專利名稱：防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及臨床治療嬰幼兒濕疹的中藥系列制劑的組方及制備方法，屬于醫(yī)藥技 術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
嬰幼兒濕疹是嬰幼兒常見病和多發(fā)病，臨床上分為滲出型和干燥型兩型。滲出型 多發(fā)生于肥胖、有滲出體質(zhì)的嬰兒，皮疹多為紅斑，境界不清，上可見粟粒至針尖大丘疹、水 疙和滲液；干燥型見于瘦弱的嬰兒，見淡紅色或暗紅色斑片，密集小丘疹而無水疙，皮膚干 燥，無明顯滲出。無論哪一型，均有陣發(fā)性劇烈痛癢，引起嬰兒哭鬧和睡眠不安。研究表明， 近幾年來患病人數(shù)有明顯上升趨勢，其發(fā)病率已接近20%。目前對本病的認(rèn)識尚不一致。病因較復(fù)雜，一般認(rèn)為與多種因子如遺傳、環(huán)境因素 等有關(guān)。遺傳因素患者常有先天性過敏體質(zhì)，且具有特殊類型的遺傳傾向和體質(zhì)的易感性。 變態(tài)反應(yīng)原患者可因吸入或食入的變態(tài)反應(yīng)原進(jìn)入體內(nèi)誘發(fā)皮膚的過敏反應(yīng)。主要的變應(yīng) 原如①屋塵；②食物如牛奶、雞蛋、魚、蝦等蛋白質(zhì)；③感染性變應(yīng)原如金黃色葡萄球菌； ④花粉；⑤接觸刺激物及變應(yīng)原如動物毛、一些溶劑、消毒劑、香精、羊毛脂等。在治療上，理 想方法是尋找病因，但較困難。因此主要是減少本病的激發(fā)因素，使癥狀減輕或緩解。全身 治療主要為脫敏及止癢，可應(yīng)用抗組胺制劑色甘酸鈉；有感染時可應(yīng)用抗生素，以減少炎癥 病灶中釋放的中間產(chǎn)物蛋白酶、激膚等刺激，使癢減輕，有利于病情恢復(fù)；外用療法應(yīng)用糠餾 油、煤焦油以及各種皮質(zhì)類固醇激素等，以緩解癥狀為主。但這些藥物毒、副作用大，有依賴 性，停藥后易復(fù)發(fā)，達(dá)不到理想治療療效，并且許多家長不愿接受給患兒應(yīng)用激素治療濕疹。祖國醫(yī)學(xué)對本病的認(rèn)識有上千年的歷史，中醫(yī)稱之為“奶癬”、“胎斂瘡”。如隋《諸 病源侯論癬侯》中說“小兒面上，癬皮如甲錯，起干燥，謂之乳癬。言兒飲乳，乳汁潰滲兒 面，變生此癥。，，明《外科正宗 奶癬》指出了病因，描訴了皮損，如“奶癬因兒在胎中，母食五 辛，父餐炙傅，遺熱與兒。頭面遍身發(fā)為奶癬，滋滋成片，睡臥不安，痰癢不絕”。清《醫(yī)宗金 鑒·外科心法要訣·嬰兒部》中叫“胎斂瘡”“此癥生嬰兒頭頂或生眉端，又名奶癬。癢起 白屑，形如癬疥，由胎中血熱，落草受風(fēng)纏綿，此系干激，有誤用燙洗，皮膚起粟，痰癢無度， 黃水浸淫，延及全身即成激”。中醫(yī)認(rèn)為本病的形成系胎中遺熱遺毒或飲食失調(diào)，脾失健運， 內(nèi)有濕熱，外受風(fēng)熱濕邪而成。胎毒與風(fēng)熱濕邪相結(jié)合，搏于肌膚則起紅斑、丘疹、水疽；熱 盛肉腐則見糜爛、滲液。中醫(yī)中藥治療嬰兒濕疹由來已久，療效好，副作用小。但目前中藥外用多是水煎， 質(zhì)量、用藥量難以控制，使用不便，加上部分藥物有局部刺激作用，有時大面積外洗會導(dǎo)致 藥物的系統(tǒng)吸收，因此臨床上急需一種療效好、副作用小、患者依從性好、使用方便的中藥 外用制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一就是為攻克濕疹頑癥，提供一種使用方便、治療效果好的中藥抗?jié)裾钕盗兄苿?。本發(fā)明主要由苦參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮組成。所述苦參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮分別占中藥制劑總量的10 50%、10 50%,10 50%、10 50%和 10 50%。本發(fā)明根據(jù)臨床多年用藥經(jīng)驗，以清熱解毒、燥濕、收斂止癢為治療原則。本發(fā)明 以黃柏、苦參為君藥，黃柏味苦、性寒，歸腎、膀胱經(jīng)，具有清熱燥濕、瀉火除蒸、解毒療瘡的 功效，苦參具有清熱燥濕，殺蟲，利尿作用。以白鮮皮、蛇床子為臣藥，白鮮皮清熱燥濕，祛風(fēng) 解毒，蛇床子溫腎壯陽，燥濕，祛風(fēng)，殺蟲。蟬衣，味甘、咸，性涼，入肝肺兩經(jīng)，功能疏風(fēng)散熱， 透診止癢，解痙消腫為佐使藥。通過實驗研究已證實該組方具有良好的抗炎、收斂、止癢、抑 菌作用，通過臨床研究已證實中藥抗?jié)裾钕盗兄苿┲委煗裾钇ぱ拙哂携熜Ш谩⑹褂梅奖?、無 明顯副作用等優(yōu)點。本發(fā)明的另一目的是提供上述中藥抗?jié)裾钕盗兄苿┑闹苽浞椒?。本發(fā)明由苦參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮混合后制成，所述以上各中藥飲片混 合前分別占混合特總質(zhì)量的10 50%、10 50%、10 50%、10 50%和10 50%。本發(fā)明可以分別制成三種不同劑型的成藥一、0/W型防治嬰幼兒濕疹中藥膏(A膏)的制備將所述各中藥飲片混合，加水浸透后，經(jīng)水蒸汽蒸餾3 4h，分別取揮發(fā)油收集管 上層的揮發(fā)油、揮發(fā)油收集管下層的餾出液和留于蒸餾器內(nèi)的藥材煎煮液；將所述揮發(fā)油 與司盤-80混合加熱至60°C ；將吐溫-80與60°C所述餾出液混合；再將兩液混合，在25 50MPa壓力下均質(zhì)后，制得0/W型防治嬰幼兒濕疹中藥膏(A膏)。上述揮發(fā)油、司盤-80、吐溫-80和餾出液的投料質(zhì)量比為30 3 7 460。二、防治嬰幼兒濕疹中藥液(B液)的制備將所述藥材煎煮液過濾后，在5士 1°C溫度環(huán)境下靜置24h，再經(jīng)離心，取上清液， 最后經(jīng)孔徑為0. 45 μ m的過濾膜過濾，取濾出液，即制得防治嬰幼兒濕疹中藥液(B液)。三、防治嬰幼兒濕疹中藥粉(C粉)的制備直接將各中藥飲片混合后，在_25°C溫度環(huán)境下進(jìn)行超微粉碎，再經(jīng)1200目納米 粉過篩，然后以10kGyCo60輻照滅菌lh，即得防治嬰幼兒濕疹中藥粉(C粉)。A膏、B液和C粉可分別單獨使用；也可先涂B液再涂上A膏(滲出型和干燥型都 適用；而C粉更適宜滲出型或濕熱汗疹時使用。本發(fā)明制備工藝簡單、合理，產(chǎn)品穩(wěn)定性好，使用方便。


圖1為六個試驗組用不同的藥物處理后48小時的病理變化HE染色切片圖。圖2為A⑶誘發(fā)治療后48小時六個試驗組的動物皮膚IL_2表達(dá)情況HE染色切 片圖。圖3為A⑶誘發(fā)治療后48小時六個試驗組的動物皮膚IFN_r表達(dá)情況HE染色切 片圖。
具體實施方式
一、制備中藥抗?jié)裾钕盗兄苿┓謩e稱取苦參1kg，蛇床子5kg，黃柏1kg，蟬衣1kg，白鮮皮2kg。按以下步驟制備中藥抗?jié)裾钕盗兄苿〢膏和B液的制備將各中藥組合物混合，加10倍水浸透，經(jīng)水蒸汽蒸餾3_4h分別得①揮發(fā)油(水蒸 汽蒸餾器揮發(fā)油收集管上層)②餾出液(水蒸汽蒸餾器揮發(fā)油收集管下層)③藥材煎煮液 (水蒸汽蒸餾器燒瓶內(nèi))。將6g揮發(fā)油與0. 6g司盤-80混合加熱至60°C ；將1. 4g吐溫-80加入92g60°C餾 出液中；兩液混合，在25 50MPa壓力下均質(zhì)30min，分裝得0/W型A膏。將濾除藥材的煎煮液5°C左右放置24h，離心取上清液，0. 45 μ m膜過濾，分裝得B液。C粉的制備直接將各中藥組合物按重量百分比混合后，于_25°C超微粉碎得過1200目篩納米 粉，分裝后用10kGyCo60輻照滅菌Ih既得C粉。A膏、B液和C粉可分別單獨使用；也可先涂B液再涂上A膏(滲出型和干燥型都 適用；而C粉更適宜滲出型或濕熱汗疹時使用。二、動物實驗1、實驗動物揚州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供的ICR小鼠，雌雄各半，10-12周齡，體重20_24g。2、試劑及藥物2，4 二硝基苯(DNFB)購自美國Sigma Aldrich公司，以4 1的丙酮橄欖油配 成0. 5%,0. 2%兩種濃度，現(xiàn)用現(xiàn)配；小鼠IL-2、IFN-γ ELISA試劑盒均購自大連Takara生 物技術(shù)有限公司；IL-2，INF-r免疫組化SABC試劑盒購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司。嬰 兒濕疹膏(商品品牌貝比拉比，包裝規(guī)格50G(1*6*24)廣東金發(fā)公司，以意大利洋甘菊提 取原液為主要成分，專為0-6歲的嬰兒研制的產(chǎn)品配方)、本發(fā)明中藥A膏、B液、C粉。3、試驗方法 A⑶模型的建立A⑶模型的建立及給藥方法實驗動物于實驗前一天腹部去毛，面積3X3cm。實驗當(dāng)日和第二日于去毛部涂 0. 5% DNFB25ul致敏，每天一次，第六日于小鼠左耳背涂0. 2% DNFB20ul誘發(fā)皮炎，右耳背 涂基質(zhì)20ul對照。誘發(fā)后六小時給藥，涂于左耳背部，稍按摩，每日2次，右耳以同樣方法 涂等量基質(zhì)對照。將90只小鼠隨機分為6組，每組15只。分別為本發(fā)明中藥A膏組(A組)、本發(fā) 明中藥B液組(B組)、本發(fā)明中藥C粉組、嬰兒濕疹膏組、模型組和空白對照組(生理鹽水 組)。觀察指標(biāo)和方法各組小鼠于最后一次激發(fā)后6小時將每組小鼠又隨機分為24h、48h、72h三個時相 點，每個時相點每組隨機取5只。分別在激發(fā)用藥后24h、48h、72h斷髓處死。1)耳腫脹度游標(biāo)卡尺測量小鼠雙耳中部的厚度，計算誘發(fā)后左右耳厚度差即小 鼠耳腫脹度。
2)HE染色觀察取鼠耳組織常規(guī)石蠟切片，HE染色。用光鏡觀察HE染色切片中有 無病理變化和各組織間有無差異，并觀察染色切片中細(xì)胞類型的變化及差異。3)小鼠左耳皮損處組織采用免疫組化的方法，觀察IL-2，IFN-r的表達(dá)切片常規(guī) 脫蠟包埋、脫水，3% H202溶液消除內(nèi)源性過氧化物酶活性，熱修復(fù)抗原，滴加5% BSA封閉 液，然后依次加入一抗，生物素化二抗，SABC后，DAB顯色，蘇木素輕度復(fù)染，脫水，透明，封 片，顯微鏡觀察。4)檢測血清IL-2，IFN-r濃度各時相小鼠處死時采用眼球摘除法取血約1. 5ml, 靜置15min后，3000r/min離心20min，分離血清，置于-20°C冰箱中待測，采用酶聯(lián)免疫吸 附法(ELISA)測定血清中細(xì)胞因子IL-2，IFN-Y表達(dá)水平。嚴(yán)格按試劑盒說明操作，用酶 標(biāo)儀測定各標(biāo)本450nm處各孔OD值。以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，用“Curve Exertl. 3”軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并求出各樣品血清中IL_2，IFN-γ的含量。4、統(tǒng)計學(xué)方法分析本實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS16. 0統(tǒng)計軟件對各樣本進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，檢測數(shù)據(jù)用均 數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(^ ± S)表示，兩組間比較采用LSD法，設(shè)置檢驗水準(zhǔn)α = 0. 05，P < 0. 05為
差異有顯著性。1)結(jié)果各處理因素對對鼠耳厚度的影響見表1表1各組小鼠不同時相耳腫脹度(左耳-右耳，單位um)的比較 士S，n = 5)
組別
24h
48h
72h
A B C
貝比拉比
模型 空白
47±31 52±16 53 ±25 53±15
67±14 13±5.0
33±12 35 ±7.0 38 ±9.0 37±12
60±13 13±5.0
15±7.0 30±10 31 士 14 30±14
53±15 13±5.0由表1可見，耳腫脹度差值不同時相模型組與空白組相KP < 0.05，24小時后耳 腫脹度A藥組、B藥組、C粉組、貝比拉比膏組與與模型組相比P > 0. 05，48小時、72小時后 耳腫脹度比較A藥組、B藥組、C粉組、貝比拉比濕疹膏組與與模型組相比P < 0. 05，且72 小時組A藥組、B藥組與C粉組及貝比拉比濕疹膏組相比P < 0. 05。A藥優(yōu)于B藥組、C粉 組及貝比拉比濕疹膏組。2)各處理因素對皮膚組織病理學(xué)影響分析
不同時間段空白組小鼠組織病理無明顯變化，模型組HE染色切片可見表皮顯示 細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)水腫，表皮細(xì)胞增生，真皮結(jié)締組織水腫，能發(fā)現(xiàn)較多的單一核細(xì)胞及少數(shù) 多形核細(xì)胞的浸潤。血管擴(kuò)張充血，周圍可見輕度炎癥細(xì)胞浸潤。A藥組、B藥組、C粉組及 貝比拉比濕疹膏組HE染色切片可見真皮水腫消退，炎性細(xì)胞浸潤減少，A藥組真皮內(nèi)炎癥 改善最明顯。圖1顯示處理后48小時不同組的病理變化。其中，圖A 模型組；圖B :A藥 組；圖C :B藥組；圖D 濕疹膏組；圖E 空白組；圖F :C藥組。不同時間段各處理組小鼠血清中IL-2，IFN-r含量的影響表2不同藥物不同時相小鼠血清中IL-2濃度(pg/ml)的比較。(i±s,n = 5)。
組別24h48h72hA25.25±4.1512.01 ±0.6510.12 士 3.11B29.52 ±0.4920.20±3.1817.99 ±0.95C27.48 ±1.4519.20±2.1818.19±1.45貝比拉比濕疹膏26.44 ±3.9417.85 ±1.0717.99±0.73模型44.74 ±1.9638.24±2.1533.16±0.71空白
表3不同藥物不同時相小鼠血清中IFN--Y 濃度(Pg/ml)的比較( 士s，η = 5),組別24h48h72h
A101.48±8,0440.77 ±9.0123.95 ±1.56B102.23 ±3.2375.53±5.5341.46 ±9.98C104.14±5.2377.51 ±8.5345·36±10.18貝比拉比濕疹膏105.48 ±6.2378.72±7.8646.21 ±14.98模型108.20± 10.0581.84 + 3.4478.62 ±3.44空白從表1、2可見，A藥組、B藥組、C粉組、貝比拉比濕疹膏組對DNFB誘導(dǎo)的A⑶小鼠 血清中IL-2、IFN-Y水平均有抑制作用，48小時、72小時各組與模型組相比有顯著性差異 (P < 0. 05)，A藥組、B藥組與C粉組之間以及A藥組與貝比拉比濕疹膏組之間比較也有顯 著性差異(P < 0. 05)不同時間段各處理組皮膚IL-2，IFN-r表達(dá)情況，見圖2、圖3。
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圖2中，A 模型組；B =A藥組；C =B藥組；D 濕疹膏組；E 空白組；F =C藥組。圖3中，A 模型組；B =A藥組；C =B藥組；D 濕疹膏組；E 空白組；F =C藥組。免疫組化結(jié)果顯示，IL-2，IFN-r在模型組皮膚表皮角朊細(xì)胞胞膜或胞漿內(nèi)較高表 達(dá)，顯示較多棕黃色深染顆粒，而在A藥組、B藥組、C藥組和貝比拉比濕疹膏組棕黃色顆粒 減少，尤其是A藥組減少更為明顯，空白組未見表達(dá)。(見圖2、圖3)結(jié)論變應(yīng)性接觸性皮炎(ACD)是有T細(xì)胞介導(dǎo)的針對皮膚接觸的抗原產(chǎn)生的遲發(fā)型變 態(tài)反應(yīng)，包括來源于B細(xì)胞以及來源于T細(xì)胞的多種細(xì)胞因子、趨化因子以及共刺激分子都 參與了整個炎癥過程。ACD及濕疹等變態(tài)反應(yīng)性疾病目前治療的主要藥物為糖皮質(zhì)激素及 抗組胺藥，一般需長期用藥，糖皮質(zhì)激素可以明顯抑制IV型變態(tài)反應(yīng)，但會出現(xiàn)皮膚萎縮、 色素沉著、向心性肥胖等，不良反應(yīng)較大，抗組胺藥也只起到暫時緩解瘙癢的作用，且本病 易復(fù)發(fā)。中醫(yī)中藥以其療效確切，中藥價格便宜，不良反應(yīng)較小，在變應(yīng)性接觸性皮炎的治 療中顯示出一定優(yōu)勢，從中篩選出新類型抗過敏藥是一個非常有希望的方向，意義不容忽 視，這對臨床上治療以IV型超敏反應(yīng)為主要發(fā)病機制的疾病有重要指導(dǎo)意義。本實驗采用經(jīng)典的DNFB誘發(fā)的A⑶模型，研究顯示模型組小鼠耳腫脹明顯，血清 中IL-2及IFN-Y均明顯增高，說明A⑶是由有分泌IL-2、IFN-y的Thl細(xì)胞介導(dǎo)的，其發(fā) 生是因為Thl/Th2分化失衡使其免疫紊亂。IFN-Y可調(diào)節(jié)抗原的呈遞和淋巴細(xì)胞的增值與 分化，增強抗原提呈細(xì)胞的呈遞效率，是最有效的激活巨噬細(xì)胞的因子，調(diào)節(jié)多種免疫活性 介質(zhì)的合成和分泌。本發(fā)明中藥A膏、B液、C粉組可明顯減輕小鼠耳的腫脹度，對不同時間 段小鼠血清中細(xì)胞因子均有下調(diào)作用，說明此藥可調(diào)節(jié)T細(xì)胞的分化且效果肯定，尤其A膏 的藥效好于B液、C粉及貝比拉比嬰兒濕疹膏。
權(quán)利要求
防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑，其特征在于主要由苦參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑，其特征在于所述苦參、蛇床子、黃 柏、蟬衣和白鮮皮分別占中藥制劑總量的10 50%、10 50%、10 50%、10 50%和 10 50%。
3.—種如權(quán)利要求1所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑的制備方法，其特征在于由苦 參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮混合后制成，所述以上各中藥飲片混合前分別占混合特總 質(zhì)量的 10 50%、10 50%、10 50%、10 50%禾Π 10 50%。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑的制備方法，其特征在于將所述 各中藥飲片混合，加水浸透后，經(jīng)水蒸汽蒸餾3 4h，分別取揮發(fā)油收集管上層的揮發(fā)油、 揮發(fā)油收集管下層的餾出液和留于蒸餾器內(nèi)的藥材煎煮液；將所述揮發(fā)油與司盤-80混合 加熱至60°C ；將吐溫-80與60°C所述餾出液混合；再將兩液混合，在25 50MPa壓力下均 質(zhì)后，制得0/W型防治嬰幼兒濕疹中藥膏。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述揮發(fā) 油、司盤-80、吐溫-80和餾出液的投料質(zhì)量比為30 3 7 460。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑的制備方法，其特征在于將所 述藥材煎煮液過濾后，在5士 1 ！溫度環(huán)境下靜置24h，再經(jīng)離心，取上清液，最后經(jīng)孔徑為 0. 45 μ m的過濾膜過濾，取濾出液，即制得防治嬰幼兒濕疹中藥液。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑的制備方法，其特征在于將所述 各中藥飲片混合后，在_25°C溫度環(huán)境下進(jìn)行超微粉碎，再經(jīng)1200目納米粉過篩，然后以 10kGyCo60輻照滅菌lh，即得防治嬰幼兒濕疹中藥粉。
全文摘要
防治嬰幼兒濕疹的中藥制劑及其制備方法，涉及臨床治療嬰幼兒濕疹的中藥系列制劑的組方及制備方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明主要由苦參、蛇床子、黃柏、蟬衣和白鮮皮組成，制成三種不同劑型的成藥，具有良好的抗炎、收斂、止癢、抑菌作用，通過臨床研究已證實中藥抗?jié)裾钕盗兄苿┲委煗裾钇ぱ拙哂携熜Ш?、使用方便、無明顯副作用等優(yōu)點。
文檔編號A61K35/64GK101972334SQ201010508130
公開日2011年2月16日 申請日期2010年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月9日
發(fā)明者刁昱, 卜平, 朱嘯, 朱曉芳, 胡榮 申請人:揚州大學(xué)