用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法，本發(fā)明制備兩種體系，海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系，并通過三通針頭將兩種組份混勻，經(jīng)一定時(shí)間平衡后制備用于心衰/心梗輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，本發(fā)明采用的材料及加工工藝中不涉及有機(jī)試劑或有機(jī)化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)體系溫和，條件可控，不存在毒性交聯(lián)劑或助劑等殘留問題，通過本技術(shù)方案制備出的水凝膠，采用過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射到心衰后發(fā)生球形擴(kuò)張的心肌壁中，可幫助心室的重新塑形，有效減少心室尺寸，降低室壁張力，可用于心衰的輔助治療，材料具有良好的力學(xué)性能和生物學(xué)性能，細(xì)胞相容性良好，操作簡(jiǎn)便可靠。
【專利說明】用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于心衰輔助治療的生物材料，特別是涉及一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]心力衰竭又稱心功能不全是指在適量靜脈回流的情況下，心臟不能排出足夠血量致周圍組織灌注不足和肺循環(huán)及體循環(huán)靜脈淤血，從而出現(xiàn)的一系列癥狀和體征，心瓣膜疾病、冠狀動(dòng)脈硬化、高血壓、內(nèi)分泌疾患、細(xì)菌毒素、急性肺梗塞、肺氣腫或其他慢性肺臟疾患等均可引起心臟病從而誘發(fā)心力衰竭。上述各種誘因造成的初始心肌損傷可引起心肌梗死、左心室肥厚和重構(gòu)、左心功能減退等，并進(jìn)一步發(fā)展至心衰的癥狀和體征，最終因頑固難治性心衰而死亡，一般地，心力衰竭的發(fā)展是不可逆行為，一旦發(fā)生后，即使沒有新的心肌損傷、臨床病情穩(wěn)定，仍會(huì)因心肌重構(gòu)而進(jìn)行性向前發(fā)展，直至達(dá)到終末期心衰。
[0003]心力衰竭在人群中發(fā)病率約為1.5%_2%，65歲以上群體的發(fā)病率高達(dá)6%_10%，其5年存活率與惡性腫瘤相當(dāng)，心衰的惡性累進(jìn)以及心臟重塑的一個(gè)最主要的表現(xiàn)便是左心室?guī)缀涡螒B(tài)和結(jié)構(gòu)的改變，如心室擴(kuò)張、肥大、球形膨大，而左心室的擴(kuò)張則進(jìn)一步加劇患者臨床病癥的惡化；藥物治療是目前心衰治療的標(biāo)準(zhǔn)策略，但無(wú)法遏制左室功能的持續(xù)衰減及臨床指征持續(xù)惡化；除藥物治療外，現(xiàn)有的幾種理療方式還包括左心室輔助裝置、雙心室起搏器以及最終的心臟移植，然而，由于上述臨床干預(yù)手段均有多種局限如供體來(lái)源、多種臨床并發(fā)癥以及治療成本昂貴等，難以普及推廣。臨床研究業(yè)已證實(shí)，心室擴(kuò)張與心衰之間存在密切的因果關(guān)系，因此，如何減輕或阻止心室的惡性擴(kuò)張是心衰治療亟需解決的重要問題。若一種治療策略可以有效減輕或抑制左室擴(kuò)張及球形膨脹，將有望為心衰的治療提供一種全新的治療手段。
[0004]海藻酸基生物材料植入左室心肌壁中，作為“假體支架”起到力學(xué)支撐作用，由于其對(duì)于生化作用和生物代謝具有相對(duì)惰性，因此，可作為惰性假體物質(zhì)長(zhǎng)期存在于填充部位；最新研究顯示，將海藻酸基生物材料經(jīng)交聯(lián)后形成水凝膠，注射到心衰動(dòng)物的左心室室壁中，可改善心室結(jié)構(gòu)并提高心臟功能，該水凝膠注射后具有良好的組織支撐功能，可增加室壁厚度減少左心室的擴(kuò)張尺寸，降低左心室的室壁應(yīng)力加射血分?jǐn)?shù)，減輕左心室的球形擴(kuò)張并改善心臟功能，從而阻止甚至逆轉(zhuǎn)心衰的持續(xù)惡化。心肌組織的重建是治療心肌梗死、心力衰竭以及其他心肌病等新興策略，而支架材料的選擇是其中的主要影響因素；將海藻酸、透明質(zhì)酸部分氧化或聯(lián)氨化后獲得衍生物Alg-Ald和HyA-Ald，并以此為原料制備可注射水凝膠，將體外培養(yǎng)的胎鼠心臟細(xì)胞(NRHC)接種到水凝膠支架內(nèi)部，體外構(gòu)建組織工程化心肌組織；生物反應(yīng)器中培養(yǎng)14d后，熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)粘附、遷移或伸長(zhǎng)等現(xiàn)象，在凝膠內(nèi)部呈球形 規(guī)則分布，施加外力作用后可觀察到細(xì)胞的搏動(dòng)，其行為與生理搏動(dòng)類似。由此，他們認(rèn)為這類原位交聯(lián)的水凝膠支架可用于改善或提高心肌功能，有望作為一種新策略用于心肌組織損傷的修復(fù)重建。[0005]多項(xiàng)研究也已證實(shí)交聯(lián)海藻酸水凝膠用于心?；蛐乃?dòng)物模型不會(huì)導(dǎo)致死亡、體重減少、臨床病理學(xué)改變 等不良反應(yīng)，雖然在手術(shù)期有短暫的心律失調(diào)但會(huì)很快消失，植入部位有輕微或中度的炎癥反應(yīng)但屬于正常的“異物反應(yīng)”可被機(jī)體良好耐受。海藻酸水凝膠植入心肌壁后，可以有效增加室壁厚度，減少心室尺寸并提高血管化程度，而且能相對(duì)長(zhǎng)期存在于心肌組織從而保持長(zhǎng)效的力學(xué)支撐作用，改善心臟功能。由此可以推斷，醫(yī)用海藻酸基生物材料作為治療心衰的新策略主要基于其力學(xué)的空間支撐功能對(duì)受損心肌部位的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)行調(diào)整，從而減輕/阻斷心肌病理性重構(gòu)的惡化，與海藻酸基生物材料的藥理學(xué)、免疫學(xué)或生物學(xué)活性無(wú)關(guān)，目前這一策略在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)水平取得了重要進(jìn)展但尚處于研究階段，國(guó)內(nèi)外均無(wú)相關(guān)上市產(chǎn)品。
[0006]綜上，上述多項(xiàng)研究中業(yè)已證實(shí)，海藻酸或海藻酸與膠原蛋白、明膠等制備的凝膠對(duì)于心梗動(dòng)物模型具有一定的治療作用，但在心衰治療的應(yīng)用仍鮮有報(bào)導(dǎo)，此外，上述常用方法制備的海藻酸水凝膠在體內(nèi)存留一段時(shí)間后仍會(huì)被吸收，其組織支撐及充填效果仍需加強(qiáng)，并且注入心肌組織后仍有較高幾率導(dǎo)致心律失調(diào)，同時(shí)具有一定的風(fēng)險(xiǎn)隱患；將膠原蛋白、明膠等物質(zhì)引入海藻酸水凝膠體系，雖然可部分改善結(jié)構(gòu)和功能，由于膠原蛋白及其降解產(chǎn)物多肽等物質(zhì)具有生物學(xué)活性和免疫原性，仍有引發(fā)免疫反應(yīng)及干擾心肌正常信號(hào)傳導(dǎo)的風(fēng)險(xiǎn)，動(dòng)物模型試驗(yàn)中心律失調(diào)比例增高也證實(shí)了這一點(diǎn)。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]有鑒于此，本發(fā)明的主要目的在于提供一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法，在海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系下，經(jīng)三通針頭將兩種組份混勻，在一定時(shí)間平衡后，制備用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，反應(yīng)體系溫和，條件可控，無(wú)毒性交聯(lián)劑或助劑等殘留問題，生物安全性高、力學(xué)性能良好，操作簡(jiǎn)單。
[0008]本發(fā)明涉及一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，所述生物材料中由海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系兩部分材料組成，所述海藻酸鈉體系的海藻酸鈉重均分子量為5 — 20萬(wàn)Da，濃度為0.5 — 3.0% ;所述交聯(lián)劑體系是由濃度為I 一 5.0 %的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中任意一個(gè)以上的組合而成。
[0009]所述交聯(lián)劑體系的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中固體顆粒粒徑為10 - 200 μ m。
[0010]本發(fā)明涉及一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法，并且按以下步驟在無(wú)菌條件下進(jìn)行。
[0011]I)第一步:海藻酸鈉體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的海藻酸鈉原料(重均分子量為5 — 20萬(wàn)Da)溶于注射用水或生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，室溫條件下充分溶解，配制成濃度為0.5 — 3.0%的溶液。
[0012]2)第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系、海藻酸鈣體系等溶于注射用水或生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，濃度為I 一 5.0%，其中的固體顆粒粒徑為10 -200 μ m。
[0013]3)第三步:無(wú)菌條件下，將制備的上述海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系分別灌裝到無(wú)菌注射器或傳輸系統(tǒng)中，通過三通針頭混勻并將混合物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌容器中，混勻過程勻速、緩慢；海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1:1—4:1，在室溫平衡2 - 50min可形成穩(wěn)定的水凝膠。
[0014] 在上述步聚3中，通過三通針頭將兩種組份混勻平衡后制備成的水凝膠能夠通過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射。
[0015]本發(fā)明采用的材料及加工方法中不涉及有機(jī)試劑或有機(jī)化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)體系溫和，條件可控，不存在毒性交聯(lián)劑或助劑等殘留問題。海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系反應(yīng)徹底，無(wú)交聯(lián)劑殘留問題。所用材料、試劑等均具有良好的生物安全性，大大降低了臨床應(yīng)用的安全性。此外，本發(fā)明減少了目前常用的交聯(lián)工藝方法中存在的交聯(lián)劑毒性較大、反應(yīng)體系有機(jī)試劑殘留、反應(yīng)過快或過慢導(dǎo)致的反應(yīng)不均等問題，工藝方法簡(jiǎn)單可控，大幅度降低了制備過程中風(fēng)險(xiǎn)管理的難度。
[0016]通過本發(fā)明的制備方法生產(chǎn)出的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，而形成的可注射型海藻酸基生物材料具有良好的力學(xué)性能，親水性良好，有很強(qiáng)的吸水性和保水性，通過介入手段植入心壁后可形成粘彈性良好的膠體，不僅具有良好的組織充填作用而且能保持較好的組織塑形性，與周圍組織相容性良好，能相對(duì)長(zhǎng)期存在于心肌組織但不引起異物反應(yīng)，從而保持長(zhǎng)期的心壁填充塑形作用，改善心肌功能。
[0017]通過本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行制備出的水凝膠采用過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射到心衰后發(fā)生球形擴(kuò)張的心肌壁中，可幫助心室的重新塑形，有效減少心室尺寸，降低室壁張力，可用于心衰的輔助治療。
[0018]親水性實(shí)驗(yàn)。
[0019]將按本工藝制備的可注射型海藻酸基生物材料真空干燥后，制成厚度適宜的薄片或膜，用表面接觸角測(cè)定儀懸滴法測(cè)定其表面接觸角，檢測(cè)其親水性。
[0020]溶脹性實(shí)驗(yàn)。
[0021]將按本工藝制備的可注射型海藻酸基生物材料試樣稱重后，浸入25°C的注射用水中，于恒溫下浸泡溶脹，每隔一定時(shí)間后取出稱重(每次稱重要用濾紙擦去表面液體)，立即放入已知重量的稱量瓶中，稱重，直至其溶脹平衡為止。按下式計(jì)算溶脹度
Q:Q=w2/ wl 式中wl和w2分別為溶脹前、后試樣的重量。
[0022]細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)。
[0023]將按本工藝制備的可注射型海藻酸基生物材料試樣制備浸提液，采用L929細(xì)胞株，根據(jù)GB/T 16886.5-2003規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)細(xì)胞增殖率，評(píng)價(jià)材料的細(xì)胞毒性。
[0024]心肌細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)。
[0025]將按本工藝制備的可注射型海藻酸基生物材料試樣制備浸提液，體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞，根據(jù)GB/T 16886.5-2003規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)細(xì)胞增殖率，評(píng)價(jià)材料的心肌細(xì)胞相容性。
[0026]本發(fā)明中所述的制備方法，整個(gè)過程為嚴(yán)格的過程無(wú)菌控制，所得的可注射型水凝膠，即海藻酸基生物材料為無(wú)菌材料。
[0027]采用上述技術(shù)方案后的有益效果是:一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料及其制備方法，通過本技術(shù)方案，有益效果在是。
[0028]1.本發(fā)明采用的材料及加工工藝方法中不涉及有機(jī)試劑或有機(jī)化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)體系溫和，條件可控，不存在毒性交聯(lián)劑或助劑等殘留問題；
2.本發(fā)明采用的海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系反應(yīng)徹底，無(wú)交聯(lián)劑殘留問題；
3.本發(fā)明所采用的全部材料或試劑均具有良好的生物安全性，大大降低了臨床應(yīng)用的安全性，并且通過本技術(shù)方案，大大減少了目前交聯(lián)工藝方法中存在的交聯(lián)劑毒性較大、反應(yīng)體系有機(jī)試劑殘留、反應(yīng)過快或過慢導(dǎo)致的反應(yīng)不均等問題，工藝方法簡(jiǎn)單可控，大幅度降低了制備過程中風(fēng)險(xiǎn)管理的難度。
[0029]4.本發(fā)明形成的可注射型海藻酸基生物材料具有良好的力學(xué)性能，親水性良好，有很強(qiáng)的吸水性和保水性，壓縮回彈性能良好，基本無(wú)細(xì)胞毒性，且與心肌細(xì)胞具有良好的相容性。
[0030]5.本發(fā)明的制備工藝中通過介入手段植入心壁后可形成粘彈性良好的膠體，不僅具有良好的組織充填作用而且能保持較好的組織塑形性，與周圍組織相容性良好，能相對(duì)長(zhǎng)期存在于心肌組織但不引起異物反應(yīng)，從而保持長(zhǎng)期的心壁填充塑形作用，改善心肌功倉(cāng)泛。
[0031]6.通過本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行制備出的水凝膠采用過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射到心衰后發(fā)生球形擴(kuò)張的心肌壁中，可幫助心室的重新塑形，有效減少心室尺寸，降低室壁張力，可用于心衰的輔助治療。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0032]圖1.本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的環(huán)境掃描電鏡圖片。
[0033]圖2.本發(fā)明的實(shí)施例中材料的吸水性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
`[0034]圖3.本發(fā)明的實(shí)施例中材料的溶脹度實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
[0035]圖4.本發(fā)明的實(shí)施例中材料的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
[0036]圖5.本發(fā)明的實(shí)施例的心肌細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0037]下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)闡述。
[0038]本發(fā)明涉及的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，所述生物材料中由海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系兩部分材料組成,所述海藻酸鈉體系的海藻酸鈉重均分子量為5 - 20萬(wàn)Da，濃度為0.5 — 3.0% ;所述交聯(lián)劑體系是由濃度為I 一 5.0%的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中任意一個(gè)以上的組合而成。
[0039]所述交聯(lián)劑體系的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中固體顆粒粒徑為10 - 200 μ m。
[0040]本發(fā)明涉及的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法，并且按以下步驟在無(wú)菌條件下進(jìn)行。
[0041]I)第一步:海藻酸鈉體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的海藻酸鈉原料(重均分子量為5 - 20萬(wàn)Da)溶于注射用水、生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，室溫條件下充分溶解，配制成濃度為0.5 — 3.0%的溶液。[0042]2)第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系、海藻酸鈣體系等溶于注射用水或生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，濃度為I 一 5.0%，其中的固體顆粒粒徑為10 -200 μ m。最終交聯(lián)體系為上述一種或多種體系的組合，包括且不限于上述體系。
[0043]3)第三步:無(wú)菌條件下，將制備的上述海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系分別灌裝到無(wú)菌注射器或傳輸系統(tǒng)中，通過三通針頭混勻并將混合物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌容器中，混勻過程勻速、緩慢；海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1:1—4:1，在室溫平衡2 - 50min可形成穩(wěn)定的水凝膠。
[0044]在上述步聚3中，通過三通針頭將兩種組份混勻平衡后制備成的水凝膠能夠通過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射。
[0045]在經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，采用無(wú)菌無(wú)熱原重均分子量為5萬(wàn)Da的海藻酸鈉原料進(jìn)行配制時(shí)，在室溫平衡40min可形成穩(wěn)定凝膠，并且凝膠力學(xué)性能相對(duì)較低，成形性欠佳，雖然可以順利通過針頭注入心肌，但考慮到其成凝膠所需的穩(wěn)定時(shí)間較長(zhǎng)，所需術(shù)前準(zhǔn)備時(shí)間較長(zhǎng)，給臨床應(yīng)用造成了一定程度的不便；無(wú)菌無(wú)熱原重均分子量為20萬(wàn)Da的海藻酸鈉原料進(jìn)行配制時(shí)，在室溫平衡I min可形成穩(wěn)定凝膠，雖然凝膠力學(xué)性能較強(qiáng)，具有很好的組織支撐作用，但由于凝膠化時(shí)間較短，因此兩種體系的混勻操作可控性欠佳且臨床操作便捷性需要改善。
[0046]實(shí)施例1。
[0047]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。
[0048]第一步:海藻酸鈉體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原重均分子量為18萬(wàn)Da的海藻酸鈉原料溶于注射用水一甘露醇`溶液中，室溫條件下充分溶解，配制成濃度為2.0%的溶液。
[0049]第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的醛基化海藻酸衍生物體一海藻酸鈣復(fù)合體系分散于注射用水一甘露醇溶液中，終濃度為2.0%，其中的固體顆粒粒徑為70 - 200 μ m。
[0050]第三步:無(wú)菌條件下，將制備的上述海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系分別灌裝到3ml無(wú)菌注射器中，通過三通針頭混勻并逐漸滴加到無(wú)菌培養(yǎng)板中，混勻過程勻速、緩慢；海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1。
[0051]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡IOmin可形成穩(wěn)定凝膠。
[0052]實(shí)施例2。
[0053]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。
[0054]第一步:同實(shí)施例1。
[0055]第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的醛基化海藻酸衍生物體一海藻酸鈣復(fù)合體系分散于注射用水一甘露醇溶液中，終濃度為3.0%，其中的固體顆粒粒徑為70 - 200 μ m。
[0056]第三步:同實(shí)施例1。
[0057]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡6 min可形成穩(wěn)定凝膠。
[0058]實(shí)施例3。
[0059]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。[0060]第一步:同實(shí)施例1。
[0061]第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的海藻酸鈣分散于注射用水一甘露醇溶液中，終濃度為4.0%，其中的固體顆粒粒徑為80 - 150 μ m0
[0062]第三步:無(wú)菌條件下，將制備的上述海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系分別灌裝到3ml無(wú)菌注射器中，通過三通針頭混勻并逐漸滴加到無(wú)菌培養(yǎng)板中，混勻過程勻速、緩慢；海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1。
[0063]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡3min可形成穩(wěn)定凝膠。
[0064]實(shí)施例4。
[0065]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。
[0066]第一步:海藻酸鈉體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的海藻酸鈉原料(重均分子量為12萬(wàn)Da)溶于注射用水溶液中，室溫條件下充分溶解，配制成濃度為2.5 %的溶液。
[0067]第二步:交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的醛基化海藻酸衍生物體一海藻酸鈣復(fù)合體系分散于注射用水溶液中，終濃度為3.5%，其中的固體顆粒粒徑為70 一 200 u π?ο
[0068]第三步:海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1:2，其他同實(shí)施例1。
[0069]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡12min可形成穩(wěn)定凝膠。
[0070]實(shí)施例5。
[0071]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。
[0072]第一步:同實(shí)施例4。
[0073]第二步:溶劑體系為注射用水,其他同實(shí)施例3。
[0074]第三步:同實(shí)施例1。
[0075]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡18 min可形成穩(wěn)定凝膠。
[0076]實(shí)施例6。
[0077]本發(fā)明用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法如下。
[0078]第一步:海藻酸鈉體系濃度為2.0%，其余同實(shí)施例4。
[0079]第二步:溶劑體系為注射用水，交聯(lián)體系終濃度為2.0%，其余同實(shí)施例3。
[0080]第三步:同實(shí)施例4。
[0081]第四步:無(wú)菌條件下，室溫平衡IOmin可形成穩(wěn)定凝膠。
[0082]按照
【發(fā)明內(nèi)容】
所述的制備方法制備而成的上述I~6實(shí)施例中制備的6種材料進(jìn)行親水性、溶脹性、細(xì)胞毒性以及心肌細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，本發(fā)明制備的材料具有良好的親水性，溶脹6h后達(dá)到平衡， 溶脹率為10~35，無(wú)細(xì)胞毒性，與心肌細(xì)胞相容性良好，用于心衰的輔助治療具有良好的安全性。
[0083]以上所述，僅為本發(fā)明的較佳可行實(shí)施例而已，并非用以限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，其特征在于，所述生物材料中由海藻酸鈉體系和交聯(lián)劑體系兩部分材料組成，所述海藻酸鈉體系的海藻酸鈉重均分子量為5 — 20萬(wàn)Da，濃度為0.5 — 3.0% ;所述交聯(lián)劑體系是由濃度為I 一 5.0%的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中任意一個(gè)以上的組合而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料，其特征在于，所述交聯(lián)劑體系的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系和海藻酸鈣體系中固體顆粒粒徑為10 - 200 μ m。
3.一種用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法，其特征在于，按以下步驟在無(wú)菌條件下進(jìn)行: 1)第一步，海藻酸鈉體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的海藻酸鈉原料，重均分子量為5 — 20萬(wàn)Da，溶于注射用水或生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，室溫條件下充分溶解，配制成濃度為0.5 — 3.0%的溶液； 2)第二步，交聯(lián)體系的制備:無(wú)菌條件下，將無(wú)菌無(wú)熱原的葡萄糖內(nèi)酯一碳酸鈣體系、葡萄糖內(nèi)酯一硫酸鈣體系、醛基化海藻酸衍生物體系、海藻酸鈣體系等溶于注射用水或生理鹽水或注射用水一甘露醇溶液中，濃度為I 一 5.0%，其中的固體顆粒粒徑為10 -200 μ m ； 3)第三步，無(wú)菌條件下，將制備的上述海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系分別灌裝到無(wú)菌注射器或傳輸系統(tǒng)中，通過三通針頭混勻并將混合物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌容器中，混勻過程勻速、緩慢；海藻酸鈉體系和交聯(lián)體系比例:1:1—4:1，在室溫平衡2 - 50min可形成穩(wěn)定的水凝膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于心衰輔助治療的可注射型海藻酸基生物材料的制備方法，其特征在于，在上述步聚3 中，通過三通針頭將兩種組份混勻平衡后制備成的水凝膠能夠通過271/2號(hào)針頭進(jìn)行注射。
【文檔編號(hào)】A61L27/52GK103480037SQ201310401817
【公開日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2013年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月6日
【發(fā)明者】奚廷斐, 位曉娟, 顧其勝 申請(qǐng)人:奚廷斐