本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取與分離
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種美白防曬護(hù)膚組合物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：隨著現(xiàn)代生活水平的不斷提高，越來越多的消費(fèi)者開始重視即對人體健康無害，又具有美容保健作用的天然護(hù)膚化妝品。利用中草藥提取物作為美容護(hù)膚化妝品的添加劑，具有藥效穩(wěn)定持久，既產(chǎn)生功效又沒有毒副作用的優(yōu)勢，深受人們的青睞。目前，中草藥所含的各種天然活性成分，被廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代美容護(hù)膚化妝品中，并發(fā)揮各種作用。中草藥提取物在美容護(hù)膚化妝品領(lǐng)域中的復(fù)配可以從3個(gè)方向上進(jìn)行探索：(1)與非植物來源的添加劑復(fù)配，以期達(dá)到預(yù)期的功效；(2)以植物純化物為基礎(chǔ)進(jìn)行復(fù)配，這樣的配方，從化學(xué)成分上是明確的；(3)延續(xù)中草藥的傳統(tǒng)，以復(fù)方中草藥藥材為基礎(chǔ)，進(jìn)行復(fù)方提取。雖然中草藥提取物對于美容護(hù)膚化妝品配方而言可如虎添翼，但復(fù)配時(shí)卻不得不考慮其使用的局限性，包括其純度、安全性、有效性及劑型等。此外，中草藥有效成分的提取分離是美容護(hù)膚化妝品生產(chǎn)過程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其工藝特點(diǎn)、工藝流程的選擇和設(shè)備配置都直接關(guān)系到被提取有效成分的數(shù)量和質(zhì)量，從而影響到產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性和有效性等。而且，植物化妝品的研制已成為當(dāng)今世界創(chuàng)新發(fā)展的潮流，世界各制藥大國普遍關(guān)注從天然植物中篩選有效成分用于研制新型美容護(hù)膚化妝品。因此探明中草藥提取、分離技術(shù)的機(jī)制、優(yōu)化提取工藝參數(shù)，明確應(yīng)用前景等逐漸成為美容護(hù)膚化妝品生產(chǎn)和研究的重點(diǎn)內(nèi)容。由于各種藥材細(xì)胞結(jié)構(gòu)不同、所含成分的差異以及提取工藝不相同，常需根據(jù)不同提取對象的性質(zhì)來選擇合適的提取分離方法。目前在天然產(chǎn)物有效成分的提取方法中，常用的傳統(tǒng)提取方法如浸漬法、蒸汽或水蒸餾法、壓榨法、滲流法和索氏提取等提取效率不高、有效成分損失多、周期長、工序多。一些新型提取技術(shù)如超聲波輔助提取(ultrasound-assistedextraction，UAE)、超臨界流體萃取(SupercriticalFluidExtraction，SFE)、加速溶劑萃取(pressurizedliquidextraction，PLE)、微波輔助提取(microwave-assistedextraction，MAE)、等技術(shù)的應(yīng)用也越來越廣泛。但上述方法通常僅限于應(yīng)用于單味中草藥化學(xué)成分的提取。這些提取方法對于復(fù)方中草藥的適用性和操作條件優(yōu)化及其提取傳質(zhì)機(jī)制研究、中試和工業(yè)規(guī)模裝置的研發(fā)等是目前亟待解決的問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)中美白防曬護(hù)膚品美白防曬效果差、成本高、不安全等不足與缺點(diǎn)，本發(fā)明的首要目的在于提供一種美白防曬護(hù)膚組合物。本發(fā)明的另一目的在于提供上述美白防曬護(hù)膚組合物的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供上述美白防曬護(hù)膚組合物的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種美白防曬護(hù)膚組合物，由如下按質(zhì)量份計(jì)的原料組分制備得到：所述的美白防曬護(hù)膚組合物，優(yōu)選由如下按質(zhì)量份計(jì)的原料組分制備得到：所述的美白防曬護(hù)膚組合物的制備方法，包含如下步驟：(1)將吳茱萸、金縷梅、益母草和白芨分別干燥、粉碎過篩，得到吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉、益母草粗粉和白芨粗粉；(2)將吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉和益母草粗粉混勻，置于超臨界CO2萃取釜中，進(jìn)行CO2超臨界流體萃?。黄渲?，提取溫度為40～50℃，提取壓力為30～40Mpa，提取時(shí)間為2～3h，CO2流速為15～20L/h，分離溫度為40～50℃，分離壓力為5～10Mpa；得到提取物一；(3)將步驟(2)提取后的植物殘?jiān)糜诔R界CO2萃取釜中，進(jìn)行二次CO2超臨界流體萃??；其中，乙醇作為夾帶劑，提取溫度為40～50℃，提取壓力為20～30Mpa，提取時(shí)間為2～3h，CO2流速為10～15L/h，分離溫度為40～50℃，分離壓力為5～10Mpa；得到提取物二；(4)將步驟(3)提取后的植物殘?jiān)c乙醇水溶液混合，置入高壓容器中，在常溫下施加600～800MPa壓力進(jìn)行提取，保壓10～20min，卸壓后過濾，將濾液濃縮，得到提取物三；(5)將白芨粗粉與水混合進(jìn)行微波輔助提取，其中，提取功率為500～600W，固液比為(1:3)～(1:20)，提取次數(shù)為2～4次，每次提取時(shí)間為8～15min，合并濾液，濃縮，得到提取物四；(6)將步驟(2)、(3)、(4)和(5)制得的提取物混合均勻，得到美白防曬護(hù)膚組合物；步驟(1)中所述的過篩優(yōu)選為過10～40目篩；步驟(2)中所述的CO2超臨界流體萃取的條件優(yōu)選為：提取溫度為45℃，提取壓力為35Mpa，提取時(shí)間為2.5h，CO2流速為16L/h，分離溫度為50℃，分離壓力為7Mpa；步驟(3)中所述的CO2超臨界流體萃取的條件優(yōu)選為：體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇作為夾帶劑，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量8％，提取溫度為48℃，提取壓力為25Mpa，提取時(shí)間為2.5h，CO2流速為12L/h，分離溫度為48℃，分離壓力為8Mpa；步驟(4)中所述的提取的固液比優(yōu)選為(1:3)～(1:20)；步驟(4)中所述的提取的條件優(yōu)選為700MPa保壓15min；步驟(4)中所述的乙醇水溶液中乙醇含量為50％～70％(v/v)；步驟(4)中所述的提取物三的相對密度為1.10～1.20；步驟(5)中所述的微波輔助提取的條件優(yōu)選為：提取功率為580W，固液比為1:5，提取次數(shù)為3次，每次提取時(shí)間為10min；步驟(5)中所述的提取物四的相對密度為1.10～1.20；所述的美白防曬護(hù)膚組合物在護(hù)膚品領(lǐng)域中應(yīng)用；所述的護(hù)膚品中美白防曬護(hù)膚組合物的用量為0.01～10％(w/w)，優(yōu)選用量為1～5％(w/w)；所述的護(hù)膚品中，除上述必需成分以外，可以根據(jù)需要適當(dāng)?shù)嘏浜贤ǔＴ诨瘖y品中使用的成分，例如，保濕劑、抗氧化劑、表面活性劑、醇類、水等基質(zhì)成分；所述的護(hù)膚品的劑型優(yōu)選為溶液、懸浮液、乳狀液、霜?jiǎng)?、膏狀、凝膠、奶液、護(hù)膚液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、濕粉或噴劑；本發(fā)明的原理：吳茱萸具有散寒止痛、疏肝下氣、溫中燥濕等功效，內(nèi)含揮發(fā)油、生物堿、多糖、氨基酸和黃酮等多種有效成分，對UVA和UVB具有很好的防曬性能，且具有抑菌作用；金縷梅內(nèi)含多種單寧質(zhì)，可以調(diào)節(jié)皮脂分泌、具有保濕及嫩白作用，可促進(jìn)淋巴血液循環(huán)，可專門克服早晨眼脬和黑眼圈，具有鎮(zhèn)靜、安撫的效果，對龜裂、曬傷、粉刺有改善效果；益母草提取物具有活血調(diào)經(jīng)、祛瘀生新、利尿消腫、清熱解毒的功能，可以抑制酪氨酸酶活性和B-16黑素瘤細(xì)胞的增殖；白芨含有豐富的白芨膠質(zhì)，其主要成分為白芨多糖，能夠有效地防止皮膚凍瘡和皸裂，具有促進(jìn)血液循環(huán)及改善皮膚營養(yǎng)狀況等功效，本發(fā)明通過各原料合理的配伍，采用CO2超臨界流體萃取技術(shù)提取吳茱萸、金縷梅、益母草中的親脂性、相對分子質(zhì)量小的物質(zhì)，對于吳茱萸、金縷梅、益母草中的極性大、相對分子質(zhì)量大的物質(zhì)，則加乙醇攜帶劑再次進(jìn)行CO2超臨界流體萃取以及在高壓下進(jìn)一步提取，使吳茱萸、金縷梅、益母草中的有效護(hù)膚成分得到最大化的利用。對于白芨，則采用微波輔助提取其白芨膠質(zhì)，具有選擇性高、萃取速度快、重現(xiàn)性好、省時(shí)節(jié)能、提取率高、產(chǎn)品質(zhì)量好、不易破壞白芨多糖的生物活性與化學(xué)結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)。本發(fā)明通過合理配伍，使不同的有效活性成分產(chǎn)生協(xié)同增效作用，極大的激發(fā)了有效活性物質(zhì)的藥性，制備得到的美白防曬護(hù)膚組合物具有防曬、美白、祛斑、抗過敏、抑菌、保濕等功效。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：(1)本發(fā)明提供的美白防曬護(hù)膚組合物能有效地防止強(qiáng)紫外線對皮膚輻射，可以抑制酪氨酸酶活性和B-16黑素瘤細(xì)胞的增殖，具有防曬美白和祛斑功效。(2)本發(fā)明提供的美白防曬護(hù)膚組合物可以幫助皮膚消除敏感性反應(yīng)，起到降低刺激、消除水腫和紅血絲的作用。(3)本發(fā)明提供的美白防曬護(hù)膚組合物富含鞣質(zhì)等物質(zhì)，具有很強(qiáng)的收斂性，還可以凝固微生物的原生質(zhì)，有一定的抗菌作用。(4)本發(fā)明通過合理配伍，使不同的有效活性成分產(chǎn)生協(xié)同增效作用，極大的激發(fā)了有效活性物質(zhì)的藥性。(5)本發(fā)明采用不同的提取方法對復(fù)方組合物原料進(jìn)行提取，使得組合物原料中的有效護(hù)膚成分得到最大化的利用。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例1(1)將12質(zhì)量份吳茱萸、7質(zhì)量份金縷梅、10質(zhì)量份益母草和6質(zhì)量份白芨分別干燥、粉碎過20目篩，得到吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉、益母草粗粉和白芨粗粉；(2)將吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉和益母草粗粉混勻，置于超臨界CO2萃取釜中，進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；其中，提取溫度為45℃，提取壓力為35Mpa，提取時(shí)間為2.5h，CO2流速為16L/h，分離溫度為50℃，分離壓力為7Mpa；得到提取物一；(3)將步驟(2)提取后的植物殘?jiān)糜诔R界CO2萃取釜中，進(jìn)行二次CO2超臨界流體萃??；其中，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇作為夾帶劑，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量8％，提取溫度為48℃，提取壓力為25Mpa，提取時(shí)間為2.5h，CO2流速為12L/h，分離溫度為48℃，分離壓力為8Mpa；得到提取物二；(4)將步驟(3)提取后的植物殘?jiān)c乙醇含量為60％(v/v)的乙醇水溶液(固液比為1:5)混合，置入高壓容器中，在常溫下施加700MPa壓力進(jìn)行提取，保壓15min，卸壓后過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.20，得到提取物三；(5)將白芨粗粉與水混合進(jìn)行微波輔助提取，其中，提取功率為580W，固液比為1:5，提取次數(shù)為3次，每次提取時(shí)間為10min，合并濾液，濃縮至相對密度為1.20，得到提取物四；(6)將步驟(2)、(3)、(4)和(5)制得的提取物混合均勻，得到美白防曬護(hù)膚組合物。實(shí)施例2(1)將10質(zhì)量份吳茱萸、5質(zhì)量份金縷梅、9質(zhì)量份益母草和4質(zhì)量份白芨分別干燥、粉碎過40目篩，得到吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉、益母草粗粉和白芨粗粉；(2)將吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉和益母草粗粉混勻，置于超臨界CO2萃取釜中，進(jìn)行CO2超臨界流體萃取；其中，提取溫度為40℃，提取壓力為40Mpa，提取時(shí)間為3h，CO2流速為20L/h，分離溫度為45℃，分離壓力為10Mpa；得到提取物一；(3)將步驟(2)提取后的植物殘?jiān)糜诔R界CO2萃取釜中，進(jìn)行二次CO2超臨界流體萃??；其中，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇作為夾帶劑，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量5％，提取溫度為40℃，提取壓力為30Mpa，提取時(shí)間為3h，CO2流速為15L/h，分離溫度為40℃，分離壓力為10Mpa；得到提取物二；(4)將步驟(3)提取后的植物殘?jiān)c乙醇含量為50％(v/v)的乙醇水溶液(固液比為1:3)混合，置入高壓容器中，在常溫下施加600MPa壓力進(jìn)行提取，保壓20min，卸壓后過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.10，得到提取物三；(5)將白芨粗粉與水混合進(jìn)行微波輔助提取，其中，提取功率為600W，固液比為1:3，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為8min，合并濾液，濃縮至相對密度為1.10，得到提取物四；(6)將步驟(2)、(3)、(4)和(5)制得的提取物混合均勻，得到美白防曬護(hù)膚組合物。實(shí)施例3(1)將15質(zhì)量份吳茱萸、9質(zhì)量份金縷梅、12質(zhì)量份益母草和9質(zhì)量份白芨分別干燥、粉碎過10目篩，得到吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉、益母草粗粉和白芨粗粉；(2)將吳茱萸粗粉、金縷梅粗粉和益母草粗粉混勻，置于超臨界CO2萃取釜中，進(jìn)行CO2超臨界流體萃??；其中，提取溫度為50℃，提取壓力為30Mpa，提取時(shí)間為2h，CO2流速為15L/h，分離溫度為50℃，分離壓力為5Mpa；得到提取物一；(3)將步驟(2)提取后的植物殘?jiān)糜诔R界CO2萃取釜中，進(jìn)行二次CO2超臨界流體萃取；其中，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇作為夾帶劑，體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇的用量相當(dāng)于萃取釜中物料質(zhì)量10％，提取溫度為50℃，提取壓力為20Mpa，提取時(shí)間為2h，CO2流速為10L/h，分離溫度為50℃，分離壓力為5Mpa；得到提取物二；(4)將步驟(3)提取后的植物殘?jiān)c乙醇含量為70％(v/v)的乙醇水溶液(固液比為1:20)混合，置入高壓容器中，在常溫下施加800MPa壓力進(jìn)行提取，保壓10min，卸壓后過濾，將濾液濃縮相對密度為1.15，得到提取物三；(5)將白芨粗粉與水混合進(jìn)行微波輔助提取，其中，提取功率為500W，固液比為1:20，提取次數(shù)為4次，每次提取時(shí)間為15min，合并濾液，濃縮至相對密度為1.15，得到提取物四；(6)將步驟(2)、(3)、(4)和(5)制得的提取物混合均勻，得到美白防曬護(hù)膚組合物。效果實(shí)施例(一)用二甲基亞砜分別將實(shí)施例1～3制得的美白防曬護(hù)膚組合物配制成濃度為質(zhì)量體積比1％的活性成分溶液，進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)：(1)抗紫外線性能測定在280～400nm波長范圍內(nèi)，每隔10nm進(jìn)行掃描，確定各波長下活性成分溶液的透光率，計(jì)算波長范圍的平均吸收率。(2)抑制小鼠黑色素細(xì)胞中酪氨酸活力試驗(yàn)將處于對數(shù)生長期的B16小鼠黑色素細(xì)胞(中科院上海細(xì)胞所)接種于96孔板中，培養(yǎng)基為RPMI1640+體積百分比10％的小牛血清，每孔100μL(104個(gè)細(xì)胞/孔)，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，添加過濾除菌后的活性成分溶液50μL。繼續(xù)培養(yǎng)3d后，棄去上清液，用pH值為6.8的0.15％(w/v)聚丁二酸丁二醇酯沖洗兩遍，每孔加90μL含1％(體積分?jǐn)?shù))TritonX-100的PBS(0.01M，pH值7.4)。冰浴中超聲破碎，每孔加10μL10mmol/L的L-多巴(L-dopa)，37℃孵育60min，于475nm處比色，空白孔調(diào)零，測各孔吸光度值。抑制率＝(1-藥物組平均吸光度值÷對照組平均吸光度值)×100％結(jié)果分析：(1)抗紫外線性能測定，結(jié)果如表1所示：表1實(shí)施例1～3制得的美白防曬護(hù)膚組合物抗紫外線性能測定實(shí)施例280～320nm吸收率(％)320～400nm吸收率(％)實(shí)施例110095.6實(shí)施例210093.5實(shí)施例310091.2(2)抑制小鼠黑色素細(xì)胞中酪氨酸活力試驗(yàn)，結(jié)果如表2所示：表2實(shí)施例1～3抑制小鼠黑色素細(xì)胞中酪氨酸活力試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用實(shí)施例分別取5％(w/w)的美白防曬護(hù)膚組合物、15％(w/w)的甘油、10％(w/w)的山梨醇三油酸酯、65％(w/w)的純化水制成美白防曬化妝品乳液。將制備得到的美白防曬化妝品乳液進(jìn)行臨床試用觀察。觀察對象：年齡20～45歲中年婦女。選面部有不同程度的黃褐斑、蝴蝶斑、老年斑等色素的中年女性100例。觀察方法：每天晚上睡覺前清潔皮膚后，涂上上述美白防曬化妝品乳液。連續(xù)使用28天為一個(gè)療程。療效標(biāo)準(zhǔn)：(1)顯效：黑色素消退達(dá)90％以上，皮膚有明顯的潤澤光滑感；(2)有效：黑色素消退50％以上，皮膚較潤澤光滑；(3)無效：治療前后無變化。結(jié)果見表3。表3人體試用實(shí)驗(yàn)有效率結(jié)果例數(shù)顯效有效無效總有效率實(shí)施例1100943397％實(shí)施例2100924496％實(shí)施例3100914595％上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3