一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶5-10份，甲氧芐嘧1-2份，α-吡咯烷酮10-20份，大豆卵磷脂30-50份，甘油縮甲醛1-10份，膽固醇10-20份。相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，具有良好的穩(wěn)定性、溶解性、緩釋性，解決復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶的使用方式問題，可以有效的利用復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶藥物藥性和減少臨床使用量，保證藥物在機(jī)體內(nèi)的安全轉(zhuǎn)換及磺胺類與增效劑的有效最佳比例。
【專利說明】一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于獸藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體及其制備方 法。

【背景技術(shù)】 磺胺間甲氧嘧啶為長效磺胺類藥物，具有性質(zhì)穩(wěn)定、抗菌譜廣、易于生產(chǎn)、價(jià)格低廉、使 用方便等特點(diǎn)，對非產(chǎn)酶金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、大腸埃希菌、克雷伯 菌屬、沙門菌屬、志賀菌屬等腸桿菌科細(xì)菌、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌具有 抗菌作用?；前奉愃幬餅閺V譜抑菌劑.其作用機(jī)制為在結(jié)構(gòu)上類似對氨基苯甲酸（PABA)， 可與PABA競爭性作用于細(xì)菌體內(nèi)的二氫葉酸合成酶，從而阻止PABA作為原料合成細(xì)菌所 需的葉酸，減少具有代謝活性的四氫葉酸的量，而后者則是細(xì)菌合成嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸 和脫氧核糖核酸（DNA)的必需物質(zhì)，從而抑制了細(xì)菌的生長繁殖。
[0002] 甲氧芐啶是一種增效劑，與磺胺類藥物聯(lián)合使用，具有增強(qiáng)磺胺類藥物在臨床上 的作用，將這兩種藥物制備成脂質(zhì)體，可以讓其充分的溶合到一起，讓動(dòng)物機(jī)體按比例進(jìn)行 使用，減少因使用不均造成的磺胺類藥物的浪費(fèi)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是甲氧芐啶與磺胺類藥物聯(lián)合使用時(shí)，會(huì)因?yàn)槭褂貌痪?造成磺胺類藥物的浪費(fèi)，為解決上述問題，提供一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體及其制備 方法。
[0004] 本發(fā)明的目的是以下述方式實(shí)現(xiàn)的： 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶5-10 份，甲氧芐嘧1-2份，α -吡咯烷酮10-20份，大豆卵磷脂30-50份，甘油縮甲醛1-10份，膽 固醇10-20份。
[0005] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，再加 入PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 作用2-8s，間隔2-5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用硫酸銨溶液沖洗、水化 得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過濾膜過濾處理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.85%的鹽水在37°C下 恒溫透析3-5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至40-50°C， 孵化20-30min，經(jīng)60-70°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體 粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。
[0006] 所述丙二醇和乙醇的體積比為3:1。
[0007] 所述PBS緩沖液的pH值為6. 8-7. 2。
[0008] 步驟3)所述硫酸銨溶液的濃度為300mmol/L，用量為25-30份。
[0009] 步驟3)所述經(jīng)過濾膜過濾處理為用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處理。
[0010] 步驟5)所述離心處理的條件為：4°C，10000-12000r/min，離心20_40min。
[0011] 將步驟5)制得的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品溶于PBS緩沖液中，得到精制復(fù) 方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液，再將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液進(jìn)一步濃縮，經(jīng) 真空凍干，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體凍干制劑。
[0012] 相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，具有良好的穩(wěn)定 性、溶解性、緩釋性，解決復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶的使用方式問題，可以有效的利用復(fù)方磺胺 間甲氧嘧啶藥物藥性和減少臨床使用量，保證藥物在機(jī)體內(nèi)的安全轉(zhuǎn)換及磺胺類與增效劑 的有效最佳比例。

【具體實(shí)施方式】
[0013] 實(shí)施例1 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶5-10 份，甲氧芐嘧1-2份，α -吡咯烷酮10-20份，大豆卵磷脂30-50份，甘油縮甲醛1-10份，膽 固醇10-20份。
[0014] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，再加 入PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 作用2-8s，間隔2-5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用硫酸銨溶液沖洗、水化 得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過濾膜過濾處理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.85%的鹽水在37°C下 恒溫透析3-5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至40-50°C， 孵化20-30min，經(jīng)60-70°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體 粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。
[0015] 所述PBS緩沖液的pH值為6. 8-7. 2。
[0016] 步驟3)所述硫酸銨溶液的濃度為300mmol/L，用量為25-30份。
[0017] 步驟3)所述經(jīng)過濾膜過濾處理為用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處理。
[0018] 步驟5)所述離心處理的條件為：4°C，10000-12000r/min，離心20_40min。
[0019] 將步驟5)制得的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品溶于PBS緩沖液中，得到精制復(fù) 方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液，再將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液進(jìn)一步濃縮，經(jīng) 真空凍干，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體凍干制劑。
[0020] 實(shí)施例2 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶50g，甲 氧芐嘧10g，α-吡咯烷酮l〇〇g，大豆卵磷脂300g，甘油縮甲醛10g，膽固醇100g。
[0021] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為3:1，再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間2s，間隔時(shí)間2s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為250g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析3h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至40°C，孵 化20min，經(jīng)60°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為 ：4°C，10000r/min，離 心 20min。
[0022] 實(shí)施例3 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶60g，甲 氧芐嘧12g，α-吡咯烷酮120g，大豆卵磷脂340g，甘油縮甲醛30g，膽固醇120g。
[0023] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為2:1，再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間3s，間隔時(shí)間3s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為260g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用1. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析3. 5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至42°C， 孵化22min，經(jīng)62°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為：4°C，10500r/min，離 心 25min。
[0024] 將步驟5)制得的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品溶于PBS緩沖液中，得到精制復(fù) 方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液，再將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液進(jìn)一步濃縮，經(jīng) 真空凍干，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體凍干制劑。
[0025] 實(shí)施例4 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶70g，甲 氧芐嘧14g，α -吡咯烷酮140g，大豆卵磷脂380g，甘油縮甲醛50g，膽固醇140g。
[0026] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為1: 1，再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間4s，間隔時(shí)間4s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為270g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析4h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至44°C，孵 化24min，經(jīng)64°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為：4°C，11000r/min，離 心 30min。
[0027] 實(shí)施例5 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶80g，甲 氧芐嘧16g，α-吡咯烷酮160g，大豆卵磷脂420g，甘油縮甲醛70g，膽固醇160g。
[0028] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為1:2,再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間5s，間隔時(shí)間5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為280g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析4. 5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至46°C， 孵化26min，經(jīng)66°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為：4°C，11500r/min，離 心 35min。
[0029] 實(shí)施例6 : 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶90g，甲 氧芐嘧18g，α-吡咯烷酮180g，大豆卵磷脂460g，甘油縮甲醛85g，膽固醇180g。
[0030] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為4:1，再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間6s，間隔時(shí)間5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為290g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用I. O μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至48°C，孵 化28min，經(jīng)68°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為：4°C，12000r/min，離 心 40min〇
[0031] 實(shí)施例7: 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，由以下重量份的原料制成：磺胺間甲氧嘧啶l〇〇g， 甲氧芐嘧20g，α -吡咯烷酮200g，大豆卵磷脂500g，甘油縮甲醛100g，膽固醇200g。
[0032] 具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，丙二 醇和乙醇的體積比為5:1，再加入pH值為6. 8-7. 2的PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度 為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取α -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 短時(shí)間作用，作用時(shí)間8s，間隔時(shí)間5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用濃度為300mmol/L的硫 酸銨溶液沖洗，用量為300g，再水化得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過用I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜過濾處 理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 85%的鹽水在37°C 下恒溫透析5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至50°C，孵 化30min，經(jīng)70°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。離心處理的條件為：4°C，12000r/min，離 心 40min〇
[0033] 實(shí)施例8 : 1)水相的制備，取5g磺胺間甲氧嘧啶和Ig甲氧芐啶原粉，溶于乙醇和乙醇胺中，然后 加入pH6. 8-7. 2的PBS緩沖液中充分溶解，制成終濃度為2. 5mg/mL的水相，備用。
[0034] 2)取大豆卵磷脂3g、α -吡咯烷酮2mL、膽固醇lg、甘油縮甲醛適量混合溶解，經(jīng)過 常溫超聲波細(xì)胞破碎儀短時(shí)間作用，作用時(shí)間5s，間隔時(shí)間2s，使其充分溶解，得到油相。
[0035] 3)將油相經(jīng)過水溫65°C旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)作用15 min制得空白磷脂膜，然后加入 300mmol/L硫酸銨溶液充分沖洗，水化得到空白脂質(zhì)載體，經(jīng)I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜兩層過 濾處理，備用。
[0036] 4)將上述步驟中的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用0. 85%生理鹽水37°C恒溫5h， 透析后加入到水相中，加熱至40°C，孵化25min，即制成復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品。
[0037] 5)再經(jīng)過4°C低溫lOOOOr/min高速離心25min處理步驟4)中的粗品，留其沉淀 加入PBS緩沖液制得精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液。
[0038] 6)可以將步驟5)中的精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體進(jìn)一步濃縮，經(jīng)真空凍干， 可以制得地克珠利脂質(zhì)體凍干制劑，凍干制劑不僅保存時(shí)間長，而且便于運(yùn)輸。
[0039] 精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體經(jīng)過無菌處理之后，4°C保存，而凍干制劑可以常 溫保存。
[0040] 包封率檢測：將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液取Iml于離心管中，經(jīng)過4°C 低溫15000r/min離心50min處理之后，取0. 5ml上清液，進(jìn)行高效液相測定，作為游離復(fù) 方磺胺間甲氧嘧啶C游；另0. 5ml沉淀作為總復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶C總，然后包封率=(C 總-C游/ C總）100%，結(jié)果見表1。
[0041] 動(dòng)物試驗(yàn)：200只5周齡的健康雞進(jìn)行隨機(jī)分成對照、試驗(yàn)、空白、市售藥組4組， 50只/組，4組試驗(yàn)雞在新的飼養(yǎng)環(huán)境中適應(yīng)一周后，對照、試驗(yàn)組、市售藥組中每只雞人工 感染雞只大腸桿菌，空白接種生理鹽水，自由飲水和采食。
[0042] 病雞表現(xiàn)出的臨床癥狀為：精神沉郁，食欲減退，下痢等；對照組不喂藥，試驗(yàn)組 飼喂實(shí)施例8制得的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，注射用量lml/kg直至全愈；空白組不喂 藥，市售藥組飼喂市售復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶，直至全愈；同時(shí)試驗(yàn)組和市售藥組定點(diǎn)采血， 測定藥動(dòng)學(xué)，試驗(yàn)結(jié)果見表2。
[0043] 實(shí)施例9 : 1)水相的制備，取IOg磺胺間甲氧嘧啶和2g甲氧芐啶原粉，溶于乙醇和乙醇胺中，然后 加入pH6. 8-7. 2的PBS緩沖液中充分溶解，制成終濃度為3mg/mL的水相，備用。
[0044] 2)取大豆卵磷脂5g、α -吡咯烷酮ImU膽固醇I. 5g、甘油縮甲醛適量混合溶解，經(jīng) 過常溫超聲波細(xì)胞破碎儀短時(shí)間作用，作用時(shí)間5s，間隔時(shí)間2s，使其充分溶解，得到油相。
[0045] 3)將油相經(jīng)過水溫60°C旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)作用20 min制得空白磷脂膜，然后加入 300mmol/L硫酸銨溶液充分沖洗，水化得到空白脂質(zhì)載體，經(jīng)I. 0 μ m和0. 45 μ m濾膜兩層過 濾處理，備用。
[0046] 4)將上述步驟中的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用0. 85%生理鹽水37°C恒溫5h， 透析后加入到水相中，加熱至45°C，孵化20 min，即制成復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品。
[0047] 5)再經(jīng)過4°C低溫lOOOOr/min高速離心20min處理步驟4)中的粗品，留其沉淀 加入PBS緩沖液制得精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液。
[0048] 6)可以將步驟5)中的精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體進(jìn)一步濃縮，經(jīng)真空凍干， 可以制得地克珠利脂質(zhì)體凍干制劑，凍干制劑不僅保存時(shí)間長，而且便于運(yùn)輸。
[0049] 精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體經(jīng)過無菌處理之后，4°C保存，而凍干制劑可以常 溫保存。
[0050] 包封率檢測：將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液取Iml于離心管中，經(jīng)過4°C 低溫15000r/min離心50min處理之后，取0. 5ml上清液，進(jìn)行高效液相測定，作為游離復(fù) 方磺胺間甲氧嘧啶C游；另0. 5ml沉淀作為總復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶C總，然后包封率=(C 總-c游/ C總）100%，結(jié)果見表1。
[0051] 動(dòng)物試驗(yàn)同實(shí)例8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。
[0052] 表1二個(gè)實(shí)施例包封率統(tǒng)計(jì)表

【權(quán)利要求】
1. 一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體，其特征在于：由以下重量份的原料制成：磺胺間 甲氧嘧啶5-10份，甲氧芐嘧1-2份，a -吡咯烷酮10-20份，大豆卵磷脂30-50份，甘油縮 甲醛1-10份，膽固醇10-20份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：具體步驟如下： 1) 按比例稱取磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐嘧，使其溶于丙二醇和乙醇的混合液中，再加 入PBS緩沖液，使其充分溶解，制成濃度為2. 5mg/mL的水相，備用； 2) 按比例稱取a -吡咯烷酮、大豆卵磷脂、甘油縮甲醛和膽固醇，經(jīng)常溫超聲波破碎儀 作用2-8s，間隔2-5s，使其充分溶解，得到油相； 3) 將油相經(jīng)旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)制成空白磷脂膜，對空白磷脂膜采用硫酸銨溶液沖洗、水化 得到空白脂質(zhì)體，經(jīng)過濾膜過濾處理，備用； 4) 將步驟3)得到的空白脂質(zhì)體放入透析袋中，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.85%的鹽水在37°C下 恒溫透析3-5h，然后將透析后的空白脂質(zhì)體加入到步驟1)制備的水相中，加熱至40-50°C， 孵化20-30min，經(jīng)60-70°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙二醇和乙醇，得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體 粗品； 5) 將步驟4)得到的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體粗品進(jìn)行離心處理，將離心后的沉淀物 凍干，即可得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：所述丙二醇和乙醇的體積比為3:1。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：所述PBS緩沖液的pH值為6. 8-7. 2。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟3)所述硫酸銨溶液的濃度為300mmol/L，用量為25-30份。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟3)所述經(jīng)過濾膜過濾處理為用1. 0 y m和0. 45 y m濾膜過濾處理。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：步驟5)所述離心處理的條件為：4°C，10000-12000r/min，離心20_40min。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于：將步驟5)制得的復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體精品溶于PBS緩沖液中，得到精制復(fù)方磺胺間 甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液，再將精制復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體溶液進(jìn)一步濃縮，經(jīng)真空凍干， 得到復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶脂質(zhì)體凍干制劑。
【文檔編號】A61K9/127GK104434802SQ201410745084
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月9日
【發(fā)明者】李建正, 郭俊清, 徐進(jìn) 申請人:鄭州后羿制藥有限公司