本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥工程，具體涉及一種治療核輻射損傷的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、近年來，許多新型輻射防護(hù)劑被開發(fā)，并且有著不錯(cuò)的抗輻射效果，如：磷酸腺嘌呤(phosphonol)、toll樣受體5等。雖然在受輻射照射前，使用輻射防護(hù)劑可以發(fā)揮不錯(cuò)的功效，但是核泄漏事故、醫(yī)療核裝置事故、自然災(zāi)害造成的核電站倒塌以及核武器爆炸等總是不可預(yù)測的，無法提前使用輻射防護(hù)劑，會(huì)造成大量人員傷亡。

2、因此，開發(fā)治療輻射損傷的方法是非常必要的。然而，目前臨床上使用的均是支持性治療包括輸血、抗感染治療和止吐藥等，這些治療大多是對(duì)癥的方法，治標(biāo)不治本，針對(duì)輻射損傷從根本上治療的病原學(xué)療法非常欠缺并且研究更加滯后。目前病原學(xué)療法主要的研究是造血干細(xì)胞，自從1951年lorenz等人發(fā)現(xiàn)輸注骨髓細(xì)胞可以延長受輻射小鼠的存活時(shí)間以來，造血干細(xì)胞的作用就引起了研究人員的關(guān)注。然而，造血干細(xì)胞移植仍然存在一些相關(guān)的問題，如供體缺乏、預(yù)處理死亡率高和移植并發(fā)癥等。因此，一些專家繼續(xù)質(zhì)疑造血干細(xì)胞移植對(duì)輻射損傷的治療。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的問題，本申請?zhí)峁┝艘环N治療核輻射損傷的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑。

2、具體來說，本發(fā)明的治療核輻射損傷的細(xì)胞制劑，是包含特定濃度的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的1％白蛋白生理鹽水溶液。

3、本發(fā)明還提供了上述治療核輻射損傷的細(xì)胞制劑的制備方法，步驟如下：

4、1)分離臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

5、將從臍帶剝離出的沃頓氏膠剪成1-4mm3的組織塊，均勻平鋪在培養(yǎng)瓶中，加入培養(yǎng)基，放置培養(yǎng)于37℃，5％co2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；5天后，進(jìn)行第一次全量換液，再將培養(yǎng)瓶平鋪放入37℃，5％co2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)；之后每4天進(jìn)行一次半量換液；

6、當(dāng)細(xì)胞生長至匯合度達(dá)到50％-60％時(shí)，進(jìn)行傳代，用間充質(zhì)干細(xì)胞溫和消化酶消化，用無菌濾網(wǎng)除去組織塊，取培養(yǎng)瓶，加入適量完全培養(yǎng)基，按5000-10000個(gè)/cm2密度接種，得到1代細(xì)胞；

7、2)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)

8、之后，每3天當(dāng)細(xì)胞生長至匯合度達(dá)到90％左右時(shí)，用間充質(zhì)干細(xì)胞溫和消化酶消化，按1傳10的比例，傳代至第5代細(xì)胞；

9、3)收集臍帶間充質(zhì)工作庫間充質(zhì)干細(xì)胞

10、當(dāng)?shù)?代細(xì)胞匯合度達(dá)到90％左右時(shí)，用間充質(zhì)干細(xì)胞溫和消化酶消化、收集細(xì)胞，將收集到的所有細(xì)胞懸液離心，棄上清后使用pbs重懸，重復(fù)離心和重懸步驟一次，計(jì)數(shù)后，再次離心，按照計(jì)數(shù)結(jié)果，按1.0×107cells/2ml/支的密度凍存細(xì)胞；

11、4)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞回輸制劑的制備

12、將凍存細(xì)胞，在37℃水域鍋中解凍后，輕柔吸出凍存管中細(xì)胞懸液于裝有20mlpbs的離心管中，用pbs輕柔沖洗凍存管并轉(zhuǎn)移至裝有細(xì)胞的離心管內(nèi)，離心，棄上清，用pbs重懸計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)后，再次離心，棄上清，根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果和所需的細(xì)胞濃度，用對(duì)應(yīng)體積的1％白蛋白生理鹽水溶液重懸，重懸后用70μm的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾，過濾后得到的細(xì)胞懸液，即為臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞回輸回輸制劑。

13、本發(fā)明的有益效果為：所提供的制劑免疫源型低，可異體回輸，無需配型。同時(shí)，是一種病原學(xué)療法，從根本上促進(jìn)輻射后，造血系統(tǒng)，消化系統(tǒng)和皮膚的恢復(fù)，從而提高生存率。

技術(shù)特征：

1.一種治療核輻射損傷的細(xì)胞制劑，其特征在于，是包含特定濃度的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的1％白蛋白生理鹽水溶液。

2.權(quán)利要求1所述治療核輻射損傷的細(xì)胞制劑的制備方法，其特征在于：步驟如下：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種治療核輻射損傷的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑及其制備方法。本發(fā)明所提供的制劑免疫源型低，可異體回輸，無需配型。同時(shí)，是一種病原學(xué)療法，從根本上促進(jìn)輻射后，造血系統(tǒng)，消化系統(tǒng)和皮膚的恢復(fù)，從而提高生存率。

技術(shù)研發(fā)人員：周智
受保護(hù)的技術(shù)使用者：武漢煥新酐醫(yī)藥科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30