專利名稱：一種治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物的提取及其制備方法，具體地講，涉及中藥的提取及其制備方法。
背景技術(shù)：
冠狀動(dòng)脈性心臟病(coronary artery heart disease, CHD)簡(jiǎn)稱冠心病，是一種最常見的心臟病，是指因冠狀動(dòng)脈狹窄、供血不足而引起的心肌機(jī)能障礙和(或)器質(zhì)性病變，故又稱缺血性心肌病(IHD)。CHD/IHD是一種最常見的心臟病。世界衛(wèi)生組織對(duì)CHD/ IHD分類如下(1)原發(fā)性心臟驟停；(2)心絞痛；(3)心肌梗塞；(4)缺血性心臟病中的心力衰竭；(5)心律失常。流行病學(xué)調(diào)查表明各種心臟病均可導(dǎo)致心源性猝死(S⑶)，CHD/IHD為最主要的原因之一，在西方國(guó)家冠心病可能占猝死原因的80 %，約20 % 25 %的CHD/IHD以猝死為首發(fā)表。冠心病在美國(guó)發(fā)病率最高，美國(guó)SCD的發(fā)生率在30萬(wàn)/年 40萬(wàn)/年。我國(guó)冠心病發(fā)生率低于美國(guó)和一些歐洲國(guó)家，但人口總基數(shù)大，近期由阜外心血管病醫(yī)院牽頭開展的我國(guó)一項(xiàng)十五攻關(guān)項(xiàng)目公布了我國(guó)SCD流行病調(diào)查結(jié)果，得出我國(guó)的SCD發(fā)生率，若以 13億人口推算，我國(guó)猝死的總?cè)藬?shù)約為54.4萬(wàn)/年。其危害程度不言而喻。目前天然藥物的研究工作在全世界范圍都是熱點(diǎn)，對(duì)于傳統(tǒng)中藥方劑開發(fā)利用是國(guó)內(nèi)研發(fā)新藥的重要來(lái)源之一。中醫(yī)在治療冠心病方面主要采取以下幾方面治療(1)補(bǔ)益類方藥治療冠心病 動(dòng)脈粥樣硬化在中醫(yī)辯證有正虛的一面，扶正是一個(gè)主要治則，其中根據(jù)不同臟腑定位選用不同治法方藥，如補(bǔ)脾，補(bǔ)腎，溫陽(yáng)等。(2)活血化瘀類方藥治療冠心病活血化瘀很早就受到人們的重視，在這方面做了大量的研究，并結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究揭示了相關(guān)機(jī)制。主要有脂質(zhì)侵潤(rùn)；血小板聚集和血栓形成；炎性反應(yīng)；血管平滑肌細(xì)胞增殖等方面。(3)除濕祛痰類方藥治療冠心病導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的主要因素是血脂過(guò)高，脂質(zhì)代謝失調(diào)。而高脂血癥，根據(jù)臨床表現(xiàn)屬于中醫(yī)學(xué)痰濁、痰瘀范疇。藥理研究表明，化痰方藥在降低血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和對(duì)抗脂斑形成方面具有顯著作用。(4)清熱解毒類方藥治療冠心病動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的炎癥學(xué)說(shuō)，為該類方藥的應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，以含有玄參、石斛、牛膝、金銀花等中藥的脈絡(luò)寧復(fù)方注射液對(duì)血栓栓塞性疾病效果突出，且四種以上的藥物結(jié)合使得其在心腦血管系統(tǒng)中也可以相對(duì)提高纖溶活性、減少纖維蛋白原含量、抗栓溶栓、改善血流變特性、改善微循環(huán)、保護(hù)心腦血管和組織等(于鋒、金亦濤、綦春玉、解煒、施鈺文.脈絡(luò)寧注射液藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2002，(12).)，但這些藥理活性僅僅說(shuō)明金銀花與玄參具有配伍、治療心腦血管疾病的基礎(chǔ)，在實(shí)際治療是否可以單獨(dú)將二者結(jié)合用于缺血性心臟病和心律失常的疾病方面，及治療的有效部位上尚且需要進(jìn)一步深入的研究
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，針對(duì)上述問(wèn)題，提供一種治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物及其制備方法，申請(qǐng)人通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)優(yōu)選單獨(dú)將金銀花與玄參結(jié)合，且更進(jìn)一步到得到二者配比及提取工藝，采用正交試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型藥效活性評(píng)價(jià)手段，獲得對(duì)缺血性心臟病及心律失常作用明確的活性部位，不但具有組方簡(jiǎn)單、有效成分清晰等優(yōu)點(diǎn)；且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中表明，有效部位在治療缺血性心臟病和抗化學(xué)藥物誘導(dǎo)的心律失常的兩個(gè)適應(yīng)癥中，療效明顯優(yōu)于目前市售脈絡(luò)寧注射液，在治療缺血性心臟病及因心肌缺血誘發(fā)的心律 失常方面具有顯著的適應(yīng)癥明確、療效確切的特點(diǎn)。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于，提供一種由玄參和金銀花組成的治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物。本發(fā)明的再一個(gè)目的在于，提供一種由玄參和金銀花組成的治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物的制備方法。本發(fā)明提供的治療缺血性心臟病的中藥提取物是由5 800重量份的玄參和 10 1500重量份的金銀花為原料制得的。本發(fā)明提供的優(yōu)選的治療缺血性心臟病的中藥提取物是由150 750重量份的玄參和300-1500重量份的金銀花為原料制得的。本發(fā)明提供的最優(yōu)選的治療缺血性心臟病的中藥提取物是由500重量份的玄參和1000重量份的金銀花為原料制得的。本發(fā)明提供的治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物是采用玄參和金銀花為原料，通過(guò)包括以下步驟的方法制備而成(1)將玄參和金銀花藥材充分混合，用水煎煮，合并提取液，濃縮；(2)在濃縮液中加入乙醇，攪拌并靜置，濾除沉淀，將濾液濃縮、干燥，獲得所述中藥提取物。本發(fā)明提供的治療缺血性心臟病的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟(1) 將玄參和金銀花藥材充分混合，加入兩味藥材總量6-12倍的水煎煮1 4次，每次1 4 小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 05 1. 20 (80°C ) ； (2)在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到50 80%，攪拌并在4 40°C溫度下靜置8 24小時(shí)，濾除沉淀，回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1.05 1.20 (80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物。本發(fā)明所提供的中藥提取物的制備方法為水煎煮醇沉淀法，水煎法遵循了中藥傳統(tǒng)用藥的習(xí)慣，可以將中藥中的化學(xué)成分較為完全地提取出來(lái)，且完全滿足大工業(yè)生產(chǎn)中藥制劑的需要；醇沉法為現(xiàn)代中藥純化技術(shù)，可以有效且經(jīng)濟(jì)地去除大部分玄參和金銀花中含有的多糖、淀粉、蛋白質(zhì)等無(wú)效成分，最大限度地保留玄參中的主要化學(xué)成分苯丙素苷類、環(huán)烯醚萜苷類成分和金銀花中的環(huán)烯醚萜苷類、有機(jī)酸類成分。這幾類化學(xué)成分具有中強(qiáng)度極性，且在熱水中具有較好的溶解性，故采用水煎煮醇沉淀法可以高效、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)地進(jìn)行提取富集。本發(fā)明還提供了上述中藥提取物在制備治療缺血性心臟病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所提供的中藥提取物可以制成任何一種臨床或藥學(xué)上可接受的劑型，如口服常釋制劑、緩釋控釋制劑、丸劑、滴丸劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、注射劑、吸入劑、 栓劑等，優(yōu)選口服制劑或注射劑。本發(fā)明所提供的中藥提取物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域的常規(guī)方法生產(chǎn)，可以添加各種藥學(xué)上可接受的輔料，如賦形劑、稀釋劑、崩解劑、粘合劑、增溶劑、等滲調(diào)節(jié)劑、潤(rùn)滑劑、促溶劑、甜味劑、著色劑等。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的一種治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物及其制備方法具有如下的有益效果1、經(jīng)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的中藥提取物對(duì)烏頭堿誘發(fā)小鼠心律失常、哇巴因誘發(fā)的豚鼠心律失常和大鼠冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常均具有預(yù)防作用，能夠明顯降低大鼠冠脈結(jié)扎后心肌梗死面積，揭示該中藥提取物對(duì)缺血性心臟病及心律失常具有很好的預(yù)防和治療作用。2、提供了由玄參和金銀花組成的新的用于治療缺血性心臟病的中藥提取物，滿足了臨床上對(duì)于中藥、天然藥物來(lái)源的治療缺血性心臟病藥物的需要；3、該中藥提取物效果顯著，能夠治療心律失常及缺血性心臟病；4、單純以玄參和金銀花為原料，組方簡(jiǎn)單，為醫(yī)學(xué)上進(jìn)一步探討玄參和金銀花在治療缺血性心腦血管疾病的治病機(jī)理方面提供了有力的幫助；5、利用正交試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型藥效活性評(píng)價(jià)手段，獲得對(duì)缺血性心臟病及心律失常作用明確的活性部位；6、實(shí)驗(yàn)證明玄參與金銀花的結(jié)合，在治療缺血性心臟病及相應(yīng)的心律失常模型上具有突出顯著的作用，效果優(yōu)于試驗(yàn)中設(shè)定的陽(yáng)性藥物脈絡(luò)寧注射液。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的一種治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物及其制備方法做進(jìn)一步更詳細(xì)的說(shuō)明。相關(guān)試驗(yàn)試驗(yàn)1中藥提取物的制備第一組分別取金銀花和玄參干燥藥材800g、40g，充分混合，加入兩味藥材總量6 倍的水煎煮3次，每次4小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 12 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到70%，攪拌并在20°C溫度下靜置10小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1. 16(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JXl-A)。第二組分別取金銀花和玄參干燥藥材500g、IOOg,充分混合，加入兩味藥材總量 8倍的水煎煮4次，每次1小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 14 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到80%，攪拌并在40°C溫度下靜置18小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1.08(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JXl-B)。第三組分別取金銀花和玄參干燥藥材500g、50g，充分混合，加入兩味藥材總量 10倍的水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 10 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到60%，攪拌并在15°C溫度下靜置24小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1.04(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JXl-C)。第四組分別取金銀花和玄參干燥藥材500g、500g，充分混合，加入兩味藥材總量12倍的水煎煮3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 10 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到50%，攪拌并在4°C溫度下靜置24小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1. 12(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JX2-A)。第五組分別取金銀花和玄參干燥藥材800g、400g，充分混合，加入兩味藥材總量 12倍的水煎煮4次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 13 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到50%，攪拌并在30°C溫度下靜置12小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1. 12(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JX2-B)。第六組分別取金銀花和玄參干燥藥材200g、400g，充分混合，加入兩味藥材總量 10倍的水煎煮1次，每次4小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. Il(SO0C)； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到60%，攪拌并在25°C溫度下靜置8小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1.05(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JX3-A)。第七組分別取金銀花和玄參干燥藥材100g、500g，充分混合，加入兩味藥材總量 7倍的水煎煮2次，每次3小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 10 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到75%，攪拌并在35°C溫度下靜置24小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1.20(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JX3-B)。第八組分別取金銀花和玄參干燥藥材60g、600g，充分混合，加入兩味藥材總量6 倍的水煎煮4次，每次4小時(shí)，合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1. 16 (80°C )； 在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到80%，攪拌并在10°C溫度下靜置24小時(shí)，濾除沉淀， 回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1. 18(80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物 (JX3-C)。試驗(yàn)2中藥提取物的藥效評(píng)價(jià)獲得的中藥組合物(JX2-B)在缺血性心臟病和心律失常中的藥效學(xué)研究。1、藥物對(duì)小鼠烏頭堿誘發(fā)心律失常的保護(hù)作用方法1 雄性小鼠18_25g，隨機(jī)分為六組，每組20只，給藥組灌胃實(shí)驗(yàn)藥物，空白組灌胃等體積生理鹽水。每組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40mg*kg-l麻醉。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠使用恒流泵尾靜脈恒速給予烏頭堿0. 2ml/min(10Ug/ml)，觀察首次心律失常出現(xiàn)時(shí)間和存活時(shí)間。結(jié)果見表1，結(jié)果說(shuō)明JX2-B具有良好的抗烏頭堿誘導(dǎo)動(dòng)物心律失?；钚?，且效果優(yōu)于脈絡(luò)寧注射液。方法2 雄性小鼠18_25g，隨機(jī)分為六組，每組20只，給藥組尾靜脈注射實(shí)驗(yàn)藥物， 空白組靜脈注射等體積生理鹽水。每組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40mg*kg-l麻醉。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠使用恒流泵尾靜脈恒速給予烏頭堿0. 2ml/min(10Ug/ml)，觀察首次心律失常出現(xiàn)時(shí)間和存活時(shí)間。結(jié)果見表2，結(jié)果說(shuō)明靜脈注射JX2-B同樣可以延長(zhǎng)烏頭堿誘導(dǎo)動(dòng)物心律失常的存活時(shí)間。從以上兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，JX2-B可能是抗藥物誘導(dǎo)心律失常的最佳提取工藝。表1. 口服藥物 JX1-A、JX1-B、JX1-C、JX2-A、JX2-B、JX3-A、JX3-B 和 JX3-C 對(duì)小鼠烏頭堿誘發(fā)心律失常的作用(η = 20)
組別
首次心律失常出現(xiàn)時(shí)間(min)存活時(shí)間(min)
空白組2.65 士 0.6519.77 ±2.10JXl-A3.35士0.77 *22.65 ± 1.98 *JXl-B3.86士0.93 *24.03 士 3.28 *JXl-C3.57士0.68 *23.39士2.08 *
JX2-A3.74 士 0.81 *25.40±2.76 *JX2-B4.33±1.03 * *28 士 6.08 * *JX3-A3.33±1.05 *24 ± 6.08 *JX3-B3.23士0.69 *22.96 士 1.74 *JX3-C3.29士0.52 *24.38士 1.92 *脈絡(luò)寧組4.18±0.73 * *27.35士L36* *
*表示與空白組比較P<0. 05廣表示與空白組比較ρ< 0. 01
表2.靜脈注射藥物JX1-A、JX1-B、JX2-B、JX3-A和JX3-B對(duì)小鼠烏頭堿誘發(fā)失常的作用(η = 20)組別首次心律失常出現(xiàn)時(shí)間(min)存活時(shí)間(min)空白組2.65 士 0.6519.77 士 2.10JXl-A4.03±1.30 *22.89 士 1.54 *JXl-B4.22±2.43 *25.23 ± 1.50 *JXl-C4.38±1.29 *23.57士 2.31 *
JX2-A4.17±1.52 *24.03士2.15 *JX2-B5.65±0.84 * *29.38 士 4.73 * *JX3-A4.10±1.56 *26.15±2.10 *JX3-B3.98±2.12 *25.88 ± 1.69 *JX3-C3.57±0.83 *23.56士 1.34 *脈絡(luò)寧6.12±0.33 * *30.07士 1.92* **表示與空白組比較ρ < 0. 05廣表示與空白組比較ρ < 0. 012、JX2-B對(duì)豚鼠哇巴因誘發(fā)心律失常的保護(hù)作用方法雄性豚鼠300_350g隨機(jī)分為四組，每組6只.。給藥組尾靜脈給予實(shí)驗(yàn)藥物，空白組給予等體積生理鹽水。安慰劑組給予安慰劑，陽(yáng)性藥物選擇脈絡(luò)寧。末次給藥30 分鐘后，各組用10%水合氯醛3. 5ml · kg-1麻醉。固定并記錄心電，分離頸總靜脈，插管并連接輸液泵，靜脈恒速注射哇巴因300ug-ml-LBug ·π η-1。記錄首次心律失常出現(xiàn)時(shí)間， 室速，室顫百分率。存活時(shí)間。結(jié)果見表3，結(jié)果顯示JX2-B不僅對(duì)烏頭堿誘發(fā)的心律失常具有良好的拮抗作用，還能對(duì)抗哇巴因誘導(dǎo)的豚鼠心律失常，進(jìn)一步驗(yàn)證了 JX2-B具有良好的抗心律失常的藥效活性。表3.靜脈注射藥物JX2-B、HHJ(安慰劑)、脈絡(luò)寧陽(yáng)性藥物對(duì)豚鼠哇巴因誘發(fā)心律失常的作用(η = 6)
權(quán)利要求
1.一種用于治療缺血性心臟病及心律失常的中藥提取物，其特征在于，所述提取物是由5 800重量份的玄參和10 1500重量份的金銀花為原料制得的。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥提取物，其特征在于所述提取物是由150 750重量份的玄參和300-1500重量份的金銀花為原料制得的。
3.如權(quán)利要求2所述的中藥提取物，其特征在于所述提取物是由500重量份的玄參和 1000重量份的金銀花為原料制得的。
4.如權(quán)利要求1 3所述的任一中藥提取物，其特征在于，通過(guò)包括以下步驟的方法制備而成(1)將玄參和金銀花藥材充分混合，用水煎煮，合并提取液，濃縮；(2)在濃縮液中加入乙醇，攪拌并靜置，濾除沉淀，將濾液濃縮、干燥，獲得所述中藥提取物。
5.如權(quán)利要求4所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)將玄參和金銀花藥材充分混合，加入兩味藥材總量6-12倍的水煎煮1 4次，每次1 4小時(shí)， 合并提取液，濃縮至半固體狀，使波美度達(dá)到1.05 1.20(8(TC) ； (2)在濃縮液中加入乙醇使醇濃度達(dá)到50 80%，攪拌并在4 40°C溫度下靜置8 24小時(shí)，濾除沉淀，回收乙醇后制成濃縮膏，使?jié)饪s膏的波美度為1. 05 1. 20 (80°C )，干燥，獲得所述中藥提取物。
6.如權(quán)利要求1 3任一所述的中藥提取物，其特征在于，該提取物可與藥學(xué)上可接受的輔料制成任何一種臨床或藥學(xué)上可接受的劑型。
7.如權(quán)利要求1 3任一所述的中藥提取物，其特征在于，該提取物可與藥學(xué)上可接受的輔料制成口服制劑或注射劑。
8.權(quán)利要求1 3任一所述的中藥提取物，在制備治療心律失常及缺血性心臟病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療缺血性心臟病的中藥提取物及其制備方法，該提取物是由5～800份重量的玄參和10～1500份重量的金銀花為原料制得的。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明提供的提取物效果顯著，能有減小大鼠冠脈結(jié)扎后因心肌缺血誘導(dǎo)的梗死面積，能夠緩解小鼠烏頭堿、豚鼠哇巴因、大鼠冠脈結(jié)扎所導(dǎo)致的心律失常。因此，該提取物可用于治療缺血性心臟病及心律失常。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102247478SQ20111013170
公開日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月21日
發(fā)明者侯云龍, 馮速捷, 姚新生, 張雪, 徐儉, 朱玲娟, 楊寶峰, 王立艷 申請(qǐng)人:黑龍江哈爾濱醫(yī)大藥業(yè)有限公司