本發(fā)明涉及降血脂藥物領(lǐng)域，尤其涉及一種山香圓葉的提取物。

背景技術(shù)：

高血脂癥是指血脂水平過(guò)高，是引起冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等嚴(yán)重危害人體健康疾病的重要危險(xiǎn)因素之一，隨著人們生活水平的提高和生活習(xí)慣的改變，該病的發(fā)病率明顯增加，發(fā)病的年齡也有所提前，每年因?yàn)楦哐Y導(dǎo)致生命終止的人數(shù)也在增加，研究有效方法預(yù)防和治療高血脂的發(fā)生具有重要意義。目前在臨床上常用的口服降血脂藥物以他汀類(辛伐他汀、美伐他汀、普伐他汀等)、煙酸類(煙肌酯、阿昔莫司等)、貝特類(苯扎貝特、吉非羅齊、非諾貝特等)等西藥為主。這些藥物長(zhǎng)期使用時(shí)或效果不佳，或有較嚴(yán)重的副作用，如對(duì)肝腎造成較大的傷害、產(chǎn)生嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)等。而天然植物提取物，具有多靶點(diǎn)和多成分協(xié)同作用的優(yōu)點(diǎn)，而且安全性高，無(wú)毒副作用，易于被消費(fèi)者接受，尤其適宜那些血脂偏高但尚未達(dá)到用藥程度的亞健康群體。因此，從天然藥物中篩選可防治高血脂癥的藥物，日益受到關(guān)注。

山香圓葉為省沽油科植物山香圓(Turpinia arguta Seem.)的干燥葉。夏、秋二季葉茂盛時(shí)采收，除去雜質(zhì)，曬干。味苦，寒。歸肺、肝經(jīng)。清熱解毒，利咽消腫，活血止痛。用于乳蛾喉痹，咽喉腫痛，瘡瘍腫毒，跌撲傷痛。在我國(guó)，主產(chǎn)于江西、福建、廣東、廣西等省。民間用鮮葉水煎內(nèi)服治療扁桃體炎、咽喉炎，預(yù)防感冒，或鮮葉搗爛外敷治療瘡疥，均有顯著療效?，F(xiàn)代藥理研究表明，山香圓具有抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛以及調(diào)節(jié)免疫作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中化學(xué)類的降血脂藥物存在毒副作用大的缺陷，本發(fā)明提出一種具有降血脂功效的山香圓葉提取物。

本發(fā)明所述的提取物，由如下方法提取得到，

1)在超聲波的作用下，利用纖維素酶對(duì)含有山香圓葉粉末的水溶液進(jìn)行酶解，對(duì)酶解液離心，收集上清液；

2)調(diào)節(jié)所述上清液中乙醇的濃度為75～85％，低溫靜置至不溶物完全析出，對(duì)出現(xiàn)不溶物的溶液再次進(jìn)行離心，收集二次上清液，去除所述二次上清液中的乙醇，得山香圓葉提取物。

本發(fā)明所述的山香圓葉粉末為山香原葉干燥果穗藥材制備成的粉末，其粒度為60～80目。

本發(fā)明所使用的纖維素酶為β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶。

優(yōu)選的，所述超聲波的功率為200～300w。

優(yōu)選的，所述酶解過(guò)程中，控制水和山香圓葉粉末的液料比為30～40ml/g，纖維素酶的添加量為所述水的質(zhì)量的3.5～4.0％，酶解時(shí)間為30～40min，溫度為25～35℃。

優(yōu)選的，所述步驟2)中，在調(diào)節(jié)所述上清液中乙醇的濃度之前，需先將所述上清液調(diào)節(jié)至生藥量為0.5～1g/ml。

優(yōu)選的，所述步驟2)中，調(diào)節(jié)乙醇的濃度為80％。

優(yōu)選的，所述低溫靜置過(guò)程中，控制溫度為2～6℃，時(shí)間為12～24h。

優(yōu)選的，所述步驟2)中去除乙醇的具體操作為將上清液在50～60℃進(jìn)行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。

優(yōu)選的，所述步驟1)和步驟2)的離心操作中，控制轉(zhuǎn)速4000～5000r/min，時(shí)間10～15min。

本發(fā)明的最后一個(gè)目的是保護(hù)包括本發(fā)明所述山香圓葉提取物在制備降血脂藥物方面的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的提取物具有如下有益效果：

1、本發(fā)明不僅利用酶解技術(shù)破壞山香圓葉細(xì)胞壁促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)有效成分的充分溶出，而且利用低功率超聲波振動(dòng)，低溫提取，在降低活性成分結(jié)構(gòu)破壞風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)促進(jìn)溶出、節(jié)省提取時(shí)間、降低能量成本；

2、本發(fā)明所述的山香圓葉水提醇沉上清液可作為活性成分，具有良好的防治高血脂癥的作用，可發(fā)展作為天然降血脂保健品用途。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不能用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

本實(shí)施例涉及本發(fā)明所述的山香圓葉提取物，其提取方法包括如下步驟：

1)將唇形科植物山香圓葉(Turpiniae Folium)的干燥果穗藥材粉碎至60～80目，得到的山香圓葉粉末，將水與山香圓葉粉末按30:1質(zhì)量比的料液比混合，在其中添加為所述水溶液質(zhì)量3.5％的纖維素酶，在200W的超聲波功率和35℃溫度下進(jìn)行30min提取，提取后再以5000r/min進(jìn)行離心，10min后收集上清液A；

2)將步驟(1)的上清液A濃縮至干藥量為0.5g/ml，在濃縮產(chǎn)物中加入其體積4倍的無(wú)水乙醇溶液混勻，當(dāng)其溶液中乙醇濃度為80％時(shí)，于4℃下靜置12h，再以5000轉(zhuǎn)/min進(jìn)行離心，10min后收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，即得山香圓葉提取物。

實(shí)施例2

本實(shí)施例涉及本發(fā)明所述的山香原葉提取物，其提取方法包括如下步驟：

1)將唇形科植物山香圓葉(Turpiniae Folium)的干燥果穗藥材粉碎至60～80目，得到的山香圓葉粉末，將水與山香原葉粉末按40:1的料液比混合，在其中添加為所述水溶液質(zhì)量4.0％的纖維素酶，在300W的超聲波功率和25℃溫度下進(jìn)行40min提取，提取后再以4000r/min進(jìn)行離心，15min后收集上清液A；

2)將步驟(1)的上清液A濃縮至干藥量為0.8g/ml，在濃縮產(chǎn)物中加入其體積3倍的無(wú)水乙醇溶液混勻，當(dāng)其溶液中乙醇濃度為85％時(shí)，于2℃下靜置24h，再以5000轉(zhuǎn)/min進(jìn)行離心，10min后收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，即得山香圓葉提取物。

實(shí)施例3

本實(shí)施例涉及本發(fā)明所述的山香原葉提取物，其提取方法包括如下步驟：

1)將唇形科植物山香圓葉(Turpiniae Folium)的干燥果穗藥材粉碎至60～80目，得到的山香圓葉粉末，將水與山香圓葉粉末按35:1的料液比混合，在其中添加為所述水溶液質(zhì)量3.75％的纖維素酶，在250W的超聲波功率和30℃溫度下進(jìn)行35min提取，提取后再以4000r/min進(jìn)行離心，15min后收集上清液A；

2)將步驟(1)的上清液A濃縮至干藥量為1g/ml，在濃縮產(chǎn)物中加入其體積3倍的無(wú)水乙醇溶液混勻，當(dāng)其溶液中乙醇濃度為75％時(shí)，于2℃下靜置24h，再以5000轉(zhuǎn)/min進(jìn)行離心，10min后收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，即得山香圓葉提取物。

試驗(yàn)例1

(1)實(shí)驗(yàn)材料

陽(yáng)性對(duì)照藥：非諾貝特片(批號(hào)：20150903)。果糖：山東西王糖業(yè)有限公司(批號(hào)：201504133)。

5周齡雄性SD大鼠36只，體重180±20g，SPF級(jí)，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。許可證號(hào)：SCXK(湘)2014-0002。

基礎(chǔ)飼料購(gòu)于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。飼料生產(chǎn)配方：玉米20％，豆粕18％，小麥38％，魚(yú)粉10％，麩皮5％，豆油3％，麥芽糊精2％，預(yù)混料4％。

(2)試驗(yàn)方法

高血脂模型法—預(yù)防性給藥

在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下大鼠喂飼基礎(chǔ)飼料觀察7d，進(jìn)行隨機(jī)分組，每天給予定量的基礎(chǔ)飼料，正常組給予定量的蒸餾水，模型組給予相同體積的20％果糖水同時(shí)灌胃2mL生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組給予相同體積的20％果糖水的同時(shí)灌胃陽(yáng)性藥物(50mg/kg/d)，實(shí)驗(yàn)組給予相同體積的20％果糖水的同時(shí)灌胃實(shí)施例1中山香圓葉水提醇沉上清液(含生藥量2.5g/kg/d)，灌胃體積10mL/kg，每周定期稱量體重，于56天實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)禁食不禁水16小時(shí)，取血，離心(3000r/10min)分離血清。測(cè)定血清TC、TG、HDL-C血脂水平。

兩組數(shù)據(jù)采用T檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)采用ANOVA統(tǒng)計(jì)處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P<0.05表示顯著差異。

(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1大鼠預(yù)防性給藥降血脂實(shí)驗(yàn)體重變化情況(n＝9)

與模型組相比aP<0.05，bP<0.01。

由表1數(shù)據(jù)可以得出：經(jīng)過(guò)56天的實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，模型組大鼠的終末體質(zhì)量、給藥后體質(zhì)量增

長(zhǎng)量顯著高于高于正常組(P<0.01)，山香圓葉水提醇沉上清液組終末體質(zhì)量、給藥后體質(zhì)量增長(zhǎng)量顯著低于模型組(P<0.01)。

表2大鼠預(yù)防性給藥降血脂實(shí)驗(yàn)血脂指標(biāo)情況(n＝9)

與模型組相比^aP<0.05，^bP<0.01。

由表2數(shù)據(jù)可以得出：經(jīng)過(guò)56天的實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，模型組大鼠的TC含量顯著高于正常組(p﹤0.01)，模型組大鼠的TG含量顯著高于正常組(p﹤0.01)，模型組大鼠的HDL-cho含量顯著高于正常組(p﹤0.01)，說(shuō)明成功的建立了高血脂大鼠模型；山香圓葉水提醇沉上清液組TC(p﹤0.01)、HDL-cho(p﹤0.05)含量均顯著低于模型組，TG含量均低于模型組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明山香圓葉水提醇沉上清液具有一定的降低高血脂作用。

大鼠的預(yù)防性降血脂實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析表明：山香圓葉水提醇沉上清液能夠顯著的抑制大鼠的TC和HDL-cho水平的升高，顯著降低體重，有利于血脂的控制和預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化；這對(duì)于降低心腦血管疾病的發(fā)生率有重要意義。因此，利用山香圓葉開(kāi)發(fā)具有降血脂作用的食品、保健食品及藥品具有良好的前景。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明、具體實(shí)施方式及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。