技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及具有不可消化低聚糖的混合物的營養(yǎng)物，具體涉及其用于刺激免疫系統(tǒng)的用途。
背景技術(shù)：
與嬰兒配方喂養(yǎng)的嬰兒相比，人乳喂養(yǎng)的嬰兒較低的感染發(fā)生率，所述感染包括病毒感染。人乳中的許多組分，包括免疫球蛋白(例如IgA)、白細(xì)胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-10、干擾素-γ(IFN-γ)、免疫活性細(xì)胞、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-b)、乳鐵蛋白、核苷酸和不可消化的低聚糖(NDO)，被認(rèn)為參與對抗腸道或呼吸系統(tǒng)病原體感染的保護(hù)作用。
NDO是人乳的主要組分并且是人乳天然免疫系統(tǒng)的主要成分。人NDO促進(jìn)以雙歧桿菌(bifidobacteria)和乳酸桿菌(lactobacilli)為主的有益微生物叢的生長。還已知一些人NDO能夠直接防止病原體和毒素的粘附。
人乳是優(yōu)選的嬰兒食物。但是，母乳喂養(yǎng)并不總是可行或合乎需要的。在所述情況下，嬰兒配方或后續(xù)配方(follow on formulae)是一個(gè)良好的替代品。這些配方應(yīng)該具有最佳的組成以便盡可能地模擬母乳的有益效果。
WO 2007/067053公開了包含植物來源的益生元菊粉和半乳糖醛酸寡糖以及由乳糖合成的益生元反式低聚半乳糖以減少感染的嬰兒配方。
WO 2005/039597涉及酸性寡糖和中性寡糖用于增強(qiáng)免疫系統(tǒng)以及治療和/或預(yù)防免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病的用途。
WO 01/642255涉及一種營養(yǎng)組合物，其包含用于增強(qiáng)免疫應(yīng)答的益生元。
US 6,576,251公開了用于通過腸內(nèi)途徑或腸胃外途徑給予的飲食食物的碳水化合物混合物，所述混合物包含(a)單糖、(b)低聚糖(至多為己糖)和(c)多糖(至少為庚糖)，其中所述a、b、c的混合比例(按重量計(jì))為：a＝1，b＝40至1000，c＝1至50，并且所述混合物包含至少1個(gè)重量百分比的巖藻糖，其以游離的形式并且/或者與低聚糖和/或多糖結(jié)合的形式存在。據(jù)報(bào)道所述碳水化合物混合物既具有營養(yǎng)作用也具有生物學(xué)作用，其比單獨(dú)成分的相應(yīng)作用明顯更大。
WO 99/11773涉及生產(chǎn)非人轉(zhuǎn)基因哺乳動物的方法，所述非人轉(zhuǎn)基因哺乳動物在其乳中產(chǎn)生多種寡糖和糖綴合物。在此文獻(xiàn)中要求保護(hù)的主題涉及哺乳動物自身、其產(chǎn)生的乳、包含所述乳的組合物、所述乳的級分，以及所述乳中存在的純化的寡糖及糖綴合物。
WO 2005/055944公開了包含一種分子和可藥用載體的藥物組合物，所述分子包含以α-1，2鍵(linkage)、α-1，3鍵或α-1，4鍵連接于半乳糖基團(tuán)的巖藻糖基團(tuán)。
WO 2007/105945涉及用于懷孕婦女的食品或補(bǔ)充品，所述食品或補(bǔ)充品包含水溶性的、不可消化糖類。所述組合物用于改善所述懷孕婦女的菌叢和/或免疫系統(tǒng)，用于改善嬰兒的免疫系統(tǒng)以及用于改善嬰兒出生后的腸道菌叢。
EP 1 629 850提供了一種用于治療和/或預(yù)防呼吸道感染和/或呼吸道感染疾病的方法和組合物，所述方法包括對哺乳動物口服給予組合物，所述組合物包含一種含不可消化低聚糖和至少5wt％可消化半乳糖的半乳糖。
發(fā)明人致力于找到用于平衡和刺激免疫系統(tǒng)的其他方案。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
人乳與家畜乳的區(qū)別在于人乳包含更多的NDO并且區(qū)別在于所述NDO在結(jié)構(gòu)上是不同的。人NDO是非常復(fù)雜的，因?yàn)樗沓^130種具有多種糖組成的不同化合物的異質(zhì)性組。由于其復(fù)雜的和多形態(tài)的結(jié)構(gòu)，所以大規(guī)模合成是復(fù)雜的。因此，制備具有與人乳等同的NDO組成的嬰兒營養(yǎng)物在技術(shù)上和經(jīng)濟(jì)上尚不可行。
最近，新技術(shù)已可用于化學(xué)合成與具體人NDO等同的具體類型的NDO，從而提供在體內(nèi)和體外測定中測試具體人NDO的免疫調(diào)節(jié)能力的機(jī)會。
發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)巖藻糖基乳糖(fucosyllactose；FL)——一種人乳中存在的具有相對簡單結(jié)構(gòu)的寡糖——當(dāng)與β-低聚半乳糖并優(yōu)選地還與低聚果糖和/或糖醛酸寡糖結(jié)合時(shí)，表現(xiàn)出在刺激免疫系統(tǒng)方面的協(xié)同效應(yīng)。與攝取單一組分的動物相比，在攝取本發(fā)明的FL和β-低聚半乳糖的結(jié)合物的動物中，在流感疫苗接種后觀察到延遲型超敏性反應(yīng)中應(yīng)答增加，表明Th1應(yīng)答增加。
據(jù)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明結(jié)合物，即包含巖藻糖基乳糖和β-低聚半乳糖、優(yōu)選還包含低聚果糖和/或糖醛酸寡糖的結(jié)合物增加Th1應(yīng)答。所觀察到的效果出乎意料地高于所述單一組分的效果之和。
本發(fā)明結(jié)合物對Th1應(yīng)答比健康成人低的的人受試者，特別是新生兒、患有免疫衰老的老年人、患有AIDS的人或被人免疫缺陷病毒感染的人以及接受或者接受過化療、放療的癌癥患者和惡病質(zhì)癌癥患者特別有利。
本發(fā)明結(jié)合物適于治療和/或預(yù)防感染，并且/或者適于在接種之前、接種過程中和/或接種之后支持接種應(yīng)答。
本發(fā)明結(jié)合物特別適于治療和/或預(yù)防可通過增加Th1應(yīng)答和/或Th1/Th2平衡來預(yù)防和/或治療的疾病，特別是變態(tài)反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、哮喘、食物變態(tài)反應(yīng)、變應(yīng)性鼻炎(例如花粉變態(tài)反應(yīng))、塵螨變態(tài)反應(yīng)和其他形式的超敏反應(yīng)，如全身性過敏癥和急性蕁麻疹。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明因此涉及一種非人乳營養(yǎng)組合物，其包含巖藻糖基乳糖和β-低聚半乳糖。
在本發(fā)明的上下文中，包含巖藻糖基聚糖和β-低聚半乳糖、優(yōu)選地還包含低聚果糖和/或糖醛酸寡糖的結(jié)合物也被稱為本發(fā)明結(jié)合物。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語本發(fā)明組合物或所述組合物或本組合物是指包含本發(fā)明結(jié)合物的組合物。
巖藻糖基乳糖
本發(fā)明結(jié)合物包含巖藻糖基乳糖。巖藻糖基乳糖(FL)是在人乳中存在的不可消化的低聚糖。它不存在于牛乳中。它由連接在一起三個(gè)單糖單元：巖藻糖、半乳糖和葡萄糖構(gòu)成。乳糖是經(jīng)β-1，4鍵連接至葡萄糖單元的半乳糖單元。巖藻糖單元經(jīng)α-1，2鍵連接至乳糖分子的半乳糖單元(2’-巖藻糖基乳糖，2’-FL)或經(jīng)α-1，3鍵連接至乳糖的葡萄糖單元(3-巖藻糖基乳糖，3-FL)。本發(fā)明組合物優(yōu)選包含2’-FL。
2’-FL，優(yōu)選α-L-Fuc-(1→2)-β-D-Gal-(1→4)-D-Glc，和3-FL，優(yōu)選α-L-Fuc-(1→3)-[β-D-Gal-(1→4)]-D-Glc)，可購自例如Sigma-Aldrich?；蛘?，它們可自人乳中分離，例如如Andersson&Donald，1981，J Chromatogr.211：170-1744中所述；或由遺傳修飾的微生物產(chǎn)生，例如如Albermann et al，2001，Carbohydrate Res.334：97-103中所述。
優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含1mg至3g巖藻糖基乳糖/100ml，更優(yōu)選包含10mg至2g/100ml，甚至更優(yōu)選20mg至100mg FL/100ml。以干重計(jì)，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含0.007wt％至20wt％的巖藻糖基乳糖，更優(yōu)選0.07wt％至10wt％，甚至更優(yōu)選0.15wt％至1wt％的巖藻糖基乳糖。較少量的巖藻糖基乳糖在刺激免疫系統(tǒng)方面效果較低，而過高的量將導(dǎo)致所述產(chǎn)品的不必要的高成本。
β-低聚半乳糖
本發(fā)明結(jié)合物包含β-低聚半乳糖。已發(fā)現(xiàn)非FL的β-低聚半乳糖與FL一起存在在免疫刺激特別是接種應(yīng)答方面具有協(xié)同效應(yīng)。
β-低聚半乳糖也可稱作反式低聚半乳糖。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物包含β-低聚半乳糖([半乳糖]n-葡萄糖；其中n是2至60的整數(shù)，即2、3、4、5、6、……、59、60；n優(yōu)選地選自2、3、4、5、6、7、8、9或10)；其中所述半乳糖單元大部分經(jīng)β鍵而連接在一起。β-低聚半乳糖(TOS)以例如VivinalTM(Borculo Domo Ingredients，Netherlands)的商標(biāo)名出售。另一個(gè)合適的來源是Bi2Munno(Classado)。優(yōu)選地所述β-低聚半乳糖包含β1，4和β1，6連接。優(yōu)選地，以連接所述單糖碳水化合物單元的總鍵數(shù)計(jì)，所述β-低聚半乳糖具有超過80％、更優(yōu)選超過90％的β-1，4和β-1，6鍵。
優(yōu)選地本發(fā)明組合物包含聚合度(DP)為2至250，更優(yōu)選2至60的其他不可消化寡糖。所述不可消化寡糖優(yōu)選地為選自低聚果糖和糖醛酸寡糖的至少一種，更優(yōu)選至少兩種。
低聚果糖組包括菊粉。低聚果糖是包含DP或平均DP為2-250、更優(yōu)選2-100、甚至更優(yōu)選10-60的β-連接的果糖單元鏈的NDO。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合類型的多聚果糖(polyfructan)。尤其優(yōu)選的低聚果糖是菊粉。適合用于所述組合物的低聚果糖也是市售可得的，例如HP(Orafti)。優(yōu)選地，低聚果糖具有的平均DP大于20。
糖醛酸寡糖組包括甘露糖醛酸(mannuronic acid)寡糖、古羅糖醛酸(guluronic acid)寡糖、半乳糖醛酸寡糖、藻酸鹽降解產(chǎn)物和果膠降解產(chǎn)物。糖醛酸低聚糖優(yōu)選地獲自果膠降解產(chǎn)物。因此本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含DP為2-100的果膠降解產(chǎn)物。所述果膠降解產(chǎn)物優(yōu)選地是由蘋果果膠、甜菜果膠和/或柑橘果膠制備。優(yōu)先地，糖醛酸低聚糖是半乳糖醛酸寡糖。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述組合物包含β-低聚半乳糖和低聚果糖的混合物，所述低聚果糖選自短鏈低聚果糖和菊粉，更優(yōu)選菊粉。優(yōu)選地，至少兩種不同的不可消化低聚糖的混合物可更大程度地刺激腸內(nèi)微生物叢的有益細(xì)菌。優(yōu)選地，β-低聚半乳糖和低聚果糖的混合物中的重量比在20-0.05之間，更優(yōu)選在20-1之間。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含聚合度(DP)為2-10的β-低聚半乳糖和/或DP為2-60的低聚果糖。
除FL之外，最優(yōu)選地，所述組合物包含β-低聚半乳糖、低聚果糖和糖醛酸低聚糖。發(fā)現(xiàn)所述結(jié)合物與巖藻糖基乳糖(特別是2’-巖藻糖基乳糖)起協(xié)同作用。β-低聚半乳糖∶低聚果糖∶糖醛酸低聚糖的重量比優(yōu)選地為(20-2)∶1∶(1-20)，更優(yōu)選地為(20-2)∶1∶(1-10)，甚至更優(yōu)選地為(20-2)∶1∶(1-3)、甚至更優(yōu)選地為(12-7)∶1∶(1-2)。最優(yōu)選地，所述重量比為約9∶1∶1.1。優(yōu)選地，F(xiàn)L與β-低聚半乳糖(優(yōu)選TOS)的重量比為5-0.05，更優(yōu)選地為5-0.1，更優(yōu)選地為2-0.1。優(yōu)選地，F(xiàn)L與低聚果糖(優(yōu)選菊粉)的重量比為10-0.05，更優(yōu)選地為10-0.1，更優(yōu)選地為2-0.5。優(yōu)選地，F(xiàn)L與糖醛酸低聚糖(優(yōu)選衍生自果膠)的重量比為10-0.05，更優(yōu)選地為10-0.1，更優(yōu)選地為2-0.5。
優(yōu)選地，所述組合物包含80mg至4g的不可消化低聚糖(包括巖藻糖基乳糖和β-低聚半乳糖)/100ml，更優(yōu)選地包含150mg至2g/100ml，甚至更優(yōu)選地包含300mg至1g的不可消化低聚糖/100ml。以干重計(jì)，所述組合物優(yōu)選地包含0.25wt％至25wt％的不可消化低聚糖，更優(yōu)選為0.5wt％至10wt％，甚至更優(yōu)選為1.5wt％至7.5wt％。更低量的不可消化低聚糖在刺激微生物叢中的有益細(xì)菌方面效果較小，而過高量將導(dǎo)致胃氣脹和腹部不適的副作用。
營養(yǎng)組合物
本發(fā)明的FL和β-低聚半乳糖的結(jié)合物優(yōu)選地是一種營養(yǎng)組合物。本發(fā)明組合物不是人乳。本發(fā)明組合物優(yōu)選地經(jīng)腸內(nèi)給予，更優(yōu)選地口服給予。
本發(fā)明組合物優(yōu)選為營養(yǎng)配方，優(yōu)選嬰兒配方。本發(fā)明組合物可有利地用作嬰兒的完全營養(yǎng)物。本發(fā)明組合物優(yōu)選包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和碳水化物組分，并且本發(fā)明組合物優(yōu)選地以液態(tài)形式給予。本發(fā)明包括干燥食物，優(yōu)選粉末，其附有關(guān)于將所述干燥食物混合物與合適液體(優(yōu)選水)混合的說明書。
本發(fā)明有利地提供了一種組合物，其中脂質(zhì)組分提供5-50％的總卡路里，蛋白質(zhì)組分提供5-50％的總卡路里，可消化的碳水化物組分提供15-85％的總卡路里。本發(fā)明有利地提供了一種組合物，其中脂質(zhì)組分提供20-50％的總卡路里，蛋白質(zhì)組分提供5-30％的總卡路里，可消化的碳水化合物組分提供30-70％的總卡路里。優(yōu)選地，在本發(fā)明組合物中，脂質(zhì)組分提供35-50％的總卡路里，蛋白質(zhì)組分提供7.5-12.5％的總卡路里，可消化的碳水化物組分提供40-55％的總卡路里。為計(jì)算蛋白質(zhì)組分的％總卡路里，需要考慮由蛋白質(zhì)、肽和氨基酸所提供的總能量。
本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含至少一種選自以下的脂質(zhì)：動物脂質(zhì)(除了人脂質(zhì)以外)和植物脂質(zhì)。優(yōu)選本發(fā)明組合物包含植物脂質(zhì)與至少一種選自以下的油的結(jié)合物：魚油、動物油、藻油、真菌油和細(xì)菌油。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)。LC-PUFA是含兩個(gè)或更多個(gè)不飽和鍵的長度為20-24個(gè)碳原子、優(yōu)選20或22個(gè)碳原子的脂肪酸和脂肪?；湣８鼉?yōu)選地，本發(fā)明組合物包含二十碳五烯酸(EPA，n-3)、二十二碳六烯酸(DHA，n-3)和/或花生四烯酸(ARA，n-6)。
優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含以總脂肪含量計(jì)至少0.1wt.％，優(yōu)選至少0.25wt.％，更優(yōu)選至少0.6wt.％，甚至更優(yōu)選至少0.75wt.％的具有20和22個(gè)碳原子的LC-PUFA。
LC-PUFA(特別是具有20和22個(gè)碳原子的LC-PUFA)的含量優(yōu)選地不超過總脂肪含量的6wt％，更優(yōu)選地不超過3wt.％，因?yàn)樾枰M可能接近地模擬人乳。LC-PUFA可作為游離脂肪酸，以甘油三酯形式、甘油二酯形式、甘油單酯形式、磷脂形式，或作為上述一種或多種的混合物來提供。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以總脂肪計(jì)5-75wt％、優(yōu)選10-50wt％的多不飽和脂肪酸。
在營養(yǎng)組合物中所使用的蛋白質(zhì)優(yōu)選地選自：非人的動物蛋白質(zhì)(優(yōu)選乳蛋白質(zhì))、植物蛋白質(zhì)(優(yōu)選大豆蛋白質(zhì)和/或稻蛋白質(zhì))、其水解產(chǎn)物、其游離氨基酸以及它們的混合物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含酪蛋白、乳清、水解的酪蛋白和/或水解的乳清蛋白。優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)包含完整蛋白質(zhì)，更優(yōu)選完整牛乳清蛋白和/或完整牛酪蛋白蛋白質(zhì)。
本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含選自以下的可消化的碳水化合物：蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖漿固體、淀粉和麥芽糖糊精，更優(yōu)選地為乳糖。
從以上可以看出，同樣重要的是所述液體食物不具有過度的卡路里密度，但仍提供足夠的卡路里以喂養(yǎng)受試者。因此，所述液體食物優(yōu)選地具有在0.1-2.5kcal/ml之間的卡路里密度、甚至更優(yōu)選在0.5-1.5kcal/ml之間、最優(yōu)選在0.6-0.8kcal/ml之間的卡路里密度。
優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含核苷酸和/或核苷，更優(yōu)選核苷酸。優(yōu)選地，所述組合物包含5’-單磷酸胞苷、5’-單磷酸尿苷、5’-單磷酸腺苷、5’-單磷酸鳥苷和/或5’-單磷酸肌苷，更優(yōu)選5’-單磷酸胞苷、5’-單磷酸尿苷、5’-單磷酸腺苷、5’-單磷酸鳥苷和5’-單磷酸肌苷。優(yōu)選地，所述組合物包含5-100mg、更優(yōu)選5-50mg、最優(yōu)選10-50mg核苷酸和/或核苷/100克所述組合物干重。核苷酸和/或核苷的存在有利地刺激NK細(xì)胞活性。人們認(rèn)為核苷酸和/或核苷與本發(fā)明組合物的巖藻糖基乳糖起協(xié)同作用。
應(yīng)用
已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的FL和β-低聚半乳糖的結(jié)合物可協(xié)同性地刺激免疫系統(tǒng)。特別是增加Th1應(yīng)答。這兩種組分的結(jié)合物的效果高于單一組分的效果之和。
本發(fā)明結(jié)合物有利地被用于治療和/或預(yù)防疾病，因此本發(fā)明涉及一種用于治療和/或預(yù)防哺乳動物疾病的方法，所述方法包括對所述哺乳動物給予本發(fā)明結(jié)合物。換言之，本發(fā)明還涉及本發(fā)明結(jié)合物用于制備治療和/或預(yù)防疾病的組合物(優(yōu)選營養(yǎng)組合物)的用途。換言之，本發(fā)明還涉及用于治療和/或預(yù)防疾病的包含本發(fā)明結(jié)合物的組合物或營養(yǎng)組合物。優(yōu)選地，所述哺乳動物是人，甚至更優(yōu)選人類嬰兒。因此，本發(fā)明還涉及本發(fā)明結(jié)合物用于制備治療和/或預(yù)防嬰兒疾病的組合物(優(yōu)選營養(yǎng)組合物)的用途?；蛘邠Q言之，本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防嬰兒疾病的包含本發(fā)明結(jié)合物的組合物或營養(yǎng)組合物。
在本發(fā)明的上下文中，嬰兒年齡為0-6歲，優(yōu)選0-4歲，更優(yōu)選0-2歲，更優(yōu)選0-1歲。
本發(fā)明還涉及一種向嬰兒提供營養(yǎng)的方法，所述方法包括對所述嬰兒給予本發(fā)明的結(jié)合物或營養(yǎng)組合物。換言之，本發(fā)明還涉及本發(fā)明結(jié)合物用于制備用于向嬰兒提供營養(yǎng)的營養(yǎng)組合物的用途。換言之，本發(fā)明涉及用于向嬰兒提供營養(yǎng)的包含本發(fā)明結(jié)合物的組合物或營養(yǎng)組合物。
本發(fā)明結(jié)合物可有利地被用于增加Th1應(yīng)答，增加Th1/Th2平衡，修復(fù)Th1/Th2應(yīng)答中的不平衡，維持有利的Thl/Th2平衡和/或用于治療和預(yù)防與Th1/Th2不平衡相關(guān)的疾病。因此，例如，被宣傳通過增強(qiáng)免疫系統(tǒng)和/或支持免疫系統(tǒng)來刺激免疫系統(tǒng)成熟、增強(qiáng)對病原體的抗性的組合物屬于本發(fā)明的一部分。在另一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療和/或預(yù)防免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病的方法，所述方法包括對所述哺乳動物給予包含治療有效量的本發(fā)明結(jié)合物的組合物。在另一方面，本發(fā)明提供了一種增強(qiáng)哺乳動物中免疫應(yīng)答的方法，所述方法包括對所述哺乳動物給予本發(fā)明結(jié)合物。
新生人類嬰兒的免疫系統(tǒng)的特征在于Th2應(yīng)答過度。在所述免疫系統(tǒng)的成熟過程中，Th1應(yīng)答增加并且Th1/Th2平衡移向在健康成人中觀察到的值。因此，本發(fā)明結(jié)合物對人類嬰兒特別有利。本發(fā)明支持嬰兒免疫系統(tǒng)的成熟。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法涉及對0-6歲、優(yōu)選0-4歲、優(yōu)選0-2歲、更優(yōu)選0-1歲的人給予本發(fā)明結(jié)合物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法涉及刺激0-6歲、優(yōu)選0-4歲、優(yōu)選0-2歲、更優(yōu)選0-1歲的人受試者中的免疫系統(tǒng)的成熟。
包含巖藻糖基乳糖和β-低聚半乳糖的組合物甚至更有利地用于早產(chǎn)嬰兒和/或出生體重非常低或低的嬰兒，因?yàn)檫@些嬰兒甚至更容易受到和/或易于發(fā)生病毒感染。
包含巖藻糖基乳糖和β-低聚半乳糖的組合物甚至更有利地用于經(jīng)由剖腹產(chǎn)術(shù)分娩的嬰兒。剖腹產(chǎn)術(shù)出生的嬰兒是在醫(yī)院中具有更多病原體的環(huán)境中出生的，所述病原體是由母親給予嬰兒的抗體所無法有效抵抗的。剖腹產(chǎn)術(shù)出生的嬰兒具有延遲的和次優(yōu)的大腸腸道定殖并因此還更易于發(fā)生腸內(nèi)感染。
過低的Th1/Th2平衡導(dǎo)致對外源組分的極度敏感，這導(dǎo)致多種免疫學(xué)反應(yīng)，例如變態(tài)反應(yīng)和相關(guān)疾病如特應(yīng)性皮炎、哮喘、食物變態(tài)反應(yīng)、變應(yīng)性鼻炎(例如花粉變態(tài)反應(yīng))、塵螨變態(tài)反應(yīng)和其他形式的超敏反應(yīng)如全身性過敏癥和急性蕁麻疹。因此，本發(fā)明結(jié)合物特別有利于治療和/或預(yù)防選自變態(tài)反應(yīng)、食物變態(tài)反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、哮喘、變應(yīng)性鼻炎、塵螨變態(tài)反應(yīng)和蕁麻疹的疾病。本發(fā)明增加了Th1/Th2平衡。
Th1應(yīng)答的增加導(dǎo)致對抗病原性細(xì)菌和/或病毒的應(yīng)答增加。因此，本發(fā)明適于治療和/或預(yù)防感染。本發(fā)明的制品可有利地被用于治療和/或預(yù)防腸道感染、全身感染和/或呼吸道感染。
由于已發(fā)現(xiàn)巖藻糖和低聚β半乳糖的結(jié)合物可特異性地且協(xié)同性地增強(qiáng)Th1應(yīng)答，因此本發(fā)明特別適于預(yù)防病毒感染，更優(yōu)選由以下病毒引起的病毒感染：正粘病毒科特別是流感病毒、皰疹病毒科、輪狀病毒、巨細(xì)胞病毒、杯狀病毒科、呼吸道合胞病毒、人免疫缺陷病毒和/或鼻病毒。因此本發(fā)明的用途優(yōu)選地用于預(yù)防和/或治療病毒感染，更優(yōu)選的病毒感染為普通感冒、流行性感冒、麻疹、水痘、病毒性腹瀉、病毒性胃腸炎，HIV感染和/或病毒性呼吸道感染。
已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明結(jié)合物可適用于支持接種方法，例如增強(qiáng)接種方法的效果。本發(fā)明結(jié)合物適于在接種之前、接種過程中和/或接種之后支持接種應(yīng)答。具體地，可合適地增強(qiáng)對白喉-破傷風(fēng)、百日咳、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹/腮腺炎/風(fēng)疹、肺炎球菌綴合物、B型嗜血桿菌綴合物、乙型肝炎、甲型肝炎、水痘和/或流感的接種效果。因此，本發(fā)明結(jié)合物可有利地用于治療和/或預(yù)防感染，和/或用于增強(qiáng)接種應(yīng)答。
因此，本發(fā)明結(jié)合物可有利地用于患免疫缺陷的人受試者，特別是患免疫衰老的老年人，患AIDS或被人免疫缺陷病毒感染的人，和/或癌癥患者，更特別是接受或者已經(jīng)接受化療、放療的癌癥患者和惡病質(zhì)癌癥患者。
本發(fā)明組合物有利地用于老年人用的營養(yǎng)品。老年人具有降低的Th1應(yīng)答。老年人尤其易患病毒感染并發(fā)癥。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明用于治療和/或預(yù)防老年人中的免疫衰老。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及向老年人提供營養(yǎng)。老年人是年齡為55歲或更高的人，特別是年齡為65歲或更高的人。
實(shí)施例
實(shí)施例1
在一種小鼠模型中測試了包含2’-FL和/或β-低聚半乳糖的膳食的作用，其中通過遲發(fā)型超敏(DTH)反應(yīng)測量對抗原的應(yīng)答。這種在用疫苗中存在的抗原局部激發(fā)后的耳中DTH反應(yīng)是TH1細(xì)胞增殖的一個(gè)量度。在對感染和/或接種的應(yīng)答過程中，Th1細(xì)胞響應(yīng)于所述抗原的激發(fā)而增殖。在隨后用所述抗原激發(fā)耳部時(shí)，這些Th1細(xì)胞浸潤耳部，并導(dǎo)致腫脹。Th1細(xì)胞在耳中的浸潤需要約24小時(shí)，因此腫脹是遲發(fā)的。在初始接種和/或感染過程中增殖的Th1細(xì)胞越多，用所述抗原激發(fā)時(shí)觀察到的DTH反應(yīng)越強(qiáng)。
材料和方法
對6-8周齡雌性C57BL/6小鼠(Charles River)給予半純化的基于AIN-93G的膳食(Research Diet Service，Wijk bij Duurstede，the Netherlands)，其包含：
1)比例為9∶1∶1.1的1wt％的β-低聚半乳糖(GOS；source Vivinal GOS，Borculo Domo)、低聚果糖(FOS；source RaftilineHP，Orafti)和半乳糖醛酸寡糖(源自AOS)。AOS是果膠(Südzucker AG，Mannheim，Germany)制備的，DP為1-20。其包含以總重量計(jì)約75％半乳糖醛酸低聚物；
2)1wt％的2’巖藻糖基乳糖(2’-FL)。
3)1wt％的比例為9∶1∶1.1的β-低聚半乳糖、低聚果糖和半乳糖醛酸寡糖(AOS)以及1重量％的2’-FL。
4)0.5wt％的比例為9∶1∶1.1的β-低聚半乳糖、低聚果糖和半乳糖醛酸寡糖(AOS)以及0.5重量％的2’-FL。
所有組均與未補(bǔ)充的對照膳食(對照組和假處理對照組)進(jìn)行對比。在第一次接種之前14天開始膳食補(bǔ)充，持續(xù)至試驗(yàn)結(jié)束，即第一次接種之后31天。
接種試驗(yàn)是使用Influvac(Solvay Pharmaceuticals，Weesp，the Netherlands)從2005/2006季進(jìn)行。小鼠接受初次接種和加強(qiáng)接種，其包括皮下注射(sc)總體積為100μl的1∶1的疫苗和佐劑的混合物。所述加強(qiáng)接種是在初次接種后第21天進(jìn)行。所述試驗(yàn)在加強(qiáng)接種后第10天結(jié)束。所包括的陰性對照組接受總體積為100μl的1∶1的PBS和佐劑的混合物注射(假處理對照組(sham control))。在疫苗激發(fā)前和其后24小時(shí)使用數(shù)字測微計(jì)(Mitutoyo Digimatic 293561，Veenendaal，the Netherlands)測量耳部厚度，重復(fù)2次。通過從激發(fā)后24小時(shí)的耳部厚度減去基底值來計(jì)算DTH反應(yīng)。
結(jié)果
僅單獨(dú)補(bǔ)充GOS/FOS/AOS或2’FL導(dǎo)致耳部腫脹增加。然而，與喂食對照的動物和喂食單一組分的動物相比，2’-FL和GOS/FOS/AOS的結(jié)合物導(dǎo)致DTH反應(yīng)(TH1依賴性參數(shù))甚至更高的增加。所述結(jié)合物協(xié)同性地增加接種應(yīng)答。參見表1。
表1：2’-FL和TOS對DTH反應(yīng)的作用。
＊表示與對照組相比p＜0.05
＊＊表示與對照組相比p＜0.01并且與0.5％GOS/FOS/AOS相比p＜0.05。
由于對DTH反應(yīng)的作用(110％)顯著高于僅含F(xiàn)L(71％)或β-低聚半乳糖(52％)的膳食對DTH反應(yīng)的作用，并且也比基于累加效應(yīng)的作用(被計(jì)算為DTH增加62％)高得多，因此這些結(jié)果表明給予FL和β-低聚半乳糖以及優(yōu)選地給予低聚果糖和/或糖醛酸寡糖對Th1應(yīng)答增加具有協(xié)同效應(yīng)。
綜上，這些結(jié)果支持了，口服補(bǔ)充FL和β-低聚半乳糖(更優(yōu)選地還包含低聚果糖和/或糖醛酸寡糖)刺激了免疫應(yīng)答。與Th1應(yīng)答和/或接種應(yīng)答相關(guān)的免疫應(yīng)答被特別地增強(qiáng)。所述結(jié)果還表明Th1/Th2平衡增加。
此實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明本發(fā)明可有利地用于支持接種應(yīng)答。此實(shí)驗(yàn)的結(jié)果還表明其可有利地用于具有低Th1應(yīng)答的受試者，特別是嬰兒。此實(shí)驗(yàn)的結(jié)果還表明其可有利地用于具有低Th1應(yīng)答的受試者，特別是患有免疫衰老或有患免疫衰老風(fēng)險(xiǎn)的老年人、HIV患者、AIDS患者并且/或者接受或已經(jīng)接受化療和/或放療的癌癥患者或惡病質(zhì)癌癥患者。此模型指征了基礎(chǔ)免疫學(xué)變化，所述變化可對所有具有免疫系統(tǒng)功能失常的疾病有益。
實(shí)施例2
用于刺激免疫系統(tǒng)的嬰兒配方包含：每100ml(13.9干重)
1.4g蛋白質(zhì)(乳清和酪蛋白)
7.3g可消化糖類(包括乳糖)
3.6g脂肪(植物脂肪、魚油)
0.8g不可消化的低聚糖，其中含80mg 2’-巖藻糖基乳糖、640mgβ-低聚半乳糖和80mg低聚果糖
另外還包含本領(lǐng)域中已知的：膽堿、肌醇、?；撬帷⒌V物質(zhì)、微量元素和維生素。
實(shí)施例3
用于刺激免疫系統(tǒng)的嬰兒配方包含：每100ml(13.9干重)
1.4g蛋白質(zhì)(乳清和酪蛋白)
7.3g可消化糖類(包括乳糖)
3.6g脂肪(植物脂肪、魚油)
0.8g不可消化的低聚糖，其中含40mg 2’-巖藻糖基乳糖，以及760mg重量/重量比為9∶1∶1.2的β-低聚半乳糖、低聚果糖和糖醛酸寡糖。
另外還包含本領(lǐng)域中已知的：膽堿、肌醇、牛磺酸、礦物質(zhì)、微量元素和維生素。