本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，特別是涉及蘆丁在抗柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、柯薩奇病毒是一種常見的腸病毒，大多數(shù)情況通過呼吸道、消化道感染人體，感染后人體會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、打噴嚏、咳嗽等感冒癥狀?？滤_奇病毒分為a組、b組2類，柯薩奇病毒a型感染兒童多見，成人感染占21.7％。潛伏期1～3天，出現(xiàn)上呼吸道感染，起病急，流涕、咳嗽、咽痛、發(fā)熱，全身不適。

2、b組柯薩奇病毒(cvb)是小rna病毒科腸道病毒屬的無包膜小rna病毒。cvb包括六種血清型(cvb?1-6)，它們引起從普通感冒到重癥心肌炎和腦炎的多種疾病。cvb是腸病毒誘導(dǎo)的急性心肌炎和心肌病的主要原因。然而，有效的抗病毒療法仍然不可用。

3、疫苗和抗病毒藥物是腸道病毒最有效的手段，然而我國已上市的ev71滅活疫苗是僅針對(duì)ev71?c4亞型的單價(jià)疫苗，對(duì)cvb5病毒無交叉免疫保護(hù)作用。cvb感染引起從普通感冒到心肌炎、腦炎和胰腺炎的多種病癥。沒有特異性的抗病毒藥物可用于治療cvb感染。并且由于疫苗的開發(fā)耗時(shí)長，研發(fā)難度大及研發(fā)資金高，且腸道病毒種類多，具有高突變的概率，至今尚未見其它腸道病毒疫苗研發(fā)的報(bào)道，同時(shí)也沒有任何抗病毒藥物被fda批準(zhǔn)用于治療任何腸道病毒感染。因此，亟需發(fā)展新的抗腸道病毒治療方法與藥物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述問題，本發(fā)明提供一種蘆丁在制備治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用，蘆丁能夠通過范德華力、氫鍵與cvb5-3c蛋白靶標(biāo)高度穩(wěn)定結(jié)合，進(jìn)而與含有主要抗原結(jié)合位點(diǎn)的vp1蛋白緊密結(jié)合，從而抑制柯薩奇病毒的復(fù)制，達(dá)到治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的效果。

2、本發(fā)明提供了一種蘆丁在制備治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用，所述蘆丁的結(jié)構(gòu)如下所示：

3、

4、腸道病毒具有相似的基因結(jié)構(gòu)，柯薩奇病毒b5(cvb5)屬于腸道病毒b組5型，cvb5含有約7.4kb的正向單鏈rna基因組，由5'非翻譯區(qū)(5'-utr)、3'非翻譯區(qū)(3'-utr)和一個(gè)開放閱讀框(open?reading?frame,orf)組成。5'-utr通常折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)，包含一個(gè)內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(internal?ribosome?entry?site，ires)，用于結(jié)合40s核糖體亞基以啟動(dòng)cap非依賴性翻譯。3'-utr包含一個(gè)可變的poly(a)尾部，這對(duì)于cvb5復(fù)制非常重要。orf被細(xì)分為p1、p2和p3區(qū)域，p1編碼4種結(jié)構(gòu)蛋白即vp1、vp2、vp3、vp4，p2編碼3種非結(jié)構(gòu)蛋白2a、2b、2c，p3編碼4種非結(jié)構(gòu)蛋白3a、3b、3c和3d。vp1、vp2和vp3暴露在病毒外殼表面組成cvb5病毒顆粒衣殼復(fù)合物，vp4包嵌入病毒外殼內(nèi)部，與病毒核心緊密連接。cvb5的vp1含有主要的抗原結(jié)合位點(diǎn)直接決定病毒的抗原性，是主要的病毒中和決定因素。vp1衣殼蛋白n端具有重要的抗原區(qū)，表現(xiàn)出高免疫原性。vp1衣殼蛋白c端能刺激中和抗體的產(chǎn)生。在非結(jié)構(gòu)蛋白中，2c、3c和3d在進(jìn)化中最保守，而2a、2b和3a在腸道病毒中高度可變。3c蛋白酶含有183個(gè)氨基酸，具有蛋白水解活性，在腸道病毒復(fù)制的過程中，3c蛋白催化病毒前體蛋白的裂解，形成成熟的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，即大部分腸道病毒前體蛋白只有在3c蛋白酶水解后形成功能蛋白，才能進(jìn)行后續(xù)的復(fù)制、封裝，因此3c蛋白酶是腸道病毒前體多聚蛋白水解的核心蛋白酶，在腸道病毒復(fù)制過程中起著至關(guān)重要的作用。3c蛋白酶還具有許多功能，如促進(jìn)病毒復(fù)制和增強(qiáng)宿主細(xì)胞的調(diào)亡，抑制其催化功能可有效抑制腸道病毒前體蛋白的切割，阻斷病毒復(fù)制，是腸道病毒藥物治療研究的重要靶點(diǎn)。

5、rutin(蘆丁)是一種廣泛存在于多種植物中的黃酮類化合物，具有抗炎、降糖、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)、腎臟保護(hù)、肝臟保護(hù)和降低aβ低聚物活性等多種生物活性?；诖?，本發(fā)明人提出利用蘆丁對(duì)柯薩奇病毒進(jìn)行治療、預(yù)防，并通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了，蘆丁能夠通過范德華力、氫鍵與cvb5-3c蛋白靶標(biāo)高度穩(wěn)定結(jié)合，進(jìn)而與含有主要抗原結(jié)合位點(diǎn)的vp1蛋白緊密結(jié)合，從而抑制柯薩奇病毒的復(fù)制，達(dá)到治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的效果。

6、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述柯薩奇病毒包括a組柯薩奇病毒、b組柯薩奇病毒。

7、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述b組柯薩奇病毒包括6種血清型：柯薩奇病毒b1-6。

8、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物還包括藥學(xué)上可接受的輔料和/或與蘆丁配伍的藥物。

9、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、著色劑、潤滑劑、抗氧劑、防腐劑、黏合劑、填充劑或增稠劑中的至少1種。

10、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述蘆丁的工作濃度≥20μm。

11、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述蘆丁的工作濃度為20-100μm。

12、所述工作濃度為上述成分在使用時(shí)能夠達(dá)到預(yù)期效果的濃度，可以理解的，本領(lǐng)域技術(shù)人員在配制上述含有蘆丁的藥物時(shí)，可以配制濃度更高的母液或者儲(chǔ)備液，待使用時(shí)再稀釋，所述母液或者儲(chǔ)備液及其濃度均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

13、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物的劑型包括膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液、丸劑、注射劑、膏劑、脂質(zhì)體納米粒、緩釋劑、控釋劑或分散片。

14、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物的給藥途徑包括口服或靜脈注射。

15、本發(fā)明還提供了一種治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的藥物，包括藥物活性成分和輔料，所述藥物活性成分為蘆丁。

16、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述藥物通過結(jié)合柯薩奇病毒b5的vp1蛋白，抑制柯薩奇病毒b5的復(fù)制。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

18、本發(fā)明的一種蘆丁在制備治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用，蘆丁能夠通過范德華力、氫鍵與cvb5-3c蛋白靶標(biāo)高度穩(wěn)定結(jié)合，進(jìn)而與含有主要抗原結(jié)合位點(diǎn)的柯薩奇病毒b5的vp1蛋白緊密結(jié)合，從而抑制柯薩奇病毒b5的復(fù)制，達(dá)到治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的效果。本發(fā)明通過選用無毒性濃度的rutin進(jìn)行cvb5病毒感染rd細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了rutin可劑量依賴性地抑制cvb5病毒的復(fù)制。rutin為柯薩奇病毒感染性疾病的預(yù)防和治療提供了新的天然小分子藥物選擇，對(duì)防治柯薩奇病毒具有重要的研發(fā)價(jià)值和開發(fā)意義。

技術(shù)特征：

1.一種蘆丁在制備治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用，所述蘆丁的結(jié)構(gòu)如下所示：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述柯薩奇病毒包括a組柯薩奇病毒、b組柯薩奇病毒。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物還包括藥學(xué)上可接受的輔料和/或與蘆丁配伍的藥物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述輔料包括溶劑、崩解劑、矯味劑、著色劑、潤滑劑、抗氧劑、防腐劑、黏合劑、填充劑或增稠劑中的至少1種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蘆丁的工作濃度≥20μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物的劑型包括膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液、丸劑、注射劑、膏劑、脂質(zhì)體納米粒、緩釋劑、控釋劑或分散片。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒藥物的給藥途徑包括口服或靜脈注射。

8.一種治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的藥物，其特征在于，包括藥物活性成分和輔料，所述藥物活性成分為蘆丁。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于，所述藥物通過結(jié)合柯薩奇病毒b5的vp1蛋白，抑制柯薩奇病毒b5的復(fù)制。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種蘆丁在抗柯薩奇病毒藥物中的應(yīng)用，涉及藥物領(lǐng)域。蘆丁能夠通過范德華力、氫鍵與CVB5?3C蛋白靶標(biāo)高度穩(wěn)定結(jié)合，抑制柯薩奇病毒的復(fù)制，達(dá)到治療和/或預(yù)防柯薩奇病毒的效果。

技術(shù)研發(fā)人員：方智新,劉洪波,陳康虹,劉嘉昕,裘建香,龐澤芬,楊博
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣東省第二人民醫(yī)院（廣東省衛(wèi)生應(yīng)急醫(yī)院）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6