本發(fā)明屬于芪精口服液應(yīng)用，具體涉及一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、運(yùn)動(dòng)性疲勞是疲勞的一種形式，當(dāng)機(jī)體處于高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)下會(huì)引起能量消耗、代謝物積累、內(nèi)環(huán)境失調(diào)、氧化損傷、免疫功能低下、與肌肉收縮相關(guān)的炎性細(xì)胞因子的增加等。典型表現(xiàn)是乳酸、尿素氮的生成增多，進(jìn)一步引起肌肉損傷和氧化應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)人體運(yùn)動(dòng)后正常身體機(jī)能的恢復(fù)產(chǎn)生不利影響。

2、為緩解運(yùn)動(dòng)性疲勞對(duì)機(jī)體造成的傷害，增加黃芪等藥食兩用中藥的開發(fā)。通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)和專家討論，形成了復(fù)方芪精口服液處方，處方由黃芪、黃精和肉蓯蓉組成。黃芪主要成分有多糖、皂苷、黃酮等，具有抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化、保護(hù)心腦血管等作用。黃精主要成分有多糖、黃酮、生物堿等，具有調(diào)節(jié)免疫力、抗衰老、抗疲勞、保護(hù)心肌細(xì)胞等作用。肉蓯蓉主要成分有苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜類、木質(zhì)素等，具有提高免疫力、抗氧化、抗衰老、抗疲勞等作用。復(fù)方中黃精是緩解疲勞常用的中藥，黃芪補(bǔ)氣養(yǎng)陰，肉蓯蓉補(bǔ)中益氣，全方用藥清輕緩和，補(bǔ)而不峻，3種藥食兼用中藥共奏扶正補(bǔ)氣、抗疲勞之功效。已有相關(guān)研究表明單味中藥黃芪、黃精、肉蓯蓉均具有抗疲勞作用，但未有3種藥物組合具有抗疲勞作用的報(bào)道，因此本研究在研制出芪精口服液的基礎(chǔ)上，探究芪精口服液對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)耐力的改善作用，并通過測(cè)定相關(guān)生化指標(biāo)來判斷其對(duì)運(yùn)動(dòng)疲勞的改善作用，為該復(fù)方及相關(guān)制劑的開發(fā)研究提供依據(jù)。

3、對(duì)此，發(fā)明人提出一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，用以解決上述問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，包括以下步驟：

4、s1、制備灌胃溶液，依處方配比制備芪精口服液，提取濃縮得到灌胃溶液；

5、s2、小鼠分組給藥，將小鼠隨機(jī)分組并依次喂養(yǎng)不同劑量的步驟s1中獲得的灌胃溶液，以及設(shè)置紅牛功能飲料對(duì)照組和正常對(duì)照組；

6、s3、小鼠負(fù)重力竭游泳試驗(yàn)，將步驟s2中分組的小鼠進(jìn)行游泳訓(xùn)練，并記錄時(shí)間；

7、s4、測(cè)定相關(guān)指標(biāo)，對(duì)步驟s2中剩余的小鼠進(jìn)行取樣和測(cè)定；

8、s5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用spss25.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，判斷是否符合正態(tài)分布，再進(jìn)行單因素方差分析及事后多重比較(lsd)，結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

9、優(yōu)選的，步驟s1中制備灌胃溶液的方法為：稱取肉蓯蓉、黃芪、黃精飲片，加入純凈水，浸泡，回流提取，加水補(bǔ)足失重，過濾，合并濾液，濃縮，得到灌胃溶液。

10、優(yōu)選的，稱取肉蓯蓉、黃芪、黃精飲片的比例為1:1:1，共45～60g，加入10倍量的純凈水，浸泡時(shí)長(zhǎng)為1.5～2h，回流提取3次，每次2～3h，加水補(bǔ)足失重，過濾，合并3次濾液，濃縮至0.5g/ml，即得灌胃溶液。

11、優(yōu)選的，步驟s2中小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、紅牛功能飲料對(duì)照組、芪精口服液低劑量組、芪精口服液中劑量組、芪精口服液高劑量組5組，進(jìn)行灌胃，記錄實(shí)驗(yàn)前后小鼠的體重。

12、優(yōu)選的，步驟s2中小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d，期間自由飲食，進(jìn)水，每組數(shù)量18只，低、中、高劑量組分別按1.8g/kg·bw·d、3.6g/kg·bw·d、7.2g/kg·bw·d，分別為人用劑量的5、10、20倍灌胃，紅牛功能飲料組和正常對(duì)照組分別灌胃等體積的紅牛飲料和生理鹽水，每天1次，每次0.1ml/10g，連續(xù)10d，實(shí)驗(yàn)前后記錄小鼠的體重。

13、優(yōu)選的，步驟s3中小鼠取材前5天每天灌胃30min后進(jìn)行不負(fù)重游泳訓(xùn)練，第1d訓(xùn)練40min，之后每天遞增10min，第11d灌胃結(jié)束后30min，從各組隨機(jī)取若干只小鼠，于尾部系上體重3％～5％的鉛皮進(jìn)行負(fù)重游泳測(cè)試，記錄小鼠開始游泳至死亡的時(shí)間。

14、優(yōu)選的，步驟s4中第11d灌胃后30min，將剩余的小鼠進(jìn)行非負(fù)重游泳，取出擦干后進(jìn)行眼球采血，置于1.5ml離心管中，小鼠處死后取肝臟和雙后腿腓腸肌，用生理鹽水漂洗去除血污，分裝到離心管中，取材后30min將血液離心，取上層血清分裝至1.5ml的離心管中，血清與組織均在-80℃儲(chǔ)存；按試劑盒說明書方法，對(duì)各組小鼠血清和肝臟中多項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

15、優(yōu)選的，小鼠血清和肝臟中測(cè)定的多項(xiàng)指標(biāo)包括血清中的血乳酸la、尿素氮bun、超氧化物歧化酶sod、丙二醛mda、乳酸脫氫酶ldh、谷胱甘肽過氧化酶gsh-px進(jìn)行測(cè)定；肝臟中的肝糖原、sod、mda、gsh-px。

16、優(yōu)選的，血液離心的條件為4℃、3500～4000r/min離心10～15min。

17、優(yōu)選的，對(duì)小鼠的雙后腿腓腸肌的左后腓腸肌均用10％甲醛固定液固定，石蠟包埋，切成4μm切片，蘇木精-伊紅染色法染色，肌肉組織在光學(xué)顯微鏡下觀察形態(tài)。

18、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

19、(1)本發(fā)明中復(fù)方芪精口服液可減少運(yùn)動(dòng)小鼠的糖原消耗及bun積累，延長(zhǎng)小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間，說明復(fù)方芪精口服液具有一定的抗疲勞作用，由3種中藥材組成的復(fù)方芪精口服液可作為抗氧化劑和提高運(yùn)動(dòng)耐力的補(bǔ)充劑，從而達(dá)到抗疲勞功能。

20、(2)本發(fā)明中不同劑量的復(fù)方芪精口服液均減少丙二醛的堆積，減少乳酸脫氫酶、肌酸激酶向血液中的釋放，增大超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的積累，減輕過度運(yùn)動(dòng)小鼠肌肉損傷。

技術(shù)特征：

1.一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：步驟s1中制備灌胃溶液的方法為：稱取肉蓯蓉、黃芪、黃精飲片，加入純凈水，浸泡，回流提取，加水補(bǔ)足失重，過濾，合并濾液，濃縮，得到灌胃溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：稱取肉蓯蓉、黃芪、黃精飲片的比例為1:1:1，共45～60g，加入10倍量的純凈水，浸泡時(shí)長(zhǎng)為1.5～2h，回流提取3次，每次2～3h，加水補(bǔ)足失重，過濾，合并3次濾液，濃縮至0.5g/ml，即得灌胃溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：步驟s2中小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、紅牛功能飲料對(duì)照組、芪精口服液低劑量組、芪精口服液中劑量組、芪精口服液高劑量組5組，進(jìn)行灌胃，記錄實(shí)驗(yàn)前后小鼠的體重。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：步驟s2中小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d，期間自由飲食，進(jìn)水，每組數(shù)量18只，低、中、高劑量組分別按1.8g/kg·bw·d、3.6g/kg·bw·d、7.2g/kg·bw·d，分別為人用劑量的5、10、20倍灌胃，紅牛功能飲料組和正常對(duì)照組分別灌胃等體積的紅牛飲料和生理鹽水，每天1次，每次0.1ml/10g，連續(xù)10d，實(shí)驗(yàn)前后記錄小鼠的體重。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：步驟s3中小鼠取材前5天每天灌胃30min后進(jìn)行不負(fù)重游泳訓(xùn)練，第1d訓(xùn)練40min，之后每天遞增10min，第11d灌胃結(jié)束后30min，從各組隨機(jī)取若干只小鼠，于尾部系上體重3％～5％的鉛皮進(jìn)行負(fù)重游泳測(cè)試，記錄小鼠開始游泳至死亡的時(shí)間。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：步驟s4中第11d灌胃后30min，將剩余的小鼠進(jìn)行非負(fù)重游泳，取出擦干后進(jìn)行眼球采血，置于1.5ml離心管中，小鼠處死后取肝臟和雙后腿腓腸肌，用生理鹽水漂洗去除血污，分裝到離心管中，取材后30min將血液離心，取上層血清分裝至1.5ml的離心管中，血清與組織均在-80℃儲(chǔ)存；按試劑盒說明書方法，對(duì)各組小鼠血清和肝臟中多項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：小鼠血清和肝臟中測(cè)定的多項(xiàng)指標(biāo)包括血清中的血乳酸la、尿素氮bun、超氧化物歧化酶sod、丙二醛mda、乳酸脫氫酶ldh、谷胱甘肽過氧化酶gsh-px進(jìn)行測(cè)定；肝臟中的肝糖原、sod、mda、gsh-px。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：血液離心的條件為4℃、3500～4000r/min離心10～15min。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，其特征在于：對(duì)小鼠的雙后腿腓腸肌的左后腓腸肌均用10％甲醛固定液固定，石蠟包埋，切成4μm切片，蘇木精-伊紅染色法染色，肌肉組織在光學(xué)顯微鏡下觀察形態(tài)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及芪精口服液應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種復(fù)方芪精口服液在小鼠的抗疲勞作用中的應(yīng)用，包括：S1、制備灌胃溶液，S2、小鼠分組給藥，S3、小鼠負(fù)重力竭游泳試驗(yàn)，S4、測(cè)定相關(guān)指標(biāo)和S5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；本發(fā)明復(fù)方芪精口服液可減少運(yùn)動(dòng)小鼠的糖原消耗及BUN積累，延長(zhǎng)小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間，說明復(fù)方芪精口服液具有一定的抗疲勞作用，由3種中藥材組成的復(fù)方芪精口服液可作為抗氧化劑和提高運(yùn)動(dòng)耐力的補(bǔ)充劑，從而達(dá)到抗疲勞功能，不同劑量的復(fù)方芪精口服液均減少丙二醛的堆積，減少乳酸脫氫酶、肌酸激酶向血液中的釋放，增大超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的積累，減輕過度運(yùn)動(dòng)小鼠肌肉損傷。

技術(shù)研發(fā)人員：蘇小紅,張曉娜,劉秋紅,崔興蘭,田靜,雒慧,馮麗娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：蘭州工業(yè)研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2