似吸收強(qiáng)度帶(例如分別在1155cm-1和1031cm-1處配糖的C-0基團(tuán)和C-C基團(tuán)的伸展頻率[Spectroscopic studies on β-Cyolodextrin，Egyed，O.Vibrational Spectroscopy 1990，1，225-227])。與物理混合物相比較，在配合物中觀察到二氯苯胺苯乙酸的紅外線吸收中的特征衰減，特別在如附圖1所示的對(duì)應(yīng)于強(qiáng)羧酸酯伸展頻率(1550-1600cm-1)和芳族伸展頻率(1400-1550和680-800cm-1)區(qū)域里觀察到了。當(dāng)與分別在1155和1031cm-1處的強(qiáng)的β-環(huán)糊精C-0和C-C吸收帶相對(duì)比進(jìn)行測(cè)量時(shí)，在1574、1556、1453、1410、765和747處二氯苯胺苯乙酸光譜帶的強(qiáng)度衰減在40和60%之間。被衰減的強(qiáng)度是由于強(qiáng)加于在環(huán)糊精空腔內(nèi)客體分子上的振動(dòng)限制所造成的，且可以將衰減強(qiáng)度用以直接證明包合配合作用。
實(shí)施例7可以用質(zhì)子核磁共振譜(NMR)法表征在水中二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精之間的反應(yīng)。在303K溫度下，在有儀表指示溫度的Bruker AMXR500譜儀上進(jìn)行質(zhì)子核磁共振實(shí)驗(yàn)。在D2O中制備二氯苯胺苯乙酸鈉(DIC)和β-環(huán)糊精(BCD)的溶液，且以不同的比例混合上述溶液以獲得連續(xù)變化點(diǎn)(工作點(diǎn))，從中可內(nèi)推得配合物化學(xué)計(jì)量值?？倽舛萚DIC]+[BCD]保持不變(10mM)且比率(r)從0.1變化到0.9，其中r＝[DIC]÷[DIC]+[BCD]。相對(duì)于外標(biāo)的四甲基硅烷測(cè)量化學(xué)位移(δ)。對(duì)于具有r＝0.4的DIC/BCD溶液，在轉(zhuǎn)動(dòng)架(ROESY)中記錄二維核極化(Over hauser)增強(qiáng)(NOE)譜。使用150ms的自旋鎖定時(shí)間。
使用HyperchemTM軟件進(jìn)行分子的模擬。使用MM-力場(chǎng)進(jìn)行牽涉剛體對(duì)接和能量最低的分子結(jié)構(gòu)計(jì)算。BCD和DIC的最初結(jié)構(gòu)是以X-射線數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)的。根據(jù)兩種可能的1∶1同分異構(gòu)的配合物以及根據(jù)1∶2DIC/BCD配合物進(jìn)行計(jì)算。在附圖6中表示了DIC和BCD的結(jié)構(gòu)和代號(hào)。
所觀察的△δ·[BCD]或△δ·[DIC]點(diǎn)作為r的函數(shù)的點(diǎn)，得到附圖7所示給出的工作點(diǎn)。內(nèi)部取向的3＇和5＇BCD，質(zhì)子以及F，H氯苯基質(zhì)子顯示大的位移和在r＝0.5處有最大值的對(duì)稱曲線表示了1∶1化學(xué)計(jì)量。就苯乙酸根B，E質(zhì)子而言，觀察到小的偏移，得到在r明顯小于0.5處具有最大值的不對(duì)稱曲線。這個(gè)結(jié)果預(yù)示可能形成了1∶2DIC/BCD配合物。
從2DROESY譜，在F，H和3＇，5＇之間以及在E和3＇質(zhì)子之間所觀察到的十字交叉峰表明分別在環(huán)糊精和二氯苯胺苯乙酸的空間緊鄰(＜4埃)質(zhì)子之間有空間偶聯(lián)。同時(shí)，NMR結(jié)果表明更多的疏水二氯苯基環(huán)跟較少部分與苯乙酸根環(huán)的包合對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)先配合。這些研究結(jié)果用圖解法描繪為附圖8所示的能量最低的分子模型。
根據(jù)二氯苯胺苯乙酸鈉和β-環(huán)糊精的高分辨率核磁共振的研究，有直接證據(jù)支持水溶液中涉及二氯苯胺苯乙酸中的二氯苯基和苯乙酸根部分的不同包合模型。因而，根據(jù)本發(fā)明，在漿糊和淤漿配合工藝中，很可能在不同程度上生產(chǎn)出不同類型的包合復(fù)化合物。
實(shí)施例8根據(jù)本發(fā)明所獲得的β-環(huán)糊精-二氯苯胺苯乙酸鈉的包合配合物可配制成具有以下單位組成的片劑二氯苯胺苯乙酸鈉-β環(huán)糊精配合物(相當(dāng)于50mg二氯苯胺苯乙酸鈉)鈉)220mg淀粉100mgAc-di-膠液20mg硬脂酸鎂4mg344mg在摻合機(jī)中預(yù)混合AC-di-膠液、微晶纖維素和淀粉。將二氯苯胺苯乙酸鈉-β環(huán)糊精配合物加到混合物中，然后進(jìn)行摻混。篩進(jìn)硬脂酸鎂并進(jìn)行摻混。將上述混合物壓制成片劑。
權(quán)利要求
1.二氯苯胺苯乙酸或其的藥物學(xué)上可接受的鹽和非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物，其中二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的包合配合物，它包含水，其中二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精與水的摩爾比為1∶1∶5至1∶1∶11。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的包合配合物，在20℃和PH值為5-7的條件下，該配合物在去離子水中的溶解度大于每毫升10mg二氯苯胺苯乙酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的包合配合物，其中配合物中的二氯苯胺苯乙酸是二氯苯胺苯乙酸鈉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的包合配合物，其中二氯苯胺苯乙酸是作為二氯苯胺苯乙酸鉀形式存在于配合物中。
6.根據(jù)權(quán)利要求4的包合配合物，它基本上具有附圖3的X-射線粉末衍射圖。
7.根據(jù)權(quán)利要求4的包合配合物，它具有結(jié)構(gòu)式(二氯苯胺苯乙酸鈉)·(β-環(huán)糊精)·11H2O。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的包合配合物，它在平行于(001)平面的平面群P6的層內(nèi)結(jié)晶，每一個(gè)連續(xù)層內(nèi)的配合物分子繞C軸旋轉(zhuǎn)與上層內(nèi)的配合物分子偏離60°。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的包合配合物，它基本上具有如附圖1所示的結(jié)構(gòu)。
10.二氯苯胺苯乙酸鈉與非取代的β-環(huán)糊精的包含配合物，其中二氯苯胺苯乙酸鈉與非取代的β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶1，而且它基本上具有附圖3的X-射線粉未衍射圖。
11.一種制備二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物的方法，包括以下步驟(a)將二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與β-環(huán)糊精混合。(b)將適量的水加到步驟(a)的混合物中，同時(shí)用力攪拌直到形成漿糊料或淤漿，(c)如果需要保持漿糊料或淤漿的稠度的話，繼續(xù)與又加入的水混合攪拌一段適宜的時(shí)間，以形成包合配合物。(d)干燥步驟(c)的產(chǎn)物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中在步驟(c)中，繼續(xù)攪拌0.25小時(shí)以上。
13.一種制備二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物的方法，包括以下步驟(e)在升溫條件下，將適量的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽與適量的非取代β-環(huán)糊精溶解在水中;和(f)將溶液冷卻并在一段時(shí)間內(nèi)通過(guò)蒸發(fā)其中的水而形成包合配合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中步驟(e)中的溫度為約70℃。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的方法，其中步驟(f)中的蒸發(fā)時(shí)間一小時(shí)以上。
16.一種藥物組合物，它包含有作為活性成分的、根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)的二氯苯胺苯乙酸或其藥物學(xué)上可接受的鹽的包合配合物，或這種藥物組合物是根據(jù)權(quán)利要求11至15中任一項(xiàng)的方法制備的。
全文摘要
二氯苯胺苯乙酸，優(yōu)選作為二氯苯胺苯乙酸鈉形式，與非取代的β-環(huán)糊精的包合配合物，它具有結(jié)構(gòu)式1分子二氯苯胺苯乙酸·1分子非取代β-環(huán)糊精和優(yōu)選地，5至11個(gè)水分子。這種包合配合物可以配制成藥物組合物。
文檔編號(hào)A61K47/48GK1107042SQ9411867
公開(kāi)日1995年8月23日 申請(qǐng)日期1994年10月8日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月8日
發(fā)明者M·D·波德利, M·R·開(kāi)拉, L·A·格林滕卡姆, V·J·格里菲思, L·R·納辛姆本尼, D·G·M·尼科爾森, L·J·彭克勒, M·C·B·范奧舒恩 申請(qǐng)人:南非藥商有限公司