本發(fā)明涉及藥劑學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種阿托伐他汀鈣亞微乳劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

阿托伐他汀鈣(atorvastatincalcium,atc)是經(jīng)典的第三代他汀類降脂藥，商品名為立普妥，是由美國輝瑞制藥公司于1997年上市上產(chǎn)的，劑型為片劑。阿托伐他汀鈣能夠抑制肝臟的膽固醇以及hmg-coa還原酶的生物合成，以此來降低血清脂蛋白濃度和血漿中膽固醇濃度，而且還可以增加細(xì)胞表面的肝臟低密度脂蛋白(ldl)受體來增加ldl的攝取和分解代謝以此來減少ldl的生成。阿托伐他汀鈣能夠降低由于脂類代謝功能缺損患者血漿總膽固醇，載脂蛋白，甘油三酯以及l(fā)dl膽固醇的水平，同時(shí)其能夠明顯減輕由純合子和雜合子所致的家族性高膽固醇血癥和非家族性膽固醇血癥。由于阿托伐他汀鈣屬于bcsii類藥物，其較差的溶解性使得藥物在胃腸道內(nèi)溶出速率較慢導(dǎo)致了其絕對生物利用度僅有12％，hmg-coa還原酶抑制劑活性的生物利用度只有30％。

阿托伐他汀鈣較低的生物利用度主要源于較差的溶解性，酸性溶液中易降解為內(nèi)酯結(jié)構(gòu)以及體內(nèi)清除速率較快三方面原因。因此有研究人員采用新型技術(shù)制備阿托伐他汀鈣口服制劑以提高藥物的體內(nèi)生物利用度。專利201110078062.0采用環(huán)糊精作為輔料制備了阿托伐他汀鈣的包合物并以此壓片，專利結(jié)果表明該方法可提高藥物的溶解度和穩(wěn)定性。專利201410567515.x公開了一種阿托伐他汀鈣固體制劑組合物，該方法采用卡波姆、乙基纖維素、丙烯酸樹脂等作為輔料制備了載藥固體分散體并以此壓片，所得到片劑具有較好的溶解性并降低了給藥后胃部的副作用。專利201310725029.1公開了一種阿托伐他汀鈣納米脂質(zhì)載體及其制備方法，可提高藥物水溶性和穩(wěn)定性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，就是提出一種阿托伐他汀鈣亞微乳劑，其亞微乳劑平均粒徑小于150nm，能夠有效增加藥物的溶解度同時(shí)提高了藥物的體內(nèi)生物利用度，即改善藥物在小腸內(nèi)的吸收情況。

此外，本發(fā)明還提出了上述阿托伐他汀鈣亞微乳劑的制備方法，本方法可有效避免使用有機(jī)溶媒、具有工藝重現(xiàn)性好、質(zhì)量穩(wěn)定、產(chǎn)品生物利用度高等優(yōu)勢，可拓展阿托伐他汀鈣的服藥形式和改善體內(nèi)療效。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

一種阿托伐他汀鈣亞微乳劑，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：

其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在油相溶劑中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

作為優(yōu)選地，每100ml所述阿托伐他汀鈣亞微乳劑中包括如下組分：

作為優(yōu)選地，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物中的磷脂選自豆磷脂、卵磷脂或人工合成磷脂酰膽堿的至少一種。

作為優(yōu)選地，所述油相溶劑選自大豆油、中鏈甘油三酯、橄欖油、維生素e及維生素e酯中的至少一種。

作為優(yōu)選地，所述乳化劑選自卵磷脂、大豆磷脂、氫化磷脂中的至少一種。

作為優(yōu)選地，所述穩(wěn)定劑選自吐溫80、泊洛沙姆188、膽固醇硫酸酯鹽、油酸中的至少一種。

作為優(yōu)選地，所述電位調(diào)節(jié)劑選自油酸鈉、磷脂酰甘油鈉鹽、磷脂酸鈉鹽中的至少一種。電位調(diào)節(jié)劑的目的是使制得的乳滴表面帶負(fù)電，這樣由于同種電荷的排斥作用使得乳滴不容易聚集，增加乳劑的穩(wěn)定性，通常是其表面的zeta點(diǎn)位值穩(wěn)定在-25～-40mv之間可以認(rèn)為所制備乳劑穩(wěn)定性良好。

作為優(yōu)選地，所述阿托伐他汀鈣亞微乳劑的ph值范圍為4-9，通過加入hcl或naoh調(diào)節(jié)。

本發(fā)明還提出了上述阿托伐他汀鈣亞微乳劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)稱取油相溶劑加熱至50-85℃，并加入阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物，攪拌使之完全溶解形成溶液，作為油相；

(2)將水加熱至50-85℃，再依次加入乳化劑、穩(wěn)定劑、電位調(diào)節(jié)劑、甘油，攪拌形成溶液，作為水相；

(3)將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，緩慢滴加油相，在加熱保溫條件下，以6000-14000rpm高速剪切2～25min得到初乳；

(4)上述初乳中加入hcl或naoh調(diào)節(jié)ph值為4-9，加水補(bǔ)齊定容至100ml刻度，采用高壓均質(zhì)法在20℃～60℃下經(jīng)過200～1200bar的壓力均質(zhì)2～10次，得到阿托伐他汀鈣亞微乳劑；

(5)將制備的阿托伐他汀鈣亞微乳劑灌裝熔封后，在121℃下高壓滅菌15min得最終成品。

本發(fā)明對阿托伐他汀鈣亞微乳劑的處方工藝進(jìn)行了篩選優(yōu)化，具體是：以離心穩(wěn)定常數(shù)，平均粒徑，多分散系數(shù)作為指標(biāo)，對影響亞微乳質(zhì)量的處方因素(油相種類及用量，乳化劑種類及用量，穩(wěn)定劑種類及用量、電位調(diào)節(jié)劑及用量、載藥量)進(jìn)行考察并通過正交實(shí)驗(yàn)對進(jìn)一步優(yōu)化，獲得最優(yōu)的處方；對影響亞微乳質(zhì)量的工藝參數(shù)(剪切溫度、剪切速度、剪切時(shí)間、均質(zhì)溫度、均質(zhì)壓力、均質(zhì)循環(huán)次數(shù))進(jìn)行考察并再通過正交實(shí)驗(yàn)對制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，得出最佳的工藝參數(shù)和操作流程。

阿托伐他汀鈣屬于油水均難溶性藥物，本發(fā)明采用磷脂復(fù)合技術(shù)將阿托伐他汀鈣制備成磷脂復(fù)合物并以此作為藥物前體制備亞微乳劑。該亞微乳劑平均粒徑小于150nm，能夠有效增加藥物的溶解度同時(shí)提高了藥物的體內(nèi)生物利用度。該方法可有效避免使用有機(jī)溶媒、具有工藝重現(xiàn)性好、質(zhì)量穩(wěn)定、生物利用度高等優(yōu)勢，可拓展阿托伐他汀鈣的服藥形式和改善體內(nèi)療效。

發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，將阿托伐他汀鈣制備成亞微乳劑之后(水包油型乳劑)，其在口服給藥后相比市售制劑不僅提高了藥物的生物利用度，而且在體內(nèi)表現(xiàn)出了明顯緩慢釋放的效果。本發(fā)明所制備的阿托伐他汀鈣亞微乳劑具有以下特點(diǎn)：

(1)采用了阿托伐他汀鈣與磷脂復(fù)合的方法改善藥物在油相中的溶解度和穩(wěn)定性，藥物具有更長的儲(chǔ)存期。

(2)與納米粒載體、膠束載體、微球載體和自乳化載體等相比，阿托伐他汀鈣亞微乳劑避免使用較高濃度的有機(jī)溶媒，降低了潛在的毒副作用風(fēng)險(xiǎn)。

(3)阿托伐他汀鈣亞微乳劑制備工藝成熟、重現(xiàn)性好、方法穩(wěn)定，能夠進(jìn)行規(guī)?；呐可a(chǎn)。

(4)本發(fā)明制備的阿托伐他汀鈣亞微乳劑外觀呈乳白色，平均粒徑為120nm，ph為6.5，包封率為97.57％，經(jīng)穩(wěn)定性考察表明其性質(zhì)質(zhì)量良好。

附圖說明

圖1本發(fā)明制得的阿托伐他汀鈣亞微乳劑電鏡形態(tài)圖；

圖2本發(fā)明阿托伐他汀鈣亞微乳劑6個(gè)月內(nèi)的含量變化曲線；

圖3本發(fā)明阿托伐他汀鈣亞微乳劑與市售制劑的血藥濃度-時(shí)間曲線；

圖4本發(fā)明阿托伐他汀鈣亞微乳劑與市售制劑的不同腸段吸收速率比較。

具體實(shí)施方式

為讓本領(lǐng)域的技術(shù)人員更加清晰直觀的了解本發(fā)明，下文中將參考附圖并結(jié)合實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明。需要說明的是，在不沖突的情況下，本發(fā)明中的實(shí)施例及實(shí)施例中的特征可以相互組合。

本發(fā)明中考察載藥亞微乳劑性質(zhì)的評價(jià)指標(biāo)：

在進(jìn)行單因素考察的過程中，以離心穩(wěn)定常數(shù)ke，平均粒徑s，多分散系數(shù)pdi三個(gè)指標(biāo)來對制備的亞微乳進(jìn)行評價(jià)。

在進(jìn)行正交優(yōu)化的過程中，將以上三個(gè)指標(biāo)進(jìn)行加權(quán)評分，評分越小表明所制備亞微乳的質(zhì)量越優(yōu)。具體評分規(guī)則為：w＝(s/smax+pdi/pdimax+ke/kemax)×100，其中s為粒徑，smax為所測最大粒徑；pdi為分散系數(shù)，pdimax為所測最大粒徑分散系數(shù)；ke為離心穩(wěn)定常數(shù)，kemax為所測最大離心穩(wěn)定常數(shù)。

本發(fā)明中所用阿托伐他汀鈣純度＞99％，批號(hào)：2015123304，市售品立普妥(阿托伐他汀鈣片)由輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格為20m，批號(hào)：n08117。

實(shí)施例1

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、5.0g大豆油、0.40g卵磷脂、0.40g泊洛沙姆188、0.20g吐溫80、0.024g油酸鈉、1.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到5.0g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取0.40g卵磷脂，0.40g泊洛沙姆188，0.20g吐溫80，0.024g油酸鈉，1.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。加入鹽酸或者氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)終乳ph值至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例2

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、10.0g大豆油、0.67g卵磷脂、0.67g泊洛沙姆188、0.20g吐溫80、0.024g油酸鈉、2.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到10.0g大豆油作為油相中，于60℃水浴加熱。稱取0.67g卵磷脂，0.67g泊洛沙姆188，0.20g吐溫80，0.024g油酸鈉，2.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。加入鹽酸或者氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例3

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、5.0g大豆油、0.80g卵磷脂、0.40g泊洛沙姆188、0.20g吐溫80、0.024g油酸鈉、1.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到5.0g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取0.80g卵磷脂，0.40g泊洛沙姆188，0.20g吐溫80，0.024g油酸鈉，1.0g甘油于適量70℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例4

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：1.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、10.0g大豆油、1.6g卵磷脂、1.6g泊洛沙姆188、0.60g吐溫80、0.08g油酸鈉、2.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取1.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到10.0g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取1.6g卵磷脂，1.6g泊洛沙姆188，0.6g吐溫80，0.08g油酸鈉，2.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例5

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：1.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、15g大豆油、1.2g卵磷脂、1.8g泊洛沙姆188、0.6g吐溫80、0.1g油酸鈉、3.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取1.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到15g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取1.2g卵磷脂，1.8g泊洛沙姆188，0.6g吐溫80，0.1g油酸鈉，3.0g甘油于適量70℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例6

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：2.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、20g大豆油、1.80g卵磷脂、2.40g泊洛沙姆188、3.20g吐溫80、0.14g油酸鈉、4.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取2.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到20g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取1.8g卵磷脂，2.4g泊洛沙姆188，3.2g吐溫80，0.14g油酸鈉，4.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例7

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：3.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、30g大豆油、2.4g卵磷脂、3.6g泊洛沙姆188、3.33g吐溫80、0.12g油酸鈉、5.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取3.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到30g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取2.4g卵磷脂，3.6g泊洛沙姆188，3.33g吐溫80，0.12g油酸鈉，5.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在10000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切5min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1000bar壓力在20℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例8

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：2.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、25g大豆油、0.4g卵磷脂、0.60g泊洛沙姆188、0.8g吐溫80、0.03g油酸鈉、5.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取2.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到25g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取0.40g卵磷脂，0.60g泊洛沙姆188，0.80g吐溫80，0.03g油酸鈉，5.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在8000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切7min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用800bar壓力在30℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例9

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：1.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、15g大豆油、2.40g卵磷脂、1.8g泊洛沙姆188、2.4g吐溫80、0.18g油酸鈉、3.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取1.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到15g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取2.40g卵磷脂，1.80g泊洛沙姆188，2.40g吐溫80，0.18g油酸鈉，3.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在14000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切20min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1200bar壓力在40℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例10

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、20g大豆油、1.20g卵磷脂、2.4g泊洛沙姆188、4.0g吐溫80、0.15g油酸鈉、4.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到20g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取1.20g卵磷脂，2.40g泊洛沙姆188，4.0g吐溫80，0.15g油酸鈉，4.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在14000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切20min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1200bar壓力在40℃下循環(huán)5次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例11

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、5.0g大豆油、0.80g卵磷脂、0.60g泊洛沙姆188、0.80g吐溫80、0.03g油酸鈉、1.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取0.5g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到5.0g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取0.80g卵磷脂，0.60g泊洛沙姆188，0.80g吐溫80，0.03g油酸鈉，1.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在14000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切20min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1200bar壓力在20℃下循環(huán)6次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

實(shí)例12

本實(shí)施例的阿托伐他汀鈣亞微乳，每100ml亞微乳劑中包括如下組分：3.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物、30g大豆油、4.0g卵磷脂、3.0g泊洛沙姆188、4.0g吐溫80、0.15g油酸鈉、5.0g甘油以及加至100ml的蒸餾水，其中，所述阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物作為前體藥物，以增加阿托伐他汀鈣在大豆油中的溶解度，阿托伐他汀鈣與磷脂的摩爾比為1:1。

制備上述阿托伐他汀鈣亞微乳的步驟如下：稱取3.0g阿托伐他汀鈣磷脂復(fù)合物加入到30g大豆油作為油相，于60℃水浴加熱。稱取4.0g卵磷脂，3.0g泊洛沙姆188，4.0g吐溫80，0.15g油酸鈉，5.0g甘油于適量60℃的蒸餾水作為水相。將水相加入到100ml塑料離心管中，置于高速分散機(jī)，將分散機(jī)機(jī)探頭浸入水相中，在12000rpm剪切速度下，緩慢滴加油相，剪切10min。剪切結(jié)束后，補(bǔ)加蒸餾水定容至100ml，攪拌除去氣泡冷卻至室溫得初乳。接著采用1200bar壓力在20℃下循環(huán)6次，最終得終乳。調(diào)節(jié)終乳ph至7.5左右，安瓿充氮?dú)夤嘌b，121℃高壓滅菌15min得成品。對制備的亞微乳進(jìn)行粒徑，離心穩(wěn)定常數(shù)，多分散系數(shù)進(jìn)行測定。

為了篩選優(yōu)化本發(fā)明中阿托伐他汀鈣的制備工藝和處方組成，本發(fā)明進(jìn)行了各項(xiàng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究，具體如下。

①處方組成的篩選優(yōu)化

根據(jù)處方考察結(jié)果，選擇顯著性的影響因素，每個(gè)因素選取4個(gè)不同水平，使用spss軟件生成5因素4水平的正交表。評分所得越小，說明其制備的乳劑穩(wěn)定性良好，粒徑小而均勻。正交實(shí)驗(yàn)水平因素設(shè)計(jì)表如表1所示，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

表1正交實(shí)驗(yàn)水平因素表

表2正交實(shí)驗(yàn)方差結(jié)果分析

結(jié)果顯示5個(gè)因素中對于亞微乳影響程度的大小順序?yàn)橛拖嗳軇┯昧浚静绰迳衬?88＞油酸鈉＞吐溫80＞卵磷脂。根據(jù)對正交實(shí)驗(yàn)的方差分析結(jié)果，采用最佳處方制備的阿托伐他汀鈣亞微乳外觀良好，乳液粘度低，沒有掛壁現(xiàn)象。

②制備工藝的篩選優(yōu)化

根據(jù)單因素考察亞微乳制備過程中的各個(gè)因素對于乳劑質(zhì)量的影響，確定了影響顯著的因素包括剪切溫度，均質(zhì)壓力，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)和均值溫度，設(shè)計(jì)4因素3水平試驗(yàn)，進(jìn)行最佳制備工藝的正交優(yōu)化，因素水平表如表3所示，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4所示。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各因素的影響程度分別是a＞b＞d＞c，根據(jù)極差結(jié)果分析確定的最佳工藝組合為a3b3c1d2，即最佳的制備工藝為剪切溫度70℃，高壓均質(zhì)壓力1200bar，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)7次，均質(zhì)溫度30℃，照此工藝條件所制備的亞微乳粒徑較小且分布均勻，亞微乳呈乳白色，黏度低，無掛壁現(xiàn)象，滅菌后乳劑穩(wěn)定性良好。

表3正交實(shí)驗(yàn)水平因素表

表4工藝優(yōu)化正交實(shí)驗(yàn)方案

③阿托伐他汀鈣亞微乳的最佳處方工藝驗(yàn)證

依據(jù)最佳處方工藝制備三批亞微乳(以實(shí)施例8為例)，觀察期外觀和形態(tài)，并對粒徑，電位，ph值，含量和包封率進(jìn)行測定。結(jié)果顯示所制備亞微乳其外觀乳白，無明顯掛壁，伴有淡藍(lán)色乳光，其離心穩(wěn)定性好，平均粒徑為124.7nm，平均包封率可達(dá)97.1％。形態(tài)和測定如圖1和表5所示。

表5三批乳劑評價(jià)結(jié)果

④阿托伐他汀鈣亞微乳的穩(wěn)定性考察

所制備的亞微乳(以實(shí)施例8為例)經(jīng)高壓滅菌后進(jìn)行長期儲(chǔ)存其外觀，ph值，粒徑，含量和包封率均未發(fā)生明顯改變，表明制備的亞微乳穩(wěn)定性良好。結(jié)果研究表明無論在4℃還是在室溫下儲(chǔ)存，體系的ph沒有明顯變化；在考察期內(nèi)，乳滴粒徑未見明顯的變化；自制的三批亞微乳樣品的6個(gè)月的平均包封率為97.54％，表明藥物絕大部分分布于油相中；含量的測定表明亞微乳作為阿托伐他汀鈣的載體能夠保證其在儲(chǔ)存過程中的穩(wěn)定性，室溫和4℃下存放六個(gè)月其含量基本沒有變化，如圖2所示。

表6亞微乳ph考察結(jié)果

表7亞微乳粒徑考察結(jié)果(單位nm)

表8亞微乳包封率考察結(jié)果(％)

⑤阿托伐他汀鈣亞微乳的體內(nèi)生物利用度

阿托伐他汀鈣亞微乳(以實(shí)施例8為例)與市售制劑生物利用度的比較。采用口服灌胃的方法比較阿托伐他汀鈣亞微乳和市售制劑立普妥的口服生物利用度，采用hplc法測定不同時(shí)間的血藥濃度變化，繪制藥時(shí)曲線，運(yùn)用das3.0軟件對藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

結(jié)果表明市售制劑達(dá)峰時(shí)間為0.5h，阿托伐他汀鈣亞微乳的達(dá)峰時(shí)間略有延長至0.75h。二者cmax分別為0.531mg/l和0.801mg/l，亞微乳組比市售制劑組提高1.62倍。亞微乳組的藥時(shí)曲線下面積(auc)為4.03mg/l·h，較市售組(1.72mg/l·h)提高了2.34倍，且半衰期明顯延長，吸收速率常數(shù)顯著增加，說明阿托伐他汀鈣亞微乳可以有效促進(jìn)藥物的體內(nèi)吸收，改善體循環(huán)時(shí)間并顯著提高生物利用度，相關(guān)藥動(dòng)學(xué)曲線及參數(shù)見圖3和表9。

表9體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

⑥阿托伐他汀鈣亞微乳的在體腸灌流實(shí)驗(yàn)

采用大鼠小腸灌流的方法來比較阿托伐他汀鈣亞微乳(以實(shí)施例8為例)和市售片劑在十二指腸，回腸，空腸，結(jié)腸的吸收情況。根據(jù)不同時(shí)間腸灌流液中的剩余藥量，求算出不同腸段的吸收速率常數(shù)和表觀滲透系數(shù)。其中吸收速率常數(shù)ka的計(jì)算如下：

lnxt＝-ka·t+lnx0

lnxt＝-ka·t+lnx0

其中xt是時(shí)間t是灌流液中剩余的藥量，x0是時(shí)間t＝0時(shí)灌流液中的藥物量。

圖4結(jié)果顯示阿托伐他汀鈣在四個(gè)腸段的吸收沒明顯差異，其在四個(gè)腸段的吸收情況為十二指腸＞回腸＞空腸≈結(jié)腸，相對來說阿托伐他汀鈣在十二指腸吸收較好。而將阿托伐他汀鈣制備成亞微乳后能夠促進(jìn)其在各個(gè)腸段的吸收，尤其在結(jié)腸吸收改變最明顯，表明了阿托伐他汀鈣亞微乳能夠明顯改善其在結(jié)腸段的吸收情況，制備成亞微乳后其在各腸段的吸收情況為結(jié)腸＞十二指腸＞空腸＞回腸。

需要說明的是，對于前述的方法實(shí)施例，其中各組分的選擇，可以做相應(yīng)的更換，并不限于上述實(shí)施例公開的選擇，具體參照說明書中發(fā)明內(nèi)容公開的為準(zhǔn)，只需各組分間比例符合比例即可。

另應(yīng)說明的是：以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其限制；盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：其依然可以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實(shí)施例技術(shù)方案的精神和范圍。