專利名稱：用于治療并預防關節(jié)和結締組織相關疾病的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及哺乳動物的關節(jié)軟骨疾病、包括膠原等的結締組織的疾病、關節(jié)和結締組織損傷及椎間盤退變性疾病的治療(特別是非手術治療)。
背景技術：
膠原是在動物的骨、軟骨、牙齒、皮膚等中發(fā)現(xiàn)的硬蛋白質(zhì)，并以纖維狀固體的形式存在。它含有氨基酸，包括脯氨酸、羥脯氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺等，并且其特征是具有在其它蛋白質(zhì)中不存在的高含量的羥脯氨酸。而且，羥脯氨酸含有羥基，該羥基在潤濕和彈性中起著重要作用。I型膠原由兩個α -1 (I)多肽鏈和一個α _2多肽鏈組成，并且大多數(shù)發(fā)現(xiàn)于皮膚組織、骨骼組織和眼角膜中。II型膠原由三個α-1( II )多肽鏈組成，并且主要發(fā)現(xiàn)于關節(jié)軟骨、椎間盤和眼玻璃體中。III型膠原由三個α-Ι(ΙΙΙ)多肽鏈和一個a-2(IV)多肽鏈組成并發(fā)現(xiàn)于胎盤和皮膚中。關節(jié)是兩根以上的骨銜接的地方，并且其由軟骨、關節(jié)囊、滑膜、韌帶、肌腱、肌肉等組成從而使骨之間光滑運動。它的作用是吸收運動引起的沖擊。關節(jié)炎是關節(jié)的炎癥， 其歸因于各種原因并且通常導致關節(jié)疼痛。治療關節(jié)炎的方法如下。透明質(zhì)酸是粘多糖的組分，并且大量存在于身體的各種部分，特別是關節(jié)中，它在關節(jié)中具有潤滑和緩沖作用。隨著關節(jié)內(nèi)開始退變，軟骨和滑液中的透明質(zhì)酸濃度降低，并且軟骨和滑液的粘度降低，由此關節(jié)可能受到損傷。當將透明質(zhì)酸注入關節(jié)腔中時，它起到潤滑和緩沖的作用，因此減輕了關節(jié)中的疼痛并改善了關節(jié)的功能。然而，由于透明質(zhì)酸的作用不能長時間持久，因此需要重復注入，并且當重復注入時，關節(jié)中產(chǎn)生的透明質(zhì)酸的量會降低。葡糖胺是軟骨中粘多糖的組分，并且發(fā)現(xiàn)于軟骨的基質(zhì)中。它改善了軟骨細胞的活性，并且還減少了關節(jié)中的促炎物質(zhì)，因此展現(xiàn)出抗癌活性。臨床上報道了葡糖胺減輕疼痛并延緩關節(jié)的退變，但是這樣的報道效果還沒有被充分證明。而且，需要葡糖胺的連續(xù)給藥，并且當其給藥不連續(xù)時，其作用就會降低。此外，硫酸軟骨素、SAM-e、MSM、戊聚糖多硫酸酯等能夠有助于減少退變的關節(jié)炎的疼痛并且不需要進一步的研究。軟骨修復的方法包括手術方法和非手術方法。手術方法包括其中將骨穿孔從而使新骨和軟骨生長的方法；移植其它部位的軟骨的方法；以及其中將自體軟骨細胞體外培養(yǎng)然后通過手術進行移植的方法。非手術方法包括其中將未分化的干細胞注射至軟骨損傷部位從而在軟骨中生長的方法；以及其中注入軟骨生長因子從而軟骨細胞能夠自身再生的方法。軟骨生長因子包括TGF-i3、IGF-l、BMP-2等。當注入這樣的軟骨生長因子或促進其分泌時，它們促進了軟骨的生長同時抑制了干擾軟骨生長的因子，由此將軟骨再生。然而，這樣的方法需要可觀的成本并且不能實現(xiàn)充分的軟骨再生。因此，人工關節(jié)外科手術目前被認為是最出色的方法，但是它的缺點在于它具有精神和經(jīng)濟負擔，并且術后的修復非常困難并漫長。對于類風濕性關節(jié)炎，使用直接調(diào)節(jié)細胞響應誘導因子的藥物，例如對炎癥具有潛在影響的細胞因子。其治療后顯示出優(yōu)異的效果，但是其缺點在于過一段時間癥狀會復發(fā)并且會發(fā)生并發(fā)癥。上述關節(jié)炎治療藥物和方法具有持續(xù)效果、并發(fā)癥、經(jīng)濟效益等問題，因此急需開發(fā)關節(jié)炎治療藥劑或方法來克服這樣的缺點。同時，結締組織是連接身體不同部分和器官的組織，并且其實例包括椎間盤、皮膚寸。椎骨由7塊頸椎骨、12塊胸椎骨、5塊腰椎骨、骶椎骨和尾椎骨構成，并且其側(cè)面呈現(xiàn)S形以充分抵抗空氣壓力和身體重量。在椎骨中，椎間盤存在于椎骨(不包括頸椎1和 2)之間以吸收椎骨上的沖擊并允許椎骨的各種運動，包括彎曲、旋轉(zhuǎn)和側(cè)彎運動。與由骨頭構成的椎骨不同，椎間盤由膠狀半固體髓核組織構成并且環(huán)形纖維組織包圍著它。對于年輕人，髓核組織的水分含量為約80%，其水分含量隨年齡減少，由此椎間盤的體積和彈性降低，導致壓力抵抗能力的降低。因此，在老年人中，腰部是硬的并且柔韌性降低。由于老化，髓核組織脫水變硬，并且環(huán)形纖維組織變?nèi)醪⒉糠珠_裂。因此，當身體以彎腰的狀態(tài)旋轉(zhuǎn)抬起重物(即實施次級機械壓力)時，或當身體保持在不良位置時，通過變?nèi)醯沫h(huán)狀纖維組織，變硬的髓核組織將會被擠出，或者會使環(huán)形纖維組織破裂同時部分髓核組織釋放入脊柱腔中。該現(xiàn)象被稱為椎間盤突出。如果釋放入脊柱腔中的髓核組織直接壓迫延續(xù)至腿的神經(jīng)，將發(fā)生疼痛。當然，在椎間盤突出中經(jīng)常觀察到髓核組織在所有方向上被擠出，從而壓迫神經(jīng)。用于治療椎間盤突出疾病的方法如下。首先，物理療法相對容易進行，但是其目的是緩解癥狀而不是治療椎間盤疾病本身。牽引療法在其中椎間盤突出疾病相對剛剛發(fā)生 (所謂的軟椎間盤突出的情況)下是有效的，但是在其它情況下，其主要目的是緩解癥狀。 此外，深度熱療法(聲譜降解法等)還對椎間盤突出具有直接的影響，但是對舊的椎間盤突出具有不良影響。此外，還有使用抗炎藥劑、肌肉遲緩藥、激素等藥物治療。然而，如同物理治療一樣，該方法的主要目的是緩解癥狀，并且其問題在于由于藥物的各種副作用很難長期給藥。還進行神經(jīng)療法，并且它的優(yōu)勢在于其能夠在相對短的時間內(nèi)展現(xiàn)出作用。然而， 它的缺點是高危險性并且很可能引起副作用。最近，已經(jīng)進行了強化療法，但是它是治療韌帶和肌腱的間接方法，而不是治療自身椎間盤突出的方法。最后，還有外科手術療法。外科手術療法的實例包括椎間盤髓核成形術、髓核溶解術、椎間盤切除術、人工椎間盤替換等。然而，它具有各種問題，包括手術負擔、副作用、并發(fā)癥、成本負擔和漫長的恢復時間。此外，它的目的是除去或溶解椎間盤而不是使椎間盤的結締組織再生。因此，它的目的不是使椎間盤再生。因此，非常強烈需要使用藥劑能夠使椎間盤再生的治療方法，所述藥劑以相對簡單和安全的方式進行口服或注射給藥
發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明已經(jīng)關注現(xiàn)有技術中存在的上述問題，并且本發(fā)明的目的是開發(fā)用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的新型藥劑。為了完成上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一方面，其提供用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述組合物含有選自多羥基化合物、氨基酸、鳥氨酸、 核酸和維生素C中的兩種以上的物質(zhì)。在本發(fā)明的組合物中，所述組合物中的多羥基化合物的濃度可為2. 5-50%，并且基于100重量份的藥物組合物，多羥基化合物的含量可為10-90重量份。氨基酸可選自脯氨酸(ftx))、甘氨酸(Gly)、谷氨酰胺(Gln)、丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)、絲氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、蛋氨酸(Met)、賴氨酸(Lys)、半胱氨酸(Cys)、羥脯氨酸(hydroxy-Pro)和精氨酸(Arg)中的一種或多種。而且所述組合物中的氨基酸的濃度可為2. 5-50%，并且基于100重量份的藥物組合物，氨基酸的含量可為10-90重量份。基于氨基酸的總重量，氨基酸可包含5-95重量份的脯氨酸，5-95重量份的羥脯氨酸，5-95重量份的甘氨酸，1-50重量份的谷氨酰胺，1-30重量份的丙氨酸，1-30重量份的天冬氨酸，1-30重量份的絲氨酸，5-95重量份的精氨酸，1-50重量份的蛋氨酸，1-30重量份的半胱氨酸，1-30重量份的賴氨酸和1-30重量份的谷氨酸。而且，基于氨基酸的總重量，氨基酸可包含5-85重量份的脯氨酸、5-85重量份的羥脯氨酸、10-90重量份的甘氨酸、1-30重量份的谷氨酰胺、1-20重量份的丙氨酸、1-20重量份的天冬氨酸、1-20重量份的絲氨酸、5-80重量份的精氨酸、1-30重量份的蛋氨酸、1-20 重量份的半胱氨酸、1-20重量份的賴氨酸和1-20重量份的谷氨酸。而且，基于氨基酸的總重量，氨基酸可包含5-70重量份的脯氨酸、5-70重量份的羥脯氨酸、10-70重量份的甘氨酸、1-20重量份的谷氨酰胺、1-10重量份的丙氨酸、1-10重量份的天冬氨酸、1-10重量份的絲氨酸、5-60重量份的精氨酸、1-15重量份的蛋氨酸、1-10 重量份的半胱氨酸、1-10重量份的賴氨酸和1-10重量份的谷氨酸。所述組合物中的鳥氨酸的濃度可為2. 5-65%，并且基于100重量份的藥物組合物，鳥氨酸的含量可為10-90重量份。核酸可包含至少一種基于嘌呤的核酸相關物質(zhì)和基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)。而且，所述組合物中的核酸的濃度可為0. 1-50%，并且基于100重量份的藥物組合物，核酸的含量可為10-90重量份。本文中，核酸的分子量為100，000-50, 000, OOODa0基于嘌呤的核酸相關物質(zhì)可選自以下一種或多種腺嘌呤、腺苷、腺苷的磷酸酯、 腺苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽；和鳥嘌呤、鳥苷、鳥苷的磷酸酯、鳥苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽。而且，基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)可選自以下一種或多種胞嘧啶、胞苷、胞苷的磷酸酯、脫氧胞苷、脫氧胞苷的磷酸酯及它們的鹽；尿嘧啶、尿苷、尿苷的磷酸酯、尿苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽；以及胸腺嘧啶、胸苷、胸苷的磷酸酯、乳清酸、5’ -乳清二酸 (5，-orothidic acid)及它們的鹽。維生素C可包括維生素C衍生物。而且，組合物中維生素C的濃度可為0. 01-10%, 并且基于100重量份的藥物組合物，維生素C的含量可為0. 1-50重量份。維生素C衍生物可選自L-抗壞血酸的烷基酯、L-抗壞血酸的磷酸酯、L-抗壞血酸的硫酸酯和L-抗壞血酸的鈉鹽中的一種或多種。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述組合物包含20-80重量份的多羥基化合物，其在組合物中的濃度為 2. 5-50% ；20-80重量份的鳥氨酸，其在組合物中的濃度為2. 5-50% ；20-80重量份的氨基酸，其在組合物中的濃度為2. 5-50%，所述氨基酸選自脯氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、 天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、賴氨酸、半胱氨酸、羥脯氨酸和精氨酸中的一種或多種； 20-80重量份的核酸，其在組合物中的濃度為0. 1-50%，以及0. 1-15重量份的維生素C，其在組合物中的濃度為0. 01-10%。核酸的分子量可為100，000-50, 000, OOODa0根據(jù)本發(fā)明，通過將具有潤濕結締組織作用的多羥基化合物、作為軟骨和結締組織的基本組分的氨基酸(例如甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等)、核酸、展現(xiàn)出抗氧活性以預防軟骨退變的維生素C等混合來制備對關節(jié)損傷和結締組織損傷有效果的藥物。當將該藥物注入損傷并退變的軟骨中時，軟骨細胞將再生來修復軟骨組織。這同樣適用于結締組織。已知，隨著椎間盤的細胞外滲透壓增加，椎間盤中聚集蛋白聚糖(aggrecan)和II 型膠原的表達增加。當將本發(fā)明的藥物組合物注入損傷軟骨時，能夠增加聚集蛋白聚糖和 II型膠原的合成以預防與關節(jié)和結締組織有關的疾病。根據(jù)本發(fā)明，能夠有效并經(jīng)濟地預防和治療關節(jié)炎、關節(jié)損傷和結締組織疾病，而不涉及副作用和并發(fā)癥。


圖1為顯示正常組、測試組和對照組中股骨內(nèi)髁(femur medial condyle)的組織病理學觀察結果的組圖。圖2為顯示正常組、測試組和對照組中股骨外髁(femur lateral condyle)的組織病理學觀察結果的組圖。圖3為顯示正常組、測試組和對照組中脛骨內(nèi)側(cè)平臺(tibia medial plateau)的組織病理學觀察結果的組圖。圖4為顯示正常組、測試組和對照組中脛骨外側(cè)平臺(tibia lateral plateau) 的組織病理學觀察結果的組圖。
具體實施例方式下文將進一步詳細描述本發(fā)明。根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含選自多羥基化合物、氨基酸、鳥氨酸、核酸和維生素C中的兩種以上的物質(zhì)。在本發(fā)明中，多羥基化合物有助于恢復肌腱、韌帶和關節(jié)中的纖維物質(zhì)并保持濕潤，由此保持關節(jié)和結締組織的彈性并減輕疼痛。而且，當以高濃度使用鳥氨酸時，多羥基化合物的作用是穩(wěn)定鳥氨酸?？稍诒景l(fā)明中使用的多羥基化合物的實例包括但不限于甘露醇、赤藻糖醇、異麥芽酚、乳糖醇、麥芽糖醇、山梨醇、木糖醇、衛(wèi)矛醇、核醣醇、纖維醇、甘油、糖漿(molasses)、聚乙二醇、葡萄糖、丙二醇、轉(zhuǎn)化糖、1，3-丁二醇、異丙醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷、失水山梨糖醇單月桂酸酯等。組合物中多羥基化合物的濃度可為2. 5-50%，并且基于100重量份的藥物組合物，多羥基化合物的含量可為10-90重量份。多羥基化合物的羥甲基鏈和羥基通過蛋白水合用來穩(wěn)定膠原的結構。因此，當將多羥基化合物引入關節(jié)中，它能夠保持關節(jié)和結締組織的潤濕能力和穩(wěn)定性。盡管，諸如山梨醇或甘露醇等的多羥基化合物被主要用作藥物載體，在本發(fā)明中， 它被用作藥物組合物的一個組分。這種多羥基化合物通過代謝途徑來刺激TGF-β、ERK和HiC (蛋白激酶C)轉(zhuǎn)錄用以產(chǎn)生細胞外基質(zhì)。通常，多羥基化合物具有羥基(-0Η)，所述羥基提供優(yōu)異的潤濕能力和彈性。例如， 當將多羥基化合物中的聚乙烯醇給予受傷的關節(jié)中時，它充當模擬原有關節(jié)軟骨的粘彈性的生物相容的水凝膠。而且，通過水凝膠和結合細胞的纖維連接蛋白之間的共價連接來促進軟骨細胞的粘附和生長多羥基化合物還參與形成蛋白質(zhì)結構和溶劑與蛋白質(zhì)之間的相互作用以增強疏水性，由此穩(wěn)定蛋白質(zhì)結構。此外，多羥基化合物的羥基(OH)和羥甲基(CH2OH)促進膠原的穩(wěn)定。例如，當諸如赤藻糖醇、木糖醇或山梨醇等的多羥基化合物與膠原共存時，它能夠提供抵抗鹽酸胍(GdmCl)的膠原。因此，多羥基化合物在預防和治療相關疾病以及與諸如肌腱或韌帶等的結締組織有關的疾病中是有效的。而且，已知普盧蘭尼克(pluronic)多羥基化合物通過以甚至少量促進人牙齦成纖維細胞的早期結合并提高人牙齦成纖維細胞的生長速率來促進傷勢康復。將用在本發(fā)明的一方面中的氨基酸用來合成膠原?？捎迷诒景l(fā)明中的氨基酸的種類不受限制。然而，參與生長因子的氨基酸是可選擇的并可用在本發(fā)明中。例如，可使用選自脯氨酸0 ))、甘氨酸(Gly)、羥脯氨酸(hydroxy-Pro)、精氨酸(Arg)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酰胺(Gln)、丙氨酸(Ala)、絲氨酸(kr)、谷氨酸(Glu)、蛋氨酸(Met)、賴氨酸(Lys)和半胱氨酸(Cys)中的一種或多種。在本發(fā)明中，組合物中氨基酸的濃度可為2. 5-50%，并且基于100重量份的藥物組合物，氨基酸的含量可為10-90重量份。用在本發(fā)明中的氨基酸能夠充當膠原的底物，并能夠影響基因表達。除了上述氨基酸外，還可以使用其它氨基酸，包括天冬酰胺(Asn)、異亮氨酸 (Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Wie)、色氨酸(Trp)、蘇氨酸(Thr)、組氨酸(His)和纈氨酸 (Val)。苯丙氨酸作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)使之感覺更好，并由此用來治療諸如精神抑郁癥和精神分裂癥等的神經(jīng)疾病以及肥胖癥。它還用來控制疼痛，并由此能夠緩解由偏頭痛、痛經(jīng)或關節(jié)炎引起的疼痛。此外，蘇氨酸在人結締組織中的膠原的合成和韌帶中的彈性蛋白的合成中起重要的作用。在本發(fā)明中所使用的氨基酸可以是L-氨基酸。而且，氨基酸可單獨使用或用在其兩種以上的混合物中。當將氨基酸用在兩種以上的混合物中時，根據(jù)氨基酸組成以及II型膠原的濃度，本領域的技術人員能夠合適地確定氨基酸在藥物組合物中的含量。
例如，每種氨基酸在氨基酸混合物中的比率能夠設置如下脯氨酸5-95%、羥脯氨酸5-95%、甘氨酸5-95%、谷氨酰胺1-50%、丙氨酸1-30%、天冬氨酸1-30%、絲氨酸 1-30%、精氨酸5-95%、蛋氨酸1-50%、半胱氨酸1-30%、賴氨酸1-30%和谷氨酸1_30%?；蛘?，每種氨基酸在氨基酸混合物中的比率能夠設置如下脯氨酸5-85%、羥脯氨酸5-85 %、甘氨酸10-90 %，、谷氨酰胺1-30 %、丙氨酸1_20 %、天冬氨酸1_20 %、絲氨酸 1-20%、精氨酸5-80%、蛋氨酸1-30%、半胱氨酸1-20%、賴氨酸1-20%和谷氨酸1-20%?；蛘?，每種氨基酸在氨基酸混合物中的比率能夠設置如下脯氨酸5_70%、羥脯氨酸5-70%、甘氨酸10-70%、谷氨酰胺1_20%、丙氨酸1_10%、天冬氨酸1_10%、絲氨酸 1_10%、精氨酸5-60%、蛋氨酸1_15%、半胱氨酸1_10%、賴氨酸和谷氨酸1_10%。當將氨基酸用在兩種以上的混合物中時，以上述具體比率來混合可商購的氨基酸?？梢栽谑覝匾韵轮苽浠蛸A存本發(fā)明的組合物，但是對制備和貯存的溫度沒有具體的限制。特別是脯氨酸、羥脯氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、精氨酸、 蛋氨酸和半胱氨酸(這些是膠原的氨基酸)在用于預防和治療關節(jié)和結締組織相關疾病的藥物組合物中是重要的。其中，在維生素C的幫助下，通過生物化學方法將脯氨酸轉(zhuǎn)化成膠原特異性氨基酸羥脯氨酸。羥脯氨酸的作用是保持膠原的結構和吸濕能力，并由此在保持彈性中起到關鍵的作用。已知精氨酸在增強巨噬細胞活性和NK (天生殺手)細胞活性中以及在增加白細胞介素-2(IL1)生成中是有效的。還已知精氨酸促進傷勢康復，特別是膠原合成，并且精氨酸和鳥氨酸在傷勢康復中顯示出增效作用。還已知精氨酸(Arg)在成骨細胞類細胞中刺激IGF-I生成和膠原合成，其中IGF-I 在體內(nèi)和體外的成骨細胞代謝中是重要的調(diào)節(jié)因子。天冬氨酸顯示出提高膠原合成以刺激結締組織中的細胞的效果。特別是，天冬氨酸與羥脯氨酸一起對成纖維細胞起作用以誘導細胞刺激，由此增加膠原和彈性蛋白的合成。而且，天冬氨酸通過天冬氨酸酶的作用合成天冬酰胺以促進膠原合成。谷氨酰胺的作用是提高免疫作用并預防肌肉纖維退變。而且，它是葡糖胺的組分， 葡糖胺構成軟骨和軟骨素以及膠原，其中葡糖胺是蛋白聚糖的組分，蛋白聚糖刺激軟骨細胞以產(chǎn)生新的膠原。這樣的葡糖胺展現(xiàn)出對骨關節(jié)炎的優(yōu)異效果。而且，已知谷氨酰胺在培養(yǎng)的人成纖維細胞中間接控制膠原基因的表達。絲氨酸作為天然潤濕因子(NMF)以對細胞提供外部潤濕。對于DNA-RNA結構、膠原和細胞蛋白合成，還需要蛋氨酸，并且已知它刺激人關節(jié)軟骨細胞中蛋白聚糖的合成。而且，身體組織和皮膚的彈性受到半胱氨酸的影響，半胱氨酸的作用是降低膠原或神經(jīng)組織蛋白的非正常交聯(lián)。還已知半胱氨酸在牛和人關節(jié)軟骨細胞中激活MAI3K下游的EPK。在本發(fā)明的一個實施方案中，用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物可包含鳥氨酸。鳥氨酸是含在蛋白質(zhì)中的一種堿性氨基酸。鳥氨酸是氨基酸代謝的中間代謝產(chǎn)物并且是在肝臟中將氨轉(zhuǎn)化成尿素的尿素循環(huán)的組分。而且，鳥氨酸是諸如腐胺和亞精胺等的多胺的原材料，其中多胺通過與DNA結合并控制DNA的復制影響蛋白質(zhì)合成或細胞分化。
而且，鳥氨酸在尿素循環(huán)中是精氨酸的重要代謝物并參與精氨酸的許多生物藥理作用。因此，還已知鳥氨酸促進傷勢康復和膠原合成。更具體地，鳥氨酸是在傷勢康復中起作用的脯氨酸的前體。特別是鳥氨酸和精氨酸顯示出對傷勢康復的增效作用。組合物中鳥氨酸的濃度可為2. 5-65%，并且基于100重量份的藥物組合物，鳥氨酸含量可為10-90重量份。然而，如果鳥氨酸以高濃度存在于組合物中，則鳥氨酸的分子穩(wěn)定性有可能降低。 在這種情況下，加入諸如山梨醇等的多羥基化合物，多羥基化合物的羥基將增加鳥氨酸的分子穩(wěn)定性。因此，如果使用高濃度的鳥氨酸，則多羥基化合物的存在將會很重要。對于傷勢康復，將會原位合成顯著量的膠原。使用氨基酸作為膠原合成的中間前體。本文中，脯氨酸及其代謝前體包括鳥氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸起了重要的作用。核酸是由鏈中互相連接的被稱為核苷酸的單體單元構成的直鏈聚合物并且被分為RNA和DNA。而且，核苷酸由核糖、堿基和磷酸構成，其中所述堿基包括腺嘌呤、鳥嘌呤(嘌呤)、胞嘧啶、尿嘧啶和胸腺嘧啶(嘧啶)。本發(fā)明中所使用的核酸可包含至少一種基于嘌呤的核酸相關物質(zhì)和基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)?；卩堰实暮怂嵯嚓P物質(zhì)包括腺嘌呤、腺苷、腺苷的磷酸酯、腺苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽；以及鳥嘌呤、鳥苷、鳥苷的磷酸酯、鳥苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽。而且，基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)可包括胞嘧啶、胞苷、胞苷的磷酸酯、脫氧胞苷、脫氧胞苷的磷酸酯及它們的鹽；尿嘧啶、尿苷、尿苷的磷酸酯、尿苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽；以及胸腺嘧啶、胸苷、胸苷的磷酸酯、乳清酸、5’ -乳清二酸及它們的鹽。 而且，所述鹽可包括堿金屬鹽，例如鈉鹽和鉀鹽；堿性堿土金屬鹽，例如鈣鹽、鎂鹽和鋇鹽；堿性氨基酸鹽；銨鹽；烷醇胺鹽等。核酸還可以是分子量為100，000-50, 000, OOODa的低分子量的核苷酸。組合物中的核酸濃度可為0. 1_50%，并且基于100重量份的藥物組合物，核酸含量可為10-90重量份。已知核酸增強體液免疫力，產(chǎn)生白細胞介素-2(IL_2)并影響T輔助細胞活性。而且，核酸中，已知ATP和UTP刺激蛋白聚糖和膠原聚集并合成關節(jié)軟骨細胞。此外，已知尿苷和尿苷衍生物促進軟骨細胞、成纖維細胞、滑膜細胞等中的膠原的生物合成。尿苷衍生物包括但不限于尿嘧啶、尿苷單磷酸酯、尿苷二磷酸酯、三乙酰基尿苷、 三苯甲?；蜍铡?-乙基尿苷、2-脫氧尿苷、異亞丙基尿苷等。而且，本發(fā)明的藥物組合物可進一步包含維生素C或其衍生物，所述維生素C或其衍生物激活膠原合成所需的羥化酶。如上所述，隨著維生素C量的增加，羥脯氨酸的量增力口，并由此還促進膠原合成。已知維生素C (或抗壞血酸)推遲骨關節(jié)炎的發(fā)展。維生素C (抗壞血酸)衍生物可單獨使用或組合使用，并且可包含所有的對映異構體。優(yōu)選地，可以L形式(左旋形式)來提供抗壞血酸。維生素C衍生物的實例可包括但不限于L-抗壞血酸的烷基酯；L-抗壞血酸的磷酸酯；L-抗壞血酸的硫酸酯；L-抗壞血酸的鈉鹽等。
本文中，組合物中維生素C的濃度可為0. 01-10%，并且基于100重量份的藥物組合物，維生素C的含量可為0. 1-50重量份。 以藥物或食物形式來提供本發(fā)明的藥物組合物。它可以通過各種常規(guī)途徑進行給藥，包括口服給藥、液體給藥和施用或噴在皮膚上。對于口服給藥，本發(fā)明的藥物組合物可單獨使用或以制劑形式與藥用載體或賦形劑一起使用，所述制劑例如片劑、丸劑、膠囊、凝膠或糖漿。具體地，組合物可以液體溶液形式與諸如鹽、緩沖液或螯合劑等的添加劑一起給藥。載體包括但不限于鹽水、緩沖鹽水、水、乙醇等，并且在本發(fā)明中可使用本技術領域已知的所有合適的制劑(Remington' s Pharmaceutical Science ( WillI^JiItl^4^ ) ‘ Mack Publishing Company, Easton PA)。而且，可使用合適的利用濃縮糖溶液的包衣或在合適的有機溶劑或溶劑混合物中的包衣溶液來提供糖丸核，所述濃縮糖溶液可包含阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦。能夠用于口服給藥的藥物組合物包括由明膠制成的推入配合膠囊(push-fit capsule)和由明膠和諸如甘油等的增塑劑制成的軟膠囊。除了活性成分，推入配合膠囊還可包含諸如乳糖等的填料、諸如淀粉等的粘合劑、諸如硬脂酸鎂等的潤滑劑或穩(wěn)定劑。通過將活性化合物溶解或懸浮在合適液體中能夠制備軟膠囊，所述合適的液體例如脂肪油、液體煤油或液態(tài)聚乙二醇。而且，所述組合物可用作靶向藥物體系，例如用靶向關節(jié)炎或纖維化組織的特異性抗體涂覆的脂質(zhì)體。對于注射給藥，可將組合物加入至合適的緩沖液或等滲劑中并溶解在無菌蒸餾水中，且可將其直接注入脊骨腔、結締組織或靜脈中。當將藥物組合物注射給藥時，將改變細胞中的滲透環(huán)境從而影響基因表達。例如，在椎間盤細胞中，隨著滲透壓的增加，通過注射給藥的組合物將增加聚集蛋白聚糖和II型膠原的表達。當將本發(fā)明的組合物用作食物時，除傳統(tǒng)食物或飲料外，可以醫(yī)療食物或保健食物的形式來使用，所述組合物將顯示出上述效果。
實施例下文中，參考實施例將進一步詳細描述本發(fā)明。然而，本發(fā)明的范圍不限于這些實施例。實施例1 治療組合物的制備制備以下表1所顯示的治療組合物。表1中所示的組分均購自Sigma Chemical Co. (USA)。[表1]
權利要求
1.用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述組合物包含兩種或更多種選自多羥基化合物、氨基酸、鳥氨酸、核酸和維生素C中的物質(zhì)。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述組合物中所述多羥基化合物的濃度為 2. 5-50%，并且基于100重量份的所述藥物組合物，所述多羥基化合物的含量為10-90重量份。
3.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述氨基酸包括選自脯氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、賴氨酸、半胱氨酸、羥脯氨酸和精氨酸中的一種或多種，所述組合物中所述氨基酸的濃度為2. 5-50%，并且基于100重量份的所述藥物組合物，所述氨基酸的含量為10-90重量份。
4.如權利要求3所述的藥物組合物，其中基于所述氨基酸的總重量，所述氨基酸包含 5-95重量份的脯氨酸、5-95重量份的羥脯氨酸、5-95重量份的甘氨酸、1_50重量份的谷氨酰胺、1-30重量份的丙氨酸、1-30重量份的天冬氨酸、1-30重量份的絲氨酸、5-95重量份的精氨酸、1-50重量份的蛋氨酸、1-30重量份的半胱氨酸、1-30重量份的賴氨酸和1-30重量份的谷氨酸。
5.如權利要求3所述的藥物組合物，其中基于所述氨基酸的總重量，所述氨基酸包含 5-85重量份的脯氨酸、5-85重量份的羥脯氨酸、10-90重量份的甘氨酸、1-30重量份的谷氨酰胺、1-20重量份的丙氨酸、1-20重量份的天冬氨酸、1-20重量份的絲氨酸、5-80重量份的精氨酸、1-30重量份的蛋氨酸、1-20重量份的半胱氨酸、1-20重量份的賴氨酸和1-20重量份的谷氨酸。
6.如權利要求3所述的藥物組合物，其中基于所述氨基酸的總重量，所述氨基酸包含 5-70重量份的脯氨酸、5-70重量份的羥脯氨酸、10-70重量份的甘氨酸、1-20重量份的谷氨酰胺、1-10重量份的丙氨酸、1-10重量份的天冬氨酸、1-10重量份的絲氨酸、5-60重量份的精氨酸、1-15重量份的蛋氨酸、1-10重量份的半胱氨酸、1-10重量份的賴氨酸和1-10重量份的谷氨酸。
7.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述組合物中所述鳥氨酸的濃度為 2. 5-65%，并且基于100重量份的所述藥物組合物，所述鳥氨酸的含量為10-90重量份。
8.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述核酸包括基于嘌呤的核酸相關物質(zhì)和基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)中的至少一種，所述組合物中所述核酸的濃度為0. 1-50%，并且基于100重量份的所述藥物組合物，所述核酸的含量為10-90重量份。
9.如權利要求8所述的藥物組合物，其中所述核酸的分子量為 100，000Da-50, 000，OOODa。
10.如權利要求8或9所述的藥物組合物，其中所述基于嘌呤的核酸相關物質(zhì)是選自以下組中的一種或多種腺嘌呤、腺苷、腺苷的磷酸酯、腺苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽； 以及鳥嘌呤、鳥苷、鳥苷的磷酸酯、鳥苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽。
11.如權利要求8或9所述的藥物組合物，其中所述基于嘧啶的核酸相關物質(zhì)包括選自以下組中的一種或多種胞嘧啶、胞苷、胞苷的磷酸酯、脫氧胞苷、脫氧胞苷的磷酸酯及它們的鹽；尿嘧啶、尿苷、尿苷的磷酸酯、尿苷的磷酸酯的代謝產(chǎn)物及它們的鹽；以及胸腺嘧啶、 胸苷、胸苷的磷酸酯、乳清酸、5’ -乳清二酸及它們的鹽。
12.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述維生素C包括維生素C衍生物，所述組合物中所述維生素C的濃度為0. 01-10%，并且基于100重量份的所述藥物組合物，所述維生素C的含量為0. 1-50重量份。
13.如權利要求12所述的藥物組合物，其中所述維生素C衍生物包括選自L-抗壞血酸的烷基酯、L-抗壞血酸的磷酸酯、L-抗壞血酸的硫酸酯和L-抗壞血酸的鈉鹽中的一種或多種。
14.用于預防和治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述組合物包含20-80重量份的多羥基化合物，其在所述組合物中的濃度為2. 5-50% ；20-80重量份的鳥氨酸，其在所述組合物中的濃度為2. 5-50% ；20-80重量份的氨基酸，其在所述組合物中的濃度為2. 5-50%，所述氨基酸為選自脯氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、賴氨酸、半胱氨酸、羥脯氨酸和精氨酸中的一種或多種；20-80重量份的核酸，其在所述組合物中的濃度為0. 1-50%;以及0. 1-15重量份的維生素C，其在所述組合物中的濃度為0.01-10%。
15.如權利要求14所述的藥物組合物，其中所述核酸的分子量為 100，000Da-50, 000，OOODa。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預防并治療關節(jié)相關疾病和結締組織相關疾病的藥物組合物，所述組合物包含選自多羥基化合物、氨基酸、鳥氨酸、核酸和維生素C中的兩種以上的物質(zhì)。所述藥物組合物以有效并經(jīng)濟的方式預防和治療新發(fā)關節(jié)炎、關節(jié)損傷和結締相關疾病，而不涉及副作用、并發(fā)癥等。
文檔編號A61P19/02GK102481266SQ201080033837
公開日2012年5月30日 申請日期2010年9月15日 優(yōu)先權日2009年9月28日
發(fā)明者樸宥信, 李日薰 申請人:樸宥信, 李日薰