專利名稱：一種中藥丹參的醋炙炮制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥炮制技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種中藥丹參的醋炙炮制方法。
背景技術(shù)：
丹參(Salviamiltiorrhiza Bunge)為唇形科(Lamiaceae)鼠尾草屬(Salvia)多年生草本植物，以其根及根莖入藥，因其色紅且形狀似參而得名“丹參”，又稱赤參、木羊乳(《吳普本草》)、紫丹參(《現(xiàn)代實(shí)用中藥》)、紅根(《中國(guó)藥植志》)等。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，為歷版《中華人民共和國(guó)藥典》收載中藥丹參的唯一來源。其性微寒、味苦、無毒，歸心、肝ニ經(jīng)，有活血通經(jīng)、祛瘀止痛、清心安神之功效。用于治療月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癮瘕積聚，胸腹刺痛，熱痹疼痛，瘡瘍腫痛，心煩不眠；肝脾腫大，心絞痛。丹參的炮制始載于梁代《本草經(jīng)集注》，歷代應(yīng)用的炮制方法包括凈選、切制和炮·炙。凈選包括“去蘆頭”、“去苗”和“洗浄”。切制有“搗”、“銼”、“切厚片”等。炮炙方法主要有酒制和妙法，尚有焙、醋炒、鹽水炒、豬心血炒、炒炭、米炒等。梁代記載有酒潰法，唐代増加了熬法，宋代增加了炙法、妙法和焙法，并有“炒令黑黃”等炒制程度記載。金元時(shí)期增加了酒妙法，明代丹參的炮炙方法比較豐富，又増加了酒洗、酒浸、醋拌炒、鹽水妙法。清代除沿用前世的酒炒和酒浸法外，又増加了酒蒸和豬心血拌炒法。現(xiàn)代丹參的炮制主要是結(jié)合丹參的主要臨床應(yīng)用如祛瘀止痛，活血通經(jīng)，基本繼承了古代炮制方法，其炮制方法主要有切片生用和酒炙法。《中國(guó)藥典》2010年版和《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》1988年版均收有生丹參和酒丹參兩種炮制品。此外，在我國(guó)ー些地方的炮制規(guī)范中尚收有炒、炒炭、米炒、麩炒、鱉血炙、醋炙及豬血制等炮制方法。但無論是藥典還是地方規(guī)范均未制訂炮制エ藝的具體量化參數(shù)，使炮制后成品質(zhì)量難以控制，影響臨床用藥安全。因此，規(guī)范飲片的炮制方法，量化丹參炮制エ藝參數(shù)，建立合理的飲片質(zhì)量考察指標(biāo)，成為中藥現(xiàn)代化過程中ー項(xiàng)重要的任務(wù)。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)以上提出的問題，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供ー種中藥炮制エ藝具體量化參數(shù)，具體的說是ー種中藥丹參的醋炙炮制方法，本發(fā)明技術(shù)方案如下將丹參生品中加入輔料陳醋，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70-80°C，炒制時(shí)間為20min，將飲片炒到黃色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹參飲片。每IOOg丹參生品加入陳醋20g，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70_80°C，炒制時(shí)間為20mino中藥丹參中含丹參的化學(xué)成分主要分為兩類，脂溶性的ニ萜類化合物和水溶性酚酸類成分，其它有留醇、糖和黃酮等。水溶性成分丹酚酸B與脂溶性成分丹參酮IIA為《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版規(guī)定的中藥丹參生品含量的檢查項(xiàng)目。同時(shí)，藥理研究證明，水溶性成分原兒茶醛、丹酚酸A具有明顯的抗氧化效果，脂溶性成分隱丹參酮、丹參酮I具有明顯的抗菌消炎作用。丹參炮制后丹酚酸B和丹酚酸A均増加，其余各成分均有不同程度的降低，這一點(diǎn)與丹參在湯劑中使用、產(chǎn)生療效的物質(zhì)基礎(chǔ)化學(xué)成分應(yīng)該是水溶性成分研究相一致，符合我國(guó)傳統(tǒng)煎煮法原理；充分說明了中藥丹參炮制的意義。


圖I :標(biāo)準(zhǔn)品指紋圖譜圖2 :丹參生品水溶性成分指紋圖譜；圖3 :本發(fā)明醋炙丹參水溶性成分指紋圖譜；圖4 :丹參生品脂溶性成分指紋圖譜； 圖5 :本發(fā)明醋炙丹參脂溶性成分指紋圖譜。注圖I :⑷水溶性標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖I-原兒茶醛2-丹酚酸B 3-丹酚酸A ；⑶脂溶性標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖I-丹參酮I 2-隱丹參酮3-丹參酮II A。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。本申請(qǐng)文件中涉及的含量除另有說明外，均為微克每克。實(shí)施例I于2009年I月采集四川中江產(chǎn)丹參的六個(gè)品系按照表I所示，用以進(jìn)行丹參飲片炮制工藝的優(yōu)選。取采集的六個(gè)丹參品系，凈選，搶水沖洗，在常溫下軟化后切成2-4mm厚片，置于80°C的烘箱中干燥20min，晾干，制得丹參生品備用；表I供試材料來源及采收時(shí)間Table I The sources of S. miltiorrhiza
編號(hào)種名Γ~^1生長(zhǎng)期采收時(shí)間~
~ 丹參S. miltiorrhiza 組培大葉2009. I四川中江
~2丹參S. miltiorrhiza 組培小葉2009. I四川中江
3丹參S. miltiorrhiza 矮桿大葉2009. I四川中江
4丹參S. miltiorrhiza 高桿大葉I年2009.1四川中江
5丹參S. miltiorrhiza 小葉丹參2009. I四川中江
6丹參S. miltiorrhiza 白葉丹參2009. I四川中江將丹參生品中加入輔料陳醋，陳醋與丹參生品的質(zhì)量比為10 100，置于密閉容器中，悶潤(rùn)至陳醋被丹參充分吸收，飲片具醋香為止，置鍋內(nèi)，溫度70-80°C，時(shí)間為20min，將飲片炒到黃色，略具醋香，取出，放冷即得六種不同品系醋炙丹參飲片。以水溶性成分及脂溶性成分六種成分為指標(biāo)，對(duì)上述得到的六種不同品系的丹參進(jìn)行優(yōu)選，優(yōu)選出含量最高的川產(chǎn)中江丹參。
對(duì)優(yōu)選出的丹參采用正交試驗(yàn)法進(jìn)行炮制優(yōu)選，丹參飲片生品中加入輔料陳醋，陳醋與丹參生品的質(zhì)量比為10 100-40 100，置于密閉容器中，悶潤(rùn)至陳醋被丹參充分吸收，悶潤(rùn)時(shí)間30-90min，飲片具醋香為止，置鍋內(nèi)，溫度70_110°C，時(shí)間為5_20min，將飲片炒到黃色，略具醋香，取出，放冷即得醋炙丹參飲片。應(yīng)用高效液相色譜技術(shù)，對(duì)所得的炮制品進(jìn)行含量檢測(cè)分析。通過此種方法得到的丹參醋炙品，量化了丹醋炙丹參飲片加工炮制各個(gè)環(huán)節(jié)的工藝參數(shù)，獲得了制備酒炙丹參飲片的最佳炮制工藝每IOOg藥材加陳醋20g，悶潤(rùn)60min，70-80°c炒制20min。實(shí)施例22. I正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選取丹參的水溶性成分——原兒茶醛，丹酚酸A，丹酚酸B及脂溶性成分——隱丹 參酮，丹參酮I，丹參酮IIA為考察指標(biāo)，選用L9 (34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，以輔料用量，悶潤(rùn)時(shí)間，炒制溫度及炒制時(shí)間4個(gè)因素，每個(gè)因素設(shè)計(jì)三個(gè)水平進(jìn)行正交試驗(yàn)，以優(yōu)選出最佳炮制工藝。結(jié)果見表2。表2醋丹參工藝因素水平表Table 2 Design for factors and levels in frying with vinegar process
_
水平ABCD
醋用量(g'lOOg·1) 悶潤(rùn)時(shí)間(min) 炒制溫度(°C) 炒制時(shí)間(min)~I103040-505
~206070-8010
~4090100-110202. 2樣品含量測(cè)定2. 2. I色譜條件脂溶性成分色譜條件AgilentXDB-C18(250 X 4. 60mm i. d.，5 μ m);檢測(cè)波長(zhǎng)254nm ;流動(dòng)相A(0. I %磷酸水)-B(甲醇)；梯度洗脫程序?yàn)?-75min,60-68 % B ；75-80min, 68-70% B ；80-110min, 70% B ;流速:0. 8mL · mirT1 ;柱溫 30°C ;進(jìn)樣量 10 μ L。水溶性成分色譜條件AgilentXDB-C18(250 X 4. 60mm i. d.，5 μ m);檢測(cè)波長(zhǎng)288nm;流動(dòng)相:A(0. 03 %磷酸水)-B (乙腈)；梯度洗脫程序?yàn)?-20min, 8-23 % B ；20-35min, 23-28. 5% B ;35_40min, 28. 5% B ;40_45min，28. 5-8% B ;流速:1. OmL .mirT1 ;柱溫25°C ;進(jìn)樣量10 μ L。2. 2. 2對(duì)照品溶液的制備脂溶性對(duì)照品分別準(zhǔn)確稱取丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮II A對(duì)照品適量，純甲醇分別定容至25. OOmL的棕色容量瓶中，得到脂溶性對(duì)照品母液。精密吸取0. 50mL隱丹參酮，2. OOmL丹參酮I和2. OOmL丹參酮II A對(duì)照品母液，置于25. OOmL棕色量瓶中，加甲醇至刻度、搖勻，得到丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮II A濃度分別為11. 5mg · Ι^，8. 32mg · Γ1和16. 9mg · Γ1的混合標(biāo)準(zhǔn)品，4°C冰箱保存，備用。水溶性對(duì)照品制備分別準(zhǔn)確稱取原兒茶醛、丹酚酸A和丹酚酸B適量，純甲醇分別定容至至25. OOmL的棕色容量瓶中，得到水溶性對(duì)照品母液。精密吸取I. OOmL原兒茶醛，8. OOmL丹酚酸A和5. OOmL丹參酮B對(duì)照品母液，置于25. OOmL棕色量瓶中，加甲醇至刻度、搖勻，得到原兒茶醒、丹酹酸A和丹酹酸B濃度分別為8. 16mg *L_1, 26. 5mg *L_1和123mg *L_1的混合標(biāo)準(zhǔn)品，4°C冰箱保存?zhèn)溆谩?. 2. 3供試品溶液的制備脂溶性供試液制備取供試品粉末O. 2g，精密稱定，置于50. OOmL具塞錐形瓶中，精密加入80 %乙醇25. OOmL,密塞，稱定重量，超聲處理30min，冷卻，80 %乙醇補(bǔ)重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
水溶性供試液的制備取供試品粉末O. 5g，精密稱定，置索氏提取器中，純水提取4h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮定容至25. OOmL，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得。2. 2. 4方法學(xué)考察線性關(guān)系考察精密吸取脂溶性對(duì)照品溶液和水溶性對(duì)照品溶液各I μ L、2 μ L、5 μ L、10 μ L、20 μ L、40 μ L，于上述色譜條件分別測(cè)定，以對(duì)峰面積⑴為橫坐標(biāo)，對(duì)照品質(zhì)量⑴為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，結(jié)果見表3，色譜圖見圖I。穩(wěn)定性考察取同一供試品溶液,在上述色譜條件下于0h、2h、4h、6h、8h、12h和24h進(jìn)樣,測(cè)定
峰面積，計(jì)算原兒茶醒、丹酹酸A、丹酹酸B、丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮II A含量及RSD值，結(jié)果見表4，5。表3回歸方程及線性范圍Table 3 Calibration curve data and and linearity range for sixcomponents by HPLCanalysis
指標(biāo)成分回歸方程I線性范圍(Hg)
原兒茶醒Y = 2. 34E-007X+3. 20E-004I. 000 8. 16-326
丹酚酸 BY = 7. 92E-007X+5. 28E-003I. 000 124-4943
丹酚酸 AY = 3. 11E-007X-1. 62E-003I. 000 26. 5-1060
隱丹參酮Y = 2. 87E-007X-6. 30E-004I. 000 8. 32-166
丹參酮 IY = 9. 65E-008X+4. 00E-004I. 000 11. 5-230
丹參酮 IIAY=L 94E-007X-1. 33E-003I. 000 17. 0-339
精密度考察取同一供試品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積和保留時(shí)間，計(jì)算原兒茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮II A含量及RSD值，結(jié)果見表4，5。重復(fù)性考察取同一批樣品6份，精密稱定，按照供試品溶液的制備方法分別制備，在上述色譜條件下分別測(cè)定，計(jì)算原兒茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮II A的含量及RSD值，結(jié)果見表4，表5。加樣回收率考察精確稱取已知指標(biāo)成分含量的樣品粉末6份，分別加入混合對(duì)照適量，依法測(cè)定， 計(jì)算回收率及RSD值，結(jié)果見表4、表5。表4水溶性成分方法學(xué)考察(η = 6)Table 4 Validation data for phenolic acids by HPLC quantitativeanalysis

權(quán)利要求
1.一種中藥丹參的醋炙炮制方法，其特征在于將丹參生品中加入輔料陳醋，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70-80°C，炒制時(shí)間為20min，將飲片炒到黃色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹參飲片。
2.按照權(quán)利要求I所述的醋炙炮制方法，其特征在于每IOOg丹參生品加入陳醋20g，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70-80°C，炒制時(shí)間為20min。
全文摘要
一種中藥炮制工藝具體量化參數(shù)，具體的說是一種中藥丹參的醋炙炮制方法，本發(fā)明技術(shù)方案如下將丹參生品中加入輔料陳醋，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70-80℃，炒制時(shí)間為20min，將飲片炒到黃色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹參飲片。每100g丹參生品加入陳醋20g，置于密閉容器中，悶潤(rùn)60min，然后置鍋內(nèi)炒制，炒制溫度70-80℃，炒制時(shí)間為20min。采用本發(fā)明方法炮制所得的醋炙丹參飲片有效成分損失小，能有效滿足臨床對(duì)中藥丹參飲片的需求，提高藥效及臨床療效。
文檔編號(hào)A61P17/02GK102836210SQ201110168718
公開日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2011年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月22日
發(fā)明者張利, 張慧, 王濤, 歐平, 楊在君, 李強(qiáng) 申請(qǐng)人:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)