本發(fā)明涉及一種活性外敷精華液及其制備方法，特別涉及一種具有消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白功效的活性外敷精華液及其制備方法。本發(fā)明屬于化妝品
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：痤瘡又名青春癥痘、暗瘡或粉刺，是毛囊皮脂腺單位的一種慢性炎癥性皮膚病，主要好發(fā)于青少年。臨床表現(xiàn)以好發(fā)于面部的粉刺、丘疹、膿皰、結(jié)節(jié)等多形性皮損為特點(diǎn)。痤瘡的發(fā)生主要與皮脂分泌過(guò)多、毛囊皮脂腺導(dǎo)管堵塞、細(xì)菌感染和炎癥反應(yīng)等因素密切相關(guān)。進(jìn)入青春期后人體內(nèi)雄激素特別是睪酮的水平迅速升高，促進(jìn)皮脂腺發(fā)育并產(chǎn)生大量皮脂。同時(shí)毛囊皮脂腺導(dǎo)管的角化異常造成導(dǎo)管堵塞，皮脂排出障礙，形成角質(zhì)栓即微粉刺。毛囊中多種微生物尤其是痤瘡丙酸桿菌大量繁殖，痤瘡丙酸桿菌產(chǎn)生的脂酶分解皮脂生成游離脂肪酸，同時(shí)趨化炎癥細(xì)胞和介質(zhì)，最終誘導(dǎo)并加重炎癥反應(yīng)。目前，市場(chǎng)上治療痤瘡的化妝品多添加了化學(xué)殺菌劑、激素、收斂劑、抗炎劑等，雖能在短時(shí)間內(nèi)殺菌或消除炎癥，但對(duì)皮膚刺激性大，長(zhǎng)期使用會(huì)增加皮膚負(fù)擔(dān)，并易引起皮膚紅腫、化膿或疼痛等過(guò)敏癥狀，而且由于病原菌極易產(chǎn)生耐藥性，青春癥很快會(huì)復(fù)發(fā)，易形成癲痕或色素沉著。近年來(lái)，植物提取物作為護(hù)膚品的添加劑，具有綠色安全、藥效穩(wěn)定持久、療效顯著以及對(duì)皮膚作用溫等優(yōu)勢(shì)，得到廣大消費(fèi)者的青睞和認(rèn)可。鑒于此，本發(fā)明提出了一種兼具消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白功效的活性外敷精華液及其制備方法，其一方面可以減少痤瘡所導(dǎo)致的皮膚紅腫、化膿或疼痛等癥狀，另一方面還可以促進(jìn)肌膚修復(fù)再生，極大減少了痤瘡愈合后的瘢痕以及色素沉著等問(wèn)題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白功效的活性外敷精華液及其制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)手段：本發(fā)明的一種具有消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白功效的活性外敷精華液，其由a相、b相、c相、d相以及e相組成；其中，所述a相由甘油硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、異壬酸異壬酯、霍霍巴油、摩洛哥阿甘油、瓊崖海棠油、肉豆蔻酸異丙酯、硬脂酸辛酯、亞油酸以及辛酸/癸酸甘油三酯組成；所述b相由黃原膠、丙二醇、丁二醇、海藻糖、l-吡咯烷酮羧鈉以及水組成；所述c相為氫化蓖麻油、va棕櫚酸酯、ve醋酸酯以及透明質(zhì)酸組成；所述d相由植物提取物、煙酰胺以及防腐劑組成：所述的植物提取物由以下重量份的各原料組成：木通提取物20-40重量份、白芷提取物15-25重量份、槐花提取物10-20重量份、天花粉提取物10-20重量份、夜交藤提取物10-20重量份、虎杖提取物15-25重量份、江南卷柏提取物15-25重量份、蘆薈提取物10-20重量份以及薄荷提取物5-10重量份組成；所述e相由ph調(diào)節(jié)劑組成，調(diào)節(jié)制劑ph＝6.0。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的植物提取物由以下重量份的各原料組成：木通提取物30重量份、白芷提取物20重量份、槐花提取物15重量份、天花粉提取物15重量份、夜交藤提取物15重量份、虎杖提取物20重量份、江南卷柏提取物20重量份、蘆薈提取物15重量份以及薄荷提取物8重量份組成。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的透明質(zhì)酸由分子量為1800000～2200000da的大分子量透明質(zhì)酸、分子量為1000000～1800000da的中分子量透明質(zhì)酸以及分子量為400000～1000000da的大分子量透明質(zhì)酸按照重量比為1:1:1混合而成。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，各原料在所述活性外敷精華液(除e相外)中所占的重量百分比分別為：甘油硬脂酸酯1.5～6.0％、聚二甲基硅氧烷0.1～4.0％、異壬酸異壬酯0.1～3.0％、霍霍巴油0.5～3.0％、摩洛哥阿甘油0.5～3.0％、瓊崖海棠油3～5.0％、肉豆蔻酸異丙酯0.5～3.0％、硬脂酸辛酯0.5～5.0％、亞油酸0.1～3.0％、辛酸/癸酸甘油三酯1.0～5.0％、黃原膠0.05～0.2％、丙二醇1～3.0％、丁二醇0.1～3.0％、海藻糖0.05-1.0％、l-吡咯烷酮羧鈉0.5～2.0％、氫化蓖麻油0.5-3.0％、va棕櫚酸酯0.05～1％、ve醋酸酯0.05～0.5％、透明質(zhì)酸0.05～0.5％、植物提取物0.5-5.0％、煙酰胺0.1～2％、防腐劑0.05～0.2％，余量為水。更優(yōu)選的，各原料在所述活性外敷精華液(除e相外)中所占的重量百分比分別為：甘油硬脂酸酯3.5％、聚二甲基硅氧烷2.0％、異壬酸異壬酯1.5％、霍霍巴油1.5％、摩洛哥阿甘油1.5％、瓊崖海棠油4.0％、肉豆蔻酸異丙酯1.5％、硬脂酸辛酯2.5％、亞油酸1.5％、辛酸/癸酸甘油三酯2.0％、黃原膠0.1％、丙二醇2.0％、丁二醇1.5％、海藻糖0.5％、l-吡咯烷酮羧鈉1.0％、氫化蓖麻油1.5％、va棕櫚酸酯0.5％、ve醋酸酯0.1％、透明質(zhì)酸0.3％、植物提取物5.0％、煙酰胺2.0％、防腐劑0.1％，余量為水。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述防腐劑選自苯氧乙醇、辛甘醇、季銨鹽-15和脫氫醋酸中的一種或多種。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的木通提取物、白芷提取物、槐花提取物、天花粉提取物、夜交藤提取物、虎杖提取物、江南卷柏提取物、蘆薈提取物以及薄荷提取物分別按照以下方法制備得到：(1)將植物原料洗凈、干燥、粉碎后，并過(guò)20目篩；(2)將過(guò)篩后的粉末用體積百分比為60％～95％的乙醇在75～85℃下進(jìn)行回流提取，原料藥與乙醇質(zhì)量體積比g/ml為1～3:10～50，回流提取3-5h，共進(jìn)行3-4次，然后將提取液合并；剩余殘?jiān)捎脽崴M(jìn)行浸提2-3次，每次3-5h，將提取液與步驟(2)的提取液合并后冷卻至20℃～30℃，50～100目濾布過(guò)濾，得濾液；(4)向步驟(3)得到的濾液中加入與乙醇相同體積量的1，3-丁二醇混溶均勻，減壓濃縮出溶液中的乙醇，然后真空減壓抽濾，濾液經(jīng)活性炭脫色，冷凍干燥即得；(5)將按照步驟(1)-(4)得到的木通提取物、白芷提取物、槐花提取物、天花粉提取物、夜交藤提取物、虎杖提取物、江南卷柏提取物、蘆薈提取物以及薄荷提取物按照所述的重量份混合均勻即為所述的植物提取物。進(jìn)一步的，本發(fā)明還提出了一種制備所述活性外敷精華液的方法，包括如下步驟：(1)按照所述的重量百分比稱(chēng)取以下各原料：甘油硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、異壬酸異壬酯、霍霍巴油、摩洛哥阿甘油、瓊崖海棠油、肉豆蔻酸異丙酯、硬脂酸辛酯、亞油酸、辛酸/癸酸甘油三酯、黃原膠、丙二醇、丁二醇、海藻糖、l-吡咯烷酮羧鈉、氫化蓖麻油、va棕櫚酸酯、ve醋酸酯、透明質(zhì)酸以及植物提取物；(2)將甘油硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、異壬酸異壬酯、霍霍巴油、摩洛哥阿甘油、瓊崖海棠油、肉豆蔻酸異丙酯、硬脂酸辛酯、亞油酸以及辛酸/癸酸甘油三酯混合后，加熱至80～85℃，混勻，得到a相；(3)將黃原膠、丙二醇、丁二醇、海藻糖、l-吡咯烷酮羧鈉以及2/3體積的水混合后，加熱至80～85℃，混勻，得到b相；(4)將a相全部加入到b相中，2000～3000r/min，均質(zhì)5min～10min；依次加入氫化蓖麻油、va棕櫚酸酯、ve醋酸酯以及透明質(zhì)酸，2000～3000r/min，均質(zhì)1～3min；30～50r/min，攪拌5～10min后，開(kāi)始攪拌降溫，攪拌速率為30～50r/min，降溫速率為1～2℃/min；(5)向植物提取物中加入剩余的1/3體積的水，溶解完全后，加入溫度降到45～50℃的步驟(4)得到的混合物中，再加入煙酰胺以及防腐劑，攪拌均勻，繼續(xù)降溫至40℃以下；(6)使用ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)制劑ph＝6.0，即得。相較于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果在于：1、本發(fā)明發(fā)明人在通曉痤瘡的病因病理、辨證審因的基礎(chǔ)上，從眾多原料藥中選擇木通提取物、白芷提取物、槐花提取物、天花粉提取物、夜交藤提取物、虎杖提取物、江南卷柏提取物、蘆薈提取物以及薄荷提取物作為原料藥，按照組方原則，酌定用量，明確君、臣、佐、使的不同地位及其相互配伍關(guān)系，使其發(fā)揮其綜合作用，制約其不利因素，使之用藥適宜，配伍嚴(yán)謹(jǐn)，主次分明，恰合病情，無(wú)實(shí)實(shí)，無(wú)虛虛，取得了良好的治療效果。特別是木通提取物的加入不可預(yù)期的提高了原有藥物的療效，使得本產(chǎn)品的功效大大增加；2、本發(fā)明在配方中加入了瓊崖海棠油，瓊崖海棠油是一種優(yōu)秀的外用愈合劑，可以幫助恢復(fù)皮膚健康，抗炎癥、抗感染、抗菌和抗氧化，能夠加速皮膚組織生長(zhǎng)，促進(jìn)新表皮形成。但瓊崖海棠油本身具有嗆鼻的味道，但配合本發(fā)明的植物提取物使用，植物提取物自帶的清香調(diào)和了這種嗆鼻的味道，使得本產(chǎn)品在不含任何人工香精的基礎(chǔ)上，具有淡淡地花草香味；3、研究發(fā)現(xiàn)，引起痤瘡的原因中，缺水是一個(gè)關(guān)鍵所在，因?yàn)榧∧w缺水自然會(huì)刺激毛孔排出油脂，造成毛孔阻塞引起痤瘡。因此，本發(fā)明在配方中加了不同分子量的透明質(zhì)酸。不同分子量的透明質(zhì)酸滲入肌膚的能力不同，所帶來(lái)的功效也有所不同，大分子量透明質(zhì)酸具有防止脫水，組織細(xì)胞再生，緊致肌膚的作用，中分子量透明質(zhì)酸具有緊致肌膚,使皮膚長(zhǎng)久保濕的作用，小分子量透明質(zhì)酸具有快速與細(xì)胞發(fā)生水合作用，保持細(xì)胞水分的作用。本發(fā)明采用將三種分子量的透明質(zhì)酸配合使用，提高了產(chǎn)品所具有的保濕，保水功效。4、為了提高產(chǎn)品的美白效果，本發(fā)明在配方中加入了煙酰胺，煙酰胺是極少的具有保濕美白抗皺抗痘的全效護(hù)膚成分，但煙酰胺在ph值不為6的水溶液中會(huì)水解為對(duì)皮膚刺激強(qiáng)的煙酸，所以本發(fā)明使用ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)制劑ph＝6.0，大大降低了煙酰胺的水解，并且嚴(yán)格控制用量，保證了其對(duì)皮膚的安全性；5、實(shí)驗(yàn)證實(shí)本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)皮膚安全無(wú)刺激，具有顯著的消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白的功效，進(jìn)而能夠達(dá)到治療痤瘡的目的。本發(fā)明原材料獲取容易、制備方法簡(jiǎn)便，綠色安全，具有很好的應(yīng)用前景和市場(chǎng)前景。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，不應(yīng)理解為是對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1植物提取物的制備(1)分別將木通莖藤、白芷、槐花、天花粉、夜交藤、虎杖、江南卷柏、蘆薈以及薄荷這九種植物原料洗凈、干燥、粉碎后，過(guò)20目篩，得到的粉末分別按照步驟(2)-(4)進(jìn)行提?。?2)用體積百分比為90％的乙醇在80℃下進(jìn)行回流提取，原料藥與乙醇質(zhì)量體積比g/ml為1:20，回流提取4h，共進(jìn)行4次，然后將提取液合并；(3)剩余殘?jiān)捎脽崴M(jìn)行浸提3次，每次4h，將提取液與步驟(2)的提取液合并后冷卻至20℃～30℃，100目濾布過(guò)濾，得濾液；(4)向步驟(3)得到的濾液中加入與乙醇相同體積量的1，3-丁二醇混溶均勻，減壓濃縮出溶液中的乙醇，然后真空減壓抽濾，收集濾液，濾液經(jīng)活性炭脫色，冷凍干燥得到木通提取物、白芷提取物、槐花提取物、天花粉提取物、夜交藤提取物、虎杖提取物、江南卷柏提取物、蘆薈提取物以及薄荷提取物；(5)將得到的木通提取物、白芷提取物、槐花提取物、天花粉提取物、夜交藤提取物、虎杖提取物、江南卷柏提取物、蘆薈提取物以及薄荷提取物按以下重量份配比混勻，即為所述的植物提取物：木通提取物30重量份、白芷提取物20重量份、槐花提取物15重量份、天花粉提取物15重量份、夜交藤提取物15重量份、虎杖提取物20重量份、江南卷柏提取物20重量份、蘆薈提取物15重量份以及薄荷提取物8重量份。實(shí)施例2具有消炎、促進(jìn)肌膚修復(fù)再生以及美白功效的活性外敷精華液1、配方按重量百分比計(jì)算，甘油硬脂酸酯3.5％、聚二甲基硅氧烷2.0％、異壬酸異壬酯1.5％、霍霍巴油1.5％、摩洛哥阿甘油1.5％、瓊崖海棠油4.0％、肉豆蔻酸異丙酯1.5％、硬脂酸辛酯2.5％、亞油酸1.5％、辛酸/癸酸甘油三酯2.0％、黃原膠0.1％、丙二醇2.0％、丁二醇1.5％、海藻糖0.5％、l-吡咯烷酮羧鈉1.0％、氫化蓖麻油1.5％、va棕櫚酸酯0.5％、ve醋酸酯0.1％、透明質(zhì)酸0.3％、實(shí)施例1制備得到的植物提取物5.0％、煙酰胺2.0％、防腐劑(苯氧乙醇)0.1％，水補(bǔ)足100％。所述的透明質(zhì)酸由分子量為1800000～2200000da的大分子量透明質(zhì)酸、分子量為1000000～1800000da的中分子量透明質(zhì)酸以及分子量為400000～1000000da的大分子量透明質(zhì)酸按照重量比為1:1:1混合而成。2、方法(1)將甘油硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、異壬酸異壬酯、霍霍巴油、摩洛哥阿甘油、瓊崖海棠油、肉豆蔻酸異丙酯、硬脂酸辛酯、亞油酸以及辛酸/癸酸甘油三酯混合后，加熱至80℃，混勻，得到a相；(3)將黃原膠、丙二醇、丁二醇、海藻糖、l-吡咯烷酮羧鈉以及水混合后，加熱至80℃，混勻，得到b相；(4)將a相全部加入到b相中，2000r/min，均質(zhì)10min；依次加入氫化蓖麻油、va棕櫚酸酯、ve醋酸酯以及透明質(zhì)酸，2000r/min，均質(zhì)3min；50r/min，攪拌10min后，開(kāi)始攪拌降溫，攪拌速率為50r/min，降溫速率為2℃/min；(5)向植物提取物中加入剩余的1/3體積的水，溶解完全后，加入溫度降到45℃的步驟(4)得到的混合物中，再加入煙酰胺以及苯氧乙醇，攪拌均勻，繼續(xù)降溫至40℃以下；(6)使用ph調(diào)節(jié)劑(naoh溶液)調(diào)節(jié)制劑ph＝6.0，即得。對(duì)比例1對(duì)比例1的區(qū)別僅在于配方中不加入木通提取物。對(duì)比例2對(duì)比例1的區(qū)別僅在于配方中不加入植物提取物。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明產(chǎn)品中植物提取物部分的抗炎活性評(píng)價(jià)透明質(zhì)酸酶和胰蛋白酶是炎癥發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中的重要酶類(lèi)物質(zhì)，降低或抑制這兩種酶的活性是防止炎癥發(fā)生的有效途徑，本實(shí)施例通過(guò)研究本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)于透明質(zhì)酸酶的抑制效果來(lái)說(shuō)明本發(fā)明產(chǎn)品中植物提取物部分的消炎功效。實(shí)驗(yàn)組i：植物提取物i，按照實(shí)施例1方法制備實(shí)驗(yàn)組ii：植物提取物ii，按照實(shí)施例1方法制備，區(qū)別在于不含有木通提取物實(shí)驗(yàn)組ii：木通提取物，按照實(shí)施例1方法制備以上植物提取物均加入10倍重量蒸餾水進(jìn)行溶解，配制成溶液用于以下實(shí)驗(yàn)。透明質(zhì)酸酶體外抑制實(shí)驗(yàn)采用elson-morgan法進(jìn)行：取0.1ml0.25mmol/lcacl2溶液和0.5ml透明質(zhì)酸酶液37℃保溫培養(yǎng)20min；分別加入實(shí)驗(yàn)組i、實(shí)驗(yàn)組ii以及實(shí)驗(yàn)組iii的植物提取物0.5ml，1ml以及1.5ml，繼續(xù)37℃保溫培養(yǎng)20min；加入0.5ml1250ug/ml的透明質(zhì)酸鈉液37℃保溫30min，常溫放置5min；加入0.1ml0.4mol/lnaoh溶液和0.5ml乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加熱15min后立即用冰水進(jìn)行冷卻5min；加入埃爾利希試劑1.0ml并用3.0ml無(wú)水乙醇進(jìn)行稀釋?zhuān)胖?0min顯色，用分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度值，以醋酸緩沖溶液作為對(duì)照溶液。計(jì)算公式：式中：a——對(duì)照溶液abs值b——對(duì)照空白溶液abs值c——試樣溶液abs值d——試樣空白溶液abs值實(shí)驗(yàn)組i-11i組體外對(duì)透明質(zhì)酸酶抑制作用見(jiàn)表1，由表1可知，實(shí)驗(yàn)組i以及實(shí)驗(yàn)組ii的植物提取物對(duì)透明質(zhì)酸酶均具有顯著的抑制作用，但實(shí)驗(yàn)組i的透明質(zhì)酸酶抑制率顯著高于實(shí)驗(yàn)組ii，而單純加入木通提取物的組抑制率相對(duì)較低，這就說(shuō)明了木通提取物與其他組分具有協(xié)同促進(jìn)作用，從而提高了植物組合物的消炎功效。表1透明質(zhì)酸酶抑制率實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明產(chǎn)品中植物提取物部分的抑制酪氨酸酶活性評(píng)價(jià)1、材料：酪氨酸酶、l-酪氨酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉恒溫儀、紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)組i：植物提取物按照實(shí)施例1方法制備實(shí)驗(yàn)組ii：植物提取物按照實(shí)施例1方法制備，區(qū)別在于不含有木通提取物。實(shí)驗(yàn)組iii：木通提取物，按照實(shí)施例1方法制備以上植物提取物均加入10倍重量蒸餾水進(jìn)行溶解，配制成溶液用于以下實(shí)驗(yàn)。2試劑配制：1)磷酸鈉緩沖液(1/15mol/l，ph＝6.8)：精確稱(chēng)取1.000g磷酸二氫鈉，1.186g磷酸氫二鈉，加入少量去離子水溶解后，定容至500ml，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?)l-酪氨酸溶液(7.5mmol/l)：精確稱(chēng)取l-酪氨酸0.272g，先加入數(shù)滴濃鹽酸，加去離子水約50ml，微熱完全溶解后，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph至7左右，加去離子水定容至200ml。3、檢測(cè)方法總反應(yīng)體系為5ml。實(shí)驗(yàn)時(shí)，向試管中依次加入磷酸鈉緩沖液、不同體積的受試液、酶液，于30℃水浴10min。然后加入底物l-酪氨酸，立即開(kāi)始計(jì)時(shí)。測(cè)定反應(yīng)20min時(shí)475nm波長(zhǎng)下的吸光值。測(cè)定時(shí)，以相應(yīng)的陰性對(duì)照為參比，用下列公式分別計(jì)算實(shí)驗(yàn)組i-iii對(duì)酪氨酸酶的抑制率，并依據(jù)濃度-酶抑制率曲線(xiàn)估計(jì)半數(shù)抑制濃度(ic50)的近似值。抑制率＝[(a-b)/a]×l00％其中，“a”為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的吸光值，“b”為受試液的吸光值。每個(gè)實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行。抑制率高表明其對(duì)酪氨酸酶活性的抑制強(qiáng)度高。4、結(jié)果實(shí)驗(yàn)組i-iii對(duì)酪氨酸酶體外抑制作用見(jiàn)表2，由表2可知，實(shí)驗(yàn)組i以及實(shí)驗(yàn)組ii的植物提取物對(duì)酪氨酸酶均具有一定的抑制作用，但實(shí)驗(yàn)組i的透明質(zhì)酸酶抑制率稍高于實(shí)驗(yàn)組ii，而單純加入木通提取物的組抑制率相對(duì)較低，這就說(shuō)明了木通提取物與其他組分具有一定的協(xié)同促進(jìn)作用，從而提高了植物組合物抑制酪氨酸酶的功效。表2酪氨酸酶抑制率實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明產(chǎn)品中植物提取物部分對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑制效果1、受試菌種痤瘡丙酸桿菌凍干菌種atcc11827。2、供試培養(yǎng)基改良gam肉湯培養(yǎng)基中加入10％羊血和2％瓊脂，加熱溶解，115℃高壓滅菌15min，傾倒在平板培養(yǎng)皿內(nèi)，以此用作凍干菌的復(fù)蘇平板和斜面培養(yǎng)基。3、菌懸液的制備利用平板劃線(xiàn)法將凍干菌株接種至平板內(nèi)，37℃厭氧培養(yǎng)72h后，挑取單個(gè)生長(zhǎng)的菌落，接種至改良gam肉湯培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24h，以此為菌懸液。4、受試材料：實(shí)驗(yàn)組i：植物提取物按照實(shí)施例1方法制備實(shí)驗(yàn)組ii：植物提取物按照實(shí)施例1方法制備，區(qū)別在于不含有木通提取物。實(shí)驗(yàn)組iii：木通提取物，按照實(shí)施例1方法制備以上植物提取物均加入10倍重量蒸餾水進(jìn)行溶解，配制成溶液用于以下實(shí)驗(yàn)。5、抑菌實(shí)驗(yàn)具體步驟：采用濾紙片擴(kuò)散法，無(wú)菌條件下進(jìn)行，將濾紙用打孔器打成直徑6mm的圓形濾紙片，置于潔凈干凈的小燒杯，115℃干熱滅菌20min后，分別放入已滅菌實(shí)驗(yàn)組i-iii的樣品液中充分浸泡，每種樣品液中放入8片濾紙片。將已配制好的供試培養(yǎng)基融化，分別倒入培養(yǎng)皿中，115℃滅菌20min，待冷卻凝固后，吸取0.1ml菌懸液于平板上涂布均勻。用無(wú)菌鑷子分別夾取已在提樣品液中浸泡過(guò)的直徑為6mm圓形濾紙片，貼在含菌平板上，每個(gè)平板內(nèi)等距離貼4片，將各培養(yǎng)皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中平板倒置培養(yǎng)24h，測(cè)定抑菌圈直徑的大小，設(shè)3個(gè)重復(fù)，取其平均值。結(jié)果如表3所示。表3不同樣品液對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑菌效果比較實(shí)驗(yàn)組平均抑菌圈直徑(mm)實(shí)驗(yàn)組i28.5實(shí)驗(yàn)組ii17.0實(shí)驗(yàn)組iii21.5從表3可以看出，與實(shí)驗(yàn)組ii以及實(shí)驗(yàn)組iii對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑菌效果相比，實(shí)驗(yàn)組i所得的植物提取物對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑菌效果非常明顯，最小抑菌直徑可達(dá)28.5mm，從而說(shuō)明木通提取物與其他組分具有協(xié)同促進(jìn)作用，能夠提高組合物對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑制作用。實(shí)驗(yàn)例4人體試用實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組選取輕、中度面部尋常痤瘡志愿者共90名，男、女各半；年齡18-30歲，平均24歲。在涂抹化妝品前2周，未使用過(guò)糖皮質(zhì)類(lèi)激素、維a酸類(lèi)和抗生素類(lèi)藥物，無(wú)高血脂及肝腎功能異常，禁止酗酒，避免強(qiáng)烈陽(yáng)光或紫外線(xiàn)過(guò)度照射。將志愿者隨機(jī)分為三組，每組30人：第一組：溫水清潔皮膚并擦干后，每天晚上使用實(shí)施例2制備得到的活性外敷精華液均勻涂抹于臉部，一次5ml，靜待數(shù)分鐘待精華液慢慢被皮膚吸收，無(wú)需清洗，次日早晨潔面；第二組：溫水清潔皮膚并擦干后，每天晚上使用對(duì)比例1制備得到的活性外敷精華液(組方中不含木通提取物)均勻涂抹于臉部，一次5ml，靜待數(shù)分鐘待精華液慢慢被皮膚吸收，無(wú)需清洗，次日早晨潔面；第三組：溫水清潔皮膚并擦干后，每天晚上使用對(duì)比例2制備得到的活性外敷精華液(組方中不含植物提取物)均勻涂抹于臉部，一次5ml，靜待數(shù)分鐘待精華液慢慢被皮膚吸收，無(wú)需清洗，次日早晨潔面。使用期間停用其他藥物或化妝品。連續(xù)試用28天，并要求試驗(yàn)的第14天(d14)及第28天(d28)進(jìn)行回訪(fǎng)。評(píng)價(jià)內(nèi)容包括志愿者左右臉的白頭粉刺、黑頭粉刺、丘疹、囊腫結(jié)節(jié)以及膿皰5個(gè)級(jí)別的痤瘡進(jìn)行個(gè)數(shù)的標(biāo)記及數(shù)目統(tǒng)計(jì)，同時(shí)對(duì)志愿者的皮膚亮度以及痤瘡的愈合情況進(jìn)行觀察。結(jié)果如下表4所示：表4統(tǒng)計(jì)結(jié)果表4結(jié)果顯示，第一組和第二組以及第三組的功效存在明顯差異，說(shuō)明其中含有木通提取物的活性外敷精華液對(duì)痤瘡有非常顯著的抑制效果。在用量相同情況下，相較于不含木通提取物的活性外敷精華液能夠顯著提高抑制痤瘡的效果。對(duì)志愿者的皮膚亮度以及痤瘡的愈合情況進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)相較于第二組以及第三組，第一組志愿者的膚色明顯變白，變得更有彈性，且志愿者的皮膚表面平整度明顯有所改善，面色紅潤(rùn)且有光澤，極大減少了瘢痕和色素沉著，使皮膚恢復(fù)正常的細(xì)膩柔滑。盡管已用具體實(shí)施例來(lái)說(shuō)明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。當(dāng)前第1頁(yè)12