一種添加有益生元的益生菌微膠囊及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種添加有益生元的益生菌微膠囊，所述益生菌微膠囊由壁材包裹芯材而成；所述壁材為海藻酸鈉與蛋白質(zhì)壁材的混合物，比例為2∶1，終濃度為3％-5％，蛋白質(zhì)壁材為大豆蛋白或乳清蛋白。本發(fā)明還公開了添加有益生元的益生菌微膠囊的制備方法。本發(fā)明的壁材包裹益生菌，海藻酸鈉可以提高益生菌對(duì)胃蛋白酶等的耐受能力，蛋白質(zhì)壁材可以提高益生菌對(duì)胃酸等的耐受能力，兩者結(jié)合大大提高進(jìn)入腸道的活菌數(shù)。芯材中的脫脂奶粉可以提高益生菌對(duì)環(huán)境的耐受力，減少生產(chǎn)加工和運(yùn)輸貯藏中益生菌的損失。芯材中的益生元可以刺激有益菌群的生長(zhǎng)。該益生菌微膠囊可以改善宿主腸道微環(huán)境，增強(qiáng)宿主的抗病能力。
【專利說明】一種添加有益生元的益生菌微膠囊及制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種微膠囊的制備方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地說是一種添加有 益生元的益生菌微膠囊及制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 微膠囊是指一種具有聚合物壁殼和微型容器或包裝物。微膠囊造粒技術(shù)就是將固 體、液體或氣體包埋、封存在一種微型膠囊內(nèi)成為一種固體微粒產(chǎn)品的技術(shù)。具體來說是 指將某一目的物（芯或內(nèi)相）用各種天然的或合成的高分子化合物連續(xù)薄膜（壁或外相） 完全包覆起來，而對(duì)目的物的原有化學(xué)性質(zhì)絲毫無損，然后逐漸地通過某些外部刺激或緩 釋作用使目的物的功能再次在外部呈現(xiàn)出來，或者依靠囊壁的屏蔽作用起到保護(hù)芯材的作 用，微膠囊的直徑一般為1?500 μ m，壁的厚度為0· 5?150 μ m，已開發(fā)了粒徑在1 μ m以下 的超微膠囊。微膠囊粒子在某些實(shí)例中擴(kuò)大到〇. 25?1000 μ m。當(dāng)微膠囊粒徑小于5 μ m 時(shí)，因布朗運(yùn)動(dòng)加劇而不容易收集；當(dāng)粒徑大于300 μπι時(shí)，其表面摩擦系數(shù)會(huì)突然下降而 失去微膠囊作用。一般膠囊膜壁厚度為1-30 ym?；瘖y品中用的多為32 ym和180 μπι。超 薄壁微膠囊膜壁厚度為〇. 01 μπι。國(guó)外微膠囊已用于遮蓋霜、保濕劑、口紅、眼影、香水、浴 皂、香粉等中。微膠囊能夠提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性，防止各種組分之間的相互干擾。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 發(fā)明目的：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種添加有益 生元的益生菌微膠囊。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供了上述益生菌微膠囊的制備方法。
[0004] 技術(shù)方案：為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明的目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：本發(fā)明提供了一 種添加有益生元的益生菌微膠囊，所述益生菌微膠囊由壁材包裹芯材而成；所述壁材為海 藻酸鈉與蛋白質(zhì)壁材的混合物，比例為2:1，終濃度為3% -5%，蛋白質(zhì)壁材為大豆蛋白或 乳清蛋白。
[0005] 進(jìn)一步地，按重量份數(shù)，所述芯材由70-85 %混合益生菌菌劑、5-10 %益生元、 5-10%中藥提取液和5-10 %脫脂奶粉混合組成。
[0006] 進(jìn)一步地，所述混合益生菌菌劑組成成分包括釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽 孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌中的一種或多種。
[0007] 進(jìn)一步地，按重量份數(shù)，所述中藥提取液含有石榴皮60?70%、楊樹花20? 30%、雞內(nèi)金10?20%。
[0008] 進(jìn)一步地，所述益生元為寡糖，包括果寡糖、甘露寡糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低 聚殼聚糖、殼寡糖、菊粉中的一種或多種。
[0009] 上述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊的制備方法，包括以下步驟：
[0010] 1)混合益生菌菌劑的制備：將各種益生菌各自接種、發(fā)酵培養(yǎng)，使其發(fā)酵液活菌 濃度達(dá)到10 8cfu/g獲得菌液；將上述菌液按一定比例混合，離心后得到菌體沉淀，用5倍滅 菌蒸餾水重懸菌體備用；
[0011] 2)中藥提取液的制備：按石榴皮60?70%、楊樹花20?30%、雞內(nèi)金10?20% 粉碎并混合均勻，加入10倍的水，煎煮濃縮至Ig中藥lml，降溫過濾待用；
[0012] 3)益生菌微膠囊的制備：按70-85%混合益生菌菌液、5-10%益生元、5-10%中藥 提取液和5-10%脫脂奶粉混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行混勻，得到芯材；將4%海藻酸鈉、2%大豆 蛋白或乳清蛋白加入蒸餾水中混合，加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加 CaCl2，固化30-40min，過濾收集微膠囊。
[0013] 有益效果：本發(fā)明中壁材包裹益生菌，海藻酸鈉可以提高益生菌對(duì)胃蛋白酶等的 耐受能力，蛋白質(zhì)壁材可以提高益生菌對(duì)胃酸等的耐受能力，兩者結(jié)合大大提高進(jìn)入腸道 的活菌數(shù)。芯材中的脫脂奶粉可以提高益生菌對(duì)環(huán)境的耐受力，減少生產(chǎn)加工和運(yùn)輸貯藏 中益生菌的損失。芯材中的益生元可以刺激有益菌群的生長(zhǎng)。該益生菌微膠囊可以改善宿 主腸道微環(huán)境，增強(qiáng)宿主的抗病能力。

【具體實(shí)施方式】
[0014] 實(shí)施例1 :含益生元和中藥提取物的嗜酸乳桿菌與釀酒酵母混合微膠囊的制備
[0015] 按石榴皮700g、楊樹花200g、雞內(nèi)金IOOg粉碎并混合均勻，加入IOL水，煎煮濃縮 至1L，降溫過濾待用。將嗜酸乳桿菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、IOOr/ min條件下，培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，將釀酒酵母種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng) 基，在37°C、100r/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離心，用 5倍滅菌蒸餾水將所得菌體沉淀重懸。將7. 5L混合益生菌菌液（終濃度為75% )、IL中藥 提取液（終濃度為10% )、1L濃度為lKg/L的果寡糖的懸濁液（終濃度為10% )和0· 5L 濃度為lKg/L脫脂奶粉的懸濁液（終濃度為5% )混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行混勻，得到芯材； 將1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% )溶于30L蒸餾水中， 加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0. 4mol/L CaCl2，固化35min，過濾收 集微膠囊。
[0016] 對(duì)比例1 :不含益生元和中藥提取物的嗜酸乳桿菌與釀酒酵母混合微膠囊的制備
[0017] 將嗜酸乳桿菌種子液按1%的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、100r/min條件下， 培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到10 8cfu/g，將釀酒酵母種子液按1%的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、 100r/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到10 8cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離心，用5倍滅菌蒸 餾水將所得菌體沉淀重懸。將IOL混合益生菌菌液、500g脫脂奶粉混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行 混勻，得到芯材；將1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% )溶于 30L蒸餾水中，加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化 35min，過濾收集微膠囊。
[0018] 實(shí)施例2含益生元和中藥提取物的嗜酸乳桿菌與屎腸球菌混合微膠囊的制備
[0019] 按石榴皮700g、楊樹花200g、雞內(nèi)金IOOg粉碎并混合均勻，加入IOL水，煎煮濃縮 至1L，降溫過濾待用。將嗜酸乳桿菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、IOOr/ min條件下，培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g ;將屎腸球菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng) 基，在37°C、lOOr/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離心，用5 倍滅菌蒸餾水將所得菌體沉淀重懸。將8L混合益生菌菌液（終濃度為8% )、0. 75L中藥提 取液（終濃度為7. 5% )、0· 75L濃度為lKg/L的果寡糖懸濁液（終濃度為7. 5% )和0· 5L 濃度為lKg/L脫脂奶粉懸濁液（終濃度為5% )混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行混勻，得到芯材；將 1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% )溶于30L蒸餾水中，加 入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0. 4mol/L CaCl2，固化40min，過濾收集 微膠囊。
[0020] 對(duì)比例2不含益生元和中藥提取物的嗜酸乳桿菌與屎腸球菌混合微膠囊的制備
[0021] 將嗜酸乳桿菌種子液按1%的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、100r/min條件下， 培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到10 8cfu/g ;將屎腸球菌種子液按1%的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、 100r/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離心，用5倍滅菌蒸 餾水將所得菌體沉淀重懸。將IOL混合益生菌菌液、500g脫脂奶粉混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行 混勻，得到芯材；將1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% )溶于 30L蒸餾水中，加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化 40min，過濾收集微膠囊。
[0022] 實(shí)施例3含益生元和中藥提取物的枯草芽孢桿菌和屎腸球菌混合微膠囊的制備
[0023] 按石榴皮600g、楊樹花200g、雞內(nèi)金200g粉碎并混合均勻，加入IOL水，煎煮濃 縮至1L，降溫過濾待用。將枯草芽孢桿菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、 100r/min條件下，培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，將屎腸球菌種子液按1%的接種量接種發(fā) 酵培養(yǎng)基，在37°C、lOOr/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到10 8cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離 心，用5倍滅菌蒸餾水將所得菌體沉淀重懸。將8L混合益生菌菌液（終濃度為8% )、0. 5L 中藥提取液（終濃度為5% )、0· 5L濃度為lKg/L的果寡糖懸濁液（終濃度為5% )和IL 濃度為lKg/L脫脂奶粉懸濁液（終濃度為10% )混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行混勻，得到芯材； 將1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% )溶于30L蒸餾水中， 加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0. 4mol/L CaCl2，固化40min，過濾收 集微膠囊。
[0024] 對(duì)比例3不含含益生元和中藥提取物的枯草芽孢桿菌和屎腸球菌混合微膠囊的 制備
[0025] 將枯草芽孢桿菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在37°C、100r/min條件 下，培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g ;將屎腸球菌種子液按1 %的接種量接種發(fā)酵培養(yǎng)基，在 37°C、lOOr/min培養(yǎng)活菌濃度達(dá)到108cfu/g，按1:1的比例將兩種菌液混合離心，用5倍滅 菌蒸餾水將所得菌體沉淀重懸。將IOL混合益生菌菌液、500g脫脂奶粉混合，高速均質(zhì)器 進(jìn)行混勻，得到芯材；將1200g海藻酸鈉（終濃度為4% )、600g大豆蛋白（終濃度為2% ) 溶于30L蒸餾水中，加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加0.4mol/L CaCl2, 固化40min，過濾收集微膠囊。
[0026] 實(shí)施例4 :
[0027] 對(duì)實(shí)施例1?3和對(duì)比例1?3的微囊化產(chǎn)品進(jìn)行對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能影響的評(píng)定測(cè) 試。
[0028] 以實(shí)施例1?3和對(duì)比例1?3的微膠囊作為飼料添加劑，以日糧重量的 0. 1% -0. 2%添加到飼料中，以不加微膠囊的飼料作為空白對(duì)照。選擇10公斤左右斷奶杜 長(zhǎng)大三元雜交小豬70頭，經(jīng)10天保育過渡，隨機(jī)分為7組，每組10頭，其中1-3組對(duì)應(yīng)實(shí) 施例1-3,4-6組對(duì)應(yīng)對(duì)比例1-3,第7組為空白對(duì)照組。日常管理按照常規(guī)方式進(jìn)行，各組 實(shí)驗(yàn)豬均自由采食，自由飲水，至第30天后停止，統(tǒng)計(jì)各項(xiàng)數(shù)據(jù)。結(jié)果如下：
[0029] 表1微膠囊對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響
[0030]

【權(quán)利要求】
1. 一種添加有益生元的益生菌微膠囊，其特征在于：所述益生菌微膠囊由壁材包裹芯 材而成；所述壁材為海藻酸鈉與蛋白質(zhì)壁材的混合物，比例為2:1，終濃度為3% -5%，蛋白 質(zhì)壁材為大豆蛋白或乳清蛋白。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊，其特征在于：按重量份 數(shù)，所述芯材中由70-85%混合益生菌菌劑、5-10%益生元、5-10%中藥提取液和5-10%脫 脂奶粉混合組成，上述各組分含量百分?jǐn)?shù)之和為100%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊，其特征在于：所述混合 益生菌菌劑組成成分包括釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、糞腸球 菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌中的一種或多種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊，其特征在于：按重量份 數(shù)，所述中藥提取液含有石榴皮60?70 %、楊樹花20?30 %、雞內(nèi)金10?20 %，上述各組 分含量百分?jǐn)?shù)之和為100%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊，其特征在于：所述益生 元為寡糖，包括果寡糖、甘露寡糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚殼聚糖、殼寡糖、菊粉中的一 種或多種。
6. 權(quán)利要求1?4任一項(xiàng)所述的一種添加有益生元的益生菌微膠囊的制備方法，其特 征在于：包括以下步驟： 1) 混合益生菌菌劑的制備：將各種益生菌各自接種、發(fā)酵培養(yǎng)，使其發(fā)酵液活菌濃度 達(dá)到108cfu/g獲得菌液；將上述菌液按一定比例混合，離心后得到菌體沉淀，用5倍滅菌蒸 餾水重懸菌體備用； 2) 中藥提取液的制備：按石榴皮60?70%、楊樹花20?30%、雞內(nèi)金10?20%粉碎 并混合均勻，加入10倍的水，煎煮濃縮至lg中藥lml提取液，降溫過濾待用； 3) 益生菌微膠囊的制備：按70-85%混合益生菌菌液、5-10%益生元、5-10%中藥提取 液和5-10%脫脂奶粉混合，高速均質(zhì)器進(jìn)行混勻，得到芯材；將4%海藻酸鈉、2%大豆蛋白 或乳清蛋白加入蒸餾水中混合，加入芯材充分混勻，通過Equl微膠囊發(fā)生器，并滴加 CaCl2， 固化30-40min，過濾收集微膠囊。
【文檔編號(hào)】A61K35/742GK104435283SQ201410652096
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月17日
【發(fā)明者】張旭, 張志成 申請(qǐng)人:金陵科技學(xué)院