緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑及其制備方法與流程

文檔序號：12046445閱讀：232來源：國知局

本發(fā)明涉及含中草藥復方制劑的技術領域，具體涉及一種緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑。

背景技術：

人參是五加科植物Panax ginseng C.A.Mey的根。人參生長于北緯33度—48度之間的海拔，產(chǎn)于中國東北、朝鮮、韓國、日本、俄羅斯東部。根中含人參皂甙0.4％，少量揮發(fā)油。油中主要成份為人參烯(panacen，C15H24)0.072％。據(jù)報導從根中分離出皂甙類：人參皂甙A、B、C、D、E和F(panaxosideA、B、C、D、E、F)等。人參皂甙A(C42H72O14)，為人參皂甙Rg1(ginsenosideRg1)。人參皂甙B和C水解后產(chǎn)生人參三醇(panaxatriol)皂甙元，人參皂甙D、E和F水解后得20－表人參二醇(20－epiprotopanaxo－diol)皂甙元。相關研究表明人參皂甙Rg1的抗疲勞作用顯著，中性皂甙(Rb1、Rb2、Rc等)無抗疲勞作用，人參抗疲勞作用的機制可能與其升高血脂和促進蛋白質、RNA合成有關。

枸杞中主要活性成分枸杞多糖是一種水溶性多糖，相對分子質量68-200，現(xiàn)已有很多研究表明枸杞多糖具有促進免疫、抗衰老、抗腫瘤、清除自由基、抗疲勞、抗輻射、保肝、生殖功能保護和改善等作用。

桑椹為桑科植物桑Morus alba L.的干燥果穗，主要含糖，鞣酸(tannic acid)，蘋果酸(malicacid)，維生素(vitamin)B1.B2和胡蘿卜素(carotene)。中醫(yī)理論上主要用于治療肝腎不足和血虛精虧的頭暈目眩、腰酸耳鳴、須發(fā)早白、失眠多夢、津傷口渴、消渴、腸燥便秘。

淫羊藿味辛甘性溫，走肝腎二經(jīng)。為補命門、益精氣、強筋骨、補腎壯陽之要藥，臨床常用于治療男子陽痿不舉、滑精早泄、小便不禁以及女子不孕等癥。

現(xiàn)代研究表明，淫羊藿含淫羊藿甙、揮發(fā)油、蠟醇、植物甾醇、鞣質、維生素E等成分。能興奮性機能，對動物有促進精液分泌作用。還有降壓(引起周圍血管舒張)、降血糖、利尿、鎮(zhèn)咳祛痰以及維生素E樣作用。藥理實驗研究表明，淫羊藿能增加心腦血管血流量，促進造血功能、免疫功能及骨代謝，具有抗衰老、抗腫瘤等功效。新加波醫(yī)學專家研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿能有效殺死乳腺癌細胞，但用于臨床還有待進一步研究。

雪蓮培養(yǎng)物是利用植物細胞工程技術制備雪蓮代用品，其不僅含有與天然雪蓮相近的活性成分,且亦具有與之相當?shù)亩喾矫娴乃幚砘钚?。其主要藥理作用?zhèn)痛、抗炎、抗風濕；抑制血小板聚集、降血脂、改善血液循環(huán)；對免疫系統(tǒng)具有調節(jié)作用；同時還有抗氧化、抗輻射、和抗疲勞等多方面的藥效學作用。

技術實現(xiàn)要素：

發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是為了彌補現(xiàn)有研究技術的不足，提供了一種安全可靠，能夠緩解體力疲勞和抗氧化的草藥復方制劑。

技術方案：一種緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑，包括下列重量份數(shù)的各組份：人參80～200份、枸杞30～50份、桑椹30～60份、淫羊藿30～50份、熟地黃30～60份、雪蓮培養(yǎng)物10～20份。

作為優(yōu)選，還包括輔料。

作為優(yōu)選，所述的輔料為糊精、淀粉。用于壓片、制顆粒劑、硬膠囊使用。

作為優(yōu)選，所述的草藥復方制劑為袋泡茶、顆粒劑、片劑、硬膠囊。

本發(fā)明還公開了上述緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑的制備方法，包括如下步驟：以下為制袋泡茶的方法：

1)將人參、雪蓮培養(yǎng)物凈制，粉碎過100目篩，干燥滅菌，得到細粉；

2)將枸杞、淫羊藿、桑椹、熟地黃混合，粉碎過10目篩，得到混合物，加入混合物5～7倍質量的乙醇在30℃～60℃溫度下超聲提取2次，每次40分鐘，合并提取物液，提取物液減壓濃縮成相對密度為1.20～1.30的稠膏；

3)袋泡茶：將步驟1)所得的的細粉與步驟2)中所得稠膏混合均勻，制軟材，搖擺制粒，沸騰床干燥，控制水分在5％以內，經(jīng)灌裝、包裝即得。

作為本發(fā)明的第三個目的，還公開了制作顆粒劑、片劑和硬膠囊的方法：包括如下步驟：

1)將人參、雪蓮培養(yǎng)物凈制，粉碎過100目篩，干燥滅菌，得到細粉；

2)將枸杞、淫羊藿、桑椹、熟地黃混合，粉碎過10目篩，得到混合物，用混合物5～7倍質量的乙醇在30℃～60℃溫度下超聲提取2次，每次40分鐘，合并提取物液，提取液減壓濃縮成相對密度為1.20～1.30的稠膏；

3)顆粒劑、片劑、硬膠囊：將步驟1)所得的的細粉、步驟2)中所得稠膏和適量輔料混合均勻，制軟材，搖擺制粒，沸騰床干燥，控制水分在5％以內，經(jīng)灌裝或壓片或填充，即得。

作為優(yōu)選，步驟2)中乙醇的質量濃度為30％～70％。

作為優(yōu)選，步驟2)中，提取物液的相對密度為在60℃條件下測得。

本發(fā)明所制備的草藥復方制劑，安全可靠，具有明顯的緩解體力疲勞和抗氧化作用，適合長期食用。

具體實施方式：

實施例1：

本發(fā)明中，原料均為市售。

以袋泡茶為例：

一種緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑，由下列重量份數(shù)的各組份組成：人參80份、枸杞30份、桑椹30份、淫羊藿30份、熟地黃30份、雪蓮培養(yǎng)物10份。

制備方法：

1)將人參、雪蓮培養(yǎng)物凈制，粉碎過100目篩，干燥滅菌，得到細粉；

2)將枸杞、淫羊藿、桑椹、熟地黃混合，粉碎過10目篩，得到混合物，用混合物5倍量質量濃度為30％的乙醇在40℃溫度下超聲提取提取2次，每次40分鐘，合并提取物液，提取

液減壓濃縮成相對密度為1.25(60℃測)的稠膏。

3)將步驟1)所得的的細粉與步驟2)中所得稠膏混合均勻，制軟材，搖擺制粒，沸騰床干燥，控制水分在5％以內，將顆粒灌裝成3克/袋的袋泡茶、包裝備用。

實施例2：

以片劑為例：

一種緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑，由下列重量份數(shù)的各組份組成：人參200份、枸杞50份、桑椹60份、淫羊藿50份、熟地黃60份、雪蓮培養(yǎng)物20份、糊精15份。

制備方法：

1)將人參、雪蓮培養(yǎng)物凈制，粉碎過100目篩，干燥滅菌，得到細粉；

2)將枸杞、淫羊藿、桑椹、熟地黃混合，粉碎過10目篩，得到混合物，用混合物7倍量質量濃度為70％的乙醇在50℃溫度下超聲提取提取2次，每次40分鐘，合并提取物液，提取物液減壓濃縮成相對密度為1.25(60℃測)的稠膏。

3)將步驟1)所得的的細粉、步驟2)中所得稠膏和糊精，混合均勻，制軟材，搖擺制粒，沸騰床干燥，控制水分在5％以內，將顆粒壓片成0.8克/片的片劑，包裝備用。

實施例3：

以顆粒劑為例：

一種緩解體力疲勞抗氧化的草藥復方制劑，由下列重量份數(shù)的各組份組成：人參100份、枸杞40份、桑椹50份、淫羊藿40份、熟地黃50份、雪蓮培養(yǎng)物15份、淀粉20份。

制備方法：

1)將人參、雪蓮培養(yǎng)物凈制，粉碎過100目篩，干燥滅菌，得到細粉；

2)將枸杞、淫羊藿、桑椹、熟地黃混合，粉碎過10目篩，得到混合物，用混合物6倍量質量濃度為70％的乙醇在50℃溫度下超聲提取提取2次，每次40分鐘，合并提取物液，提取物液減壓濃縮成相對密度為1.20(60℃測)的稠膏。

3)將步驟1)所得的的細粉、步驟2)中所得稠膏和淀粉，混合均勻，制軟材，濕法制粒，沸騰床干燥，控制水分在5％以內，包裝備用。

為了進一步體現(xiàn)本申請的有益效果，特提供下列試驗例：

1.緩解體力疲勞功效試驗：

1.1取實施例1所得樣品袋泡茶顆粒。實驗前用將顆粒煎煮40分鐘，煎煮液用蒸餾水配制成按所需的不同濃度樣品。

1.2實驗動物：ICR雄性小鼠40只，體重18g～20g，由湖北省疾病預防控制中心實驗動物中心提供。

1.3主要儀器與試劑

荷蘭ISP-M型半自動生化儀、SBA-生物傳感分析儀、VIS-7200可見分光光度計、勻漿機、離心機、電子天平。

1.4實驗方法

將實驗動物隨機分為空白對照組和三個實施例1所得樣品水溶液實驗組。受試物劑量分別為270mg/kg.bw(低劑量組)、540mg/kg.bw(中劑量組)、800mg/kg.bw(高劑量組)，空白對照組動物以蒸餾水灌胃，各實驗組動物以相應劑量的實施例1所得樣品水溶液灌胃，每日一次，連續(xù)灌胃30天后分別進行以下實驗。

1.5負重游泳實驗末次給予受試物30min后，將尾根部負荷5％體重鉛皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水溫25℃±1℃，記錄小鼠自由泳開始至死亡的時間。

1.6血乳酸測定末次給予受試物30min后，將動物置溫度為30℃的水中不負重游戲10min，并于游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min各采眼球血20μL測定乳酸含量。并按以下公式計算血乳酸曲線下面積，以判斷運動后血乳酸變化情況。

乳酸曲線下面積＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min血乳酸值+2×游泳后休息20min血乳酸值)

1.7血清尿素氮測定末次給予受試物30min后，將小鼠置溫度為30℃的水中不負重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5mL血凝固后取血清用二乙酰-肟法測定血清尿素氮含量。

1.8肝糖原測定于末次給予受試物后30min處死動物，取肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干后置于冰面上的平皿內，迅速稱取肝臟100mg，測定肝糖原含量(蒽酮法)。

1.9實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計

實驗數(shù)據(jù)用PEMS for Windows3.0統(tǒng)計軟件包進行方差分析，方差不齊者用秩和檢驗統(tǒng)計。

結果：

實施例1所得樣品對小鼠體重的影響：見表1～表4。

表1～表4顯示，實施例1所得樣品三個劑量組和空白對照組間小鼠初始體重、實驗中期和實驗結束時體重無顯著差異(P＞0.05)。

表1實施例1所得樣品對小鼠體重的影響(負重游泳實驗)

表2實施例1所得樣品對小鼠體重的影響(血乳酸測定)

表3實施例1所得樣品對小鼠體重的影響(尿素氮測定)

表4實施例1所得樣品對小鼠體重的影響(肝糖原測定)

實施例1所得樣品對小鼠負重游泳時間的影響：結果見表5。

表5實施例1所得樣品對小鼠負重游泳時間的影響

*與空白對照組相比較，P＜0.05

如表5所示，實施例1所得樣品800mg/kg.bw劑量組小鼠負重游泳時間顯著長于空白對照組(P＜0.05)。

實施例1所得樣品對小鼠血乳酸含量的影響：見表6。

表6實施例1所得樣品對小鼠血乳酸含量的影響

*與空白對照組相比較，P＜0.05，**與空白對照組相比較，P＜0.01

如表6所示，實施例1所得樣品三個劑量組游泳后0min血乳酸含量和三個時點血乳酸曲線下面積顯著低于空白對照組(P＜0.05、P＜0.01)。

乳酸是運動過程中能源物質分解代謝的產(chǎn)物，肌肉運動時，當乳酸積累到一定程度，便會出現(xiàn)肌力下降，導致運動能力下降。因此，加快血乳酸的清除，可減緩運動疲勞的產(chǎn)生。實施例1各組實驗后血乳酸含量顯著減少，說明本發(fā)明產(chǎn)品起到了緩解運動疲勞的作用。

實施例1所得樣品對小鼠肝糖原含量的影響：見表7。

表7實施例1所得樣品對小鼠肝糖原含量的影響

**與空白對照組相比較，P＜0.01

如表7所示，實施例1所得樣品540mg/kg.bw劑量組肝糖原含量顯著高于對照組(P＜0.01)。

體力活動時，葡萄糖為骨骼肌主要能量來源，糖原的儲備量直接影響機體的運動能力，

當耐力運動中消耗大量能量時，肝糖原首先分解入血，輸送到肌肉中提供能量并維持血糖正常水平，避免低血糖引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)疲勞感，糖原的含量能夠間接說明疲勞發(fā)生的快慢或程度。

實施例1所得樣品對小鼠血清尿素氮含量的影響：見表8。

如表8所示，實施例1所得樣品三個劑量組血清尿素氮含量與空白對照組相比無顯著差異。

表8實施例1所得樣品對小鼠血清尿素氮含量的影響

結果分析：本實驗采用雄性ICR小鼠，實施例1所得樣品按人體推薦劑量的10、20、30倍連續(xù)灌胃30天，結果表明800mg/kg.bw劑量組小鼠負重游泳時間顯著長于空白對照組，(P＜0.05)。三個劑量組游泳后0min血乳酸含量和三個時間點血乳酸曲線下面積顯著低于空白對照組(P＜0.05、，P＜0.01)。540mg/kg.bw劑量組肝糖原含量顯著高于空白對照組(P＜0.01)。依據(jù)實驗結果，實施例1所得樣品具有明顯緩解體力疲勞的作用。

2.抗氧化作用功效試驗

2.1試樣制備

取實施例2所得片劑50g，加水煎煮40分鐘后，過濾，取濾液，加蒸餾水至溶液量為100ml，即是使每ml藥液相當于0.5g片劑，備用；

2.2試驗動物

昆明種雌性小鼠共50只，其中12月齡以上小鼠40只，體重范圍45-54g，8周少齡小鼠10只，平均體重21.6±2.6g，由湖北省疾病預防控制中心實驗動物中心提供。

2.3劑量分組

以實施例2所得樣品液按照133.3mg/kg.bw、266.7mg/kg.bw、533.3mg/kg.bw設三個劑量組，另設老齡鼠對照組和少齡鼠對照組。

2.4主要儀器和試劑

751紫外分光光度計，恒溫水浴箱，微量可調加樣器，高速離心機和低速離心機，旋渦混勻器。MDA、SOD、GSH-Px測定試劑盒，購于南京建成微生物工程研究院，臨用前一周購買，4度冰箱保存。所用三氯甲烷、無水乙醇、冰乙酸等均為國產(chǎn)分析純試劑。

2.5實驗方法

對各劑量組小鼠，每日按2％(即每100克體重灌2ml)體積給動物灌胃給予受試物，老齡對照和年輕對照組動物等體積給予蒸餾水，連續(xù)30天，試驗結束時按南京建成生物工程研究所購買的MDA、SOD、GSH-Px試劑盒說明書測定動物肝組織中的MDA含量、紅細胞中的SOD活力以及全血中的GSH-Px酶活力單位。

2.6實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用各實驗組與對照組均數(shù)比較的方差分析對數(shù)據(jù)進行處理。所用軟件為PEMS3.0《中國醫(yī)學百科全書·醫(yī)學統(tǒng)計學》統(tǒng)計軟件包(第三版)。

2.7實施例2所得樣品液對小鼠各實驗階段體重的影響，結果見表9：

表9實施例2所得樣品液對小鼠各實驗階段體重的影響

由表9可見：在整個實驗期間，老齡鼠各組體重均無顯著差異(P＞0.05)。

2.8實施例2所得樣品液對紅細胞脂質過氧化作用的影響：結果見表10：

表10實施例2樣品液對小鼠肝組織中MDA含量的影響

實施例2所得樣品液對紅細胞脂質過氧化作用的影響，*與少齡鼠對照組比較有顯著差異(P＜0.01)。#與老齡鼠對照組比較有顯著差異(P＜0.01)。

表10顯示，老齡鼠對照組肝組織MDA含量顯著高于少齡鼠對照組(P＜0.01)，受試物高計量組的MDA含量與老齡鼠對照組比較顯著降低(P＜0.01)。

2.9實施例2所得樣品液對小鼠紅細胞超氧化物歧化酶的影響，見表11

表11實施例2樣品液對小鼠紅細胞SOD活力的影響

與少齡鼠對照組比較有顯著差異(P＜0.01)。^#與老齡鼠對照組比較有顯著差異(P＜0.05)。