本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療局部軟組織炎癥疼痛的馬錢子堿貼劑。

背景技術(shù)：

馬錢子堿具有良好的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，能夠抑制血小板的凝聚及抗血栓形成，還能明顯降低NO誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞的早期凋亡。但馬錢子堿也是劇毒物質(zhì)，口服半小時內(nèi)達(dá)到血藥峰濃度，隨后血藥濃度急速下降，因此馬錢子堿口服給藥存在很高的臨床中毒風(fēng)險(xiǎn)，且其療效持續(xù)時間較短。日常生活中肌肉、關(guān)節(jié)等軟組織易出現(xiàn)局部的炎癥疼痛，選用中藥膏藥治療簡便有效。但傳統(tǒng)的中藥膏藥所含活性成分含量低，藥物經(jīng)皮滲透速率低，到達(dá)靶組織藥量少，其臨床療效有待提高。

專利申請?zhí)?01010155252.3公開了一種馬錢子堿制備的水凝膠貼劑，水凝膠貼劑的持粘力不佳，用藥過程中易自行脫落，工業(yè)化生產(chǎn)工藝尚存一些技術(shù)難題；此外，水凝膠基質(zhì)的成分復(fù)雜，易與藥物相互作用；且該貼劑需經(jīng)皮吸收達(dá)到馬錢子堿全身有效的血藥濃度才能發(fā)揮鎮(zhèn)痛療效。對于治療局部軟組織炎癥而言，在患處表面的皮膚給藥能將藥物直接傳遞到皮下深層的炎癥組織即可發(fā)揮靶向治療的功效，避免達(dá)到全身有效的血藥濃度而降低臨床毒副作用的風(fēng)險(xiǎn)。專利授權(quán)號201210492872.2公開的馬錢子總生物堿貼劑，馬錢子總堿所含士的寧并無明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理活性，且士的寧毒性峻烈，臨床中毒劑量僅5mg，當(dāng)患者給藥部位皮膚破損或全身多個部位同時經(jīng)皮給藥時仍然存在臨床用藥的安全隱患。本發(fā)明擬開發(fā)一種具有良好經(jīng)皮滲透速率的馬錢子堿貼劑，該貼劑應(yīng)用時馬錢子堿能顯著地蓄積在給藥部位皮下的深層組織，且馬錢子堿的血藥濃度不會顯著地升高，實(shí)現(xiàn)“高效低毒”的制劑目標(biāo)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是制備一種對局部軟組織炎癥疼痛療效強(qiáng)、副作用小的馬錢子堿貼劑。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是調(diào)控馬錢子堿貼劑的經(jīng)皮滲透速率，使其能顯著地蓄積在給藥部位皮下的深層軟組織，且其血藥濃度不會過度地升高，從而實(shí)現(xiàn)“高效低毒”的制劑目標(biāo)。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明的貼劑包括含藥壓敏膠層、背襯層與防粘層；所述的含藥壓敏膠層包括藥物、壓敏膠基質(zhì)與經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑；含藥壓敏膠層各成分的質(zhì)量百分含量為馬錢子堿0.05～5%，經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑0.5～20%，硅酮壓敏膠基質(zhì)余量。

壓敏膠是貼劑的關(guān)鍵組成部分，它不僅影響貼劑的粘貼性能，而且也對藥物的釋放與經(jīng)皮滲透產(chǎn)生重要影響。本發(fā)明貼劑所述壓敏膠可選用聚異丁烯類壓敏膠、丙烯酸酯類壓敏膠、硅橡膠類壓敏膠中任何一種，本發(fā)明貼劑優(yōu)選的壓敏膠為硅酮壓敏膠。

皮膚是人體與外界的優(yōu)良的屏障，它可阻止藥物經(jīng)皮滲透進(jìn)入體內(nèi)，選擇合適的經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑提高藥物經(jīng)皮滲透的速率通常是提高藥物療效的關(guān)鍵。目前常用的經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑種類較多：(1)合成化合物，如氮酮；(2) 天然萜類物質(zhì)，如薄荷醇、樟腦、薄荷油、桉葉油、檸檬烯、冰片等；(3)脂肪醇，如乙醇、異丙醇、異丁醇、丙二醇、甘油等；(4) 脂肪酸，如油酸、月桂酸等；(5)脂肪酸酯，如肉豆蔻酸異丙酯，等。

經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑對藥物促滲作用千差萬別，它們與壓敏膠之間存在相互作用，往往需多種經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑聯(lián)合應(yīng)用才能達(dá)到適宜的藥物經(jīng)皮滲透速率。本發(fā)明所述的經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑為氮酮、肉豆蔻酸異丙酯、脂肪酸類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑與萜類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑其中之一或其中任意組合；所述脂肪酸類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑為油酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸與硬脂酸，優(yōu)選月桂酸；所述的脂肪酸類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑用量為1%～15%，優(yōu)選用量范圍為2%～10%；所述的萜類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑為冰片、薄荷腦、香芹酮、薄荷醇、檸檬烯與萜品油烯，優(yōu)選檸檬烯與萜品油烯，所述的萜類經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑用量為1%～10%，優(yōu)選用量范圍為3%～8%；氮酮的用量為1%～5%，優(yōu)選用量范圍為2%～3%；所述的經(jīng)皮滲透劑合用為氮酮和月桂酸，在含藥壓敏膠層的質(zhì)量百分含量分別為3%和2.5%。

本發(fā)明提供的馬錢子堿貼劑具體的制備方法如下：將馬錢子堿、硅酮壓敏膠基質(zhì)和經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑充分混合，涂布于防粘層上，50～80℃干燥，再與背襯層復(fù)合，沖切成貼劑，密封保存于室溫下。本發(fā)明提供的馬錢子堿貼劑載藥壓敏膠層厚度為30～300μm，優(yōu)選厚度為50～150μm。

附圖說明

圖1馬錢子堿貼劑對熱板實(shí)驗(yàn)中小鼠的鎮(zhèn)痛活性（n=10）。

圖2馬錢子堿小鼠口服與經(jīng)皮給藥后血液中的馬錢子堿濃度（n=10）。

圖3馬錢子堿小鼠口服與經(jīng)皮給藥后皮膚中的馬錢子堿濃度（n=10）。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例均按份數(shù)按重量計(jì)。

除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。

實(shí)施例1

取0.4g馬錢子堿，加入硅酮壓敏膠7-4301至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例2

取0.4g馬錢子堿，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例3

取0.4g馬錢子堿，加入丙烯酸酯壓敏膠87-4098至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例4

取0.4g馬錢子堿，加入丙烯酸酯壓敏膠87-2852至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例5

將0.4g馬錢子堿和1.0g癸酸混合后，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例6

將0.4g馬錢子堿和1.0g月桂酸混合后，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例7

將0.4g馬錢子堿和1.0g肉豆蔻酸混合后，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例8

將0.4g馬錢子堿和1.0g棕櫚酸混合后，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例9

將0.4g馬錢子堿和1.0g硬脂酸混合后，加入硅酮壓敏膠7-4302至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例10

將0.4g馬錢子堿與1.0g油酸混合后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例11

將0.4g馬錢子堿與0.5g月桂酸混合后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例12

將0.4g 馬錢子堿與1.5g月桂酸混合，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例13

將0.4馬錢子堿與0.2g氮酮混合后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例14

將0.4馬錢子堿與0.6g氮酮混合后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例15

將0.4馬錢子堿與1.0g氮酮混合后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

實(shí)施例16

將0.4馬錢子堿與0.6g氮酮與0.5g月桂酸混合后后，加入硅酮壓敏膠至總重為20g，充分混勻，涂布于防粘材料上，60～80℃干燥，再與背襯材料復(fù)合，沖切成厚度為100μm的馬錢子堿貼劑。

體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)：

家豬殺死后，立即割下耳朵，用自來水清洗干凈，吹干，電剪小心剃去耳朵外側(cè)的毛發(fā)。用Z10100型植皮刀取厚約600 μm的皮膚。仔細(xì)檢查皮膚，將無破損的皮膚切成約2 cm × 2 cm大小塊狀，用保鮮膜包好并-20 ℃保存，備用。采用立式收擴(kuò)散池，有效擴(kuò)散面積為2.8cm²，所用皮膚為去毛豬耳朵皮膚，皮膚厚度約為約600μm。將貼劑貼于皮膚的角質(zhì)層一側(cè)，置于擴(kuò)散池與接收池之間，角質(zhì)層朝向擴(kuò)散池，真皮層一側(cè)面向接受池，固定好。接受池體積為6.5ml，注滿pH7.4磷酸緩沖液并排除氣泡，至于循環(huán)水浴磁力攪拌池中，磁子轉(zhuǎn)速設(shè)為300r/min，水浴溫度為37℃。透皮開始后第2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h、24h取樣1ml，取樣后立即補(bǔ)充新鮮的接收液。接收液0.45μm微孔濾膜濾過后高效液相色譜法測定馬錢子堿的濃度。

各處方的馬錢子堿貼劑體外透皮結(jié)果見表1至表3，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知馬錢子堿以硅酮壓敏膠7-4302作為基質(zhì)經(jīng)皮滲透速率和累積透皮量高于硅酮壓敏膠7-4301和兩種丙烯酸酯壓敏膠87-2852、87-4098。不同碳原子數(shù)的脂肪酸中，碳原子數(shù)為12的月桂酸對馬錢子堿的經(jīng)皮促透作用最強(qiáng)，故優(yōu)選月桂酸作為促透劑。3%氮酮與2.5%月桂酸聯(lián)合使用對馬錢子堿的促透作用較強(qiáng)，該處方貼劑中馬錢子堿的體外經(jīng)皮滲透速率為3.02±0.87μg·cm^-2·h^-1，24h累積透皮量為77.08±18.62μg·cm^-2。

表1馬錢子堿在不同壓敏膠中的體外透皮參數(shù)

結(jié)論：馬錢子堿在硅酮7-4302中經(jīng)皮滲透速率最高，其次為硅酮7-4301，在含羧基的丙烯酸酯壓敏膠87-2852中經(jīng)皮滲透的速率最低。

表2含不同脂肪酸的馬錢子堿貼劑體外透皮參數(shù)

結(jié)論：脂肪肪酸中油酸、葵酸與月桂酸均能明顯提高馬錢子堿的經(jīng)皮滲透速率，其中月桂酸促透能力最強(qiáng)。

表3含不同濃度月桂酸與氮酮及兩者合用的馬錢子堿貼劑體外透皮參數(shù)

結(jié)論：低、中、高系列濃度經(jīng)皮滲透促進(jìn)劑中，低濃度月桂酸對馬錢子堿促透作用更強(qiáng)，中濃度氮酮促透能力更好，低濃度月桂酸與中濃度氮酮同時使用可產(chǎn)生顯著的協(xié)同作用。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非用以限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請的權(quán)利要求范圍中，任何他人完成的技術(shù)實(shí)體或方法，若是與申請的權(quán)利要求范圍所定義的完全相同，或是一種等效的變更，均將被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中。

為了闡明馬錢子堿貼劑的鎮(zhèn)痛、抗炎的藥動學(xué)機(jī)制與評價其臨床用藥安全性，對馬錢子堿口服與本發(fā)明貼劑采用小鼠熱板致痛（中樞鎮(zhèn)痛模型）和小鼠醋酸扭體（外周局部鎮(zhèn)痛模型）兩個鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图敖o藥后血液和皮膚的馬錢子堿濃度進(jìn)行了研究。

1、小鼠熱板法實(shí)驗(yàn)

選用18～22g昆明種雌性小鼠，將小鼠放在55.0℃恒溫?zé)岚?，秒表開始計(jì)時，小鼠出現(xiàn)舔后足時中止計(jì)時，所測時間即為痛閾值。預(yù)選痛閾值在5～30秒內(nèi)小鼠納入試驗(yàn)，痛閾值超過此范圍或出現(xiàn)跳躍的小鼠則剔除。將小鼠隨機(jī)分成馬錢子堿口服組、馬錢子堿貼劑組、空白組，每組10只。口服組小鼠灌胃給予馬錢子堿溶液（3mg/ml，30mg/kg），貼劑組小鼠則在腹部脫毛部位給予1cm²貼劑(馬錢子堿貼劑按表1中4-1處方制備)，空白組小鼠不做任何處理。各組小鼠于同一環(huán)境下給藥后30min、60min、120min、180min、300min、420min測定痛閾值。

2、小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)

將18～22g的昆明種雌性小鼠隨機(jī)分為馬錢子堿口服組、馬錢子堿貼劑組、空白組，每組10只?？诜M小鼠灌胃給予馬錢子堿溶液（3mg/ml，30mg/kg），貼劑組(馬錢子堿貼劑按表1中4-1處方制備)小鼠則在腹部脫毛部位給予1cm²上述貼劑，空白組小鼠不做任何處理。三組小鼠在給藥后30min腹腔注射給予醋酸溶液（1.5%，0.1ml/10g），當(dāng)小鼠腹部凹陷，同時軀干與后肢伸張、身體扭曲時視為出現(xiàn)扭體反應(yīng)。從注射醋酸后開始計(jì)時，記錄小鼠開始扭體的時間與20min內(nèi)扭體的次數(shù)，并計(jì)算扭體抑制百分率（PIP），PIP=（空白組扭體次數(shù)均值－給藥組扭體次數(shù)均值）÷空白組扭體次數(shù)均值×100%。注射醋酸30min后小鼠立即摘眼球取血，處死小鼠，剪下貼劑下皮膚，測定血漿及皮膚中馬錢子堿的濃度。

3、鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚與血漿的馬錢子堿濃度測定

熱板法小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束時與醋酸扭體法注射醋酸30min后立即摘眼球取血，離心取血漿；立即處死小鼠，用乙酸乙酯將皮膚表面殘留的藥物清洗干凈，剪下貼劑貼劑給藥部位的皮膚，精密稱重，血漿與皮膚樣品冷凍備測。超高效液相-串連質(zhì)譜法（UPLC-MS-MS）測定小鼠血漿與皮膚中馬錢子堿的濃度。

表4 馬錢子堿貼劑對小鼠醋酸所致疼痛的抑制

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：本發(fā)明貼劑對熱板法致痛小鼠的痛閾值無顯著的影響，馬錢子堿口服則在30min時顯著地提高熱板法致痛小鼠的痛閾值，但隨后迅速減弱，至60分鐘已消失，見附圖1；本發(fā)明貼劑組在注射醋酸部位腹部皮膚經(jīng)皮給藥對小鼠醋酸扭體抑制率比馬錢子堿口服組約高30%，兩組抑制率分別為96.38%與61.04%，見表4。給藥1小時后，馬錢子堿口服組小鼠的血藥濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于本發(fā)明貼劑組，隨后口服組血藥濃度急劇下降，給藥7小時后兩組小鼠的血藥濃度相近；經(jīng)皮給藥組的小鼠皮膚中馬錢子堿含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于馬錢子堿口服組；馬錢子堿貼劑經(jīng)皮給藥組的皮膚藥物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于馬錢子堿口服組，見附圖2和3。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：本發(fā)明貼劑能從給藥部位的皮膚將藥物直接傳遞到皮下深層患病的軟組織，對局部軟組織的炎癥疼痛療效遠(yuǎn)優(yōu)于馬錢子堿口服；本發(fā)明馬錢子堿貼劑無法經(jīng)皮吸收達(dá)到全身有效的血藥濃度，可避免馬錢子堿的全身毒副作用。