專利名稱：一種八肽菌素及其制備與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的多粘菌素類似物一八肽菌素及其制備與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
幾乎對所有抗生素均耐藥的病原菌的出現(xiàn)，使人類健康正面臨一個(gè)日益嚴(yán)重的巨大威脅。雖然，多重耐藥革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌對公眾衛(wèi)生都是一個(gè)嚴(yán)峻考驗(yàn)，但是后者的問題目前看來要嚴(yán)重的多。一方面，革蘭氏陰性菌正成為當(dāng)前醫(yī)院和社區(qū)感染的一類主要致病菌，且臨床分離菌株耐藥性呈日益上升趨勢，特別是銅綠假單胞菌、鮑氏不動(dòng)桿菌以及克雷伯氏菌這些醫(yī)院感染的重要條件致病菌，極易變異為對幾乎所有抗生素均耐藥的超級病原菌，從而嚴(yán)重影響人類健康。據(jù)報(bào)道，我國重癥監(jiān)護(hù)室內(nèi)的細(xì)菌感染率逐漸增高，其中 70%以上的感染是由上述三種革蘭氏陰性菌引起的。另一方面，近年來盡管針對多重耐藥革蘭氏陽性菌已開發(fā)出不少新藥，但是除替加環(huán)素外，卻沒開發(fā)出一種適用于治療革蘭氏陰性菌，特別是針對上述超級耐藥菌引起的全身性感染用新藥，而且即使未來十年也難有此類新藥出現(xiàn)。正因?yàn)槿绱耍绹鴤魅静W(xué)學(xué)會(huì)(IDSA)將銅綠假單胞菌、鮑氏不動(dòng)桿菌以及克雷伯氏菌列為6種最需優(yōu)先應(yīng)對的危險(xiǎn)多重耐藥微生物之列。目前，多粘菌素是治療這些對其它所有抗生素均耐藥的革蘭氏陰性細(xì)菌，特別是銅綠假單胞桿菌感染的最后防線。多粘菌素類抗生素發(fā)現(xiàn)于50年前，其中多粘菌素B和E曾在上世紀(jì)六、七十年代應(yīng)用于臨床治療，后因腎毒性和神經(jīng)毒性較大而停用；九十年代因?qū)Ω锾m氏陰性耐藥菌有效，又重新起用。隨著多重耐藥革蘭氏陰性菌所致的重癥感染日漸增多，同時(shí)又缺乏能對抗這種感染的新型抗生素，促使人們對多粘菌素類抗生素進(jìn)行重新評價(jià)。據(jù)對1950年至2005 年間的研究資料統(tǒng)計(jì)分析表明，和早期的研究資料相比，近期研究顯示多粘菌素所致腎毒性明顯減少，即便有，其嚴(yán)重程度也較低。而且，多粘菌素所致的神經(jīng)毒性作用也多較輕微， 停藥后即可消退。盡管，新的證據(jù)顯示多粘菌素的毒性沒有以往報(bào)告中所說的那么嚴(yán)重，但是其機(jī)會(huì)性毒性，特別是腎毒性常導(dǎo)致治療的復(fù)雜化甚至停藥。因此，有必要加快開發(fā)高效、低毒的新型多粘菌素類似物以應(yīng)對日益嚴(yán)重的革蘭氏陰性桿菌耐藥性問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新的針對革蘭氏陰性桿菌、具有醫(yī)療應(yīng)用潛在價(jià)值的多粘菌素類似物——八肽菌素及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種八肽菌素，結(jié)構(gòu)如式⑴所示
權(quán)利要求
1. 一種八肽菌素，結(jié)構(gòu)如式(I)所示
2.如權(quán)利要求1所述的八肽菌素的制備方法，所述方法包括將類芽孢桿菌 (Paenibacillus tianmuensis) CCTCC No :M 209149 接種至發(fā)酵培養(yǎng)基，于沘 32°C下培養(yǎng)72 120h，發(fā)酵液離心取上清液，上清液經(jīng)分離純化得到所述多肽菌素。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述分離純化方法如下上清采用大孔吸附樹脂進(jìn)行固相萃取，先用蒸餾水和10 30%甲醇水溶液沖洗，然后用40 90%甲醇水溶液洗脫，收集活性洗脫液成分，濃縮蒸干得到粗品；粗品用甲醇溶解，離心過濾先用C-18固相萃取柱進(jìn)一步純化，然后進(jìn)行高效液相色譜層析，收集活性組分，濃縮蒸干即可得到所述八肽菌素。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)基終濃度組成如下葡萄糖，1 10g/L ； (NH4)2SO4jO. 5 2. Og/L ；MgSO4. 7Η20，0· 1 0. 5g/L ；NaCl,0. 05 0. 5g/ L ；CaCl2,0. 05 0. 5g/L ；FeSO4,0. 005 0. 05g/L ；ZnSO4,0. 005 0. 05g/L ；MnSO4. H2O, 0. 001 0. 01g/L ；KH2PO4,1 5g/L ；溶劑為水，pH7. 0 7. 2。
5.如權(quán)利要求1所述的八肽菌素在制備抗菌制劑中的應(yīng)用。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述八肽菌素用于制備抗細(xì)菌感染的藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新的具有生物防治和醫(yī)療應(yīng)用潛在價(jià)值的多肽菌素及其制備方法與應(yīng)用，所述多肽菌素結(jié)構(gòu)如式(I)所示。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在提供了一種毒性低于多粘菌素B、具有醫(yī)療應(yīng)用價(jià)值的八肽菌素及其制備方法和應(yīng)用，體外實(shí)驗(yàn)表明該化合物對所有測試過的革蘭氏陰性菌均具有顯著的抑制作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，該化合物對大腸桿菌引起的小鼠敗血癥模型具有良好的治療效果。
文檔編號A61K38/12GK102558307SQ201110425969
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月16日
發(fā)明者吳雪昌, 李歐, 滕毅, 趙文鵬, 錢朝東 申請人:浙江大學(xué)