來(lái)自prasinococcale的多糖的制作方法
【專利摘要】提供了包含可獲自微藻類Prasinococcus capsulatus和與P.capsulatus相關(guān)的藻株的多糖的組合物，用于在免疫系統(tǒng)的紊亂，例如銀屑病和皮膚病狀況、內(nèi)部免疫系統(tǒng)紊亂，特別是腸道炎性狀況和呼吸道狀況的治療中預(yù)防地和/或治療上使用。此外，提供了可獲自微藻類Prasinococcus capsulatus或與P.capsulatus相關(guān)的藻株的多糖的衍生物，以及這樣的衍生物在免疫系統(tǒng)的紊亂的治療中預(yù)防地和/或治療上的用途。
【專利說(shuō)明】來(lái)自PRASINOCOCCALE的多糖 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及包含可獲自微藻類Prasinococcus capsulatus和與P. capsulatus 相關(guān)的藻株的多糖的組合物，用于在免疫系統(tǒng)的紊亂諸如炎性紊亂，例如銀肩病和皮膚病 學(xué)狀況的治療中預(yù)防地和/或治療上使用。此外，提供了可獲自微藻類Prasinococcus capsulatus和與P. capsulatus相關(guān)的藻株的多糖的衍生物，以及這樣的衍生物在免疫系 統(tǒng)的紊亂諸如炎性紊亂，例如銀肩病和皮膚病學(xué)狀況的治療中預(yù)防地和/或治療上的用 途。
[0002] 還提供了可獲自微藻類Prasinococcus capsulatus和與P. capsulatus相關(guān)的藻 株的多糖及其衍生物在制備化妝品和營(yíng)養(yǎng)組合物中的用途。
[0003] 發(fā)明背景
[0004] 已開(kāi)發(fā)大型藻類（macroalgae)(海藻）提供長(zhǎng)期建立的產(chǎn)品諸如藻酸鹽和鹿角菜 膠及較新的產(chǎn)品諸如巖藻聚糖，然而，還未以這種方式大量使用微藻類，并且存在源自微藻 類的這些產(chǎn)品的相對(duì)很少的表征。
[0005] 發(fā)明概述
[0006] 根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了可獲自Prasinococcus capsulatus或與 P. capsulatus相關(guān)的藻株的形成凝膠的多糖，其中形成凝膠的多糖是包括葡萄糖、半乳糖、 阿拉伯糖和糖醛酸單元的大于670 kDa的分子量的硫酸化雜聚合物，用于在免疫系統(tǒng)紊亂， 特別是為炎性狀況的免疫系統(tǒng)紊亂的治療中使用。
[0007] 本發(fā)明人已采用一系列方法以確定本發(fā)明的多糖及其衍生物的組成。使用本文詳 述的方法，不希望受關(guān)于多糖的結(jié)構(gòu)理論的束縛，本發(fā)明人已如所述地表征了多糖及衍生 物。因此，在實(shí)施方案中，當(dāng)使用本文所述的方法來(lái)表征多糖或衍生物時(shí)，其提供了單糖和 硫酸組成，如本文所述的。
[0008] 已顯示相對(duì)最近地發(fā)現(xiàn)的物種Prasinococcus capsulatus產(chǎn)生多糖 (Miyashita,等人 Prasinococcus capsulatus Gen.Et Sp. Nov. , A New Marine Coccoid Prasinophyte.J. Gen. Appl. Microbiol. ,39, 571-582 (1993)以及 Miyashita， 等人 Composition and nature of extracellular polysaccharide produced by newly isolated coccoid prasinophyte,Prasinococcus capsulatus. J. Marine Biotechnol.，3, 136-139(1995) ·)。
[0009] 合適地，與 Prasinococcus capsulatus 相關(guān)的藻株可包括 Prasinococcales 藻株。在實(shí)施方案中，與Prasinococcus capsulatus相關(guān)的藻株可包括Prasinoderma singularis。在實(shí)施方案中，多糖可以是與微藻類的細(xì)胞壁相關(guān)的多糖，和/或可存在于微 藻類的勻漿中，和/或可以是分泌的多糖或胞外多糖?？梢苑蛛x的、純化的、或半純化的形 式提供多糖。在實(shí)施方案中，多糖可以是已從細(xì)胞生物質(zhì)中分離的純化的材料，使得多糖為 按重量計(jì)至少50 %多糖，和更優(yōu)選地按重量計(jì)75 %以上多糖，更優(yōu)選地按重量計(jì)85 %以上 多糖，更優(yōu)選地按重量計(jì)約95 %多糖。
[0010] 在實(shí)施方案中，免疫系統(tǒng)紊亂是血管細(xì)胞和組織對(duì)內(nèi)部或外部刺激的應(yīng)答不足、 過(guò)度或長(zhǎng)期的那些。在炎性狀況中該應(yīng)答通常是過(guò)度的和/或長(zhǎng)期的，導(dǎo)致增加的和保持 的免疫細(xì)胞（諸如中性粒細(xì)胞和T細(xì)胞）的活化，其可浸潤(rùn)組織并增加促炎性介質(zhì)的產(chǎn)生， 導(dǎo)致維持的炎癥。已確定了多糖可被用于通過(guò)以下減輕該活化的效應(yīng)：例如，通過(guò)減少中性 粒細(xì)胞蛋白酶，諸如彈性蛋白酶的活性；通過(guò)減少促炎性蛋白（細(xì)胞因子）和活性氧物質(zhì)從 血液和內(nèi)皮細(xì)胞的分泌；以及通過(guò)減少血細(xì)胞向受影響的組織的浸潤(rùn)。
[0011] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，如本文描述的多糖可用于在炎性皮膚狀況，包括濕瘆、銀 肩病和特應(yīng)性皮炎的治療中使用。
[0012] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，如本文描述的多糖可用于在腸的炎性狀況的治療中使 用，特別是在腸紊亂，包括腸易激綜合征、克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎的治療中使用。
[0013] 在本發(fā)明的實(shí)施方案中，如本文描述的多糖可用于在包括以下的呼吸道炎癥狀 況的治療中使用：哮喘、囊性纖維化病、肺氣腫、慢性阻塞性肺紊亂（chronic obstructive pulmonary disorder)、急性呼吸窘迫綜合征、或過(guò)敏性鼻炎。
[0014] 用于本發(fā)明的多糖的實(shí)施方案可通過(guò)特征（i)、（ii)、（iii)、（iv)、和（V)的至少 一種、至少兩種、至少三種、至少四種、或至少五種來(lái)表征。
[0015] (i)分子量范圍
[0016] (ii)單糖組成
[0017] (iii)免疫調(diào)節(jié)活性
[0018] (iv)硫酸含量（作為分子的分子量的百分比）
[0019] (V)粘度/形成凝膠特性
[0020] 分子量范圍
[0021] 用于本發(fā)明的多糖通常具有670 kDa或比670 kDa更大的分子量。
[0022] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖可具有在670 kDa至40兆Da的范圍內(nèi)的分子量。在 實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖可具有以下的分子量：大于或等于1兆Da、大于或等于5兆Da、 大于或等于10兆Da、大于或等于15兆Da、大于或等于20兆Da、大于或等于25兆Da、大于 或等于30兆Da、大于或等于35兆Da、或40兆Da。
[0023] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖可包含約
[0024] 20 %至30 %葡萄糖
[0025] 30 %至60 %半乳糖
[0026] 4%至19%阿拉伯糖
[0027] 2 %至6 %糖醛酸
[0028] 和小百分比（1 %至10% )的其他糖，更特別地
[0029] 1% -4% 鼠李糖
[0030] 1% -3%木糖
[0031] 1% -10% 甘露糖
[0032] (%按重量計(jì)）。
[0033] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖可包含約
[0034] 25 %至29 %葡萄糖
[0035] 35 %至47 %半乳糖
[0036] 14 %至15 %阿拉伯糖
[0037] 4%至6%糖醛酸
[0038] 和小百分比（1 %至4% )的其他糖，更特別地
[0039] 2. 4% 鼠李糖
[0040] L 8 % 木糖
[0041] 3. 3 % 甘露糖
[0042] (%按重量計(jì)）。
[0043] 在實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的多糖可具有以下的硫酸含量：按重量計(jì)約17%至 35%、按重量計(jì)17%至30%、適當(dāng)?shù)兀粗亓坑?jì)25%至30%、適當(dāng)?shù)匕粗亓坑?jì)17%至25%， 多糖可適當(dāng)?shù)鼐哂幸韵碌牧蛩岷浚喊粗亓坑?jì)約20%、適當(dāng)?shù)匕粗亓坑?jì)約19%。
[0044] 在實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的多糖可顯示體外免疫調(diào)節(jié)活性，其中例如相對(duì)于未 被提供多糖的中性粒細(xì)胞，多糖可抑制中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性的約60%至90%，特別 是 60%至 80%。
[0045] 除了治療上有助于治療皮膚的炎性狀況，還認(rèn)為本文描述的多糖的實(shí)施方案可用 于治療內(nèi)部免疫系統(tǒng)紊亂，特別是腸炎性狀況和呼吸道狀況，例如腸炎性狀況包括腸紊亂、 腸易激綜合征、克羅恩病、和潰瘍性結(jié)腸炎，且呼吸道狀況包括哮喘、囊性纖維化病、肺氣 月中、慢性阻塞性肺紊亂、急性呼吸窘迫綜合征、或過(guò)敏性鼻炎。這樣的狀況的治療可經(jīng)由多 糖的攝取或通過(guò)多糖的吸入。還認(rèn)為，當(dāng)患者具有潛在的免疫系統(tǒng)紊亂，但不呈現(xiàn)癥狀時(shí)， 則可供給本文描述的多糖以使癥狀的風(fēng)險(xiǎn)最小化。
[0046] 因此本發(fā)明的第二個(gè)方面提供了包含可獲自P. capsulatus或與P. capsulatus相 關(guān)的藻株的多糖的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，其中形成明膠的多糖是具有比670 kDa更大的分子量的硫 酸化雜聚合物，主要包含葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖醛酸單元。
[0047] 此外，當(dāng)不需要治療益處時(shí)，本發(fā)明人認(rèn)為多糖可為用戶有助地提供美容上的優(yōu) 勢(shì)。
[0048] 因此本發(fā)明的第三個(gè)方面是包含可獲自P. capsulatus或與P. capsulatus相關(guān)的 藻株的多糖的美容制品，其中形成明膠的多糖是具有比670 kDa更大的分子量的硫酸化雜 聚合物，主要包含葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖醛酸單元。
[0049] 應(yīng)認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的第一方面的多糖的實(shí)施方案可用于本發(fā)明的第二和第三方 面。
[0050] 多糖的衍生物及其用途
[0051] 本發(fā)明人已確認(rèn)了，可獲自 Prasinococcus capsulatus 或與 P. capsulatus 相關(guān) 的藻株的形成凝膠的多糖的衍生物，其中形成明膠的多糖是具有比670 kDa更大的分子量 的硫酸化雜聚合物，包括葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖醛酸單元，也可用于治療免疫系統(tǒng) 紊亂，特別是促進(jìn)炎性應(yīng)答的免疫系統(tǒng)紊亂。
[0052] 因此本發(fā)明的第四個(gè)方面提供了來(lái)自Prasinococcus capsulatus或與 P. capsulatus相關(guān)的藻株的形成凝膠的多糖的衍生物（低聚糖），其中形成明膠的多糖是 具有比670 kDa更大的分子量的硫酸化雜聚合物，主要包括葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖 醛酸單元，其中所述衍生物具有約2 kDa至10 kDa的范圍內(nèi)、或約2 kDa至20 kDa的范圍 內(nèi)、約20 kDa至60 kDa的范圍內(nèi)的分子量。
[0053] 應(yīng)認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的第一方面的多糖的實(shí)施方案可用于形成本發(fā)明的第四方面的 衍生物。
[0054] 在實(shí)施方案中，衍生物可以是具有范圍在2 kDa至10 kDa內(nèi)的分子量的低分子量 片段。在實(shí)施方案中，衍生物可包括具有范圍在20 kDa至60kDa內(nèi)的分子量的多糖的更大 片段。
[0055] 在實(shí)施方案中，約2 kDa至10 kDa的多糖的低分子量片段可包括約
[0056] 30 %至40 %葡萄糖
[0057] 30 %至40 %半乳糖
[0058] 8%至14%阿拉伯糖
[0059] 7 %至11 %糖醛酸
[0060] 和小百分比（1 %至10% )，適當(dāng)?shù)匦“俜直龋? %至4% )的其他糖單元按重 量計(jì)）。
[0061] 在實(shí)施方案中，約2 kDa至10 kDa的多糖的低分子量片段可包括約
[0062] 35 %葡萄糖
[0063] 35 %半乳糖
[0064] 11 %阿拉伯糖
[0065] 9 %糖醛酸
[0066] 和小百分比（1 %至10% )，適當(dāng)?shù)匦“俜直龋? %至4% )的其他糖單元按重 量計(jì)）。
[0067] 在實(shí)施方案中，多糖的大片段（約20 kDa至60 kDa)可包括
[0068] 25 %至28 %葡萄糖
[0069] 35 %至55%，適當(dāng)?shù)?5 %至45 %半乳糖
[0070] 8%至17%阿拉伯糖，適當(dāng)?shù)?5%阿拉伯糖
[0071] 4%-6 % 糖醛酸
[0072] 和小百分比（1 %至4% )的其他糖單元按重量計(jì)）。
[0073] 在實(shí)施方案中，多糖的大片段（約20 kDa至60 kDa)可包括
[0074] 25 %葡萄糖
[0075] 50 %半乳糖
[0076] 15 %阿拉伯糖
[0077] 5 %糖醛酸
[0078] 和小百分比（1%至5%)的其他糖單元按重量計(jì)）。
[0079] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖的衍生物可包含按重量計(jì)約
[0080] 8. 4%阿拉伯糖
[0081] 0.7 % 鼠李糖
[0082] 2.0 % 木糖
[0083] 2. 2 % GalA (半乳糖醛酸）
[0084] 57. 9 % 半乳糖
[0085] 24. 6 %葡萄糖
[0086] 3. 8% GlcA (葡糖醛酸）。
[0087] 適當(dāng)?shù)?，在?shí)施方案中，本發(fā)明的多糖的衍生物可具有按重量計(jì)約20%至30%、 適當(dāng)?shù)匕粗亓坑?jì)25%至30%的硫酸含量。
[0088] 在實(shí)施方案中，相對(duì)于未被提供衍生物的中性粒細(xì)胞，多糖的低聚糖衍生物可抑 制中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶釋放的約70 %至90 %、適當(dāng)?shù)?0 %至90 %。
[0089] 在實(shí)施方案中，相對(duì)于其中未被提供衍生物的中性粒細(xì)胞，多糖的衍生物可抑制 中性粒細(xì)胞活性氧物質(zhì)（ROS)產(chǎn)生的約30%-40%。在實(shí)施方案中，相對(duì)于未被提供衍生 物的角質(zhì)形成細(xì)胞，低聚糖衍生物可抑制人角質(zhì)形成細(xì)胞IL-8基因表達(dá)和釋放的約70% 至100%。該活性比得上良好表征的多糖抗凝血藥肝素，肝素抑制彈性蛋白酶釋放的約 60% -75%，但對(duì)ROS產(chǎn)生不具有顯著效應(yīng)。該活性還比得上海藻多糖巖藻依聚糖，巖藻 依聚糖抑制彈性蛋白酶釋放的約70%至90%，以及角質(zhì)形成細(xì)胞IL-8釋放的約80%至 90%〇
[0090] 在實(shí)施方案中，相對(duì)于未被提供衍生物的人角質(zhì)形成細(xì)胞，多糖的低聚糖衍生物 可抑制人角質(zhì)形成細(xì)胞IL6和IL17C釋放的約50% -70%。在實(shí)施方案中，相對(duì)于其中未 被提供衍生物的人PBMC，多糖的低聚糖衍生物可抑制來(lái)自人類外周血單核細(xì)胞（PBMC)的 干擾素 γ的釋放的約50%-70%。在實(shí)施方案中，相對(duì)于未被提供衍生物的中性粒細(xì)胞和 單核細(xì)胞，低聚糖可抑制人中性粒細(xì)胞的趨化性的約50% -70%和THP-I (單核細(xì)胞）細(xì)胞 的趨化性的約30% -50%。在實(shí)施方案中，相對(duì)于其中未被提供衍生物的對(duì)照，多糖的低聚 糖衍生物可以劑量依賴性方式抑制咪喹莫特誘導(dǎo)的小鼠皮膚炎癥。
[0091] 就約而言意指在在所述值的1 %至20%之內(nèi)，更特別地在10%之內(nèi)，又更特別地 在5%之內(nèi)，甚至又更特別地2%之內(nèi)。
[0092] 本發(fā)明的衍生物的實(shí)施方案可用于在免疫系統(tǒng)紊亂，特別是促進(jìn)炎性應(yīng)答的免疫 系統(tǒng)紊亂，更具體地皮膚狀況，包括濕瘆、銀肩病和特應(yīng)性皮炎的治療中使用。
[0093] 本發(fā)明的衍生物的實(shí)施方案可用于在內(nèi)部免疫系統(tǒng)紊亂，特別是腸的炎性狀況和 呼吸道狀況，例如腸炎性狀況包括腸紊亂、腸易激綜合征、克羅恩病、和潰瘍性結(jié)腸炎，且呼 吸道狀況包括哮喘、囊性纖維化病、肺氣腫、慢性阻塞性肺紊亂、急性呼吸窘迫綜合征、或過(guò) 敏性鼻炎的治療中使用。
[0094] 這樣的衍生物在這樣的治療中的用途提供了本發(fā)明的另外的方面。
[0095] 適當(dāng)?shù)?，可通過(guò)以下本領(lǐng)域已知的任何方法制備衍生物的實(shí)施方案：包括水 解或酶法水解多糖或通過(guò)自由基或光化學(xué)方法，諸如由Higashi等人（Controlled photochemical depolymerization of K5 heparosan, a bioengineered heparin precursor, Carbohydrate Polymers 86(2011) 1365 - 1370)描述的。
[0096] 本發(fā)明的衍生物的實(shí)施方案可以是通過(guò)自由基或光化學(xué)方法制備的解聚的多糖。
[0097] 衍生物的實(shí)施方案可以是具有按重量計(jì)約25% -30%的硫酸含量的低聚糖。
[0098] 優(yōu)選地本發(fā)明的低聚糖衍生物可具有等于或大于本發(fā)明的天然多糖物質(zhì)的免疫 調(diào)節(jié)特性。
[0099] 根據(jù)本發(fā)明的第五個(gè)方面，提供了包含來(lái)自Prasinococcus capsulatus或與 P. capsulatus相關(guān)的藻株的多糖的至少一種衍生物的美容制品，其中形成明膠的多糖是具 有比670 kDa更大的分子量的硫酸化雜聚合物，主要包括葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖醛 酸單元，其中所述衍生物具有范圍2 kDa至10 kDa內(nèi)或約20 kDa至60 kDa的范圍內(nèi)的分 子量。
[0100] 在實(shí)施方案中，衍生物可以是具有范圍2 kDa至10 kDa內(nèi)的分子量的低分子量片 段。在實(shí)施方案中，衍生物可包括具有范圍20 kDa至60 kDa內(nèi)的分子量的多糖的大片段。 [0101] 在實(shí)施方案中，可提供衍生物的大片段和低分子量片段的組合。
[0102] 根據(jù)本發(fā)明的第六個(gè)方面，提供了包含來(lái)自Prasinococcus capsulatus或與 P. capsulatus相關(guān)的藻株的多糖的至少一種衍生物的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，其中形成明膠的多糖是 具有比670 kDa更大的分子量的硫酸化雜聚合物，主要包括葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖 醛酸單元，其中所述衍生物具有范圍2 kDa至10 kDa內(nèi)或約20 kDa至60 kDa的范圍內(nèi)的 分子量。
[0103] 在實(shí)施方案中，衍生物可以是具有范圍2 kDa至10 kDa內(nèi)的分子量的低分子量片 段。在實(shí)施方案中，衍生物可包括具有范圍20 kDa至60 kDa內(nèi)的分子量的多糖的大片段。 [0104] 在實(shí)施方案中，可提供衍生物的大片段和低分子量片段的組合。
[0105] 組合物
[0106] 適當(dāng)?shù)兀商峁┤绫疚挠懻摰亩嗵腔蜓苌镒鳛榻M合物的一部分。這樣的組合物 可適于口服、局部、直腸或腸胃外、鼻或肺施用（通過(guò)吸入）。在實(shí)施方案中，組合物根據(jù)用 途可用于局部施用至皮膚或用于攝取。
[0107] 在實(shí)施方案中，備用的組合物可呈片劑、膠囊、扁膠囊、或可分散的顆粒的形式，其 可，例如，在施用之前懸浮于水中或撒在食物上。組合物可便利地呈現(xiàn)為單位劑型，并可通 過(guò)食品工業(yè)中熟知的任何方法來(lái)制備以制備食品和食品補(bǔ)充劑，或可通過(guò)制藥工業(yè)已知的 方法來(lái)制備以用作藥物，例如作為局部藥劑。
[0108] 用于局部施用的組合物可例如作為凝膠、霜或軟膏提供。這樣的組合物可被直接 應(yīng)用至皮膚或承載在適當(dāng)?shù)闹С治锷希T如繃帶、紗布、網(wǎng)絲、或可被應(yīng)用至待處理的區(qū)域 的類似物上。
[0109] 食品制造的領(lǐng)域中的技術(shù)人員已知的方法包括，但不限于；粉末形式中的活性劑 和其他成分的干混，包含所有組分的乳劑的噴霧干燥或使用擠壓技術(shù)以形成丸劑或顆粒 劑?？蛇x地，組合物可呈液體補(bǔ)藥的形式。
[0110]多糖或衍生物可提供為藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的溶劑化物。在實(shí)施方 案中，多糖或衍生物可單獨(dú)，或以與關(guān)于施用的預(yù)期途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐而選擇的藥物載 體、賦形劑或稀釋劑的混合物中來(lái)施用。藥物載體可以是有機(jī)的或無(wú)機(jī)的、天然的或合成的 生理學(xué)上可接受的載體，本發(fā)明的多糖或其衍生物可與上述載體組合以促進(jìn)應(yīng)用。
[0111] 在實(shí)施方案中，多糖或衍生物可摻入任何合適的粘結(jié)劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、涂層劑、 增溶劑、載體、或緩沖穩(wěn)定劑。
[0112] 本發(fā)明的組合物還可包含根據(jù)待治療的狀況的需要選擇的一種或更多種另外的 活性化合物。例如組合物可包含另外的活性化合物，其靶向與本發(fā)明的產(chǎn)品靶向的通路或 機(jī)制不同的通路或機(jī)制。這可提供改進(jìn)的效力，例如協(xié)同效應(yīng)。在實(shí)施方案中，多糖或衍生 物可與維生素 D組合提供。
[0113] 藥用化妝品或美容制品
[0114] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的多糖或衍生物可提供為藥用化妝品，即具有標(biāo)明具有醫(yī) 學(xué)或藥物樣益處的生物學(xué)活性成分的美容產(chǎn)品。
[0115] 可選地，本發(fā)明的多糖或衍生物可提供為化妝品，其改進(jìn)皮膚的外觀和功能，但沒(méi) 有臨床效應(yīng)。
[0116] 適當(dāng)?shù)?，用作藥用化妝品或美容制品的組合物可提供為本領(lǐng)域已知的，包括，但不 限于，面霜、凝膠、精華液、洗滌物、漂洗物、洗發(fā)劑、護(hù)發(fā)素、摩絲等。
[0117] 本發(fā)明的美容制品的實(shí)施方案可提供例如為用于局部施用至皮膚的乳霜、精華 液、凝膠或軟膏。在實(shí)施方案中，美容制品可用作抗衰老皮膚制品，用于皮膚調(diào)色/平滑或 改進(jìn)皮膚的顏色。這樣的制品可適合地使被認(rèn)為與老化相關(guān)的效應(yīng)諸如皺紋的可視化外 觀、陽(yáng)光損傷最小化并可增加皮膚彈性。在這樣的美容組合物中，多糖或其衍生物通常可與 基礎(chǔ)載體或皮膚保濕物質(zhì)組合來(lái)提供。適當(dāng)?shù)兀A(chǔ)載體與組合物的其他成分相容，并對(duì)化 妝品的使用者無(wú)毒害。通常這樣的制品還可包括防腐劑、香精或抗氧化劑。另外，這樣的制 品可包括水、濕潤(rùn)劑、乙醇、油類、著色劑等。
[0118] 在實(shí)施方案中，可提供包含用于本發(fā)明的多糖的美容制品。在優(yōu)選的實(shí)施方案中， 可提供具有本文討論的衍生物的美容制品。
[0119] 營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑
[0120] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可促進(jìn)接受該營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的受試者中的腸道 健康。適當(dāng)?shù)?，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的實(shí)施方案可減少腸內(nèi)痙攣或不適。在實(shí)施方案中，可提供包含 用于本發(fā)明的多糖的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，可提供具有本文討論的衍生物的 營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。
[0121] 在實(shí)施方案中，本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可配制成膠囊形式以口服。在實(shí)施方案中，可 提供營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑為營(yíng)養(yǎng)組合物的一部分。
[0122] 多糖的制備
[0123] 在實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的多糖或這樣的多糖的衍生物可以是從 Prasinococcus capsulatus或與P. capsulatus相關(guān)的藻株的培養(yǎng)物的細(xì)胞級(jí)分或分泌級(jí) 分分離的多糖。
[0124] 在實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的多糖或這樣的多糖的至少一種衍生物可從 Prasinococcus capsulatus或與P. capsulatus相關(guān)的藻株的培養(yǎng)物的細(xì)胞級(jí)分分離。
[0125] 在實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的多糖或這樣的多糖的至少一種衍生物可從 Prasinococcus capsulatus或與P. capsulatus相關(guān)的藻株的培養(yǎng)物的分泌級(jí)分分離。
[0126] 在實(shí)施方案中，Prasinococcus capsulatus 的培養(yǎng)物可以是 Prasinococcus capsulatus藻株CCMPII94。該藻株為公眾可得。培養(yǎng)物可適當(dāng)?shù)厣L(zhǎng)在如本領(lǐng)域?qū)⒁阎?的藻類培養(yǎng)基上，其中藻類培養(yǎng)基中提供的氮、維生素、二氧化硅或微量金屬的修改可如本 領(lǐng)域技術(shù)人員已知的來(lái)做出。藻類培養(yǎng)基可與海水基礎(chǔ)或使用合成的海水一起使用。
[0127] 在實(shí)施方案中，可使用具有以下組成的f/2生長(zhǎng)培養(yǎng)基：
[0128] 貯備溶液：
[0129]
【權(quán)利要求】
1. 一種形成凝膠的多糖，所述形成凝膠的多糖是從Prasinococcales目的微藻細(xì)胞 可獲得的，其中所述形成凝膠的多糖是包含葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和糖醒酸單元的至少 670 kDa的分子量的硫酸化雜聚合物，用于在免疫系統(tǒng)素亂的治療中使用。
2. 如權(quán)利要求1所述的形成凝膠的多糖，其中所述多糖由W下方法產(chǎn)生： 任選地，培養(yǎng)來(lái)自Prasinococcales目下的科的微藻細(xì)胞W及 從所述微藻細(xì)胞培養(yǎng)基中提取由所述微藻細(xì)胞分泌的微藻多糖。
3. 如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的形成凝膠的多糖，用于在選自W下的免疫系統(tǒng)素 亂的治療中使用；炎性皮膚狀況，包括濕疹、銀屑病和特應(yīng)性皮炎，腸的炎性狀況，包括腸易 激綜合征、克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎，或呼吸道的炎性狀況，包括哮喘、囊性纖維化病、肺氣 月中、慢性阻塞性肺素亂、急性呼吸窘迫綜合癥、或過(guò)敏性鼻炎。
4. 如任一項(xiàng)前述權(quán)利要求中所述的形成凝膠的多糖，其中所述多糖是從Pr as i no derma singularis 或 Prasinococcus capsulatus 可獲得的。
5. 如任一項(xiàng)前述權(quán)利要求中所述的形成凝膠的多糖，所述形成凝膠的多糖包含按重量 計(jì)約 20%至30%葡萄糖 30 %至60 %半乳糖 4%至19 %阿拉伯糖 2%至6%糖醒酸和1 %至10%的其他糖單元。
6. 如權(quán)利要求5所述的形成凝膠的多糖，其中所述其他糖單元包含 鼠李糖 木糖和 甘露糖。
7. 如任一項(xiàng)前述權(quán)利要求中所述的形成凝膠的多糖，其中所述多糖具有按重量計(jì)約 17 %至35 %的硫酸含量。
8. 如任一項(xiàng)前述權(quán)利要求中所述的形成凝膠的多糖，其中所述多糖具有按重量計(jì)約 20 %的硫酸含量。
9. 如任一項(xiàng)前述權(quán)利要求中所述的形成凝膠的多糖，其中相對(duì)于未被提供多糖的中性 粒細(xì)胞，所述多糖抑制中性粒細(xì)胞中的中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性的約60%至90%。
10. -種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，所述營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑包含權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)的多糖。
11. 一種美容制品，所述美容制品包含如權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)中所述的多糖，優(yōu)選 地其中所述美容制品包含基礎(chǔ)載體或皮膚保濕物質(zhì)。
12. -種如權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)中所述的形成凝膠的多糖的衍生物，其中所述衍生 物具有約2 kDa至60 kDa的范圍內(nèi)的分子量。
13. 如權(quán)利要求12中所述的衍生物，其中所述衍生物具有范圍2 kDa至10 kDa內(nèi)的分 子量。
14. 如權(quán)利要求13中所述的衍生物，其中所述衍生物包含按重量計(jì)約 30%至40%葡萄糖 30 %至40 %半乳糖 8 %至14%阿拉伯糖 7%至11 %糖醒酸 和1 %至10 %的其他糖單元。
15. 如權(quán)利要求12中所述的衍生物，其中所述衍生物具有范圍20 kDa至60 kDa內(nèi)的 分子量。
16. 如權(quán)利要求15中所述的衍生物，其中所述衍生物包含按重量計(jì)約 25%至28%葡萄糖 35 %至55 %半乳糖 8 %至17 %阿拉伯糖 4% -6 %糖醒酸 和1 %至5 %的其他糖單元。
17. 如權(quán)利要求12至16的任一項(xiàng)所述的衍生物，其中所述衍生物抑制中性粒細(xì)胞彈性 蛋白酶釋放的約70%至90%。
18. 如權(quán)利要求12至17的任一項(xiàng)所述的衍生物，其中相對(duì)于未被提供衍生物的中性粒 細(xì)胞，所述衍生物抑制中性粒細(xì)胞活性氧物質(zhì)產(chǎn)生的約30% -40%。
19. 如權(quán)利要求12至18的任一項(xiàng)所述的衍生物，其中相對(duì)于未被提供衍生物的角質(zhì)形 成細(xì)胞，所述衍生物抑制人角質(zhì)形成細(xì)胞IL-8基因表達(dá)和IL8釋放的約70% -100%。
20. -種美容制品，所述美容制品包含如權(quán)利要求12至19的任一項(xiàng)所述的衍生物。
21. -種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，所述營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑包含如權(quán)利要求12至19的任一項(xiàng)所述的衍生 物。
22. -種組合物，所述組合物包含如權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所述的多糖或如權(quán)利要求 12至19的任一項(xiàng)所述的衍生物。
23. -種制備如權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所述的多糖或如權(quán)利要求12至19的任一項(xiàng) 所述的衍生物的方法，所述方法包括W下所述步驟： -培養(yǎng)來(lái)自Prasinococcales目的微藻細(xì)胞，特別是Prasinoderma singularis，或 P. capsulatus 細(xì)胞，W及 -從培養(yǎng)物的細(xì)胞級(jí)分或分泌級(jí)分分離所述多糖或其衍生物。
【文檔編號(hào)】A61K36/05GK104470530SQ201380024416
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2013年5月13日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月11日
【發(fā)明者】查爾斯·丹尼爾·巴溫頓, 克萊爾·莫斯 申請(qǐng)人:格力科瑪有限公司