本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及威靈仙總皂苷在制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、尿酸是一種弱有機(jī)酸，在生理?xiàng)l件下主要以尿酸一鈉形式存在。它是人類嘌呤代謝的最終氧化產(chǎn)物，主要在肝臟、肌肉和腸道中產(chǎn)生。尿酸在血液或組織液中過飽和，形成尿酸鈉鹽結(jié)晶，結(jié)晶沉淀在關(guān)節(jié)、滑膜、腎小管等處。在關(guān)節(jié)局部形成晶體并沉積，誘發(fā)局部炎癥反應(yīng)和組織破壞，即急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。在腎臟沉積則引起腎組織損傷與功能受損，甚至出現(xiàn)腎結(jié)石或慢性間質(zhì)性腎炎。出現(xiàn)尿酸性腎損傷后，人體排泄尿酸功能進(jìn)一步下降，加快多種尿酸性疾病進(jìn)程。目前還沒有針對尿酸性腎損傷的專家指南或共識，臨床通常以降尿酸和腎病治療為主。降尿酸藥物包括非布司他、別嘌醇等一線用藥，雖然能在一定程度上降低尿酸水平，但對于腎臟功能的恢復(fù)還有待觀察。因此尋找新的針對性的治療藥物依舊迫在眉睫。

2、威靈仙中的皂苷類化合物是其主要藥效活性成分之一，盡管目前有關(guān)威靈仙總皂苷的專利十余篇，但尚未報(bào)道其治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷的用途。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的技術(shù)問題，提供威靈仙總皂苷在制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷藥物中的應(yīng)用。

2、本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明提供威靈仙總皂苷在制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷藥物中的應(yīng)用。

3、所述的應(yīng)用，所述威靈仙總皂苷的提取方法具體步驟如下：

4、(1)將毛茛科鐵線蓮屬植物東北鐵線蓮的干燥根或根莖粉碎，以5～10倍量的濃度百分?jǐn)?shù)為10％～30％的乙醇溶液冷浸3-5日、滲漉24h、超聲30min或70-100℃加熱回流提取，將提取液減壓濃縮為無醇味的浸膏；

5、(2)浸膏加水溶解、過濾，經(jīng)d101大孔樹脂柱層析純化，依次用水，30％乙醇，60％乙醇，95％乙醇洗脫至流出物為無色，收集60％乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得威靈仙總皂苷粗品；

6、(3)將威靈仙總皂苷粗品用5～10倍量乙醇溶解，過濾，濾液減壓回收溶劑至干，即得威靈仙總皂苷。

7、所述威靈仙總皂苷包括分子中含6個(gè)糖以上的7種威靈仙三萜皂苷，7種威靈仙三萜皂苷分別為：clematichinenoside?ar2、clematomandshurica?saponin?f、clematichinenoside?ar、clematomandshurica?saponinc、clematichinenoside?c、huzhangoside?b、clematichinenoside?h，7種威靈仙三萜皂苷的結(jié)構(gòu)通式如式ⅰ所示：

8、

9、當(dāng)r1為h、r2為s2、r3為s1、r4為oh時(shí)為clematichinenoside?ar2，

10、當(dāng)r1為oh、r2為s2、r3為s1、r4為h時(shí)為clematomandshurica?saponin?f，

11、當(dāng)r1為h、r2為s2、r3為s1、r4為h時(shí)為clematichinenoside?ar，

12、當(dāng)r1為h、r2為s2、r3為s3、r4為h時(shí)為clematomandshurica?saponinc，

13、當(dāng)r1為h、r2為s2、r3為s4、r4為h時(shí)為clematichinenoside?c，

14、當(dāng)r1為h、r2為s2、r3為h、r4為h時(shí)為huzhangoside?b，

15、當(dāng)r1為h、r2為h、r3為s1、r4為h時(shí)為clematichinenoside?h，其中，s1、s2、s3、s4的結(jié)構(gòu)是分別為：

16、

17、所述7種威靈仙皂苷的總量為93.02％。

18、本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明建立了一種氧嗪酸鉀、腺嘌呤、尿酸單鈉結(jié)晶誘導(dǎo)的尿酸性腎損傷合并急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型，評價(jià)了威靈仙總皂苷對急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及尿酸性腎損傷的治療作用。大鼠足爪腫脹程度、關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分、步態(tài)評分和滑膜h&e染色結(jié)果共同證實(shí)了急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生，并且顯示了威靈仙總皂苷能回調(diào)疾病引起的尿酸升高、有效減輕足爪腫脹程度、改善步態(tài)、緩解滑膜的組織病理情況，起到改善疾病癥狀的作用。當(dāng)大鼠出現(xiàn)明顯的尿酸水平升高時(shí)，腎組織病理切片以及血清中血肌酐、尿素氮含量和24h尿液中白蛋白水平的檢測結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎也出現(xiàn)損傷，說明尿酸性腎損傷合并急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型建立成功。結(jié)合以上評價(jià)指標(biāo)對威靈仙總皂苷的治療效果進(jìn)行綜合評價(jià)，發(fā)現(xiàn)威靈仙總皂苷在減輕急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎癥狀的同時(shí)，還能夠降低尿酸水平、有效緩解由高尿酸水平導(dǎo)致的腎損傷，具有潛在的治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷的用途。

19、同時(shí)，證實(shí)nlrp3/il-1β信號通路及炎癥反應(yīng)參與了高尿酸所致的腎臟功能損害。本發(fā)明提取的威靈仙總皂苷不僅降低了尿酸水平，改善了腎功能，還有效降低了血清il-1β水平。揭示威靈仙總皂苷抑制nlrp3炎癥小體活化及il-1β炎癥因子的分泌，從而減輕炎癥浸潤及間質(zhì)纖維化程度，起到對尿酸性腎病的改善作用。

20、本發(fā)明選用毛茛科鐵線蓮屬植物東北鐵線蓮clematrs?mandshusica進(jìn)行提取得到威靈仙總皂苷，該提取物主要由分子中含6個(gè)糖以上的7種威靈仙三萜皂苷組成，該提取物中7種威靈仙皂苷的總量為93.02％，且能夠?qū)δ蛩嵝阅I損傷合并急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎有顯著的改善。

技術(shù)特征：

1.威靈仙總皂苷在制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述威靈仙總皂苷的提取方法具體步驟如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述威靈仙總皂苷包括分子中含6個(gè)糖以上的7種威靈仙三萜皂苷，7種威靈仙三萜皂苷分別為：clematichinenoside?ar2、clematomandshurica?saponin?f、clematichinenoside?ar、clematomandshuricasaponinc、clematichinenoside?c、huzhangoside?b、clematichinenoside?h，7種威靈仙三萜皂苷的結(jié)構(gòu)通式如式ⅰ所示：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述7種威靈仙皂苷的總量為93.02％。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了威靈仙總皂苷在制備急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明采用毛茛科鐵線蓮屬植物東北鐵線蓮的干燥根或根莖粉碎提取威靈仙總皂苷，提取的威靈仙總皂苷在減輕急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎癥狀的同時(shí)，還能夠降低尿酸水平、有效緩解由高尿酸水平導(dǎo)致的腎損傷，具有潛在的治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎并改善尿酸性腎損傷的用途。

技術(shù)研發(fā)人員：劉麗芳,曾菁,辛貴忠,鄭佳逸
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國藥科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6