專利名稱：豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及豬牙花乙醇提取物的制劑工
藝和抑菌作用。本發(fā)明產(chǎn)品對金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不 同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的 各種形式的產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
豬牙花(Erythroni咖 j即omcum Decne.)為百合禾斗(Xiliaceae)豬牙花屬 (Erythronium)多年生草本植物，生于林下濕地。分布于我國東北地區(qū)，朝鮮、日本也有分 布。 金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌等廣泛分布于自然界，?？?引起皮膚、組織及器官的化膿性炎癥，它產(chǎn)生的毒素進入人體腸道后可引起食物中毒。固內(nèi) 外有不少關(guān)于金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌等引起人類食物中毒的 報道。 目前，對于豬牙花植物的研究國內(nèi)外鮮見報道。因此，本發(fā)明對豬牙花全草的80% 的乙醇提取物的制劑工藝和抑菌活性作用進行了研究。 本發(fā)明的豬牙花全草的80%的乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽 孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用，這種抑菌作用具有積極的應(yīng)用價值，可開發(fā)為 天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
1、一種以豬牙花全草為原料制備豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作用，其特 征在于包括以下步驟 步驟(一)取干燥豬牙花全草，除去豬牙花全草中的雜物，然后烘干或曬干，粉碎 成40目粉末，用8-10倍量80%乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1. 5h，溫度為3(TC，功率為 80W ; 步驟(二 )將步驟( 一 )中的80 %的乙醇提取液用濾紙過濾，濾渣再分別用6倍 量與4倍量80%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次； 步驟(三)將步驟(二)中的80%的乙醇濾液合并，回收乙醇，得豬牙花乙醇提 取物； 步驟(四)將步驟(三)中的豬牙花乙醇提取物進行抑菌試驗，對金黃色葡萄球 菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用。 2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，制備豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作 用原料為豬牙花(Erythroniumj即onicum Decne.)的干燥全草。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的"％ "是重量百分比。
具體實施例方式
本發(fā)明所述的豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作用包括以下實施例，下面的
實施例可進一步說明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1 : (1)稱取干燥豬牙花全草80g，除去其中的雜物，然后烘干，粉碎成40目粉末，用8 倍量80%乙醇室溫下浸提4h后超聲lh，溫度為30。C，功率為80W; (2)將步驟(1)中的80%的乙醇提取液用濾紙過濾，濾渣再分別用6倍量與4倍 量80%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次； (3)將步驟(2)中的80%的乙醇濾液合并，回收乙醇，得豬牙花乙醇提取物；
(4)將步驟(3)中的豬牙花乙醇提取物進行抑菌試驗，對金黃色葡萄球菌、沙門氏 菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用。
實施例2: (1)稱取干燥豬牙花全草80g，除去其中的雜物，然后曬干，粉碎成40目粉末，用10 倍量80%乙醇室溫下浸提6h后超聲1.5h，溫度為3(TC，功率為80W; (2)將步驟(1)中的80%的乙醇提取液用濾紙過濾，濾渣再分別用6倍量與4倍 量80%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次； (3)將步驟(2)中的80%的乙醇濾液合并，回收乙醇，得豬牙花乙醇提取物； (4)將步驟(3)中的豬牙花乙醇提取物進行抑菌試驗，對金黃色葡萄球菌、沙門氏
菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用。 藥理試驗例豬牙花乙醇提取物的抑菌作用 1實驗材料 1. 1材料 豬牙花(Erythronium j即onicum Decne.)采集于吉林省臨江市老嶺基地。
1. 2供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、沙門
氏菌(Salmonellaenterica)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)均由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防
獸醫(yī)學(xué)實驗室提供，在3rc蛋白胨牛肉湯中培養(yǎng)12h。 2實驗方法與結(jié)果 2. 1豬牙花乙醇提取物抑菌試驗 2. 1. 1營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、 NaC15.0g、蒸餾水
1000mL、瓊脂20. 0g、pH7. 0。滅菌。 2. 1. 2濾紙片法測定最小抑菌濃度(MIC) 將豬牙花乙醇提取物用二倍稀釋法進行稀釋，培養(yǎng)皿上分別接種金黃色葡萄球 菌，大腸桿菌，沙門氏菌，枯草芽孢桿菌懸液各0. 2mL(菌濃度106CFU)，涂布均勻，然后將直 徑5mm的滅菌濾紙片在提取液中浸泡2h后貼在培養(yǎng)基上，每皿3片等距放置，每菌三份平 行，另外，每個菌種用滅菌的濾紙片做一份空白對照及鏈霉素(100ug/mL)進行陽性對照， 置培養(yǎng)箱中37t:下培養(yǎng)24h。用十字交叉法測量并記錄抑菌圈的大小，結(jié)果取三次重復(fù)實 驗的平均值，得不同濃度提取物對供試菌的抑菌效果，抑菌圈不明顯所對應(yīng)的提取物濃度 即為最低抑菌濃度。
2. 2結(jié)果 豬牙花乙醇提取物對4種細菌的抑菌作用，結(jié)果如表1所示。 表1豬牙花乙醇提取物對4種細菌的抑菌作用
濃度(mg/mL)_金黃色葡萄球菌_大腸桿g_j少門氏菌__枯草芽f包桿B
卵0 ^ "~:
40(5 ++ ++ +++ +十
200 如+ + ++ +
/朋 ++ — + +
)一fl ++ - - ,
25 十十 - - -
/25 + — — — 注-無抑菌圈出現(xiàn)；+-抑菌圈不明顯；+抑菌圈直徑為6_7mm ;++抑菌圈直徑為
8-10mm ;+++抑菌圈直徑為11mm以上. 由表1可知豬牙花乙醇提取物對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為12. 5mg/mL， 對沙門氏菌和枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度均為100mg/mL，對大腸桿菌的最小抑菌濃度為 200mg/mL。 通過具體實施例說明豬牙花乙醇提取物抑菌效果很好，可作為天然抗菌劑用于食 品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑。豬牙花乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、沙 門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌有良好的抑制作用，可以制備食品添加劑以及各種劑型的 藥品，用于預(yù)防與治療因食物被細菌污染而導(dǎo)致的食物中毒。
權(quán)利要求
一種以豬牙花全草為原料制備豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作用，其特征在于包括以下步驟步驟(一)取干燥豬牙花全草，除去豬牙花全草中的雜物，然后烘干或曬干，粉碎成40目粉末，用8-10倍量80％乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h，溫度為30℃，功率為80W；步驟(二)將步驟(一)中的80％的乙醇提取液用濾紙過濾，濾渣再分別用6倍量與4倍量80％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次；步驟(三)將步驟(二)中的80％的乙醇濾液合并，回收乙醇，得豬牙花乙醇提取物；步驟(四)將步驟(三)中的豬牙花乙醇提取物進行抑菌試驗，對金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，制備豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌活性作用的原料為豬牙花(Erythronium japonicum Decne.)的干燥全草。
全文摘要
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及豬牙花乙醇提取物的制劑工藝和抑菌作用。取干燥豬牙花全草，除去豬牙花全草中的雜物，然后烘干或曬干，粉碎成40目粉末，用8-10倍量80％乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h，溫度為30℃，功率為80W，然后用濾紙過濾，濾渣再分別用6倍量與4倍量80％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，合并三次濾液，回收乙醇，得豬牙花乙醇提取物。本發(fā)明產(chǎn)品對金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌均有不同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。
文檔編號A61K36/896GK101773597SQ20101013467
公開日2010年7月14日 申請日期2010年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月1日
發(fā)明者張崇禧, 蔡恩博, 鄭友蘭 申請人:山東大學(xué)威海分校