本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糖尿病是以持續(xù)高血糖為基本生化特征一種綜合病癥。主要是由于體內(nèi)胰島素相對(duì)或絕對(duì)不足所引起的糖代謝紊亂所致。糖尿病患者長(zhǎng)期高血糖狀態(tài)可產(chǎn)生多種并發(fā)癥。臨床上用于治療ii型糖尿病的藥物主要分為(1)胰島素及類似物；(2)口服降血糖藥：主要有磺酰脲類、雙胍類、α-葡萄糖抑制劑和胰島素增敏劑等藥物。西藥治療糖尿病療效值得肯定。但各種西藥降糖藥物都有消化道反應(yīng)、肝腎損害等副作用，且不能有效控制并發(fā)癥。中醫(yī)治療糖尿病療效穩(wěn)定，作用溫和，不良反應(yīng)少，能有效預(yù)防并發(fā)癥。因此開發(fā)利用天然植物中藥成為糖尿病防治藥物研究中的熱點(diǎn)。三葉五加，學(xué)名白簕(acanthopanaxtrioliatus(l.)merr.)，又稱鵝掌簕、三加皮、刺三加等，為五加科五加屬攀援狀灌木。以根或根皮、帶葉嫩枝入藥，味苦、辛，性微寒。具有清熱解毒、活血舒筋、祛風(fēng)利濕等作用。用于治療感冒發(fā)熱、咳嗽胸悶、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、毒蟲咬傷等癥。三葉五加的嫩莖、葉民間也可作為蔬菜食用，李時(shí)珍于《本草綱目》中記載“五加治風(fēng)濕痿痹，壯筋骨，其功良深”。廣東五邑地區(qū)將帶葉嫩枝作為食材稱之為簕菜，入口先苦后漸覺喉嚨甘涼，可炒食或做湯食。也有將其制成茶葉，飲用后具有獨(dú)特苦味，并有日益受到世人青睞和廣闊的開發(fā)利用前景。但至今未見有三葉五加在降糖方面的應(yīng)用研究或用于制備降糖藥物的公開報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的是提供一種三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的用途，可有效解決高血糖治療用藥問題。本發(fā)明所述的三葉五加提取物，采用本領(lǐng)域已知的常規(guī)化學(xué)提取方法制備得到總提取物或低極性的三葉五加提取物。根據(jù)本發(fā)明，將三葉五加粉碎，用有機(jī)溶劑或/和水提取制備得到總提取物，所用的有機(jī)溶劑可采用醇類，如乙醇、甲醇等，其中優(yōu)選95％乙醇。將總提取物用水分散后，用低極性有機(jī)溶劑萃取，取有機(jī)溶劑萃取相，回收溶劑后干燥即得三葉五加總提取物。所用的低極性溶劑可以采用乙酸乙酯、石油醚、氯仿或二氯甲烷等，其中優(yōu)選石油醚。脂溶性部位也可以直接通過二氧化碳超臨界萃取獲得。所述的三葉五加，為三葉五加根、莖、葉或其混合物。本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，原材料豐富，所制備的三葉五加提取物具有降糖作用，可有效用于制備治療高血糖藥物，實(shí)現(xiàn)三葉五加提取物在制備降糖藥物中的應(yīng)用，開拓了三葉五加在制備治療高血糖引起的糖尿病藥物中的新用途。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明所述的三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述三葉五加提取物與化學(xué)藥或中藥組成的治療糖尿病藥物。本發(fā)明所述的三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的三葉五加提取物通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料制成藥劑學(xué)上的片劑、顆粒劑、脂質(zhì)體、微囊、口服液或膠囊。本發(fā)明所述的三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述三葉五加提取物的制備方法為，將三葉五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用8-10倍量溶劑提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得三葉五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用石油醚等低極性有機(jī)溶劑萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得三葉五加提取物。本發(fā)明所述的三葉五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的用途，其特征在于所述三葉五加提取物是如下方法制備得到的：將三葉五加用二氧化碳超臨界萃取獲得三葉五加提取物。附圖說明圖1實(shí)施例1三葉五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率圖2實(shí)施例2三葉五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率圖3實(shí)施例3三葉五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率具體實(shí)施方式以下結(jié)合具體情況對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式做詳細(xì)說明。實(shí)施例1將三葉五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用10倍量50％甲醇溶液回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得三葉五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用石油醚萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得三葉五加提取物。實(shí)施例2將三葉五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用9倍量95％乙醇溶液冷浸提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得三葉五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得三葉五加提取物。實(shí)施例3將三葉五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用6倍量30％甲醇溶液閃式提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得三葉五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用氯仿萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得三葉五加提取物。實(shí)施例4三葉五加提取物片劑的制備取實(shí)施例1三葉五加提取物225g，加入淀粉38g，混勻，制粒，過篩，加微晶纖維素15g，硬脂酸鎂1.5g，混勻，壓制成1000片，即得三葉五加提取物片劑。實(shí)施例5三葉五加提取物顆粒劑的制備取實(shí)施例2三葉五加提取物195g，加入糊精160g，混勻，制粒，干燥，整粒，即得三葉五加提取物顆粒劑。實(shí)施例6三葉五加提取物膠囊的制備取實(shí)施例3三葉五加提取物235g，加入淀粉85g，混勻，制粒，干燥，整粒。裝膠囊1000粒，即得三葉五加提取物膠囊。實(shí)施例7三葉五加提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶活性的體外抑制作用在bhandari方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)：取ph6.8磷酸鹽緩沖溶液100μl，加入30μl的α葡萄糖苷酶(0.25u)和150μl待測(cè)樣品溶液，使用阿卡波糖作為陽性對(duì)照。充分混合后，將樣品在37℃下孵育15min，然后再向反應(yīng)體系中加入100μl5mm的4-硝基酚-α-d-吡喃葡萄糖苷(pnpg)溶液，并將混合物在37℃下進(jìn)一步孵育25min。通過加入300μl0.1mna2co3終止反應(yīng)。通過葡萄糖氧化酶法測(cè)定釋放的葡萄糖的量，并在405nm測(cè)量吸光度。取實(shí)施例1-3的三葉五加提取物分別配制成待測(cè)樣品溶液，每個(gè)待測(cè)樣品溶液同時(shí)做3個(gè)平行，取平均值。抑制率(％)＝(a對(duì)照-a樣品)/(a對(duì)照-a空白)*100％實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1-3所示，20μg/ml的三葉五加提取物均能使α-葡萄糖苷酶的活性降低75.8％以上。實(shí)施例8三葉五加提取物對(duì)自發(fā)性肥胖型糖尿病小鼠降血糖試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：spf級(jí)，自發(fā)性肥胖型糖尿病小鼠(db/db小鼠)50只，6周齡，體重38±2g，隨機(jī)分組。由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。實(shí)驗(yàn)藥物及儀器：三葉五加提取物(分別由實(shí)施例4-6制備得到)；陽性對(duì)照藥為馬來酸羅格列酮(葛蘭素史克天津藥業(yè)有限公司)，onetouchii血糖儀(強(qiáng)生公司)。動(dòng)物分組：模型對(duì)照組：10只，給等量水；陽性對(duì)照組；10只，給陽性藥；實(shí)驗(yàn)藥物組：30只，共分為三組。給藥：分組后適應(yīng)一周開始給藥，連續(xù)給藥2周，給藥途徑為灌胃。提取物的給藥量換算為小鼠后為400mg/kg體重，羅格列酮的給藥量為5mg/kg體重。血糖測(cè)定：第7、14天給藥1小時(shí)后，尾靜脈取血用onetouchii血糖儀測(cè)定動(dòng)物隨即血糖。試驗(yàn)結(jié)果見表1。表1三葉提取物藥物各劑型對(duì)db/db小鼠血糖濃度的影響動(dòng)物分組動(dòng)物數(shù)(只)7天后血糖濃度(mm)14天后血糖濃度(mm)模型對(duì)照組1025.2±2.527.6±2.9陽性對(duì)照組1011.2±2.4*9.7±2.6*三葉五加提取物片劑1012.3±2.6*10.9±2.5*三葉五加提取物顆粒劑1011.9±2.4*10.4±2.6*三葉五加提取物膠囊1013.0±2.6*11.8±2.3*注：*p＜0.05，與模型組比較。表1結(jié)果表明各三葉五加提取物藥物對(duì)db/db小鼠具有顯著的降血糖作用。以上實(shí)施例顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征以及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍，在不脫離本發(fā)明范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁12