專利名稱：一種載藥納米微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種載藥納米微球及其制備方法，特別是涉及一 種內(nèi)外雙層結(jié)構(gòu)的載藥納米微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
為提高藥物的生物利用率和療效，減少藥物的毒副作用，要求藥物在生物體內(nèi)不 僅能以預定的速度釋放，并且能夠在病灶部位富集。新型載藥體系一載藥納米微粒(球) 有望較好地達到上述目標。載藥納米微粒一般指粒徑在IOnm-IOOOnm之間的固態(tài)或膠態(tài)粒 子。藥物或生物活性物質(zhì)通過物理或化學作用分布于粒子內(nèi)部或表面。納米微粒在藥物輸 送方面具有許多優(yōu)點(1)利用尺寸效應，可實現(xiàn)納米微粒在生物體內(nèi)的選擇性分布。如，粒徑在 IOOnm-IOOOnm的微球很快被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的吞噬細胞從血液中清除，到達網(wǎng)狀內(nèi)皮 組織豐富的肝、脾組織中，而粒徑小于IOOnm的納米微粒可到達骨髓等組織中。控制納米微 粒的大小，可以使納米微粒到達特定的組織，起到被動靶向的作用。此外，對載藥納米微粒 表面進行修飾，可以延長納米微粒在血液中的停留時間，從而減少給藥次數(shù)和給藥量，提高 藥物的利用率。(2)藥物通過化學或物理的作用，分散于納米微粒的內(nèi)部或表面。藥物可以通過擴 散作用而釋放，也可通過基質(zhì)本身逐漸溶蝕降解而得以釋放。因而，納米微粒給藥體系可以 延緩藥物的釋放，延長藥物的作用時間。(3)如將藥物包覆于納米微粒的內(nèi)部，納米微粒給藥體系還可以提高藥物的穩(wěn)定 性，避免藥物在到達病灶部位前發(fā)生降解。由于以上諸多優(yōu)點，載藥納米微粒給藥體系已經(jīng)引起了人們廣泛的研究興趣。 具有良好生物相容性以及可生物降解性能的聚己內(nèi)酯(PCL)、聚羥基乙酸(PGA)、聚乳 酸(PLA)、聚羥基丁酸(PHB)、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(PGLA)、聚(3-羥基丁酸)-聚 (3-羥基戊酸)共聚物(PHBV)均是疏水藥物的理想載體?？刹捎萌榛軇]發(fā)法制備載 藥納米微粒。即將載體材料和藥物溶解于有機溶劑中，然后將其加入到含有乳化劑的水 或純水中，攪拌或超聲乳化后，減壓揮發(fā)或者對水透析除去有機溶劑，即可得到載有疏水性 藥物的納米微粒。采用乳化溶劑揮發(fā)法制備得到的載藥的上述可生物降解聚合物或共聚 物微球，尺寸較大，通常在微米級，因而無法通過粘膜或經(jīng)體循環(huán)直接把藥物輸送到靶向組 織；同時由于其疏水的表面，微球也極易被蛋白質(zhì)吸附和被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)地巨噬細胞識別 并捕捉。為克服這種缺陷，現(xiàn)有文獻或?qū)＠捎靡胗H水性嵌段或接枝鏈的方法，制備兩 親性嵌段或接枝共聚物，然后將其作為載體材料，通過與藥物在選擇性溶劑中共膠束化，制 備得到核由疏水嵌段或接枝鏈和疏水藥物組成、殼由親水嵌段或接枝鏈組成的載藥納米微 球。如專利CN1561987A采用把含有聚己內(nèi)酯_聚乙二醇共聚物與紫杉醇的有機溶劑加入 聚乙烯醇或明膠的水溶液中，超聲乳化，然后減壓揮發(fā)有機溶劑，得到了粒徑為300-800nm 的載藥微球。但嵌段或接枝共聚物的制備比較困難，而且其制備過程中還會使用一些對生物體有害的試劑(如芳香族異氰酸酯，CN1425706A)，影響納米微粒的實際應用。中國專利 CN1903365A則采用了溴化雙十二烷基二甲基銨、多聚左旋賴氨酸或硫酸魚精蛋白修飾微粒 表面的方法。首先以PVA為乳化劑，采用溶劑乳化揮發(fā)法制備載藥的聚己內(nèi)酯、聚乳酸或聚 乳酸_聚羥基乙酸共聚物微粒，然后，采用反復高速離心_分散方法洗滌除去乳化劑并冷凍 干燥，最后，將載藥納米微粒加入含修飾劑的水中，超聲或高速攪拌分散后，冷凍干燥。但這 些修飾劑是以簡單的物理包覆的形式存在于微粒的表面，在實際應用中，微粒通過口服、注 射、經(jīng)皮或粘膜給藥等方式進入體液內(nèi)，由于溶解稀釋作用，其表面修飾物很容易脫落。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種載藥納米微球及其制備方法，也就是提供一種內(nèi)外雙層 結(jié)構(gòu)的載藥納米微球及其制備方法。本發(fā)明解決了由可生物降解聚合物或無規(guī)共聚物制備 具有穩(wěn)定親水表層的載藥納米微球的問題，彌補了現(xiàn)有技術(shù)必須使用合成困難的兩親性嵌 段(或接枝)共聚物或者親水表層容易脫落的不足。本發(fā)明的一種載藥納米微球，包括內(nèi)核和表層，其內(nèi)核由可生物降解高分子材料 和疏水藥物組成，其表層由殼聚糖或其衍生物組成；內(nèi)核中，可生物降解高分子材料的重 量百分比為50-95%，疏水藥物的重量百分比為5-50% ；表層相對于內(nèi)核的重量百分比為 2-10% ；所述載藥納米微球的粒徑范圍為50nm-500nm ；其中，所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁 酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物。作為優(yōu)選的技術(shù)方案如上所述的一種載藥納米微球，其中，所述的可生物降解高分子材料的相對分子 質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過封端處理的聚己內(nèi)酯、聚 羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)_聚(3-羥 基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫乙酰度大于90% ；所述的 殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮增生的多烯紫杉醇、紫杉 醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。本發(fā)明的一種載藥納米微球的制備方法，包括下列步驟(1)將疏水藥物溶于有機溶劑甲中，可生物降解高分子材料溶解于有機溶劑乙中， 然后將兩者混合均勻，制備含疏水藥物和可生物降解高分子材料的有機溶劑溶液；所述的 有機溶劑溶液中，其可生物降解高分子材料的濃度為l-30mg/mL，所述的疏水藥物與所述的 可生物降解高分子材料的重量比為1 1 19;所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi) 酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸_聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)-聚 (3-羥基戊酸)共聚物；(2)在攪拌條件下，將步驟(1)制備的有機溶劑溶液緩慢注入水中，所述的有機溶 劑溶液與水的體積比為1 2-20，注入時間為l_6h(小批量條件下，注入速度為0. 5-10mL/ h，如果將容器放大，注入速度要變快，但注入時間是保持不變的)，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌 0. 5-4h ；然后，通過減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或?qū)λ肝龅姆椒?，除去分散液中的有機溶劑，得到載藥 納米微粒的水分散液；(3)將殼聚糖或其衍生物溶解于0. l-3vol. %的乙酸水溶液中，制備殼聚糖溶液，所述的殼聚糖溶液中，殼聚糖或其衍生物的濃度為0. 5-5mg/mL ；然后，在攪拌條件下，將殼 聚糖溶液加入步驟(2)制備的載藥納米微粒的水分散液中，所述的殼聚糖溶液與所述的載 藥納米微粒的水分散液的體積比為1 10-60，繼續(xù)攪拌0.5-4h后，冷凍干燥，得到具有殼 聚糖或其衍生物表層的載藥納米微球粉末。如上所述的一種載藥納米微球的制備方法，其中，所述的可生物降解高分子材料 的相對分子質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過封端處理的 聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁 酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫乙酰度大 于90% ；所述的殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮增生的多 烯紫杉醇、紫杉醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。如上所述的一種載藥納米微球的制備方法，其中，所述的有機溶劑甲或有機溶劑 乙為能與水混溶的有機溶劑甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、二氧六烷、二甲基甲酰胺、二 甲基乙酰胺或二甲基亞砜。本發(fā)明還提供了另一種載藥納米微球的制備方法，包括下列步驟(1)將疏水藥物溶于有機溶劑甲中，可生物降解高分子材料溶解于有機溶劑乙中， 然后將兩者混合均勻，制備含疏水藥物和可生物降解高分子材料的有機溶劑溶液；所述的 有機溶劑溶液中，其可生物降解高分子材料的濃度為l-30mg/mL，所述的疏水藥物與所述的 可生物降解高分子材料的重量比為1 1 19;所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi) 酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸_聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)-聚 (3-羥基戊酸)共聚物；(2)將殼聚糖或其衍生物溶解于0. l-3vol. %的乙酸水溶液中，制備殼聚糖溶液； 所述的殼聚糖溶液中，殼聚糖或其衍生物的濃度為0. 05-lmg/mL ；(3)在攪拌條件下，將步驟⑴制備的有機溶劑溶液緩慢注入步驟⑵制備的殼 聚糖溶液中，所述的有機溶劑溶液與所述的殼聚糖溶液的體積比為1 2-20;注入時間為 l-6h，注入結(jié)束后，再繼續(xù)攪拌0. 5-4h ；然后，通過減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或?qū)λ肝龅姆椒?，除?分散液中的有機溶劑，然后冷凍干燥，得到表層為殼聚糖或其衍生物、內(nèi)核為可生物降解高 分子材料和藥物的載藥納米微球的粉末。如上所述的一種載藥納米微球的制備方法，其中，所述的可生物降解高分子材料 的相對分子質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過封端處理的 聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁 酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫乙酰度大 于90% ；所述的殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮增生的多 烯紫杉醇、紫杉醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。如上所述的一種載藥納米微球的制備方法，其中，所述的有機溶劑甲或有機溶劑 乙為能與水混溶的有機溶劑甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、二氧六烷、二甲基甲酰胺、二 甲基乙酰胺或二甲基亞砜。本發(fā)明又提供了一種如權(quán)利要求1的載藥納米微球的使用方法，其特征是所述 的載藥納米微球的粉末通過超聲分散于水中，形成濃度為0. l-50mg/mL的載藥納米微球的 水分散液，通過口服、注射、經(jīng)皮、粘膜或介入療法的球囊導管方式給藥。
本發(fā)明的原理由于聚己內(nèi)酯(PCL)、聚羥基乙酸(PGA)、聚乳酸(PLA)、聚羥基丁酸(PHB)、聚乳 酸-聚羥基乙酸共聚物(PGLA)、聚(3-羥基丁酸)-聚(3-羥基戊酸)共聚物(PHBV)載體 材料中親水端羧基和端羥基的存在，該載體材料的結(jié)構(gòu)類似于小分子表面活性劑，只是載 體材料的疏水鏈段更長。將載體材料和疏水藥物的有機溶劑溶液緩慢注入大量的水中時， 發(fā)生了微相反轉(zhuǎn)。對載體材料的疏水鏈段和疏水藥物來說，介質(zhì)由原先的良溶劑轉(zhuǎn)變?yōu)椴?良溶劑，疏水鏈段和疏水藥物會聚集坍塌成球，而緩慢的注入速度使載體材料大分子有足 夠的時間調(diào)整其構(gòu)象，從而使其親水的端基選擇性地富集分布于微粒的表面。由于電離的 端羧基的電荷排斥作用和未電離端羧基及端羥基的親水作用，微粒能穩(wěn)定分散于介質(zhì)中。載藥納米微粒表面所帶的負電荷，可以與帶正電的殼聚糖或其衍生物分子發(fā)生正 負電荷作用，同時，載藥納米微粒表面所帶的親水羥基和羧基，可以與殼聚糖或其衍生物分 子所帶的羥基、羧基和氨基發(fā)生氫鍵作用，因而，通過后續(xù)簡單吸附處理，就可以在載藥納 米微粒表面形成一層殼聚糖或其衍生物，得到表層為殼聚糖或其衍生物、內(nèi)核為載藥納米 微粒的載藥納米微球。將載體材料和疏水藥物的有機溶劑溶液緩慢注入大量含有殼聚糖或其衍生物的 水中時，載體材料的疏水鏈段和疏水藥物會聚集坍塌成球，通過與其表面親水端基的正負 電荷作用和氫鍵作用，殼聚糖或其衍生物會吸附在載體材料和疏水藥物形成的聚集體的周 圍，使其穩(wěn)定存在于介質(zhì)中。由此，也能得到表層為殼聚糖或其衍生物、內(nèi)核為載體材料和 疏水藥物的載藥納米微球。由于殼聚糖或其衍生物表層是通過氫鍵作用和正負電荷作用與疏水的載藥內(nèi)核 結(jié)合，而不是簡單的物理包覆，因而，所制備的載藥納米微球的殼聚糖或其衍生物表層具有 較好的穩(wěn)定性，不會在應用中發(fā)生脫落。本發(fā)明的有益效果是(1)本發(fā)明的方法簡單，無需使用合成困難的兩親性嵌段或接枝共聚物和乳化劑， 就可以制備得到載藥納米微球；(2)殼聚糖或其衍生物表層的存在，一方面，使微球表面帶正電荷，可以通過正負 電荷作用與血管壁組織中所含的帶負電荷的糖胺多糖作用，促進載藥納米微球在血管壁中 的吸收和駐留，從而可以提高載藥納米微球在防治血管再狹窄中的療效；另一方面，還可以 消除聚酯類載體材料在人體內(nèi)降解產(chǎn)生的酸性產(chǎn)物引起的局部炎癥問題。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施方式
，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā) 明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限 定的范圍。各實施例中，載藥納米微球的平均粒徑是通過動態(tài)光散射測試得到。將載藥納米 微球的水分散液冷凍干燥，用藥物的選擇性溶劑萃取載藥納米微球凍干粉中的藥物后，通 過高效液相色譜法測定萃取液中藥物的濃度，從而計算得到載藥量和包封率。本發(fā)明的一種載藥納米微球，包括內(nèi)核和表層，其內(nèi)核由可生物降解高分子材料和疏水藥物組成，其表層由殼聚糖或其衍生物組成；內(nèi)核中，可生物降解高分子材料的重 量百分比為50-95%，疏水藥物的重量百分比為5-50% ；表層相對于內(nèi)核的重量百分比為 2-10%;所述載藥納米微球的粒徑范圍為50nm-500nm ；其中，所述的可生物降解高分子材料 為聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁 酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物。一種載藥納米微球的使用方法，載藥納米微球的粉末通過超聲分散于水中，形成 濃度為0. l-50mg/mL的載藥納米微球的水分散液，通過口服、注射、經(jīng)皮、粘膜或介入療法 的球囊導管方式給藥。實施例1稱取50mg聚己內(nèi)酯(PCL)溶于4mL 二甲基亞砜中，稱取20mg阿奇霉素溶于ImL 二 甲基亞砜中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的 條件下，將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0. 5h。接 著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的水 分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為163nm，多分散性系數(shù)為0. 12。載藥量為39%，包封率 為97.5%。將殼聚糖溶于Ivol %的醋酸水溶液中，配制濃度為lmg/mL的殼聚糖溶液。在 攪拌的條件下，將3mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌0. 5h， 得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PCL和阿奇霉素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后， 得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為192nm，多分散性系數(shù)為0. 15。實施例2稱取8. 6mg聚己內(nèi)酯(PCL)溶于8. 6mL丙酮中，稱取8. 6mg阿奇霉素溶于0. 4mL甲 醇中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的條件下， 將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入ISmL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌4h。接著，在60°C 及200mbar以下的真空度下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的 水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為168nm，多分散性系數(shù)為0. 10。載藥量為93%，包 封率為93%。將殼聚糖溶于0. Ivol %的醋酸水溶液中，配制濃度為0. 96mg/mL的殼聚糖溶 液。在攪拌的條件下，將1. 8mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪 拌4h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PCL和阿奇霉素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干 燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為224nm，多分散性系數(shù)為0. 16。實施例3稱取150mg聚乳酸(PLA)溶于4. 5mL 二甲基甲酰胺中，稱取7. 9mg紫杉醇溶于 0.5mL乙醇中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PLA和紫杉醇的有機溶劑溶液。在攪拌的 條件下，將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入IOOmL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌2h。接 著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的水 分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為417nm，多分散性系數(shù)為0. 18。載藥量為5. 24%，包封 率為99. 5%。將殼聚糖溶于Ivol %的醋酸水溶液中，配制濃度為1. 9mg/mL的殼聚糖溶液。 在攪拌的條件下，將1. 66mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌 0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PLA和紫杉醇的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥 后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為453nm，多分散性系數(shù)為0. 18。實施例4
稱取IOOmg聚羥基乙酸(PGA)溶于4. 5mL 二甲基甲酰胺中，稱取12mg多烯紫杉醇 溶于0. 5mL乙腈中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PGA和多烯紫杉醇的有機溶劑溶液。 在攪拌的條件下，將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪 拌2h。接著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納 米微粒的水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為282nm，多分散性系數(shù)為0.16。載藥量為 11. 8%，包封率為98. 3%。將殼聚糖溶于3vol%的醋酸水溶液中，配制濃度為5mg/mL的殼 聚糖溶液。在攪拌的條件下，將1. 2mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中， 繼續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PGA和多烯紫杉醇的載藥納米微球的水分散液， 將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為327nm，多分散性系 數(shù)為0. 18。實施例5稱取50mg聚羥基丁酸(PHB)溶于4. 8mL 二甲基甲酰胺中，稱取20mg雷帕霉素溶 于0.2mL甲醇中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PHB和雷帕霉素的有機溶劑溶液。在攪 拌的條件下，將有機溶劑溶液以5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌2h。接 著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的水 分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為182nm，多分散性系數(shù)為0.12。載藥量為38.9%，包 封率為97. 3%。將殼聚糖溶于Ivol %的醋酸水溶液中，配制濃度為0. 5mg/mL的殼聚糖溶 液。在攪拌的條件下，將3mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌 0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PHB和雷帕霉素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干 燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為202nm，多分散性系數(shù)為0. 12。實施例6稱取50mg聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(PGLA)溶于4. SmL 二甲基甲酰胺中，稱取 20mg布洛芬溶于0. 2mL丙酮中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PGLA和布洛芬的有機溶劑 溶液。在攪拌的條件下，將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼 續(xù)攪拌2h。接著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥 納米微粒的水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為122nm，多分散性系數(shù)為0. 12。載藥量 為35. 2%，包封率為88%。將殼聚糖溶于Ivol%的醋酸水溶液中，配制濃度為lmg/mL的殼 聚糖溶液。在攪拌的條件下，將3mL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼 續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PGLA和布洛芬的載藥納米微球的水分散液，將其 冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為148nm，多分散性系數(shù)為 0. 12。實施例7稱取50mg聚(3-羥基丁酸)_聚(3_羥基戊酸)共聚物(PHBV)溶于4. SmL 二甲基 乙酰胺中，稱取20mg阿奇霉素溶于0. 2mL 二甲基乙酰胺中，然后，將兩者混合均勻，制備含 有PHBV和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的條件下，將有機溶劑溶液以2. 5mL/h的速度 注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌2h。接著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有 機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為152nm， 多分散性系數(shù)為0.12。載藥量為39.2%，包封率為98%。將殼聚糖溶于Ivol %的醋酸水 溶液中，配制濃度為lmg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將3mL殼聚糖溶液加入上述
9的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PHBV和阿奇霉 素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的 平均粒徑為174nm，多分散性系數(shù)為0. 12。實施例8稱取50mg聚己內(nèi)酯(PCL)溶于4mL四氫呋喃中，稱取20mg阿奇霉素溶于ImL甲 醇中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的條件下， 將有機溶劑溶液以1.5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0.5h。接著，在 60°C及200mbar以下的真空度下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去有機溶劑，并濃縮溶液體積至20mL，得到帶 淡藍色乳光的載藥納米微粒的水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為177nm，多分散性系數(shù) 為0.12。載藥量為39.6%，包封率為99%。將殼聚糖溶于2vol %的醋酸水溶液中，配制濃 度為3mg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將ImL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒 的水分散液中，繼續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PCL和阿奇霉素的載藥納米微球 的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為213nm， 多分散性系數(shù)為0.18。實施例9稱取50mg聚己內(nèi)酯(PCL)溶于4mL 二氧六烷中，稱取20mg阿奇霉素溶于ImL乙醇 中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的條件下，將 有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0. 5h。接著，將其裝 入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到帶藍色乳光的載藥納米微粒的水分散液。載 藥納米微粒的平均粒徑為157nm，多分散性系數(shù)為0. 12。載藥量為39. 2%，包封率為98%。 將殼聚糖溶于2vol%的醋酸水溶液中，配制濃度為3mg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件 下，將ImL殼聚糖溶液加入上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為 殼聚糖、內(nèi)核為PCL和阿奇霉素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納 米微球粉末。載藥納米微球的平均粒徑為183nm，多分散性系數(shù)為0. 15。實施例10稱取50mg聚己內(nèi)酯(PCL)溶于4mL丙酮中，稱取20mg阿奇霉素溶于ImL丙酮中， 然后，將兩者混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。在攪拌的條件下，將有 機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL水中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0. 5h。接著，在60?！鉉 及200mbar以下的真空度下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去有機溶劑，并濃縮溶液體積至20mL，得到帶淡藍 色乳光的載藥納米微粒的水分散液。載藥納米微粒的平均粒徑為214nm，多分散性系數(shù)為 0.13。載藥量為39%，包封率為97.5%。將羧甲基殼聚糖溶于0. Ivol%的醋酸水溶液中， 配制濃度為lmg/mL的羧甲基殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將3mL羧甲基殼聚糖溶液加入 上述的載藥納米微粒的水分散液中，繼續(xù)攪拌0. 5h，得到表層為羧甲基殼聚糖、內(nèi)核為PCL 和阿奇霉素的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納 米微球的平均粒徑為239nm，多分散性系數(shù)為0. 15。實施例11稱取50mgPCL溶于4mL丙酮中，稱取20mg阿奇霉素溶于ImL丙酮中，然后，將兩者 混合均勻，制備含有PCL和阿奇霉素的有機溶劑溶液。將殼聚糖溶于0. lvol%的醋酸水溶 液中，配制濃度為0. 05mg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將有機溶劑溶液以1. 5mL/h
10的速度注入50mL的殼聚糖溶液中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0. 5h。接著，在60°C及200mbar 以下的真空度下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去有機溶劑，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PCL和阿奇霉素的載 藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平均粒 徑為303nm，多分散性系數(shù)為0. 18。實施例12稱取IOOmg PHBV溶于4mL 二甲基乙酰胺中，稱取40mg阿奇霉素溶于ImL 二甲基 乙酰胺中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PHBV和阿奇霉素的有機溶劑溶液。將殼聚糖溶 于3vol%的醋酸水溶液中，配制濃度為lmg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將有機溶 劑溶液以0. 9mL/h的速度注入14mL的殼聚糖溶液中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌4h。接著，將其 裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PHBV和阿奇霉素 的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平 均粒徑為423nm，多分散性系數(shù)為0. 26。實施例13稱取IOOmg PLA溶于4mL 二甲基亞砜中，稱取40mg雷帕霉素溶于ImL 二甲基亞 砜中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PLA和雷帕霉素的有機溶劑溶液。將殼聚糖溶于 0. 5vol%的醋酸水溶液中，配制濃度為0. lmg/mL的殼聚糖溶液。在攪拌的條件下，將有機 溶劑溶液以5mL/h的速度注入IOOmL的殼聚糖溶液中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌2h。接著，將 其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，得到表層為殼聚糖、內(nèi)核為PLA和雷帕霉素 的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球粉末。載藥納米微球的平 均粒徑為286nm，多分散性系數(shù)為0. 20。實施例14稱取50mg PLA溶于4. 5mL 二甲基甲酰胺中，稱取IOmg紫杉醇素溶于0. 5mL乙醇 中，然后，將兩者混合均勻，制備含有PLA和紫杉醇的有機溶劑溶液。將羧甲基殼聚糖溶于 0. Ivol %的醋酸水溶液中，配制濃度為0. 05mg/mL的羧甲基殼聚糖溶液。在攪拌的條件下， 將有機溶劑溶液以1. 5mL/h的速度注入50mL的羧甲基殼聚糖溶液中，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪 拌0. 5h。接著，將其裝入透析袋中對大量水透析，除去有機溶劑，，得到表層為羧甲基殼聚 糖、內(nèi)核為PLA和紫杉醇的載藥納米微球的水分散液，將其冷凍干燥后，得到載藥納米微球 粉末。載藥納米微球的平均粒徑為316nm，多分散性系數(shù)為0. 18。
權(quán)利要求
一種載藥納米微球，其特征是包括內(nèi)核和表層，其內(nèi)核由可生物降解高分子材料和疏水藥物組成，其表層由殼聚糖或其衍生物組成；內(nèi)核中，可生物降解高分子材料的重量百分比為50 95％，疏水藥物的重量百分比為5 50％；表層相對于內(nèi)核的重量百分比為2 10％；所述載藥納米微球的粒徑范圍為50nm 500nm；其中，所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸 聚羥基乙酸共聚物或聚(3 羥基丁酸) 聚(3 羥基戊酸)共聚物。
2.如權(quán)利要求1所述的一種載藥納米微球，其特征在于，所述的可生物降解高分子材 料的相對分子質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過封端處理的 聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁 酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫乙酰度大 于90% ；所述的殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮增生的多 烯紫杉醇、紫杉醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。
3.一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于包括下列步驟(1)將疏水藥物溶于有機溶劑甲中，可生物降解高分子材料溶解于有機溶劑乙中，然后 將兩者混合均勻，制備含疏水藥物和可生物降解高分子材料的有機溶劑溶液；所述的有機 溶劑溶液中，其可生物降解高分子材料的濃度為l-30mg/mL，所述的疏水藥物與所述的可生 物降解高分子材料的重量比為1 1 19;所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi)酯、聚 羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)_聚(3-羥 基戊酸)共聚物；(2)在攪拌條件下，將步驟(1)制備的有機溶劑溶液緩慢注入水中，所述的有機溶劑溶 液與水的體積比為1 2-20，注入時間為l-6h，注入結(jié)束后，繼續(xù)攪拌0.5-4h;然后，通過 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或?qū)λ肝龅姆椒?，除去分散液中的有機溶劑，得到載藥納米微粒的水分散 液；(3)將殼聚糖或其衍生物溶解于0.l-3vol. %的乙酸水溶液中，制備殼聚糖溶液，所述 的殼聚糖溶液中，殼聚糖或其衍生物的濃度為0. 5-5mg/mL ；然后，在攪拌條件下，將殼聚糖 溶液加入步驟(2)制備的載藥納米微粒的水分散液中，所述的殼聚糖溶液與所述的載藥納 米微粒的水分散液的體積比為1 10-60，繼續(xù)攪拌0.5-4h后，冷凍干燥，得到具有殼聚糖 或其衍生物表層的載藥納米微球粉末。
4.如權(quán)利要求3所述的一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于，所述的可生物降 解高分子材料的相對分子質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過 封端處理的聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚 (3-羥基丁酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫 乙酰度大于90% ；所述的殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮 增生的多烯紫杉醇、紫杉醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。
5.如權(quán)利要求3所述的一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于，所述的有機溶劑 甲或有機溶劑乙為能與水混溶的有機溶劑甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、二氧六烷、二 甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基亞砜。
6.一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于包括下列步驟(1)將疏水藥物溶于有機溶劑甲中，可生物降解高分子材料溶解于有機溶劑乙中，然后將兩者混合均勻，制備含疏水藥物和可生物降解高分子材料的有機溶劑溶液；所述的有機 溶劑溶液中，其可生物降解高分子材料的濃度為l-30mg/mL，所述的疏水藥物與所述的可生 物降解高分子材料的重量比為1 1 19;所述的可生物降解高分子材料為聚己內(nèi)酯、聚 羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚(3-羥基丁酸)_聚(3-羥 基戊酸)共聚物；(2)將殼聚糖或其衍生物溶解于0.l-3vol. %的乙酸水溶液中，制備殼聚糖溶液；所述 的殼聚糖溶液中，殼聚糖或其衍生物的濃度為0. 05-lmg/mL ；(3)在攪拌條件下，將步驟(1)制備的有機溶劑溶液緩慢注入步驟(2)制備的殼聚糖溶 液中，所述的有機溶劑溶液與所述的殼聚糖溶液的體積比為1 2-20 ；注入時間為l-6h，注 入結(jié)束后，再繼續(xù)攪拌0. 5-4h ；然后，通過減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或?qū)λ肝龅姆椒?，除去分散液?的有機溶劑，然后冷凍干燥，得到表層為殼聚糖或其衍生物、內(nèi)核為可生物降解高分子材料 和藥物的載藥納米微球的粉末。
7.如權(quán)利要求6所述的一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于，所述的可生物降 解高分子材料的相對分子質(zhì)量為3000-200000 ；所述的可生物降解高分子材料為沒有經(jīng)過 封端處理的聚己內(nèi)酯、聚羥基乙酸、聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物或聚 (3-羥基丁酸)_聚(3-羥基戊酸)共聚物；所述的殼聚糖相對分子質(zhì)量為1500-100000，脫 乙酰度大于90% ；所述的殼聚糖衍生物為羧甲基殼聚糖；所述的疏水藥物為抑制血管內(nèi)皮 增生的多烯紫杉醇、紫杉醇或雷帕霉素，或者是消炎的阿奇霉素或布洛芬。
8.如權(quán)利要求6所述的一種載藥納米微球的制備方法，其特征在于，所述的有機溶劑 甲或有機溶劑乙為能與水混溶的有機溶劑甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、二氧六烷、二 甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基亞砜。
9.一種如權(quán)利要求1的載藥納米微球的使用方法，其特征是所述的載藥納米微球的 粉末通過超聲分散于水中，形成濃度為0. l-50mg/mL的載藥納米微球的水分散液，通過口 服、注射、經(jīng)皮、粘膜或介入療法的球囊導管方式給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種載藥納米微球，包括內(nèi)核和表層，其內(nèi)核由可生物降解高分子材料和疏水藥物組成，其表層由殼聚糖或其衍生物組成；內(nèi)核中，可生物降解高分子材料的重量百分比為50-95％，疏水藥物的重量百分比為5-50％；表層相對于內(nèi)核的重量百分比為2-10％；所述載藥納米微球的粒徑范圍為50nm-500nm。本發(fā)明的載藥納米微球的制備方法，將含載體材料和疏水藥物的有機溶劑溶液，緩慢注入大量水中然后加入殼聚糖或其衍生物水溶液；或者緩慢注入大量殼聚糖或其衍生物水溶液中，制備載藥納米微球。本發(fā)明解決了由可生物降解聚合物或無規(guī)共聚物制備具有穩(wěn)定親水表層的載藥納米微球的問題，彌補了現(xiàn)有技術(shù)必須使用合成困難的兩親性嵌段(或接枝)共聚物或者親水表層容易脫落的不足。
文檔編號A61K47/36GK101889985SQ20101022296
公開日2010年11月24日 申請日期2010年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月8日
發(fā)明者吳啟敏, 張幼維, 張文禮, 張秀芳, 王大新, 趙炯心 申請人:東華大學;揚州大學