專利名稱：通過(guò)反義寡核苷酸來(lái)調(diào)制toll樣受體9表達(dá)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及Toll樣受體9 (TLR9)。具體而言，本發(fā)明涉及反義寡核苷酸及其在治療或預(yù)防與TLR9有關(guān)的或者可受益于調(diào)制TLR9表達(dá)的疾病中的用途，所述反義寡核苷酸與編碼TLR9的核酸特異性雜交，從而調(diào)制TLR9表達(dá)和活性。相關(guān)技術(shù)的概述Toll樣受體(TLR)存在于免疫系統(tǒng)的許多細(xì)胞上，而且已經(jīng)被證明涉及先天性免疫應(yīng)答(Hornung, V.等，(2002) J. Immunol. 168 :4531-4537)。TLR 是哺乳動(dòng)物識(shí)別外來(lái)分子并發(fā)動(dòng)對(duì)外來(lái)分子的免疫應(yīng)答的關(guān)鍵手段，而且還提供了聯(lián)系先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的(Akira,S^ (2001) Nature Immunol. 2 :675-680 ；Medzhitov, R. (2001) Nature Rev. Immunol. 1 :135-145)。在脊椎動(dòng)物中，此家族由稱作TLRl至TLRll的至少11種蛋白質(zhì)組成，已知所述蛋白質(zhì)識(shí)別來(lái)自細(xì)菌、真菌、寄生物和病毒的病原體相關(guān)分子樣式(PAMP)，并誘導(dǎo)由許多轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。一些TLR位于細(xì)胞表面上以檢測(cè)胞外病原體并啟動(dòng)對(duì)胞外病原體的應(yīng)答，而其它 TLR位于細(xì)胞內(nèi)部以檢測(cè)胞內(nèi)病原體并啟動(dòng)對(duì)胞內(nèi)病原體的應(yīng)答。表1列出了 TLR、其已知的激動(dòng)劑和已知含有TLR的細(xì)胞類型(Diebold，S. S.等(2004) Science 303 :1529-1531 ； Liew, F.等(2005)Nature 5 :446-458 ；Hemmi H 等(2002)Nat Immunol 3:196-200; Jurk M 等，O002)Nat Immuno 13 499 ；Lee J 等(2003) Proc. Natl. Acad. ki. USA 100 6646-6651) ； (Alexopoulou, L. (2001) Nature 413:732-738)。表 權(quán)利要求
1.靶向TLR9mRNA(SEQID NO :206)的長(zhǎng)度為20至50個(gè)核苷酸的合成的反義寡核苷酸，其中所述反義寡核苷酸具有包含SEQ ID NO :3、4、7、18、41、42、49、55、65、81、83、87、 116、125、159、167或189的序列，且其中所述寡核苷酸與人TLR9特異性雜交，并且抑制人 TLR9的表達(dá)。
2.權(quán)利要求1的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有至少一個(gè)核苷酸間聯(lián)接，其選自下組烴基膦酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯和甲基膦酸酯。
3.權(quán)利要求2的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有至少一個(gè)硫代磷酸酯核苷酸間聯(lián)接。
4.權(quán)利要求1的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸或其組合。
5.權(quán)利要求4的反義寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一個(gè)2’-0_取代的核糖核苷酸。
6.一種組合物，其包含依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸和生理學(xué)可接受載體。
7.一種用于抑制TLR9表達(dá)的方法，該方法包括施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸。
8.一種用于抑制TLR9表達(dá)的方法，該方法包括施用依照權(quán)利要求6的組合物。
9.一種用于抑制哺乳動(dòng)物中TLR9表達(dá)的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸。
10.一種用于抑制哺乳動(dòng)物中TLR9表達(dá)的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
11.一種用于抑制哺乳動(dòng)物中TLR9介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸。
12.一種用于抑制哺乳動(dòng)物中TLR9介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
13.一種用于治療性處理患有由TLR9介導(dǎo)的疾病的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸。
14.一種用于治療性處理患有由TLR9介導(dǎo)的疾病的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括以藥學(xué)有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
15.一種用于在患有由TLR9介導(dǎo)的疾病或病癥的哺乳動(dòng)物中預(yù)防疾病或病癥的方法， 該方法包括以預(yù)防有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸。
16.一種用于在患有由TLR9介導(dǎo)的疾病或病癥的哺乳動(dòng)物中預(yù)防疾病或病癥的方法， 該方法包括以預(yù)防有效量對(duì)所述哺乳動(dòng)物施用依照權(quán)利要求6的組合物。
17.一種用于下調(diào)TLR9表達(dá)從而阻止由激活TLR9的化合物進(jìn)行的不期望的TLR9介導(dǎo)的免疫刺激的方法，該方法包括與一種或多種包含免疫刺激性基序的化合物聯(lián)合施用依照權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的合成的反義寡核苷酸，所述免疫刺激性基序若無(wú)所述反義寡核苷酸的存在則會(huì)激活TLR9介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。
18.一種用于下調(diào)TLR9表達(dá)從而阻止由激活TLR9的化合物進(jìn)行的不期望的TLR9介導(dǎo)的免疫刺激的方法，該方法包括與一種或多種包含免疫刺激性基序的化合物聯(lián)合施用依照權(quán)利要求6的組合物，所述免疫刺激性基序若非所述組合物的存在則會(huì)激活TLR9介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。
19.依照權(quán)利要求9-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
20.依照權(quán)利要求13-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病選自癌癥、自身免疫性病癥、 氣道炎癥、炎性病癥、感染性疾病、瘧疾、萊姆病、眼部感染、結(jié)膜炎、皮膚病癥、銀屑病、硬皮病、心血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性疲乏綜合征、結(jié)節(jié)病、移植排斥、變態(tài)反應(yīng)、哮喘或由病原體引起的疾病。
21.依照權(quán)利要求20的方法，其中所述自身免疫性病癥選自紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、I 型糖尿病、腸易激綜合征、克羅恩氏病(Chron’ s disease)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、感染性休克、 普禿、急性播散性腦脊髓炎、阿狄森氏綜合征、強(qiáng)直性脊柱炎、抗磷脂抗體綜合征、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、大皰性類天皰瘡、查加斯病(chagas disease)、慢性阻塞性肺病、腹部疾病、皮肌炎、子宮內(nèi)膜異位癥、肺出血腎炎綜合征、格雷夫斯氏病、格-巴二氏綜合征、橋本氏病、化膿性汗腺炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、間質(zhì)性膀胱炎、硬斑病、重癥肌無(wú)力、發(fā)作性睡病、神經(jīng)性肌強(qiáng)直、天皰瘡、惡性貧血、多肌炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、精神分裂癥、斯耶格倫氏綜合征、顳動(dòng)脈炎(“巨細(xì)胞動(dòng)脈炎”)、血管炎、白癜風(fēng)、外陰痛和韋格納氏肉芽腫病。
22.依照權(quán)利要求20的方法，其中所述炎性病癥選自氣道炎癥、哮喘、自身免疫性疾病、慢性炎癥、慢性前列腺炎、腎小球腎炎、貝切特氏病、超敏感性、炎性腸病、再灌注損傷、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植排斥、潰瘍性結(jié)腸炎、葡萄膜炎、結(jié)膜炎和血管炎。
23.依照權(quán)利要求17或18的方法，其中所述化合物是一種或多種包含原本會(huì)激活 TLR9介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的免疫刺激性基序的非TLR9反義寡核苷酸。
24.依照權(quán)利要求7-18中任一項(xiàng)的方法，其中施用路徑選自胃腸外、肌肉內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、粘膜投遞、口服、舌下、經(jīng)皮、局部、吸入、鼻內(nèi)、氣霧劑、眼內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、 陰道、基因槍、皮膚貼片、滴眼劑或漱口劑。
25.依照權(quán)利要求7-18中任一項(xiàng)的方法，包括進(jìn)一步施用一種或多種疫苗、抗原、抗體、細(xì)胞毒劑、變應(yīng)原、抗生素、反義寡核苷酸、TLR激動(dòng)劑、TLR拮抗劑、siRNA、miRNA、反義寡核苷酸、適體、蛋白質(zhì)、基因療法載體、DNA疫苗、佐劑、共刺激分子或其組合。
全文摘要
提供了用于下調(diào)TLR9表達(dá)的反義寡核苷酸化合物、組合物和方法。所述組合物包含靶向編碼TLR9的核酸的反義寡核苷酸。所述組合物還可以包含與其它治療性和/或預(yù)防性化合物和/或組合物組合的靶向編碼TLR9的核酸的反義寡核苷酸。提供了使用這些化合物和組合物來(lái)下調(diào)TLR9表達(dá)以及預(yù)防或治療可受益于調(diào)制TLR9表達(dá)的疾病的方法。
文檔編號(hào)A61P3/00GK102165061SQ200980137933
公開(kāi)日2011年8月24日 申請(qǐng)日期2009年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月28日
發(fā)明者埃坎巴·R·坎迪瑪拉, 拉克什米·巴加特, 朱富剛, 王大慶, 蘇德希爾·阿格拉沃爾, 郁東, 馬利卡爾朱納·帕塔 申請(qǐng)人:艾德拉藥物股份有限公司