本發(fā)明屬于動物脂肪肝測定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種超聲檢測設(shè)備在測定奶牛脂肪肝中的用途。

背景技術(shù)：

奶牛脂肪肝是由于干乳期過于肥胖的母牛產(chǎn)犢后能量負(fù)平衡，體脂動員所致發(fā)的一種以肝臟脂肪蓄積和脂肪變性為病理特征的奶牛圍產(chǎn)期代謝病。多見于2-6胎經(jīng)產(chǎn)奶牛，且多發(fā)于日產(chǎn)奶30Kg以上高產(chǎn)牛。奶牛脂肪肝常發(fā)生于泌乳的頭2周，也見于產(chǎn)犢前和產(chǎn)犢后1個月發(fā)病的，發(fā)病率一般為10％-50％，在高發(fā)牛群可達(dá)50-90％，病死率為25％。奶牛脂肪肝不僅造成奶產(chǎn)量下降，又因其常常誘發(fā)皺胃變位、胎衣不下及生產(chǎn)癱瘓等圍產(chǎn)期其他疾病，給奶牛業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，因此快速準(zhǔn)確地診斷脂肪肝則有利于疾病的治療，減少經(jīng)濟損失。

臨床中常應(yīng)用低血糖、高非酯化脂肪酸、高谷草轉(zhuǎn)氨酶三個血液生化指標(biāo)特征診斷奶牛脂肪肝，然而上述三個血液生化指標(biāo)的變化用于診斷脂肪肝的特異性低下，且因脂肪肝導(dǎo)致的高谷草轉(zhuǎn)氨酶血癥通常預(yù)示疾病已出現(xiàn)了一周以上的病程，已對奶牛業(yè)已造成較嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。迄今為止診斷脂肪肝的金標(biāo)準(zhǔn)依然是肝臟活體穿刺，通過檢測肝組織的脂肪浸潤、肝小葉炎癥、肝細(xì)胞壞死以確定其嚴(yán)重程度。作為介入性診斷方法肝臟活體組織檢測也存在弊端，首先肝臟穿刺會對奶牛造成較強的應(yīng)激導(dǎo)致生產(chǎn)性能的下降，再者作為群發(fā)性疾病，大規(guī)模的應(yīng)用肝臟活體組織穿刺的可實施性不強。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決背景技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本申請?zhí)峁┮环N超聲檢測設(shè)備在測定奶牛脂肪肝中的用途，脂肪肝超聲檢測是一種操作簡便、費用低廉、無損傷的檢測方法。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：超聲檢測設(shè)備在測定奶牛脂肪肝中的用途，包括以下步驟：

(1)、建立奶牛脂肪肝動物模型，并進(jìn)行模型分析；

(2)、分別對產(chǎn)后3天、6天奶牛肝臟區(qū)域進(jìn)行超聲探測，超聲探測模型奶牛肝臟區(qū)域獲取超聲圖像，同時肝臟組織活體穿刺檢測肝組織甘油三酯含量用于界定超聲圖像對應(yīng)的肝臟脂肪沉積嚴(yán)重程度；奶牛脂肪肝肝臟甘油三酯含量進(jìn)行分類，即肝臟中甘油三酯含量小于2％為健康、2％-5％為輕度脂肪肝、5％-10％為中度脂肪肝、10％-20％為重度脂肪肝五類；

(3)、依據(jù)肝組織甘油三酯含量，分析不同嚴(yán)重程度脂肪肝的肝臟超聲圖像聲影特征，建立奶牛脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)：9-11肋間為超聲探測區(qū)域；針對肝臟遠(yuǎn)場即大于6cm的肝臟血管壁及瓣胃壁邊緣輪廓清晰程度，肝臟近場回聲增強程度特征，采用圖像特征3分法即未見異?；蜉p微可見異常為健康奶牛、可見異常為中度脂肪肝、明顯異常為重度脂肪肝；

(4)、所建立的診斷方法的靈敏度、特異性以及觀察值之間一致性等診斷性能做出評價；肝臟甘油三酯含量小于5％的靈敏度91.7％，特異性為100％；肝臟甘油三酯含量大于5％的靈敏度為88.9％，特異性為100％；肝臟甘油三酯含量大于10％的靈敏度100.0％，特異性91.7％。

步驟(3)所述的9-11肋間為超聲探測區(qū)域；甘油三脂含量在2％-5％的奶牛肝臟超聲圖像特征為肝臟遠(yuǎn)場處即大于6cm血管壁邊緣輕微模糊，6cm以外的遠(yuǎn)場處肝臟與瓣胃壁邊緣模糊；甘油三脂含量在5％-10％的奶牛肝臟肝臟遠(yuǎn)場處即大于6cm血管壁邊緣輪廓不可見，6cm以外的遠(yuǎn)場處肝臟與瓣胃壁邊緣聲影明顯減弱輪廓不可辨，肝臟近場回聲增強明顯；甘油三脂含量在10％-20％的奶牛肝臟呈現(xiàn)明顯的肝臟近場回聲增強遠(yuǎn)程回聲減弱，由于回聲減弱導(dǎo)致6cm以外的遠(yuǎn)場肝臟血管及瓣胃壁幾乎不可見，近場回聲可見明顯的肝內(nèi)血管輪廓模糊邊界不可辨，瓣胃壁邊界輪廓模糊。

本發(fā)明具有下列優(yōu)點：(1)、本發(fā)明所建立的模型為模擬自然狀態(tài)的能量負(fù)平衡復(fù)制脂肪肝病例，為臨床生產(chǎn)中奶牛脂肪肝研究提供動物模型；(2)、本發(fā)明診斷方法明確了超聲診斷的相關(guān)參數(shù)設(shè)置，明確了肝臟探測具體部位及肝臟超聲圖像所需信息，明確了脂肪肝病例肝臟超聲圖像特征，保證了奶牛脂肪肝超聲診斷的可重復(fù)性和時效性。(3)、本發(fā)明建立的標(biāo)準(zhǔn)，診斷中度以上脂肪肝的的靈敏度達(dá)88.9％，特異性100％，本發(fā)明的診斷方法具有較理想的應(yīng)用前景。

附圖說明

附圖1為奶牛脂肪肝超聲診斷圖像示意圖。

圖中：A，肝臟實質(zhì)；B，瓣胃壁；C，肝內(nèi)血管，D，超聲深度標(biāo)尺。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明：超聲檢測設(shè)備在測定奶牛脂肪肝中的用途，包括以下步驟：

1、奶牛脂肪肝實驗?zāi)Ｐ徒ⅲ?/p>

(1)、實驗動物及飼養(yǎng)管理：

健康妊娠后期的經(jīng)產(chǎn)奶牛10頭，隨機分成兩組，健康組4頭，模型組6頭，所有奶牛產(chǎn)前正常TMR飼喂。

造模方法：造模時間開始于奶牛分娩當(dāng)天，健康組奶牛正常TMR飼喂；脂肪肝模型組于分娩當(dāng)天飼喂健康組奶牛采食量的三分之一的飼料，之后每天記錄每頭奶牛當(dāng)天的采食量和泌乳量，計算當(dāng)天健康組奶牛干物質(zhì)采食量與泌乳量的比值(R)，記錄造模組奶牛當(dāng)天產(chǎn)奶量(M)，則造模組奶牛第二天的采食量＝1/3*M*R。造模時間6天，造模期間奶牛自由活動，正常榨乳。

(2)、模型分析：

造模期間每3天進(jìn)行一次肝臟活體組織穿刺，對奶牛脂肪肝嚴(yán)重程度的界定采用能量負(fù)平衡導(dǎo)致圍產(chǎn)期奶牛脂肪肝肝臟甘油三酯含量(甘油三酯重量/肝臟濕重)進(jìn)行分類，即肝臟中甘油三酯含量小于2％(健康)、2％-5％(輕度脂肪肝)、5％-10％(中度脂肪肝)、10％-20％(重度脂肪肝)五類。結(jié)果顯示，造模第3天模型組奶牛肝臟呈現(xiàn)不同程度的肝臟甘油三酯沉積，但多為輕度脂肪肝，造模第6天模型組奶牛肝臟甘油含量高達(dá)10％以上，脂肪肝的嚴(yán)重程度與產(chǎn)奶量成正比，造模組奶牛產(chǎn)奶量越高肝臟甘油三酯含量越高。本發(fā)明試驗期間共采集樣品20個，其中健康肝臟樣品5個、輕度脂肪肝肝臟樣品6個、中度脂肪肝肝臟樣品5個、重度脂肪肝肝臟樣品4個。

2、超聲檢測設(shè)備測定奶牛脂肪肝的方法。

(1)、超聲參數(shù)設(shè)置：

超聲探頭采用凸陣式換能探頭，頻率為3.5MHz，其他參數(shù)設(shè)置為探測深度：11.8-12.8cm；動態(tài)范圍：80-90dB；時間增益補償：居中；焦點位置：4cm。實驗期間所有超聲圖像均由同一名超聲技術(shù)人員采集。

(2)、肝臟超聲與圖像分析：

分別對產(chǎn)后3天、6天奶牛肝臟區(qū)域進(jìn)行超聲探測，依據(jù)肝臟活體組織穿刺結(jié)果對不同嚴(yán)重程度的脂肪肝肝臟超聲圖像特征進(jìn)行分析。最終確定了超聲診斷奶牛脂肪肝方法的診斷標(biāo)準(zhǔn)為：9-11肋間為超聲探測區(qū)域；甘油三脂含量在2％-5％的奶牛肝臟超聲圖像特征為肝臟遠(yuǎn)場處(大于6cm)血管壁邊緣輕微模糊，6cm以外的遠(yuǎn)場處肝臟與瓣胃壁邊緣模糊；甘油三脂含量在5％-10％的奶牛肝臟肝臟遠(yuǎn)場處(大于6cm)血管壁邊緣輪廓不可見，6cm以外的遠(yuǎn)場處肝臟與瓣胃壁邊緣聲影明顯減弱輪廓不可辨，肝臟近場回聲增強明顯；甘油三脂含量在10％-20％的奶牛肝臟呈現(xiàn)明顯的肝臟近場回聲增強遠(yuǎn)程回聲減弱，由于回聲減弱導(dǎo)致6cm以外的遠(yuǎn)場肝臟血管及瓣胃壁幾乎不可見，近場回聲可見明顯的肝內(nèi)血管輪廓模糊邊界不可辨，瓣胃壁邊界輪廓模糊。

(3)、診斷方法的性能評估：

三位具有超聲診斷經(jīng)驗的觀察者對本發(fā)明建立的診斷方法進(jìn)行評價，如表1和表2所示，本發(fā)明建立的脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)對健康和重度脂肪肝的診斷靈敏度100％，而輕度脂肪肝的靈敏度僅有38.9％，由表1可見主要是由于輕度脂肪肝肝臟超聲圖像的特征不明顯，且由于奶牛的皮脂層較厚影響肝臟超聲圖像回聲質(zhì)量導(dǎo)致圖像不清晰，使得部分輕度脂肪肝圖像被界定為健康，而輕度脂肪肝奶牛超聲圖像未能達(dá)到中度脂肪肝聲影特征，上述原因則導(dǎo)致輕度脂肪肝超聲診斷靈敏度低下。中度脂肪肝奶牛超聲圖像診斷結(jié)果顯示其靈敏度53.3％，但未見有中度脂肪肝被診斷為健康案例，而是多數(shù)被誤診為重度脂肪肝導(dǎo)致其靈敏度低下。因此綜合表1和表2結(jié)果，本發(fā)明建立的診斷方法不利于輕度脂肪肝的診斷，但對中度和重度脂肪肝的診斷率高，經(jīng)數(shù)據(jù)分析顯示本發(fā)明診斷中度以上嚴(yán)重程度的脂肪肝的靈敏度為88.9％，特異性為100％，真陽性率達(dá)100％，真陰性率91.7％，當(dāng)肝臟甘油三酯含量低于5％時本發(fā)明的診斷靈敏度91.7％，特異性為100％，真陽性率達(dá)100％，真陰性率88.9％。觀察者間個案處理一致性較好。

表1三位觀察者對不同嚴(yán)重程度脂肪肝的肝臟超聲圖像診斷結(jié)果

表2超聲技術(shù)診斷奶牛脂肪肝方法的性能參數(shù)

注：κ為觀察者間間個案處理一致性的Kappa分析值，κ值低于0.4表示觀察者間個案處理一致性不好，

0.4-0.6,表示一致性一般、0.6-0.8表示有較好的一致性、0.8-1表示觀察者間個案處理有完好的一致性。

本申請模擬自然狀態(tài)下的能量負(fù)平衡建立奶牛脂肪肝模型，通過肝臟組織穿刺測定肝臟甘油三酯含量并分析相應(yīng)肝臟超聲圖像特征。最終確定9-11肋間為超聲探測區(qū)域；針對肝臟遠(yuǎn)場(大于6cm)肝臟血管壁及瓣胃壁邊緣輪廓清晰程度，肝臟近場回聲增強程度特征，采用圖像特征3分法即未見異?；蜉p微可見異常為健康奶牛、可見異常為中度脂肪肝、明顯異常為重度脂肪肝。本發(fā)明建立的診斷標(biāo)準(zhǔn)不利于輕度脂肪肝的診斷，對中度和重度脂肪肝的靈敏度高，檢測靈敏度達(dá)88.9％，特異性100％，可重復(fù)性高，具有較理想的應(yīng)用前景。