本發(fā)明涉及一種美白提亮組合物、制備方法和在化妝品中的應(yīng)用，特別是涉及以熊果苷、VC、煙酰胺為活性成分的美白外用品，屬于化妝品
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：黑素是深色素類物質(zhì)的一種，能引起皮膚的著色，是在黑素細(xì)胞(Melanin)中由苯丙氨酸或酪氨酸經(jīng)氧化等一系列生化反應(yīng)生成的。酪氨酸酶兼具酪氨酸經(jīng)化酶活性(催化酪氨酸一多巴)和多巴氧化酶活性(催化多巴一多巴醌)，是黑素細(xì)袍合成黑素的關(guān)鍵因素。熊果苷能迅速滲入肌膚，在不影響細(xì)胞增殖濃度的同時，能有效抑制皮膚中的酪氨酸酶的活性，阻斷黑色素的生成。它通過自身與酪氨酸酶直接結(jié)合，競爭多巴的結(jié)合位點，加速黑色素的分解與排泄，從而減少皮膚色素沉積。熊果苷能迅速滲入肌膚，在不影響細(xì)胞增殖濃度的同時，能有效地抑制皮膚中的酪氨酸酶的活性，阻斷黑色素的形成，通過自身與酪氨酶直接結(jié)合，加速黑色素的分解與排泄少從而減少皮膚色素沉積，祛除色斑和雀斑，而且對黑色素細(xì)胞不產(chǎn)生毒害性、刺激性、致敏性等副作用，同時還有殺菌、消炎的作用。熊果苷作用原理類似美白藥物對苯二酚。但對苯二酚存在副作用，注意事項很多，必須在醫(yī)生的指導(dǎo)和監(jiān)測下使用。而熊果苷的結(jié)構(gòu)中比對苯二酚多了葡萄糖分子，刺激性較低，可以自由添加到保養(yǎng)品中，濃度上限高達(dá)7％。熊果苷的活性分子能夠穿透基底層進行深度淡斑，對于黃褐斑、黑斑、日曬斑，藥物過敏遺留下來的色素沉著都很強的治療作用。但是，由于熊果苷被皮膚吸收后會還原成對苯二酚，因此會存在著類似對苯二酚的副作用。雖然對苯二酚應(yīng)該算是極有效的美白成分，它除了能抵制酪氨酸酶活性，還有破壞已形成的黑色素細(xì)胞的能力，祛斑效果很好，但用后易引起皮膚潮紅或過敏，對肌膚來說負(fù)擔(dān)很大，我國是禁止這個成分的，主要是因為氫醌的副作用較大，過度使用會對皮膚產(chǎn)生細(xì)胞毒性，且有一定幾率造成藍(lán)黑斑，不僅如此，氫醌對人體也有胎兒致畸性和毒性，當(dāng)含有熊果苷美白產(chǎn)品停用后面，由熊果苷還原產(chǎn)生的對苯二酚類物質(zhì)會對皮膚細(xì)胞的活化、生長產(chǎn)生一定影響，使美白產(chǎn)品的效果不易長效發(fā)揮作用，存在著化妝品停用后面皮膚色澤、水分等會迅速復(fù)原，需要長期使用化妝品才能使效果保持，造成使用者較高的花費并會對皮膚產(chǎn)生刺激。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是：美白外用化妝品中采用熊果苷等成分作為活性組分時容易導(dǎo)致對皮膚具有一定刺激作用，長效美白、護膚效果不好的問題，提供了一種組合物，通過組分之間相同協(xié)同，利于細(xì)胞活化再生，提高長效美白補水效果。技術(shù)方案是：根據(jù)本發(fā)明的第一個方面：一種美白提亮組合物，包括有按重量百分比計的如下組分：熊果苷25～30％，維生素C或者其衍生物10～15％、煙酰胺15～20％，絲氨酸蛋白酶抑制劑3～6％、人參皂苷1～2％、防曬劑30～35％。所述的防曬劑選自物理防曬劑或者化學(xué)防曬劑。所述的熊果苷選自α-熊果苷或者β-熊果苷。所述的人參皂苷為人參皂苷F1、人參皂苷Re、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb1或人參皂苷Rc中的一種或者幾種的混合。根據(jù)本發(fā)明的第二個方面：包含有所述的美白提亮組合物的外用化妝品。所述的外用化妝品，所使用的載體選自包括乳狀液、乳霜、洗劑、溶液、無水賦形劑、凝膠和軟膏。所述的乳狀液選自油包水、水包油包水、水包油、水包硅膠、硅膠包水、油包水包油或者硅膠包水包油的乳劑。根據(jù)本發(fā)明的第三個方面：一種包含有上述的美白提亮組合物的外用乳劑，采用水包油載體，包括有按重量百分比計的如下組分：美白提亮組合物10～15％、蠟類3～10％、植物來源的烴油3～6％、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷2～4％、非離子型表面活性劑1～4％、水70～75％。所述的蠟類是指熔點為75～100℃的動/植物來源的蠟類。根據(jù)本發(fā)明的第四個方面：所述的外用乳劑的制備方法，包括如下步驟：將美白提亮組合物、蠟類、植物來源的烴油、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷、一部分非離子表面活性劑混合均勻，得到油相；再將水和剩下的非離子表面活性劑混合均勻，得到水相；在高速分散的條件下，再將油相緩慢加入至水相當(dāng)中，攪拌均勻，得到穩(wěn)定的水包油乳液。根據(jù)本發(fā)明的第五個方面：所述的美白提亮組合物在制備化妝品中的應(yīng)用。有益效果本發(fā)明提供的美白組合物中，通過熊果苷、維C衍生物、煙酰胺產(chǎn)生美白效果，同時利用絲氨酸蛋白酶抑制劑對皮膚細(xì)胞的蛋白類成分進行保護，促進細(xì)胞活化再生，消除熊果苷還原后產(chǎn)生的對苯二酚帶來的細(xì)胞毒性，達(dá)到長效美白、活化細(xì)胞的作用；該組合物應(yīng)用于化妝品中，例如面膜、乳液、霜劑中具有對皮膚刺激小、作用時間長的優(yōu)點。具體實施方式下面通過具體實施方式對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明。但本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。本文使用的近似語在整個說明書和權(quán)利要求書中可用于修飾任何數(shù)量表述，其可在不導(dǎo)致其相關(guān)的基本功能發(fā)生變化的條件下準(zhǔn)許進行改變。因此，由諸如“約”的術(shù)語修飾的值并不局限于所指定的精確值。在至少一些情況下，近似語可與用于測量該值的儀器的精度相對應(yīng)。除非上下文或語句中另有指出，否則范圍界限可以進行組合和/或互換，并且這種范圍被確定為且包括本文中所包括的所有子范圍。除了在操作實施例中或其他地方中指明之外，說明書和權(quán)利要求書中所使用的所有表示成分的量、反應(yīng)條件等等的數(shù)字或表達(dá)在所有情況下都應(yīng)被理解為受到詞語“約”的修飾。本文使用的詞語“包括”、“包含”、“具有”或其任何其他變體意欲涵蓋非排它性的包括。例如，包括列出要素的工藝、方法、物品或設(shè)備不必受限于那些要素，而是可以包括其他沒有明確列出或?qū)儆谶@種工藝、方法、物品或設(shè)備固有的要素。以范圍形式表達(dá)的值應(yīng)當(dāng)以靈活的方式理解為不僅包括明確列舉出的作為范圍限值的數(shù)值，而且還包括涵蓋在該范圍內(nèi)的所有單個數(shù)值或子區(qū)間，猶如每個數(shù)值和子區(qū)間被明確列舉出。例如，“大約0.1％至約5％”的濃度范圍應(yīng)當(dāng)理解為不僅包括明確列舉出的約0.1％至約5％的濃度，還包括有所指范圍內(nèi)的單個濃度(如，1％、2％、3％和4％)和子區(qū)間(例如，0.1％至0.5％、1％至2.2％、3.3％至4.4％)。本發(fā)明所提供的組合物主要包括如下的組分：熊果苷，維生素C或者其衍生物、煙酰胺，絲氨酸蛋白酶抑制劑、人參葉提取物、防曬劑。熊果苷，是組合物中起到美白、抑制黑色素生成的主要活性物質(zhì)，它可以選自α-熊果苷或者β-熊果苷。維生素C或者其衍生物，起到輔助增白的作用。煙酰胺用作美白成分時，證明對治療黃褐斑和紫外線造成的色素沉著過度有一定功效。絲氨酸蛋白酶抑制劑用于提高皮膚細(xì)胞的活性，避免熊果苷還原產(chǎn)物對皮膚細(xì)胞的刺激的作用，例如可以是抑肽酶及其類似物。人參皂苷用于抑制酪氨酸酶的活性，進一步增加改善發(fā)暗的膚色或防止皮膚的色素沉著的效果，例如可以采用人參皂苷為人參皂苷F1、人參皂苷Re、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb1或人參皂苷Rc，其中優(yōu)選采用人參皂苷Rb1。防曬劑，用于防止皮膚細(xì)胞對UVA、UVB的吸收。本發(fā)明中所采用的防曬劑，沒有特別限定，可以包括化學(xué)和物理防曬物質(zhì)。可以使用的化學(xué)防曬物質(zhì)的非限制性實例包括對氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、戊基二甲醇PABA酯和辛基二甲醇PABA酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、乙基二羥基丙醇PABA酯、二苯甲酮(氧苯酮、磺異苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1到12)、肉桂酸鹽/酯(甲氧基肉桂酸辛酯、對甲氧基肉桂酸異戊酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西諾沙酯、二異丙基肉桂酸甲酯、甲氧基肉桂酸DEA鹽、二異丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水楊酸酯(均甲基水楊酸酯、水楊酸芐酯、乙二醇水楊酸酯、異丙基芐醇水楊酸酯等)、鄰氨基苯甲酸鹽/酯、尿刊酸乙酯、原膜散酯、水楊酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奧克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、2-羥基-1,4-萘醌和二羥基丙酮、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亞甲基丙二酸脂聚二甲基硅氧烷、對苯二亞甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二鈉、二乙氨基羥基苯甲?；郊姿峒乎?、雙二乙氨基羥基苯甲?；郊姿狨?、雙苯并惡唑基苯基乙基己基亞氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亞甲基雙苯并三唑基四甲基丁基苯酚和雙乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亞甲基莰酮和4-甲氧基肉桂酸異戊酯。物理防曬物質(zhì)的非限制性實例包括高嶺土、滑石、凡士林和金屬氧化物(例如二氧化鈦和氧化鋅)。上述的組合物的制備方法，沒有特別限定，只要采用合適的混合手段將其各個組分混合即可。上述的美白組合物可以并入所有類型的載體。非限制性實例包括乳狀液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅膠、硅膠包水、油包水包油、硅膠包水包油的乳劑)、乳霜、洗劑、溶液(水溶液或者水-乙醇溶液)、無水賦形劑(例如口紅和粉末)、凝膠和軟膏，合適的載體對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)任意是明顯的，并且適用于本發(fā)明。在一個優(yōu)選的實施例中，本發(fā)明的組合物特別適用于水包油乳化液，可以采用如下按重量百分比計的配方：美白提亮組合物10～15％、蠟類3～10％、植物來源的烴油3～6％、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷2～4％、非離子型表面活性劑1～4％、水70～75％。其中，蠟類、植物來源的烴油類和非乳化性交聯(lián)型硅氧烷是作為油相的組分，非離子表面活性劑直到乳化和分散的效果，水作為主要的基質(zhì)。其中，蠟類可以指熔點為75～100℃的動/植物來源的蠟類。另外，更優(yōu)選植物來源的蠟類。具體而言可列舉出巴西棕櫚蠟。植物來源的烴油，例如植物甾醇酯，如植物甾醇油酸酯、植物甾醇異硬脂酸酯和月桂酰/辛基十二烷醇/植物甾醇谷氨酸酯，由甘油的脂肪酸酯形成的甘油三酯，其中脂肪酸特別可具有C4至C36，尤其是C18至C36的鏈長，這些油可能是直鏈或支鏈的，和飽和或不飽和的；這些油尤其可以是庚酸或辛酸甘油三酯、乳木果油、紫花苜蓿油、罌粟籽油、筍瓜油、小米油、大麥油、藜麥油、黑麥油、石栗油、西番蓮油、牛油樹脂、蘆薈油、甜杏仁油、桃核油、花生油、摩洛哥堅果油、鱷梨油、木棉油、琉璃苣油、西蘭花油、金盞花油、亞麻薺油、芥花油、胡蘿卜油、紅花油、大麻油、菜籽油、棉籽油、椰子油、骨髓籽油、小麥胚芽油、荷荷巴油、百合油、澳洲堅果油、玉米油、白芒花籽油、圣約翰草油、梔子花油、榛果油、杏仁油、核桃油、橄欖油、月見草油、棕櫚油、黑醋栗籽油、奇異果籽油、葡萄籽油、阿月渾子籽油、筍瓜油、南瓜籽油、藜麥油、麝香玫瑰油、芝麻油、大豆油、葵花油、蓖麻油和西瓜籽油及其混合物。非乳化性交聯(lián)型硅氧烷優(yōu)選為選自由下述構(gòu)成的組中的1種或2種以上：二甲基聚硅氧烷交聯(lián)聚合物、(二甲基聚硅氧烷/乙烯基二甲基聚硅氧烷)交聯(lián)聚合物、(二甲基聚硅氧烷/苯基乙烯基二甲基聚硅氧烷)交聯(lián)聚合物、(乙烯基二甲基聚硅氧烷/十二烷基二甲基聚硅氧烷)交聯(lián)聚合物、(十二烷基聚二甲基甲硅烷氧基乙基二甲基聚硅氧烷/雙-乙烯基二甲基聚硅氧烷)交聯(lián)聚合物、烷基(C30-45)十六烷基二甲基聚硅氧烷交聯(lián)聚合物、十六烷基二甲基聚硅氧烷交聯(lián)聚合物。另外，在不有損本發(fā)明的效果的范圍內(nèi)，上述水包油型乳化防曬化妝品可以根據(jù)需要適宜配合化妝品和準(zhǔn)藥品領(lǐng)域中通常配合的各種成分，例如：粉末成分、固體油脂、保濕劑、增稠劑、金屬離子封閉劑、色素、pH調(diào)節(jié)劑、皮膚營養(yǎng)劑、維生素、防腐劑、抗氧化劑、抗氧化助劑、香料等。本發(fā)明所述的水包油型乳化防曬化妝品可以根據(jù)乳化物的制造中一直使用的方法而制造。例如，將油相成分和水相成分各自混合而分別調(diào)制油相和水相，混合水相和油相并用均質(zhì)混合器等乳化，由此能夠得到本發(fā)明的水包油型乳化防曬化妝品。在一個實施例中，其制造方法包括如下步驟：將美白提亮組合物、蠟類、植物來源的烴油、高級醇、一部分非離子表面活性劑混合均勻，得到油相；再將水和剩下的非離子表面活性劑混合均勻，得到水相；在高速分散的條件下，再將油相緩慢加入至水相當(dāng)中，攪拌均勻，得到穩(wěn)定的水包油乳液。實施例1組合物的制備美白提亮組合物，是由按重量比計的如下組分制備得到：熊果苷30％，維生素C15％、煙酰胺20％，絲氨酸蛋白酶抑制劑抑肽酶4％、人參皂苷Rb11％、防曬劑(乙基己基三嗪酮與滑石粉按重量比1：4混合而成)30％。將各個組分按重量比混合均勻即可。實施例2組合物的制備美白提亮組合物，是由按重量比計的如下組分制備得到：熊果苷28％，維生素C12％、煙酰胺17％，絲氨酸蛋白酶抑制劑抑肽酶6％、人參皂苷Rb12％、防曬劑(對氨基苯甲酸與二氧化鈦按重量比1：5混合而成)35％。將各個組分按重量比混合均勻即可。實施例3組合物的制備美白提亮組合物，是由按重量比計的如下組分制備得到：熊果苷25％，維生素C14％、煙酰胺18％，絲氨酸蛋白酶抑制劑抑肽酶6％、人參皂苷Rb12％、防曬劑(辛基三嗪酮與二氧化鈦按重量比1：5混合而成)35％。將各個組分按重量比混合均勻即可。對照例1與實施例3的區(qū)別在于：組合物中未加入絲氨酸蛋白酶抑制劑。對照例2與實施例3的區(qū)別在于：組合物中未加入熊果苷。提取物美白功能體外評價實驗1、試樣的配制以實施例1～3和對照例1～2中制備的組合物的提取物為樣品。將樣品1g溶于99g二甲亞砜中，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％的樣品溶液，離心分離后取上清液進行下面試驗。2、抑制酪氨酸酶活力效果評價試驗按下表準(zhǔn)確吸取樣品溶液、pH值為6.8的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的多巴溶液，充分混合，于30℃孵育5min后，加入活度為110U/mL的酪氨酸酶溶液，再在30℃下孵育10min，迅速轉(zhuǎn)移至比色皿中，在475nm處測吸光度。反應(yīng)液成分1組2組3組4組樣品溶液mL11磷酸鹽緩沖溶液mL22.511.5多巴溶液mL111酪氨酸酶溶液mL0.50.5總體積mL3.53.53.53.5按式(1)計算樣品對酪氨酸酶的相對抑制率(I)。I＝[(A1-A2)-(A3-A4)]×100％÷(A1-A2)(1)式中：A1、A2、A3、A4分別為1組～4組溶液的吸光度。抑制黑色素細(xì)胞中黑色素合成試驗將B16黑色素瘤細(xì)胞以1×105個/mL的密度接種于96孔板中，每孔90μL，CO2孵箱中孵育24小時后，每孔加入樣品溶液。同時設(shè)立培養(yǎng)基和細(xì)胞的空白對照組。將培養(yǎng)板置于孵箱中孵育72小時后，棄去上清液，PBS洗滌兩遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化細(xì)胞3min，每孔加入2mL維持液終止消化?；靹蚝?，每種濃度取出0.5mL做細(xì)胞計數(shù)。其余細(xì)胞懸液以2500r/min離心分離5min，棄去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加熱使黑色素溶解，選擇490nm波長在酶聯(lián)免疫檢測儀下測定吸光度值。按式(2)計算樣品對黑色素合成抑制率(I’)。I’＝(1-A5÷P1/A6÷P2)×100％(2)式中：A5為藥物孔吸光度值；P1為藥物孔細(xì)胞密度；A6為對照孔吸光度值；P2為對照孔細(xì)胞密度。實施例1實施例2實施例3對照例1對照例2對酪氨酸酶的抑制率％90.388.589.490.654.1對黑色素合成的抑制率％82.180.781.382.142.7從上表中可以看出，上述的組合物具有較好的對酪氨酸酶的抑制效率，并能抑制黑色素的合成，對照例1中未加入絲氨酸蛋白酶抑制劑對于體外合成試驗未顯示出明顯影響，對照例2中由于未加入熊果苷，表現(xiàn)出對酪氨酸酶和黑色素合成的抑制率降低。實施例4水包油乳液的制備采用實施例1中的組合物，美白提亮組合物13％、巴西棕櫚蠟7％、小麥胚芽油5％、聚二甲基硅氧烷交聯(lián)聚合物2％、非離子型表面活性劑3％、水70％。將美白提亮組合物、蠟類、植物來源的烴油、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷、一半的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至50℃攪拌10min，得到油相；再將水和剩下的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至75℃攪拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的條件下，再將油相緩慢加入至水相當(dāng)中，攪拌均勻，得到穩(wěn)定的水包油乳液。實施例5水包油乳液的制備采用實施例2中的組合物，美白提亮組合物10％、巴西棕櫚蠟3％、鱷梨油5％、聚二甲基硅氧烷交聯(lián)聚合物3％、非離子型表面活性劑4％、水75％。將美白提亮組合物、蠟類、植物來源的烴油、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷、一半的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至50℃攪拌10min，得到油相；再將水和剩下的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至75℃攪拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的條件下，再將油相緩慢加入至水相當(dāng)中，攪拌均勻，得到穩(wěn)定的水包油乳液。實施例6水包油乳液的制備采用實施例3中的組合物，美白提亮組合物11％、巴西棕櫚蠟4％、橄欖油3％、聚二甲基硅氧烷交聯(lián)聚合物4％、非離子型表面活性劑3％、水75％。將美白提亮組合物、蠟類、植物來源的烴油、非乳化性交聯(lián)型硅氧烷、一半的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至50℃攪拌10min，得到油相；再將水和剩下的非離子表面活性劑混合均勻，升溫至75℃攪拌10min，得到水相；在1500rpm高速分散的條件下，再將油相緩慢加入至水相當(dāng)中，攪拌均勻，得到穩(wěn)定的水包油乳液。對照例2與實施例6的區(qū)別在于：采用的美白提亮組合物是對照例1中制備得到的，用于替代實施例3中制備得到的。對照例3與實施例6的區(qū)別在于：采用的美白提亮組合物是對照例2中制備得到的，用于替代實施例3中制備得到的。美白祛斑功效試驗美白祛斑功效試驗，包括加速皮膚黑色素的轉(zhuǎn)移、代謝和提高皮膚亮度試驗。下述美白功效試驗均采用人體測試方式，用皮膚黑紅色素測試儀和皮膚色度測試探頭+MPA9測試儀測定皮膚的黑色素含量和亮度。選取120個自愿者，男女各半，隨機分為6組，每組20人，每組分別用實施例4～6、對照例2～3和空白樣進行試驗，空白樣為普通的75％乙醇，各組的測試數(shù)據(jù)均取平均值。受試部位前2～3天不能使用任何產(chǎn)品；用干的面巾紙將雙手前臂內(nèi)側(cè)擦拭干凈并做4×4cm2試驗區(qū)域測定標(biāo)記，用皮膚黑紅色素測試儀和皮膚色度測試探頭+MPA9測試儀測定受試皮膚的黑色素含量和皮膚亮度；用乳膠指套將測試樣品和空白組按2.0±0.1mg樣品/cm2的用量分別涂抹在左右手臂上，每天早晚各涂抹一次，每次涂抹后輕輕涂搓5min，連續(xù)涂抹4周，涂抹后分別測量第1～4周每個區(qū)域的黑色素含量和皮膚亮度；4周后，停止使用外用藥物，再繼續(xù)測定皮色素含量和皮膚亮度2周。(1)黑色素含量變化分析皮膚黑色素含量變化反映在測試周期內(nèi)，試驗區(qū)域皮膚黑色素含量隨時間變化規(guī)律。其值越大，皮膚黑色素含量越大，反之，皮膚黑色素含量。黑色素含量差值(ΔT)＝使用產(chǎn)品后各時間點黑色素含量(Tn)-使用產(chǎn)品前黑色素含量(T0)。受試部位皮膚黑色素含量與初始值的差值在測試周期4周內(nèi)，實施例中提供的水包油乳液具有較好的降低皮膚黑色素含量的效果，黑色素含量均為負(fù)值，并逐漸下降，說明外用化妝品具有祛黑的作用，同時，空白樣品的色素變化率都為正值。另外，當(dāng)?shù)?周停藥之后，對照例1的樣品使用后的皮膚黑色素含量顯著恢復(fù)，到第6周時已經(jīng)提高至-0.87，而使用了實施例6的樣本的黑色素含量升高緩慢，說明加入了絲氨酸蛋白酶抑制劑的化妝品具有較好的保持細(xì)胞活性，防止熊果苷還原產(chǎn)物刺激皮膚的作用，具有長效抑黑的作用；對照例3中的樣品中未加入熊果苷，皮膚未受到熊果苷還原產(chǎn)物的影響，停藥后皮膚亮度的變化不大，絲氨酸蛋白酶抑制劑在對照例3中加入后所起的作用不顯著。(2)皮膚亮度的變化分析皮膚亮度變化反映在測試周期內(nèi)，考察實驗區(qū)域皮膚亮度L值隨時間變化規(guī)律。其值越大，皮膚亮度越大，反之，皮膚亮度越低。皮膚亮度差值(ΔT)＝使用產(chǎn)品后各時間點L值(Tn)-使用產(chǎn)品前L值(T0)。受試部位皮膚亮度L值與初始值的差值從上表中可以看出，空白樣品的皮膚亮度在測試的6周內(nèi)基本保持穩(wěn)定，而實施例中的樣品具有使皮膚亮度穩(wěn)定上升的效果；在第5、6周停藥后，對照例2中的樣品的皮膚亮度明顯出現(xiàn)了下降，而實施例中的樣品的亮度保持穩(wěn)定，說明加入了絲氨酸蛋白酶抑制劑的外用皮膚試驗中，能夠有效地抑制熊果苷的降解對皮膚的影響，促使細(xì)胞活化，使美白效果更持久。當(dāng)前第1頁1 2 3