專(zhuān)利名稱(chēng)：超速效胰島素組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
提供包含被配制用于腸胃外給藥的速效胰島素組合物和乙酰透明質(zhì)酸降解酶組 合物的組合、組合物和藥盒。
背景技術(shù)：
糖尿病由于胰臟不能產(chǎn)生足量的胰島素或細(xì)胞不能適當(dāng)?shù)睾铣珊歪尫乓葝u素而 引起慢性高血糖癥。危重患者也會(huì)經(jīng)歷高血糖癥，引起死亡率和發(fā)病率增加。已將胰島素 作為藥物給藥用于治療患有包括例如I型糖尿病、II型糖尿病和妊娠糖尿病在內(nèi)的糖尿病 患者以模擬發(fā)生在正常個(gè)體中的內(nèi)源性胰島素反應(yīng)。也將胰島素給藥于患有高血糖癥的危 重患者以控制血糖水平。通常，響應(yīng)高血糖癥或?qū)Ω哐前Y的預(yù)期(例如進(jìn)食后)，向這些個(gè)體給藥可引起 血糖控制的速效胰島素。然而，現(xiàn)有速效形式的胰島素的吸收和起效存在延遲，并因此不近 似快速的內(nèi)源性胰島素作用。因此，這些制劑起效不夠快速以致不能阻止該第一相胰島素 釋放后立即發(fā)生的肝葡萄糖產(chǎn)生。由于藥理學(xué)作用的延遲，應(yīng)在進(jìn)食之前給藥速效胰島素 制劑以達(dá)到所需的血糖控制。而且，必須給予的劑量導(dǎo)致作用時(shí)間延長(zhǎng)，其可引起低血糖癥 并且在許多情況下引起肥胖癥。因此，需要當(dāng)給藥于個(gè)體時(shí)可更有效地模擬內(nèi)源性胰島素 反應(yīng)、引起更有效的血糖控制并減少胰島素療法的不良副作用例如體重增加的備選胰島素 組合物。發(fā)明概述本文提供與速效組合物相比可在預(yù)選時(shí)間段內(nèi)更快起效和/或增加全身暴露 (exposure)的超速效胰島素組合物。因此，本文提供超速效胰島素組合物。所述組合物包 含治療有效量的速效胰島素和其量使得所述組合物達(dá)到超速效的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。所 述組合物被配制用于腸胃外給藥，例如皮下、皮內(nèi)或肌肉內(nèi)給藥。可通過(guò)足以達(dá)到血糖控制 (可憑經(jīng)驗(yàn)確定，例如糖負(fù)荷(glucose challenge))的量確定胰島素劑量(給藥量)。通 常，治療目標(biāo)為給藥達(dá)到血糖控制并減少高血糖和/或低血糖事件的數(shù)量的最可能低的胰 島素量。所述超速效胰島素組合物中使用的較低的胰島素劑量可降低糖尿病個(gè)體體重增加和肥胖的風(fēng)險(xiǎn)。可將所述組合物提供于任何合適的容器或載體中，例如無(wú)菌小瓶、注射器、 藥筒(cartridge)、胰島素筆、胰島素泵或閉環(huán)系統(tǒng)容器中。本文提供超速效胰島素組合物，其包含用于控制血糖水平的治療有效量的速效胰 島素和其量足以使得所述組合物成為超速效胰島素組合物的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。本文 也提供制備例如本文描述的任何超速效胰島素組合物的超速效胰島素組合物的方法，所述 方法通過(guò)選擇速效胰島素并將其與使得所述組合物成為超速效胰島素組合物的足量的乙 酰透明質(zhì)酸降解酶組合。在所述組合物和制備所述組合物的方法的一些實(shí)施例中，所述治 療有效量的速效胰島素為10U/mL或約10U/mL至500U/mL或約500U/mL，且使得所述組合 物成為超速效胰島素組合物的足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少lU/mL、2U/ mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、10U/mL、15U/mL、20U/mL 或 25U 透明質(zhì) 酸酶活性 /mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、10U/ mL、15U/mL、20U/mL或25U透明質(zhì)酸酶活性/mL。在一些實(shí)施例中，使得所述組合物成為超 速效胰島素組合物的足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少30或35單位透明質(zhì) 酸酶活性/mL或者約30或35單位透明質(zhì)酸酶活性/mL。例如，所述組合物中速效胰島素 的量可為 10U/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/ mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL 或者約 10U/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/ mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL，且所述組合物中乙 酰透明質(zhì)酸降解酶的量在功能上等價(jià)于1 U/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、 8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/mL、35U/mL、37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、 60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、 700U/mL、800U/mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL 或者約 lU/mL、2U/ mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/ mL、35U/mL、37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/ mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、800U/mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、 3000U/mL或5000U/mL。所述組合物的體積，例如，可為lmL、3mL、5mL、10mL、20mL或50mL或 約11^、31^、51^、101^、201^或5011^。在一些實(shí)施例中，所述組合物被配制用于通過(guò)閉環(huán)系 統(tǒng)、胰島素筆或胰島素泵遞送，并可被配制用于單劑量給藥或多劑量給藥。在一些實(shí)施方案中，所述速效胰島素的治療有效量小于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解 酶時(shí)達(dá)到相同療效所需的所述速效胰島素的治療有效量。乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以在 腸胃外給藥后最初的3、6、9、12、15、20、25、30、35、40、50或60分鐘達(dá)到比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸 降解酶時(shí)在腸胃外給藥相同的速效胰島素后的相同時(shí)間段的胰島素全身暴露大至少30% 或約30%的胰島素全身暴露，和/或足以在給藥后最初的30、45、60、90、120或180分鐘達(dá) 到比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃外給藥相同的速效胰島素后的相同時(shí)間段的全身葡 萄糖代謝大至少30%或約30%的全身葡萄糖代謝(本文中有時(shí)稱(chēng)作葡萄糖消除)。在本文 提供的所有組合物中和本文提供的方法中，各組分的量可根據(jù)被給藥所述組合物的個(gè)體和 /或所提供的具體速效胰島素(或其混合物)而變化。必要時(shí)，可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定所述量。本文提供包含治療有效量的速效胰島素和某量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的胰島素 組合物。乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使得給藥后最初的30至40分鐘達(dá)到比無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃外給藥相同的速效胰島素后相同時(shí)間段的全身暴露大至少30% 或約30%的胰島素全身暴露。乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量可足夠使得所得超速效胰島素組合物可在腸胃外給藥 后最初的30、45、60、90、120或180分鐘引起比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃外給藥相同 的速效胰島素后的相同時(shí)間段的血糖水平增加低至少20 %至30 %或約20 %至30 %的血糖 水平增加。所述血糖水平增加可以比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃外給藥所述速效胰 島素后的血糖水平增加低至少 30%,30%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%^； 80% 或者約 30%、30%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75% 或 80%。本文也提供這樣的超速效胰島素組合物，其包含治療有效量的速效胰島素和某量 的乙酰透明質(zhì)酸降解酶，所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以達(dá)到比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶 時(shí)在腸胃外給藥相同的速效胰島素后最初60分鐘的全身葡萄糖消除(即代謝)大至少 30%或約30%的全身葡萄糖代謝。在本文提供的超速效胰島素組合物中，胰島素的示例性量(即，所述組合物提供 用于單次劑量的量)為0. 05單位、0. 06單位、0. 07單位、0. 08單位、0. 09單位、0. 1單位、0. 2 單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、 5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或100單位或 者約0. 05單位、0. 06單位、0. 07單位、0. 08單位、0. 09單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、 0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、 15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或100單位。乙酰透明質(zhì)酸降 解酶的示例性量包括在功能上等價(jià)于0. 3單位、0. 5單位、1單位、3單位、5單位、10單位、 20單位、30單位、40單位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單 位、400單位、450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單 位、3000單位、4000或者約0. 3單位、0. 5單位、1單位、3單位、5單位、10單位、20單位、30 單位、40單位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單 位、450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單位、3000 單位、4000或更多的透明質(zhì)酸酶活性的量。本文提供的超速效胰島素組合物可達(dá)到比所述無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃 外給藥胰島素后的全身暴露大至少5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、 90% ,100%, 120 %、140 %、160 %、180 %、200 %、300 % 或 400 % 或者約 5 %、10 %、20 %、 30 % ,40 % ,50 % ,60 % ,70 % ,80 % ,90 % UOO % ,120 % ,140 % ,160 % ,180 %,200 %,300% 或400%的餐時(shí)(例如，給藥后0-4小時(shí))胰島素全身暴露。本文提供的超速效胰島素組 合物可達(dá)到比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)在腸胃藥給藥胰島素后的血糖代謝大至少30%、 40 %,50 %,60 %,70 %,80 %,90 %U00 %U20 %,140 %,160 %,180 %,200 %,250 300 350 % 或 400 % 或者約 30 %,40 %,50 %,60 %,70 %,80 %,90 %,100 %,120 140%、160%、180%、200%、250%、300%、350%或400%的全身葡萄糖代謝(即，表示為速 率(量/時(shí)間)或預(yù)定時(shí)間段內(nèi)的總量的葡萄糖從血液中的清除的定量)。本文提供的超速效胰島素組合物任選包含螯合劑，例如但不限于乙二胺四乙酸 (EDTA)或乙二胺四乙酸鹽。所述螯合劑可以作為和與之等摩爾或約等摩爾濃度的金屬的 復(fù)合物提供，例如所述螯合劑乙二胺四乙酸鈣復(fù)合物。乙二胺四乙酸鈣的濃度為0. 02mM、0.04mM、0.06mM、0. 08mM、0. lmM、0. 2mM、0. 3mM、0. 4mM、0. 5mM、0. 6mM、0. 7mM、0. 8mM、0. 9mM、 lmM、5mM、10mM、15mM 或 20mM 或者約 0. 02mM、0. 04mM、0. 06mM、0. 08mM、0. lmM、0. 2mM、0. 3mM、 0. 4mM、0. 5mM、0. 6mM、0. 7mM、0. 8mM、0. 9mM、lmM、5mM、10mM、15mM 或 20mM。本文提供的超速效胰島素組合物通常包含鋅。鋅的濃度通常為0.002毫克每 100 單位胰島素(mg/100U)、0· 005mg/100U、0. 01mg/100U、0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、 0. 016mg/100U、0. 017mg/100U、0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、 0. 026mg/100U、0. 28mg/100U、0. 03mg/100U、0. 04mg/100U、0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、 0. 07mg/100U、0. 08mg/100U 或 0. lmg/lOOU 或者約 0. 002 毫克每 100 單位胰島素(mg/100U)、 0. 005mg/100U、0. 01mg/100U、0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、0. 016mg/100U、0. 017mg/100U、 0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、0. 026mg/100U、0.28mg/100U、 0. 03mg/100U、0. 04mg/100U、0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、0. 07mg/100U、0. 08mg/100U 或 0. lmg/100U。通常，將速效胰島素與鋅一起配制；本文使用的量可為當(dāng)與乙酰透明質(zhì)酸降解 酶組合時(shí)保持相同鋅濃度的量。示例性組合物可包含摩爾比為0.5 1、1 1,1.5 1、 2 1、5 UlO 1、20 1、30 1、40 1、50 1、60 1、70 1、80 1、90 1、 100 1,300 1 或 1000 1 或者約 0.5 1、1 1,1. 5 1、2 1、5 UlO 1、20 1、 30 1、40 1、50 1、60 1、70 1、80 1、90 UlOO 1,300 1 或 1000 1 的乙 二胺四乙酸鈣和鋅，例如約0. 010-0. 50mg鋅如0. 017mg鋅每100U胰島素或0. 010-0. 50mg 鋅如0. 017mg鋅每100U胰島素，以及0. 1至50mM乙二胺四乙酸鈣。其他示例性超速效胰 島素組合物包含與所述速效胰島素摩爾比約13的鋅和與所述速效胰島素摩爾比為約 1 3至10 1的乙二胺四乙酸鈣。所述超速效胰島素組合物也任選包含張力調(diào)節(jié)劑，例如但不限于氨基酸、例如甘 油的多元醇和/或例如氯化鈉的鹽。所述組合物的同滲濃度可為200m0sm/kg、220m0sm/ kg、240m0sm/kg、260m0sm/kg、280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、360m0sm/ kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/kg 或者約 200m0sm/kg、220m0sm/kg、240m0sm/kg、260m0sm/kg、 280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、360m0sm/kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/ kg。pH適于腸胃外給藥，例如約5. 5至8. 5或5. 5至8. 5，特別是6至8，如約6、6. 2、6. 4、 6. 6,6. 8、7、7· 2,7. 4,7. 6、7. 8 或8，或者 6、6. 2,6. 4,6. 6,6. 8、7、7· 2,7. 4,7. 6、7. 8 或8。所述 組合物可任選包含所述速效胰島素的穩(wěn)定劑、所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的穩(wěn)定劑或二者。 穩(wěn)定劑包括但不限于去污劑、多元醇、金屬、鹽、共溶劑和/或蛋白質(zhì)。這樣的穩(wěn)定劑的示例 為血清白蛋白和/或聚山梨醇酯，其濃度足以達(dá)到所述組合物和/或組分的較大穩(wěn)定性。 包含的血清白蛋白的濃度可為 0. lmg/mL、0. 2mg/mL,0. 3mg/mL,0. 4mg/mL、0. 5mg/mL、0. 6mg/ mL、0. 7mg/mL、0. 8mg/mL、0. 9mg/mL 或 lmg/mL 或者約 0. lmg/mL、0. 2mg/mL、0. 3mg/mL、0. 4mg/ mL、0. 5mg/mL、0. 6mg/mL、0. 7mg/mL、0. 8mg/mL、0. 9mg/mL 或 lmg/mL。包含的聚山梨醇酯的 濃度例如可為 0. 001%,0. 002%,0. 003%,0. 004%,0. 005%,0. 006%,00. 007%,0. 008%, 0. 009 %,0. 01 %,0. 02 %,0. 03 %,0. 04 %,0. 05 %,0. 06 %,0. 07 %,0. 08 %,0. 09 % 或 0. 或者約 0. 001%,0. 002%,0. 003%,0. 004%,0. 005%,0. 006%,00. 007%,0. 008%, 0. 009 %,0. 01 %,0. 02 %,0. 03 %,0. 04 %,0. 05 %,0. 06 %,0. 07 %,0. 08 %,0. 09 % 或 0.1%。其他任選的成分包括，例如，濃度可為1福、21111、31111、51111、101111或201111的除氧劑，例 如抗壞血酸、抗壞血酸鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、甲硫氨酸，和/或白蛋白和/或防腐劑，例如包含芳香環(huán)的化合物，如間甲酚或苯酚。所述速效胰島素可為例如單體或多聚體，如二聚體或六聚體。所述速效胰島素包 括正規(guī)胰島素，例如但是不限于人胰島素或豬胰島素，如具有氨基酸序列如SEQ ID NO 103 所示的A鏈，和氨基酸序列如SEQ ID NO :104所示的B鏈的胰島素，或具有氨基酸序列如 SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :123的 氨基酸殘基位點(diǎn)25-M所示的B鏈的胰島素。所述胰島素可為重組胰島素、或者可為合成 的或部分合成的、或者可為分離自天然來(lái)源的。所述胰島素可為胰島素類(lèi)似物。示例性的 胰島素類(lèi)似物為選自具有氨基酸序列如SEQ ID NO :103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO =147-149中任一所示的B鏈的胰島素的胰島素類(lèi)似物。在一些示例性超速效胰島素組 合物中，所述速效胰島素為速效人胰島素。而且，所述超速效胰島素組合物可包含胰島素的 混合物。該混合物可為速效胰島素或速效胰島素與較慢作用的胰島素例如基礎(chǔ)作用胰島素 (basal-acting insulin)的t昆合物。包含于本文提供的組合物和組合中的乙酰透明質(zhì)酸降解酶包括例如透明質(zhì)酸酶， 如動(dòng)物(包括人)透明質(zhì)酸酶，特別是其可溶形式。示例性乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì) 酸酶，特別是可溶性透明質(zhì)酸酶，例如PH20或其截短形式。所述PH20可為，例如，羊的、牛 的或截短的人PH20。包括包含或含有SEQ ID NO :1_39和67-96中任一所示氨基酸序列的 那些及其截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體。截短的人PH20，特別是可溶 性截短形式，包括任意具有SEQ ID NO :4-9中任一所示氨基酸序列的多肽、或其等位基因變 體和其他變體。所述透明質(zhì)酸酶的變體通常與SEQ ID NO :1-39和67-96中任一，特別是與 可溶形式具有至少 40%、50%、60%、70%、80%、85%、88%、90%、91%、92%、93%、94%、 95%,96%,97%,98%,99%或更大的序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶活性。所述可溶性透明 質(zhì)酸酶可為組合物，該組合物為rHuPH20。所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶可為軟骨素酶，例如但不限于軟骨素ABC裂解酶、軟骨 素AC裂解酶和軟骨素C裂解酶。示例性軟骨素酶具有或包含SEQ ID NO :98-100中任一 所示的氨基酸序列、或者其截短形式、或其等位基因變體、物種變體和其他變體。變體通常 與SEQ ID NO. 98-100中任一所示的多肽或與野生型軟骨素酶具有至少40%、50%、60%、 70%、80%、85%、88%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更大的 序列相同性。本文提供的超速效胰島素組合物可被配制用于多劑量給藥，用于稀釋至所需劑量 或用于單劑量給藥。示例性的胰島素治療有效量取決于所述組合物中的胰島素和被給藥所 述組合物的個(gè)體。這些單劑量的量包括例如，0. 05單位、0. 06單位、0. 07單位、0. 08單位、 0. 09單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、 0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單 位、50單位或100單位或者約0. 05單位、0. 06單位、0. 07單位、0. 08單位、0. 09單位、0. 1單 位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2 單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或100單 位。在這些組合物中，乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量可以或?qū)嶋H在功能上等價(jià)于0. 3單位、0. 5 單位、1單位、2單位、3單位、4單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單位、50單位、100 單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位或1000單位的透明質(zhì)酸酶活性或者約0. 3單位、0. 5單位、 1單位、2單位、3單位、4單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單位、50單位、100單位、 150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、450單位、500單位、600單位、 700單位、800單位、900單位或1000單位的透明質(zhì)酸酶活性。所述超速效胰島素組合物可被配制通過(guò)泵遞送。本文提供用于控制血糖水平的閉 環(huán)系統(tǒng)。所述系統(tǒng)為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任意閉環(huán)系統(tǒng)，但接受了以下修改包含本文描 述的速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶，并適于給藥或程序化遞送治療劑量的速效胰島素 和產(chǎn)生超速效胰島素組合物的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。所述閉環(huán)系統(tǒng)可包含含有速效胰島素 和乙酰透明質(zhì)酸降解酶的容器(reservoir)，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的存在量足以 使得所得組合成為超速效胰島素組合物。在另一實(shí)施方案中，提供用于控制血糖水平的包 含含有速效胰島素的容器和包含乙酰透明質(zhì)酸降解酶的另一容器的閉環(huán)系統(tǒng)。所述閉環(huán)系統(tǒng)可任選包含葡萄糖傳感器、遞送所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶和速效胰 島素的遞送系統(tǒng)以及程序化的用于整合泵藥和監(jiān)測(cè)功能的軟件中的一個(gè)或多個(gè)，藉此遞送 乙酰透明質(zhì)酸降解酶和速效胰島素以達(dá)到模擬非糖尿病個(gè)體中的血糖控制的血糖控制。所 述閉環(huán)系統(tǒng)也可包含在單獨(dú)容器中的或與所述速效胰島素和/或乙酰透明質(zhì)酸混合的較 慢作用的胰島素例如基礎(chǔ)胰島素。所述系統(tǒng)也可包含任何上文提到的任選的成分。所述速 效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶可包括任意上文描述的那些。在所述閉環(huán)系統(tǒng)中，包含所述速效胰島素的容器可包含用于維持至少半天、一天 或更多天的血糖控制的足夠的單位數(shù)量，并可包含0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、 0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20 單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位、100單位、200單位、300單位、400單位、500 單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單位、5000單位、6000單位、 7000單位或者約0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8 單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、 40單位、50單位、100單位、200單位、300單位、400單位、500單位、600單位、700單位、800 單位、900單位、1000單位、2000單位、5000單位、6000單位、7000單位或更多的胰島素。所 述閉環(huán)系統(tǒng)可遞送任意所需量或劑量增量的胰島素和/或乙酰透明質(zhì)酸降解酶，例如0. 05 單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單 位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50 單位或者約0. 05單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單 位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、 35單位、40單位、50單位或更多的胰島素每增量。包含所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的容器可 包含在功能上等價(jià)于1單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單位、50單位、100單位、 150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、450單位、500單位、600單位、 700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單位、3000單位、4000單位、5000單位、6000 單位、7000單位、8000單位、9000單位、10000單位、20000單位或者約1單位、5單位、10單 位、20單位、30單位、40單位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350 單位、400單位、450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000 單位、3000單位、4000單位、5000單位、6000單位、7000單位、8000單位、9000單位、10000單位、20000單位或更多的透明質(zhì)酸酶活性的量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶，并且能夠以功能上 等價(jià)于例如0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、3單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40 單位、50單位、100單位、150單位或者約0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、3單位、5單位、 10單位、20單位、30單位、40單位、50單位、100單位、150單位或更多的透明質(zhì)酸酶活性的 乙酰透明質(zhì)酸降解酶量的單個(gè)劑量增量遞送所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶。本文也提供組合，其包含包含IOU或約IOU至500U或約500U胰島素的第一組 合物和包含當(dāng)與所述胰島素一起給藥時(shí)使得所述速效胰島素成為超速效胰島素的足量的 乙酰透明質(zhì)酸降解酶的第二組合物。所述足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少 1U/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL 或 25U 透明質(zhì)酸酶活性 /mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、 9U/mL、1 OU/mL、15U/mL、20U/mL或25U透明質(zhì)酸酶活性/mL。在一些實(shí)施例中，所述足量的 乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等于至少35U透明質(zhì)酸酶活性/mL或約35U透明質(zhì)酸酶活性 /mL。例如，所述第二組合物中乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量可在功能上等價(jià)于至少lU/mL、2U/ mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/ mL、35U/mL、37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、 300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、800U/mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、 3000U/mL 或 5000U/mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/ mL、1OU/mL,15U/mL,20U/mL,25U/mL,30U/mL,35U/mL,37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、 70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、 800U/mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL。在一些實(shí)施例中，所述第 一組合物中的速效胰島素的量為 1 OU/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、 80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL 或者約 1 OU/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/ mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL。本文也提供包含乙酰透明質(zhì)酸降解酶的第一組合物和包含速效胰島素的第二組 合物的組合。這些組合物被配制用于腸胃外給藥。在一些情況下，當(dāng)與所述第二組合物混合 時(shí)乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使所得組合物成為超速效胰島素組合物。在其他情況下， 如果在給藥所述第一組合物前給藥，乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使得所述速效胰島素組 合物成為超速效胰島素組合物。在本文提供的組合中，所述速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶以及其他組分如 上文對(duì)組合物所述。本文也提供包含這些組合的藥盒。胰島的素組合物可被配制用于給 藥針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量，例如但不限于約0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/ kg、0.03U/kg、0. 04U/kg、0. 05U/kg、0. 06U/kg、0. 07U/kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、 0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、0. 14U/kg、0. 15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、 0. 40U/kg、0. 50U/kg、lU/kg、l. 5U/kg或2U/kg。乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量可被配制用于 向個(gè)體給藥針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量，且所述量例如為0. 3U、0. 5U、1U、2U、3U、4U、5U、10U、 20U、30U、40U、50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、700U、800U、 900U、1000U、2000U、3000U、4000U、5000U 或者約 0. 3U、0. 5U、1U、2U、3U、4U、5U、10U、20U、 30U、40U、50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、700U、800U、900U、1000U、2000U、3000U、4000U、5000U或更多。所述組合中的組合物可被配制用于皮下給藥。本文提供給藥本文提供的超速效胰島素組合物和組合的方法。通常該類(lèi)給藥為腸 胃外給藥，例如靜脈內(nèi)、皮下或通過(guò)任何合適的途徑。在本文提供的任何所述方法中，可分 別地、間歇地或一起(在單獨(dú)的組合物中或一起配制的組合物中)給藥所述速效胰島素和 乙酰透明質(zhì)酸降解酶。本文也提供通過(guò)給藥本文提供的任何所述超速效胰島素組合物或組 合來(lái)控制個(gè)體中葡萄糖水平的方法。在一些情況下，以餐時(shí)劑量的形式給藥所述組合物或 組合，包括例如在進(jìn)餐前少于20、10或5分鐘或者約20、10、5分鐘至進(jìn)餐后少于10分鐘或 約10分鐘給藥所述組合物或組合，或與食物一起給藥所述組合物或組合。本文也提供涉及指示患者在進(jìn)餐前少于20、10、5分鐘或者約20、10、5分鐘至進(jìn)餐 后少于30分鐘或約30分鐘給藥速效胰島素組合物的方法，其中將所述速效胰島素與使得 所述速效胰島素組合物成為超速效組合物的足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶聯(lián)合給藥?？蓪⑺?述速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶一起配制或分別提供用于聯(lián)合給藥。在這些方法中， 可指示所述患者在或約在進(jìn)餐時(shí)給藥所述速效胰島素組合物。在一些實(shí)施例中，所述指示 為書(shū)面的在其他實(shí)施例中，所述指示為口頭的。本文提供通過(guò)向個(gè)體給藥乙酰透明質(zhì)酸降解酶和速效胰島素來(lái)控制個(gè)體血糖水 平的方法，其中給藥的所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶和速效胰島素的量足以a)獲得比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同方式給藥所述速效胰島素后獲得的血 胰島素濃度的最大增加大至少20%至30%或約20%至30%的血胰島素濃度的最大增加； 和/或b)將達(dá)到最大血胰島素濃度所需時(shí)間減少至不多于無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以 相同方式給藥所述速效胰島素時(shí)達(dá)到最大血胰島素濃度所需時(shí)間的80% ；和/或c)給藥后15分鐘將胰島素濃度增加至少50、60、70、80、90或lOOpmol/L或者約 50、60、70、80、90 或 100pmol/L。通過(guò)所述方法，血胰島素濃度的最大增加比無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)胰島 素濃度的最大增加大至少 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、120%、 140%、160%、180%、200%、250%、300%、350% 或 400% 或者約 20 %、30 %、40 %、50 %、 60 %,70 %,80 %,90 %UOO %,120 %,140 %,160 %, 180 %,200 %,250 %、300 %、350 % 或 400%?？蓪⑦_(dá)到血最大胰島素濃度所需的時(shí)間減少至不多于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶 時(shí)達(dá)到血最大胰島素濃度所需時(shí)間的80%。例如，給藥20U劑量的胰島素后，在給藥15分 鐘后，可將胰島素濃度增加至少 60pmol/L、80pmol/L、100pmol/L、120pmol/L、140pmol/L、 160pmol/L、180pmol/L 或 200pmol/L 或者約 60pmol/L、80pmol/L、100pmol/L、120pmol/L、 140pmol/L、160pmol/L、180pmol/L 或 200pmol/L。在示例性實(shí)施方案中，所述糖尿病個(gè)體患有I型或II型糖尿病，與無(wú)乙酰透明質(zhì) 酸降解酶時(shí)以相同方式給藥所述速效胰島素相比減少了向所述個(gè)體給藥的速效胰島素的 量。例如，可將向I型糖尿病患者給藥的速效胰島素的量減少至少日^、^)1^、〗。1^、〗。1^、 40%、50%、60%或者約 5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%或更多，且可將向 II 型胰 島素個(gè)體給藥的速效胰島素的量減少至少5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、 70%、80%或者約 5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或更多。本文也提供用于控制或預(yù)防糖尿病個(gè)體體重增加和/或肥胖癥，例如與餐時(shí)胰島素療法相關(guān)的體重增加的方法。通常，這是通過(guò)給藥乙酰透明質(zhì)酸降解酶和劑量小于無(wú)乙 酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)給藥的速效胰島素劑量的速效胰島素來(lái)實(shí)現(xiàn)。糖尿病個(gè)體可為肥胖的 或存在肥胖癥風(fēng)險(xiǎn)，并且可患有I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠糖尿病或其他糖尿病。示例 性糖尿病個(gè)體為II型糖尿病個(gè)體。在一個(gè)實(shí)施例中，通過(guò)向肥胖的糖尿病個(gè)體或具有肥胖 癥風(fēng)險(xiǎn)的糖尿病個(gè)體給藥治療有效劑量的與乙酰透明質(zhì)酸降解酶組合的速效胰島素，來(lái)達(dá) 到控制或預(yù)防糖尿病個(gè)體的肥胖癥?？稍谶M(jìn)餐時(shí)或約進(jìn)餐時(shí)給藥所述組合物，且a)乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使得所給藥的速效胰島素成為超速效胰島素； 且b)速效胰島素的劑量在給藥后最初的40分鐘內(nèi)達(dá)到與無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解 酶時(shí)以相同方式給藥更高劑量的相同速效胰島素基本相同程度的餐時(shí)葡萄糖消除。與所 述更高劑量的速效胰島素相比，所述超速效胰島素組合物中的速效胰島素的劑量引起餐后 低血糖癥和肥胖癥的趨勢(shì)減小。在示例性實(shí)施方案中，所述糖尿病個(gè)體患有II型糖尿病， 且與無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同方式給藥速效胰島素相比，向所述個(gè)體給藥的所述速 效胰島素的量減少。例如，可將向II型糖尿病個(gè)體給藥的速效胰島素的量減少至少5%、 10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80% 或者約 5 %、10 %、15 %、20 %、 25%、30%、40%、50%、60%、70%、80% 或更多。本文也提供降低或防止與餐時(shí)胰島素療法相關(guān)的體重增加的方法，其通過(guò)在進(jìn)餐 時(shí)或約進(jìn)餐時(shí)向具有餐時(shí)胰島素療法引起的體重增加風(fēng)險(xiǎn)的糖尿病個(gè)體給藥包含速效胰 島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶的組合物，使得與無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同方式給 藥時(shí)治療個(gè)體餐后高血糖癥所需的相同速效胰島素的量相比，所給藥的用于治療所述高血 糖癥的速效胰島素的量減少。量減少的速效胰島素使得包含所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的組 合物較不可能引起所述個(gè)體體重增加。例如，可向II型糖尿病個(gè)體給藥如上文所述的胰 島素組合物，其包含的速效胰島素的量比無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同方式給藥時(shí) 治療所述高血糖癥所需要的相同速效胰島素的量少至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、 40%、50%、60%、70% 或 80% 或者約 5 %、10 %、15 %、20 %、25 %、30 %、40 %、50 %、60 %、 70%或80%。在一些情況下，在餐時(shí)胰島素療法的長(zhǎng)期給藥方案中給藥所述胰島素組合物。本文提供通過(guò)在至少三十天的時(shí)間里向具有餐時(shí)胰島素療法引起的體重增加風(fēng) 險(xiǎn)的糖尿病個(gè)體實(shí)施皮下餐時(shí)胰島素療程來(lái)降低或預(yù)防糖尿病個(gè)體體重增加的方法。在所 述療程中給藥的餐時(shí)胰島素劑量包含速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶的組合。各劑量中 的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使得所述速效胰島素成為超速效胰島素組合物，且用于治 療所述個(gè)體的餐后高血糖癥的劑量中包含的速效胰島素的量低于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降 解酶時(shí)用于治療所述高血糖癥所需的相同速效胰島素的量。這樣的餐時(shí)胰島素療程與無(wú)乙 酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)使用更高劑量的速效胰島素的相似療程相比可引起較少的體重增加。本文也提供通過(guò)向個(gè)體給藥餐時(shí)劑量的超速效胰島素組合物來(lái)控制所述個(gè)體中 葡萄糖水平的方法，其中a)所述超速效胰島素組合物包含治療有效量的胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶；b)所述速效胰島素為正規(guī)胰島素；c)所述劑量用于或建議用于餐時(shí)給藥或者比無(wú)乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同的 給藥途徑給藥的相同或更大劑量的相同速效正規(guī)胰島素更接近進(jìn)餐時(shí)間的餐前給藥；且
d)所述超速效胰島素組合物的劑量具有至少與無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)所 述速效正規(guī)胰島素相同的療效。例如，所述超速效胰島素組合物用于或建議用于在進(jìn)餐前少于20分鐘或約20分 鐘至進(jìn)餐后少于10或20分鐘或者約10或20分鐘給藥。通常，所述超速效胰島素組合物 中速效胰島素的劑量小于或等于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)通過(guò)相同途徑給藥的所述 速效胰島素的劑量。在實(shí)施本文提供的任何方法時(shí)，可通過(guò)任何合適的途徑并使用任何合適的裝置或 容器例如通過(guò)注射器、胰島素筆、胰島素泵或閉環(huán)系統(tǒng)來(lái)給藥所述組合物。所述組合物或組 合可包含上文所述的任何速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶以及上文所述的任何附加試 劑。向個(gè)體給藥的組合物中的胰島素量可為針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量，并且為0. 001U/kg、 0.005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 05U/kg 至 0.30U/kg 例如 0.05U/kg、0. 06U/kg、0. 07U/ kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、0. 14U/kg、0. 15U/kg、 0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、0. 40U/kg、0. 50U/kg、l. OU/kgU. 5/kg 或 2U/kg 或者約 0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 05U/kg 至 0. 30U/kg 例如 0. 05U/kg、0. 06U/ kg、0. 07U/kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、0. 14U/kg、 0. 15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、0. 40U/kg、0. 50U/kg、l. OU/kgU. 5/kg 或 2U/kg。 向個(gè)體給藥的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量為用于與針對(duì)單次進(jìn)餐的餐時(shí)劑量的速效胰島素 聯(lián)合給藥(單獨(dú)地、間歇地、或者一起(在單獨(dú)的組合物中或一起配制的組合物中))。所述 乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量可為或者實(shí)際為約0. 3U、0. 5U、1U、2U、5U、10U、20U、30U、40U、50U、 100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、700U、800U、900U、1000U、2000U、 3000U、4000 單位、5000U 或更多。本文提供制品，其包含包裝材料和在所述包裝材料內(nèi)的任意所述超速效胰島素組 合物或組合，以及任選的用于向糖尿病個(gè)體給藥的使用說(shuō)明。所述速效胰島素、胰島素、乙酰透明質(zhì)酸降解酶和其他組分包括上文所述的那些。 特別地，給藥本文提供的組合物和組合。附圖簡(jiǎn)述

圖1描繪了在與或不與rHuPH20聯(lián)合給藥的情況下皮下給藥時(shí)速效胰島素類(lèi)似物 Humalog 胰島素和速效正規(guī)胰島素Humulin R胰島素的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)(profile)。使用 高血胰島素-正常血糖鉗夾法(Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp procedure),通過(guò)方文 射免疫測(cè)定法(RIA)測(cè)定了向正常健康個(gè)體給藥后各時(shí)間點(diǎn)的血漿胰島素濃度。圖2描繪了使用高血胰島素-正常血糖鉗夾法，在與或不與rHuPH20聯(lián)合給藥 的情況下皮下給藥時(shí)速效胰島素類(lèi)似物Humalog 胰島素和速效正規(guī)胰島素Humulin R胰島素的藥效學(xué)性質(zhì)。測(cè)定了在將胰島素給藥于正常健康個(gè)體后將血糖水平維持在 90-110mg/dL所需的葡萄糖輸注速度。發(fā)明詳述大綱A.定義B. “超速效”胰島素1.胰島素、糖尿病和現(xiàn)有速效胰島素療法的綜述
2.超速效胰島素組合物的藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)C.胰島素多肽和制劑D.乙酰透明質(zhì)酸降解酶1.透明質(zhì)酸酶a.哺乳動(dòng)物型透明質(zhì)酸酶b.細(xì)菌透明質(zhì)酸酶c.來(lái)自水蛭、其他寄生蟲(chóng)和甲殼動(dòng)物的透明質(zhì)酸酶2.其他乙酰透明質(zhì)酸降解酶3.可溶性乙酰透明質(zhì)酸降解酶a.可溶性人PffiOb.重組可溶性人 PffiO (rHuPffiO)4.乙酰透明質(zhì)酸降解酶的糖基化5.透明質(zhì)酸酶的修飾以提高它們的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)E.制備編碼可溶性透明質(zhì)酸酶及其多肽的核酸的方法1.載體和細(xì)胞2.接頭部分3.表達(dá)a.原核細(xì)胞b.酵母細(xì)胞c.昆蟲(chóng)細(xì)胞d.哺乳動(dòng)物細(xì)胞e.植物4.純化技術(shù)F.胰島素和可溶性透明質(zhì)酸酶多肽的制備、制劑和給藥1.制劑凍干粉2.劑量和用法給藥方式a.注射器b.胰島素筆c.胰島素泵和其他胰島素遞送裝置d.閉環(huán)系統(tǒng)G.評(píng)價(jià)活性、生物利用度和藥動(dòng)學(xué)的方法1.藥動(dòng)學(xué)、藥效學(xué)和耐受性2.生物學(xué)活性a.胰島素b.乙酰透明質(zhì)酸降解酶H.治療用途1.糖尿病
a. I型糖尿病b. II型糖尿病c.妊娠糖尿病2.用于危重患者的胰島素療法I.聯(lián)合療法J.制品和藥盒K.實(shí)施例A.定義除非另外指明，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員 通常理解的相同含義。除非另外指明，本文完整公開(kāi)內(nèi)容通篇提及的所有專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)、 公開(kāi)的申請(qǐng)和出版物、Genbank序列、數(shù)據(jù)庫(kù)、網(wǎng)站和其他公開(kāi)的材料以其整體通過(guò)援引納 入本文。當(dāng)本文術(shù)語(yǔ)存在多個(gè)定義時(shí)，以本章節(jié)的那些為準(zhǔn)。當(dāng)提及URL或其他這樣的標(biāo) 識(shí)符(identifier)或地址時(shí)，應(yīng)理解這些標(biāo)識(shí)符可發(fā)生變化并且因特網(wǎng)上的具體信息會(huì) 不斷變化，但是通過(guò)搜索因特網(wǎng)可以發(fā)現(xiàn)等同的信息。對(duì)它們的參考證明了這些信息的可 獲得性和公開(kāi)傳播性。如本文所使用，“胰島素”指用于增加葡萄糖攝取和儲(chǔ)存和/或降低內(nèi)源性葡萄糖 產(chǎn)生的激素、其前體或者合成的或重組的類(lèi)似物。示例性人胰島素被翻譯為110個(gè)氨基酸 的前體多肽，前胰島素原(SEQ ID NO :101)，其包含可將該蛋白質(zhì)引導(dǎo)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)的對(duì) 個(gè)氨基酸的信號(hào)肽，該信號(hào)肽在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被裂解，生成胰島素原(SEQ ID NO :102)。胰島素原 經(jīng)進(jìn)一步加工釋放31個(gè)氨基酸的C-或連接鏈肽(對(duì)應(yīng)于SEQ ID N0:101所示前胰島素原 多肽的氨基酸殘基57至87，和SEQ ID NO :102所示胰島素原多肽的氨基酸殘基33至63)。 所得胰島素包含通過(guò)二硫鍵交聯(lián)的21個(gè)氨基酸的A-鏈(對(duì)應(yīng)于SEQ ID N0:101所示前胰 島素原多肽的氨基酸殘基90至110，以及SEQ ID NO 102所示胰島素原多肽的氨基酸殘基 66至86)和30個(gè)氨基酸的B-鏈(對(duì)應(yīng)于SEQ ID NO :101所示前胰島素原多肽的氨基酸 殘基25至M，以及SEQ ID NO :102所示胰島素原多肽的氨基酸殘基1至30)。適當(dāng)交聯(lián)的 人胰島素包含3個(gè)二硫鍵一個(gè)在A-鏈的7位和B-鏈的7位之間，第二個(gè)在A-鏈的20位 和B-鏈的19位之間，以及第三個(gè)在A-鏈的6和11位之間。提及的胰島素包括單鏈或雙 鏈形式的前胰島素原、胰島素原和胰島素多肽，其具有活性的截短形式，并包括等位基因變 體和物種變體、由剪接變體編碼的變體、和其他變體，例如胰島素類(lèi)似物，包括與SEQ IDNO 101所示前體多肽或其成熟形式具有至少40%、45%、50%、55%、65%、70%、75%、80%、 85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高序列相同性的多肽。示例性胰島素類(lèi)似物包 括 SEQ ID NO 147-149、152 所示的那些和包含 SEQ ID NO 150、156、158、160、162 和 164 所 示的 A-鏈和 / 或 SEQ ID NO 151、153-155、157、159、161、163 和 165 所示的 B-鏈的那些。示例性胰島素多肽為包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物來(lái)源的那些。人源胰島素的示例性氨 基酸序列顯示于SEQ ID NO :101-104o示例性胰島素類(lèi)似物包括SEQ ID NO 147-149、152 所示的那些和包含SEQ ID NO 150、156、158、160、162和164所示的A-鏈和/或SEQ ID NO 151、153-155、157、159、161、163和165所示的B-鏈的那些。胰島素多肽也包括任何非 人源的，包括但不限于SEQ ID NO :105-146所示的任何前體胰島素多肽。提及的胰島素包 括單體和多聚體胰島素，包括六聚體胰島素以及人源化胰島素。
如本文所使用，“速效胰島素”指響應(yīng)于在給藥速效胰島素時(shí)或給藥速效胰島素后 約四小時(shí)內(nèi)發(fā)生的真實(shí)的、察覺(jué)到的或預(yù)期的高血糖癥(例如由進(jìn)食引起的或預(yù)期由進(jìn)食 引起的餐時(shí)高血糖癥)而緊急給藥于糖尿病個(gè)體的任何胰島素或速效胰島素組合物，從而 所述速效胰島素能夠預(yù)防、控制或緩解所述急性高血糖癥。通常速效胰島素組合物在皮下 給藥至個(gè)體后不超過(guò)四小時(shí)或約不超過(guò)四小時(shí)顯示峰胰島素水平。速效胰島素組合物包 括重組胰島素和分離的胰島素(也稱(chēng)作“正規(guī)”胰島素)，例如以Humulin R銷(xiāo)售的胰島 素、豬胰島素和牛胰島素，以及經(jīng)設(shè)計(jì)因?yàn)榘被岣淖兌優(yōu)樗傩У囊葝u素類(lèi)似物。示例性 正規(guī)胰島素制劑包括但不限于人正規(guī)胰島素，例如以商品名Humulin R、Novolin R和 Velosulin 出售的那些，InsulinHuman, USP 和 Insulin Human Injection, USP 以及胰島 素的酸制劑，例如Toronto Insulin,Old Insulin和Clear Insulin，和正規(guī)豬胰島素，例如 Iletinπ (豬胰島素)。示例性速效胰島素類(lèi)似物包括例如賴(lài)脯胰島素(如Humalog 胰島素)、門(mén)冬胰島素(如NovoLog 胰島素)和谷賴(lài)胰島素(如Apidra 胰島素)、以 VIAject 和viAtab 出售的速效胰島素組合物(見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利第7，279，457號(hào))。盡 管術(shù)語(yǔ)“速效胰島素”不涵蓋“基礎(chǔ)作用胰島素”，但是本文描述的超速效胰島素組合物可任 選地包含除速效胰島素外的一種或多種基礎(chǔ)作用胰島素。如本文所使用，人胰島素指基于人多肽的合成或重組產(chǎn)生的胰島素，包括其等位 基因變體和類(lèi)似物。如本文所使用，速效人胰島素或人速效胰島素組合物包括任何速效的人胰島素或 人胰島素組合物，但是不包括非人胰島素例如正規(guī)豬胰島素。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“基礎(chǔ)作用胰島素”或“基礎(chǔ)胰島素”指作為用于至少例如糖 尿病的慢性病癥的整體治療方案的一部分用于維持基礎(chǔ)胰島素水平而給藥的胰島素。通 常，基礎(chǔ)作用胰島素被配制用于當(dāng)周期性(例如，每天一次或兩次)給藥時(shí)通過(guò)胰島素的 控釋維持接近穩(wěn)定狀態(tài)的胰島素水平?；A(chǔ)作用胰島素包括結(jié)晶胰島素(例如，NPH和 Lente ，魚(yú)精蛋白胰島素、surfen insulin)、基礎(chǔ)胰島素類(lèi)似物(甘精胰島素、HOE 901、 NovoSolBasal)和減緩正規(guī)胰島素吸收速率的其他胰島素化學(xué)制劑(例如，阿拉伯膠、卵磷 脂或油混懸劑)。如本文所使用，所述基礎(chǔ)作用胰島素可包括通常理解為長(zhǎng)效(通常達(dá)到相 對(duì)低的峰濃度，但是具有約20-30小時(shí)的最長(zhǎng)作用時(shí)間)或中效(通常在給藥后約4-12小 時(shí)引起峰胰島素濃度)的胰島素。如本文所使用，“超速效胰島素組合物”指包含速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶 (例如可溶性透明質(zhì)酸酶，包括但不限于rHuPH20制劑)的胰島素組合物，以致于在腸胃外 給藥至個(gè)體后的最初的四十分鐘，所述胰島素組合物在所述個(gè)體中提供的累積全身胰島素 暴露大于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同途徑給藥相同劑量的相同速效胰島素后經(jīng) 過(guò)相同時(shí)間提供給所述個(gè)體的累積全身胰島素暴露。本文描述的超速效胰島素組合物可任 選地包含基礎(chǔ)作用胰島素。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“高血糖病癥”或“高血糖癥”指不期望的血糖升高。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“低血糖病癥”或“低血糖癥”指不期望的血糖降低。如本文所使用，“全身胰島素消除”或“全身葡萄糖代謝”指從血中清除葡萄糖并可 表示為速率(量/時(shí)間)或量(一段時(shí)間的量)?？刹捎帽绢I(lǐng)域任何已知的適當(dāng)方法測(cè)定 全身葡萄糖消除。例如，可在禁食條件下采用高血胰島素-正常血糖鉗操作(如本文所示例和描述的)測(cè)定全身葡萄糖消除，其中用以維持恒定血糖水平例如90_110mg/dL的靜脈 輸注的葡萄糖的量或速率等于全身葡萄糖消除。因此可采用這些操作測(cè)定不同胰島素組合 物達(dá)到的全身葡萄糖消除方面的差異，例如通過(guò)給藥超速效胰島素組合物達(dá)到的全身葡萄 糖消除相對(duì)通過(guò)速效胰島素達(dá)到的全身葡萄糖消除的差異。也可通過(guò)在糖負(fù)荷試驗(yàn)后的給 定時(shí)間點(diǎn)測(cè)量對(duì)照(comparator)胰島素的相對(duì)葡萄糖降低活性來(lái)測(cè)定對(duì)照胰島素之間的 全身葡萄糖消除方面的差異。例如，可利用糖負(fù)荷試驗(yàn)(例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的75-g 的口服葡萄糖耐量試驗(yàn)或標(biāo)準(zhǔn)的試驗(yàn)餐劑(test meal formulation))比較不同的胰島素 制劑。在這些負(fù)荷試驗(yàn)中，在非靜脈內(nèi)腸胃外給藥胰島素組合物后立即向個(gè)體給藥某量的 葡萄糖或其他碳水化合物。然后在預(yù)定的時(shí)間測(cè)量血糖水平(即，個(gè)體血液中的葡萄糖濃 度)以測(cè)定該胰島素的降血糖作用。在各種胰島素制劑的這些口服負(fù)荷比較中，必須經(jīng)過(guò) 足以允許全身葡萄糖攝取的時(shí)間后測(cè)量血糖水平。上文描述的測(cè)定全身葡萄糖消除的研究 可采用動(dòng)物模型和/或人類(lèi)個(gè)體進(jìn)行。如本文所使用，血糖控制或“控制血糖水平，，指將血糖濃度維持在期望的水平，通 常為 70-130mg/dL 或 90_110mg/dL。如本文所使用，“累積全身胰島素暴露”或“對(duì)胰島素的累積全身暴露”指腸胃外給 藥胰島素后被吸收進(jìn)入血液的所述胰島素的量?？赏ㄟ^(guò)計(jì)算特定時(shí)間段曲線下面積測(cè)定對(duì) 胰島素的累積全身暴露，其中通過(guò)將血液、血清或血漿中的胰島素濃度作為時(shí)間的函數(shù)作 圖生成該曲線。如本文所使用，閉環(huán)系統(tǒng)為用于提供持續(xù)血糖控制的整合系統(tǒng)。閉環(huán)系統(tǒng)包括測(cè) 量血糖的裝置(mechanism)、遞送包括胰島素組合物在內(nèi)的一種或多種組合物的裝置以及 用于測(cè)定達(dá)到血糖控制需要遞送的胰島素的量的裝置。因此，閉環(huán)系統(tǒng)通常包括葡萄糖傳 感器、例如胰島素泵的胰島素遞送裝置和接受來(lái)自所述葡萄糖傳感器的信息并向所述胰島 素遞送裝置提供指令的控制器。這些指令可由所述控制器中的軟件生成。該軟件通常包括 用于基于葡萄糖傳感器檢測(cè)的或使用者預(yù)期的血糖水平來(lái)測(cè)定達(dá)到血糖控制需要遞送的 胰島素的量的算法。如本文所使用，給藥方案指給藥胰島素的量和給藥頻率。所述給藥方案取決于欲 治療的疾病或病癥，因此可發(fā)生變化。如本文所使用，乙酰透明質(zhì)酸降解酶指催化乙酰透明質(zhì)酸聚合物(也稱(chēng)作透明質(zhì) 酸或HA)裂解成較小分子量片段的酶。示例性乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶，特別 是具有解聚乙酰透明質(zhì)酸的能力的軟骨素酶和裂解酶。示例性的作為乙酰透明質(zhì)酸降解 酶的軟骨素酶包括但不限于軟骨素ABC裂解酶(也稱(chēng)作軟骨素酶ABC)、軟骨素AC裂解酶 (也稱(chēng)作硫酸軟骨素裂解酶或硫酸軟骨素果膠酶)和軟骨素C裂解酶。軟骨素ABC裂解酶 包括兩種酶，硫酸軟骨素ABC內(nèi)解酶(endolyase) (EC 4. 2. 2. 20)和硫酸軟骨素ABC外解 酶(exolyase) (EC 4. 2. 2. 21)。示例性的硫酸軟骨素ABC內(nèi)解酶和硫酸軟骨素ABC外解 酶包括但不限于來(lái)自普通變形桿菌(Proteusvulgaris)和肝黃黃桿菌(Flavobacterium heparinum)的那些(普通變形桿菌的硫酸軟骨素ABC內(nèi)解酶顯示于SEQ ID NO 98 ；Mto等 人(1994) Appl. Microbiol. Biotechnol. 41 (1) :39-46)。來(lái)自細(xì)菌的示例性軟骨素酶 AC 酶 包括但不限于來(lái)自肝黃黃桿菌，Victivallis vadensis(顯示于SEQ ID N0:99)，和金黃節(jié) Iflif (Arthrobacter aurescens)白勺面|3些(Tkalec 等人(2000)Applied andEnvironmentalMicrobiology 66(1) :29-35 ;Ernst 等人(1995) Critical Reviews inBiochemistry and Molecular Biology 30(5) :387-444)。示例性的來(lái)自于細(xì)菌的軟骨素酶C酶包括但不限于 來(lái)自鏈球菌屬(Streptococcus)和黃桿菌屬(Flavobacterium)的那些(Hibi等人(1989) FEMS-Microbiol-Lett. 48(2) :121-4 ；Michelacci 等人(1976) J. Biol. Chem. 251 :1154-8 ； Tsuda 等人(1999) Eur. J. Biochem. 262 :127-133)。如本文所使用，透明質(zhì)酸酶指一類(lèi)乙酰透明質(zhì)酸降解酶。透明質(zhì)酸酶包括細(xì)菌透 明質(zhì)酸酶(EC 4. 2. 2.1或EC 4.2.99. 1)，來(lái)自水蛭、其他寄生蟲(chóng)和甲殼動(dòng)物(EC 3.2.1.36) 的透明質(zhì)酸酶以及哺乳動(dòng)物類(lèi)型的透明質(zhì)酸酶(EC3. 2. 1. 35)。透明質(zhì)酸酶包括任何非人 來(lái)源(包括但不限于鼠科、犬科、貓科、兔屬、鳥(niǎo)類(lèi)、牛、羊、豬、馬、魚(yú)類(lèi)、蛙類(lèi)、細(xì)菌)的，和 任何來(lái)自水蛭、其他寄生蟲(chóng)和甲殼類(lèi)動(dòng)物的。示例性非人透明質(zhì)酸酶包括，來(lái)自奶牛的透 明質(zhì)酸酶(SEQ ID而10，11，64和冊(cè)55(美國(guó)專(zhuān)利第5，747，027號(hào)和第5，827，721號(hào))、 來(lái)自黃蜂的(SEQ ID NO :12和13)、來(lái)自蜜蜂的(SEQ IDNO 14)、來(lái)自白臉大黃蜂的(SEQ ID NO 15)、來(lái)自胡蜂的(SEQ ID NO 16)、來(lái)自小鼠的(SEQ ID NO :17_19，32)、來(lái)自豬的 (SEQ ID NO :20-21)、來(lái)自大鼠的(SEQ ID NO :22_24，31)、來(lái)自家兔的(SEQ ID NO :25)、來(lái) 自綿羊的(SEQID NO :26，27，63和65)、來(lái)自猩猩的(SEQ ID NO :28)、來(lái)自食蟹猴的(SEQ IDNO :29)、來(lái)自豚鼠的(SEQ ID NO :30)、來(lái)自節(jié)桿菌屬的(Arthrobacter sp.)的(菌株 FB24) (SEQ ID NO 67)、來(lái)自食菌蛭弧菌(Bdellovibriobacteriovorus)的(SEQ ID N0: 68)、來(lái)自痤瘡丙酸桿菌(Propionibacteriumacnes)的(SEQ ID NO :69)、來(lái)自無(wú)乳鏈球菌 (Streptococcus agalactiae)的((SEQ ID NO 70)；來(lái)自 18RS21 的(SEQ ID NO 71)；來(lái) 自血清型Ia的(SEQID NO 72)；來(lái)自血清型III的(SEQ ID NO :73)、來(lái)自金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)的(菌株 COL) (SEQ ID NO :74)；來(lái)自菌株 MRSA252 的(SEQ ID NO :75 禾口 76)；來(lái)自菌株 MSSA476 的(SEQ ID NO 77)；來(lái)自菌株 NCTC 8325 的(SEQ ID N0: 78)；來(lái)自菌株牛 RF122 的(SEQ IDNO 79 和 80)；來(lái)自菌株 USA300 的(SEQ ID N0:81)，來(lái) 自肺炎鏈球菌的(Sti^ptococcus pneumoniae) ((SEQ ID NO :82)；來(lái)自菌株 ATCCBAA-255/ R6 的(SEQ ID NO 83)；來(lái)自血清型 2，菌株 D39/NCTC 7466 的(SEQ ID N0:84)、來(lái)自釀膿 鏈球菌(Sti^ptococcus pyogenes)(血清型 Ml)的(SEQ ID NO 85)；來(lái)自血清型 M2，菌 株 MGASlO27O 的(SEQ ID NO 86)；來(lái)自血清型 M4，菌株 MGASlO75O 的(SEQ ID NO 87)； 來(lái)自血清型M6的(SEQ ID NO 88)；來(lái)自血清型M12，菌株MGAS2096的(SEQ ID NO 89禾口 90)；來(lái)自血清型M12，菌株MGAS9429的(SEQ ID NO 91)；來(lái)自血清型]\C8的(SEQ ID NO 92)；來(lái)自豬鏈球菌(Streptococcus suis)的(SEQ IDNO :93-95)；來(lái)自費(fèi)氏弧菌(Vibrio fischeri)(菌株 ATCC 700601/ES114 (SEQID NO 96))的透明質(zhì)酸酶，以及 Mi^ptomyces hyaluronolyticus透明質(zhì)酸酶，其對(duì)透明質(zhì)酸具有特異性并且不裂解軟骨素或硫酸軟骨素 (0hya,T. andKaneko,Y. (1970) Biochim. Biophys. Acta 198:607)。透明質(zhì)酸酶也包括人源 的那些。示例性人透明質(zhì)酸酶包括HYALl (SEQ ID NO 36) ,HYAL2 (SEQID NO :37)、HYAL3 (SEQ ID NO :38)、HYAL4(SEQ ID NO :39)和PH20 (SEQID NO :1)。透明質(zhì)酸酶也包括可溶性透明 質(zhì)酸，包括羊和牛PH20、可溶性人PH20以及可溶性rHuPH20。示例性可商購(gòu)的?；蜓蛲该?質(zhì)酸酶為Vitrase (羊透明質(zhì)酸酶)和Amphadase (牛透明質(zhì)酸酶)。乙酰透明質(zhì)酸降解酶包括前體乙酰透明質(zhì)酸降解酶多肽和成熟乙酰透明質(zhì)酸降 解酶多肽(例如已去除其中的信號(hào)序列的那些)、其具有活性的截短形式，并包括與SEQ IDNO 1和10-48、63-65、67-100中所示前體多肽或其成熟形式具有至少40%、45%、50%、 55%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99% 或更高序列相同性的 等位基因變體和物種變體、由剪接變體編碼的變體和其他變體，包括多肽。例如，提到的乙 酰透明質(zhì)酸降解酶也包括SEQ ID NO :50-51所示的人PH20前體多肽變體。乙酰透明質(zhì)酸 降解酶也包括包含化學(xué)或翻譯后修飾的那些以及不包含化學(xué)或翻譯后修飾的那些。這些 修飾包括但不限于聚乙二醇化、白蛋白化(albumination)、糖基化、法尼基化、羧基化、羥基 化、磷酸化和其他本領(lǐng)域已知的多肽修飾。如本文所使用，可溶性透明質(zhì)酸酶指以其在生理?xiàng)l件下的可溶性為特征的多肽。 可溶性透明質(zhì)酸酶可通過(guò)例如其分配在加熱到37°C的TritonX-114溶液的水相中進(jìn)行區(qū) 分(Bordier等人，(1981) J. Biol. Chem.，256 :1604-7)。膜錨定的例如脂質(zhì)錨定的透明質(zhì)酸 酶會(huì)分配到富含去污劑的相中，但是用磷脂酶C處理后會(huì)分配到去污劑含量少的相中或水 相中。可溶性透明質(zhì)酸酶包括這樣的膜錨定透明質(zhì)酸酶，其中的該透明質(zhì)酸酶錨定至膜相 關(guān)的一個(gè)或多個(gè)區(qū)域已被去除或修飾，其中該可溶性形式保留了透明質(zhì)酸酶活性。可溶性 透明質(zhì)酸酶包括重組可溶性透明質(zhì)酸酶和那些包含于或純化自天然來(lái)源例如來(lái)自綿羊或 奶牛的睪丸提取物的那些。這樣的可溶性透明質(zhì)酸酶的實(shí)例是可溶性人PH20。其他可溶性 透明質(zhì)酸酶包括羊(SEQ ID NO :27,63,65)和牛(SEQ ID NO :11、64)PH20。如本文所使用，可溶性人PH20或sHuPH20包括成熟多肽，所述多肽在C-端缺乏 全部或部分糖基磷脂酰肌醇(GPI)附著位點(diǎn)，使得表達(dá)后所述多肽為可溶性的。示例性 sHuPH20多肽包括具有SEQ ID NO :4_9和47-48中任一所示氨基酸序列的成熟多肽。這 樣的示例性sHuPH20多肽的前體多肽包括信號(hào)序列。所述前體的示例為SEQ ID NO :3和 40-46所示的那些，其中每一個(gè)均在氨基酸位點(diǎn)1-35包含35個(gè)氨基酸的信號(hào)序列?？扇苄?HuPH20多肽也包括在本文所述的生產(chǎn)和純化方法之中或之后降解的那些。如本文所使用，可溶性重組人PH20(rHuPH20)指重組表達(dá)于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO) 細(xì)胞中的可溶形式的人PH20?？扇苄詒HuPH20由包含所述信號(hào)序列并由SEQ ID NO :49所 示的核酸編碼。也包括作為其等位基因變體和其他可溶性變體的DNA分子。編碼可溶性 rHuPH20的核酸表達(dá)于分泌所述成熟多肽的CHO細(xì)胞中。當(dāng)產(chǎn)生于培養(yǎng)基中時(shí)，在C-端 存在異質(zhì)性使得該產(chǎn)物包含不同種(species)的混合物，其可包含各種豐度的一個(gè)或多個(gè) SEQ ID NO. 4-9。也包括對(duì)應(yīng)的等位基因變體和其他變體，包括對(duì)應(yīng)于SEQ ID NO 50-51 中所示前體人PH20多肽的那些。其他變體可與SEQ IDNO :4-9和47-48中任一具有60%、 70%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更高的序列 相同性，只要它們保留透明質(zhì)酸酶活性并且為可溶的。如本文所使用，活性指與全長(zhǎng)(完整)蛋白相關(guān)的多肽或其部分的一種或多種功 能活性。功能活性包括但不限于生物學(xué)活性、催化或酶活性、抗原性(與多肽結(jié)合或競(jìng)爭(zhēng)以 結(jié)合抗-多肽抗體的能力)、免疫原性、形成多聚體的能力以及特異結(jié)合至所述多肽的受體 或配體的能力。如本文所使用，透明質(zhì)酸酶活性指酶催化透明質(zhì)酸裂解的能力。美國(guó)藥典(USP) XXII透明質(zhì)酸酶的測(cè)定通過(guò)測(cè)量較大分子量的透明質(zhì)酸、或乙酰透明質(zhì)酸，即使酶與 HA在37°C反應(yīng)30分鐘后剩余的(HA)底物，來(lái)直接測(cè)定透明質(zhì)酸酶活性(USP XXII-NF XVII (1990)644-645 United StatesPharmacopeia Convention, Inc, Rockville, MD)。在測(cè)定中可使用參比標(biāo)準(zhǔn)溶液以確定任何透明質(zhì)酸酶的相對(duì)活性(以單位計(jì))。測(cè)定例如可 溶性rHuPH20的透明質(zhì)酸酶的透明質(zhì)酸酶活性的體外測(cè)定法為本領(lǐng)域已知的并描述于本 文中。示例性測(cè)定法包括下文描述的微濁度測(cè)定法(見(jiàn)實(shí)施例幻，其通過(guò)檢測(cè)未裂解的透 明質(zhì)酸與血清白蛋白結(jié)合時(shí)形成的不溶性沉淀間接測(cè)定透明質(zhì)酸酶對(duì)透明質(zhì)酸的裂解。例 如可使用參比標(biāo)準(zhǔn)品生成標(biāo)準(zhǔn)曲線以測(cè)定被測(cè)透明質(zhì)酸酶的活性(以單位計(jì))。如本文所使用，關(guān)于乙酰透明質(zhì)酸降解酶的“功能等價(jià)量”或其語(yǔ)法變體，指達(dá)到 與某量(例如已知單位數(shù)量的透明質(zhì)酸酶活性)的參比酶例如透明質(zhì)酸酶相同作用的乙酰 透明質(zhì)酸降解酶的量。例如，可將任何乙酰透明質(zhì)酸降解酶的活性與rHuPH20的活性比較， 以測(cè)定會(huì)達(dá)到與已知量的rHuPH20相同作用的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的功能等價(jià)量。例如， 乙酰透明質(zhì)酸降解酶作為擴(kuò)展劑或分散劑的能力可通過(guò)將其與錐蟲(chóng)藍(lán)一起注射入小鼠的 側(cè)面皮膚來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)(見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利公布第2005(^60186號(hào))，且可測(cè)定達(dá)到與例如100 單位透明質(zhì)酸酶參比標(biāo)準(zhǔn)品相同的擴(kuò)散量所需的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量。因此，所需的 乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量功能上等價(jià)于100單位。在另一實(shí)施例中，可在人類(lèi)個(gè)體中評(píng)價(jià) 乙酰透明質(zhì)酸降解酶增加聯(lián)合給藥的胰島素的水平和吸收速率的能力，如下文實(shí)施例1中 所述，且可測(cè)定達(dá)到與例如所給藥量的rHuPH20相同的胰島素水平和吸收速率的增加所需 的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量(例如通過(guò)測(cè)定最大血胰島素濃度(Cmax)、達(dá)到最大血胰島素 濃度所需的時(shí)間(tmax)和經(jīng)給定時(shí)間后的累積全身胰島素暴露(AUC))。如本文所使用，天然存在的α-氨基酸的殘基為那些自然屆發(fā)現(xiàn)的20個(gè)α-氨基 酸的殘基，其通過(guò)人體中加載的(charged) tRNA分子與其同族的mRNA密碼子的特異性識(shí)別 而并入蛋白質(zhì)中。如本文所使用，核酸包括DNA、RNA及其類(lèi)似物，包括肽核酸(PNA)及其混合物。核 酸可為單鏈或雙鏈的。當(dāng)指探針或引物(其任選地被例如可檢測(cè)標(biāo)記如熒光或放射標(biāo)記進(jìn) 行標(biāo)記)時(shí)，單鏈分子是被涵蓋的。這些分子通常具有的長(zhǎng)度使得在用于探測(cè)或引導(dǎo)文庫(kù) 時(shí)它們的靶點(diǎn)是統(tǒng)計(jì)學(xué)上獨(dú)特的或具有低拷貝數(shù)(通常小于5，一般小于3)。通常探針或 引物包含至少14、16或30個(gè)與感興趣的基因互補(bǔ)或相同的連續(xù)核苷酸序列。探針和引物 的長(zhǎng)度可為10、20、30、50、100或更多核酸。如本文所使用，肽指長(zhǎng)度大于或等于兩個(gè)氨基酸并且長(zhǎng)度小于或等于40個(gè)氨基 酸的多肽。如本文所使用，出現(xiàn)在本文提供的各種氨基酸序列中的氨基酸根據(jù)它們已知的三 字母或單字母縮寫(xiě)(表1)進(jìn)行識(shí)別。出現(xiàn)在各種核酸片段中的核苷酸以本領(lǐng)域常規(guī)使用 的標(biāo)準(zhǔn)的單字母名稱(chēng)進(jìn)行命名。如本文所使用，“氨基酸”為包含氨基和羧基的有機(jī)化合物。多肽包含兩個(gè)或多個(gè) 氨基酸。用于本文目的，氨基酸包括所述二十個(gè)天然氨基酸、非天然氨基酸和氨基酸類(lèi)似物 (即，其中的α-碳具有側(cè)鏈的氨基酸)。如本文所使用，“氨基酸殘基”指多肽在其肽鍵處的化學(xué)消化(水解)所形成的氨 基酸。假定本文描述的氨基酸殘基為“L”異構(gòu)形式。如此命名的“D”異構(gòu)形式的殘基可由任 何L-氨基酸殘基取代，只要所述多肽保留期望的功能性質(zhì)。NH2指存在于多肽氨基端的游離 氨基。COOH指存在于多肽羧基端的游離羧基。為了與J. Biol. Chem.，243 :3557-3559 (1968) 中描述并在37C.F.R. § § 1.821-1. 822中采用的標(biāo)準(zhǔn)多肽命名法保持一致，氨基酸殘基的縮寫(xiě)顯示于表1。
表1-對(duì)照表
權(quán)利要求
1.超速效胰島素組合物，其包含用于控制血糖水平的治療有效量的速效胰島素；和其量足以使得所述組合物成為超速效胰島素組合物的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述速效胰島素的量為10U/mL或約10U/mL至500U/mL或約500U/mL胰島素；以及使得所述組合物成為超速效胰島素組合物的足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等 價(jià)于至少 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、10U/mL、15U/mL、 20U/mL 或 25U 透明質(zhì)酸酶活性 /mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/ mL、8U/mL、9U/mL、10U/mL、15U/mL、20U/mL 或 25U 透明質(zhì)酸酶活性 /mL。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的組合物，其中使得所述組合物成為超速效胰島素組合物 的足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少30至35單位透明質(zhì)酸酶活性/mL或約 30至35單位透明質(zhì)酸酶活性/mL。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的組合物，其中所述組合物的體積為lmL、3mL、5mL、10mL、 20mL 或 50mL 或者約 lmL、3mL、5mL、10mL、20mL 或 50mLo
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素的量為10U/mL、20U/mL、30U/ mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL、 300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL 或者約 10U/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、 50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、 350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的組合物，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量在功能上等價(jià) 于 1U/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、 25U/mL,30U/mL,35U/mL,37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、IOOU/ mL、200U/mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、800U/mL、900U/mL、1000U/ml、 2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、 8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/mL、35U/mL、37· 5U/mL、40U/mL、50U/mL、 60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、 700U/mL、800U/mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的組合物，其被配制用于多劑量給藥。
8.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的組合物，其被配制用于單劑量給藥。
9.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的組合物，其被配制用于使用閉環(huán)系統(tǒng)遞送。
10.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的組合物，其被配制用于使用胰島素筆遞送。
11.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的組合物，其被配制用于使用胰島素泵遞送。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的組合物，其中所述血糖水平為餐時(shí)血糖水平。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的組合物，其中用于單次劑量的胰島素的治療有效量為 0. 05單位、0. 06單位、0. 07單位、0. 08單位、0. 09單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單 位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單 位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或100單位或者約0. 05單位、0. 06 單位、0. 07單位、0. 08單位、0. 09單位、0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6 單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或100單位。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的組合物，其中用于單次劑量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量 在功能上等價(jià)于0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單 位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、450單位、 500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2，000單位、3，000單位、4，000 單位或者約0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單位、 50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、450單位、500 單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2，000單位、3，000單位、4，000單 位或更多的透明質(zhì)酸酶活性。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含螯合劑。
16.權(quán)利要求15的超速效胰島素組合物，其中所述螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)或乙二胺四乙酸鹽。
17.權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的組合物，其中將所述螯合劑作為與等摩爾濃度或約等 摩爾濃度的金屬形成的復(fù)合物提供。
18.權(quán)利要求17的組合物，其中所述螯合劑復(fù)合物為EDTA鈣。
19.權(quán)利要求18的組合物，其中所述EDTA鈣的濃度為0.02mM、0. 04mM、0. 06mM、 0.08mM、0. lmM、0. 2mM、0. 3mM、0. 4mM、0. 5mM、0. 6mM、0. 7mM、0. 8mM、0. 9mM、lmM、5mM、10mM、 15mM 或 20mM 或者約 0. 02mM、0. 04mM、0. 06mM、0. 08mM>0. lmM、0. 2mM、0. 3mM、0. 4mM、0. 5mM> 0. 6mM、0. 7mM、0. 8mM、0. 9mM、lmM、5mM、10mM、15mM 或 20mM。
20.權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含鋅。
21.權(quán)利要求20的組合物，其中所述鋅的濃度為0.002微克每100單位胰島素 (mg/100U)、0. 005mg/100U、0. 01mg/100U、0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、0. 016mg/100U、 0. 017mg/100U、0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、0. 026mg/100U、 0. 028mg/100U、0. 03mg/100U、0. 04mg/100U、0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、0. 07mg/100U、 0. 08mg/100U 或 0. lmg/lOOU 或者約 0.002mg/100U、0. 005mg/100U、0. 01mg/100U、 0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、0. 016mg/100U、0. 017mg/100U、0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、 0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、0. 026mg/100U、0. 028mg/100U、0. 03mg/100U、0.04mg/100U、 0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、0. 07mg/100U、0. 08mg/100U 或 0. lmg/100U。
22.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的組合物，其包含摩爾比為0.5 1、1 1,1.5 1、2 1、 5 UlO 1、20 1、30 1、40 1、50 1、60 1、70 1、80 1、90 UlOO 1、 300 1 或 1000 1 或者約 0.5 1、1 1,1. 5 1、2 1、5 UlO 1、20 1、30 1、 40 1、50 1、60 1、70 1、80 1、90 UlOO 1,300 1 或 1000 1 的 EDTA 鈣 和鋅。
23.權(quán)利要求22的組合物，其包含0.Olmg或約0. Olmg至0. 02mg或約0. 02mg鋅和 0. ImM或約0. ImM至50mM或約50mM EDTA鈣每100U人胰島素。
24.權(quán)利要求1-23中任一項(xiàng)的組合物，其包含與所述速效胰島素的摩爾比為1 3或 約1 3的鋅和與所述速效胰島素的摩爾比為1 3至10 1或約1 3至10 1的 EDTA 鈣。
25.權(quán)利要求I-M中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含張力調(diào)節(jié)劑。
26.權(quán)利要求25的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑選自氨基酸、多元醇和鹽。
27.權(quán)利要求25或權(quán)利要求沈的組合物，其中所述張力調(diào)節(jié)劑為甘油和/或氯化鈉。
28.權(quán)利要求1-27中任一項(xiàng)的組合物，其中所述組合物的同滲濃度為200m0sm/kg、 220m0sm/kg、240m0sm/kg、260m0sm/kg、280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、 360m0sm/kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/kg 或者約 200m0sm/kg、220m0sm/kg、240m0sm/kg、 260m0sm/kg、280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、360m0sm/kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/kgo
29.權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的組合物，其中所述組合物的pH為6、6·2,6. 4,6. 6,6. 8、 7,7. 2,7. 4,7. 6,7. 8 或 8 或者約 6,6. 2,6. 4,6. 6,6. 8、7、7· 2,7. 4,7. 6,7. 8 或 8。
30.權(quán)利要求1- 中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含所述速效胰島素的穩(wěn)定劑、所述 乙酰透明質(zhì)酸降解酶的穩(wěn)定劑或二者。
31.權(quán)利要求30的組合物，其中所述穩(wěn)定劑為去污劑、多元醇、金屬、鹽、共溶劑和/或 蛋白質(zhì)。
32.權(quán)利要求31的組合物，其中所述穩(wěn)定劑為血清白蛋白。
33.權(quán)利要求32的組合物，其包含濃度為0.lmg/mL、0. 2mg/mL,0. 3mg/mL,0. 4mg/mL, 0. 5mg/mL、0. 6mg/mL、0. 7mg/mL、0. 8mg/mL、0. 9mg/mL 或 lmg/mL 或者約 0. lmg/mL、0. 2mg/mL、 0. 3mg/mL、0. 4mg/mL、0. 5mg/mL、0. 6mg/mL、0. 7mg/mL、0. 8mg/mL、0. 9mg/mL 或 lmg/mL 的血清 白蛋白。
34.權(quán)利要求30的組合物，其中所述蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑為聚山梨醇酯。
35.權(quán)利要求；34的組合物，其包含濃度為0.001%,0. 002 %,0. 003 %,0. 004 %, 0. 005 %,0. 006 %,0. 007 %,0. 008 %,0. 009 %,0. 01 %,0. 02 %,0. 03 %,0. 04%,0. 05 %, 0. 06 %、0. 07 %、0. 08 %、0. 09 % 或 0. 1 % 或者約 0. 001 %、0. 002 %、0. 003 %,0. 004 %, 0. 005 %,0. 006 %,0. 007 %,0. 008 %,0. 009 %,0. 01 %,0. 02 %,0. 03 %,0. 04%,0. 05 %, 0. 06%,0. 07%,0. 08%,0. 09%或 0. 的聚山梨醇酯。
36.權(quán)利要求1-35中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含除氧劑。
37.權(quán)利要求36的組合物，其中所述除氧劑選自抗壞血酸、抗壞血酸鹽、檸檬酸、檸檬 酸鹽、甲硫氨酸和白蛋白。
38.權(quán)利要求37的組合物，其包含濃度為11111、21111、31111、51111、101111或201111或者約ImM、 2mM、3mM、5mM、10mM 或 20mM 的甲硫氨酸。
39.權(quán)利要求1-38中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含防腐劑。
40.權(quán)利要求39的組合物，其中所述防腐劑包含芳香環(huán)。
41.權(quán)利要求39或權(quán)利要求40的組合物，其中所述防腐劑為間甲酚或苯酚。
42.權(quán)利要求1-41中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為單體、二聚體或六聚體。
43.權(quán)利要求1-42中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為速效人胰島素。
44.權(quán)利要求1-43中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
45.權(quán)利要求44的組合物，其中所述正規(guī)胰島素為人胰島素或豬胰島素。
46.權(quán)利要求44或權(quán)利要求45的組合物，其中所述正規(guī)胰島素為具有氨基酸序列如 SEQ ID NO :103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO 104所示的B鏈的胰島素或具有氨 基酸序列如SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ IDNO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)25巧4所示的B鏈的胰島素。
47.權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為重組胰島素。
48.權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為合成的或部分合成的。
49.權(quán)利要求1-46中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為分離的。
50.權(quán)利要求1-43中任一項(xiàng)的組合物，其中所述速效胰島素為胰島素類(lèi)似物。
51.權(quán)利要求50的組合物，其中所述胰島素類(lèi)似物選自具有氨基酸序列如SEQNO 103 所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ NO =147-149中任一所示的B鏈的胰島素。
52.權(quán)利要求1-51中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含一種或多種另外的胰島素。
53.權(quán)利要求1-52中任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含基礎(chǔ)作用胰島素。
54.權(quán)利要求1-53中任一項(xiàng)的組合物，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶。
55.權(quán)利要求I-M中任一項(xiàng)的組合物，其中所述透明質(zhì)酸酶具有SEQIDNO :1-39或 67-96中任一所示的氨基酸序列、或截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體，其 與 SEQ ID NO :1 所示多肽具有 60%、70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、 97^^98%或99%序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶活性。
56.權(quán)利要求M或權(quán)利要求55的組合物，其中所述透明質(zhì)酸酶為可溶性透明質(zhì)酸酶。
57.權(quán)利要求56的組合物，其中所述可溶性透明質(zhì)酸酶為PH20、或其截短形式。
58.權(quán)利要求57的組合物，其中所述PH20選自羊、?；蚪囟痰娜薖H20。
59.權(quán)利要求58的組合物，其中所述截短的人PH20選自具有SEQIDNO :4_9中任一所 示氨基酸序列的多肽、或者其與SEQ ID NO :4-9中任一所示的多肽具有60%,70^^80%、 90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶 活性的等位基因變體或其他變體。
60.權(quán)利要求56-59中任一項(xiàng)的組合物，其中所述透明質(zhì)酸酶為以命名為rHuPH20的組 合物的形式提供的可溶性透明質(zhì)酸酶。
61.權(quán)利要求1-53中任一項(xiàng)的組合物，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為軟骨素酶。
62.權(quán)利要求61的組合物，其中所述軟骨素酶選自軟骨素ABC裂解酶、軟骨素AC裂解 酶和軟骨素C裂解酶。
63.權(quán)利要求62的組合物，其中所述軟骨素酶具有SEQID NO :98-100中任一所示 的氨基酸序列、或其截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體，其與SEQ ID NO 98-100 中任一所示多肽具有 60%、70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、 97%、98%或99%序列相同性并保留降解乙酰透明質(zhì)酸的能力的。
64.注射器或小瓶，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物。
65.閉環(huán)系統(tǒng)，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物。
66.胰島素泵，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物。
67.胰島素筆，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物。
68.用于控制個(gè)體中血糖水平的閉環(huán)系統(tǒng)，其包含速效胰島素；和乙酰透明質(zhì)酸降解酶；其中所述速效胰島素和所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶在相同或不同的容器中。
69.權(quán)利要求68的閉環(huán)系統(tǒng)，其進(jìn)一步包含葡萄糖傳感器、用于遞送所述乙酰透明質(zhì) 酸降解酶和速效胰島素的遞送系統(tǒng)以及程序化的用于整合泵藥和監(jiān)測(cè)功能的軟件中的一個(gè)或多個(gè)，藉此遞送乙酰透明質(zhì)酸降解酶和速效胰島素以達(dá)到模擬非糖尿病個(gè)體中血糖控 制的血糖控制。
70.權(quán)利要求68或權(quán)利要求69的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述速效胰島素為單體、二聚體、多聚 體或六聚體。
71.權(quán)利要求68-70的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述速效胰島素為速效人胰島素。
72.權(quán)利要求68-71中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
73.權(quán)利要求72的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述正規(guī)胰島素為人胰島素或豬胰島素。
74.權(quán)利要求72或權(quán)利要求73的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述正規(guī)胰島素選自具有氨基酸序列 如SEQ ID NO 103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ IDNO :104所示的B鏈的胰島素或具有 氨基酸序列如SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)25巧4所示的B鏈的胰島素。
75.權(quán)利要求68-71中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述速效胰島素為胰島素類(lèi)似物。
76.權(quán)利要求75的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述胰島素類(lèi)似物選自具有氨基酸序列如SEQID NO 103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO =147-149中任一所示的B鏈的胰島素。
77.權(quán)利要求68-76中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述胰島素為重組胰島素。
78.權(quán)利要求68-77中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其進(jìn)一步包含一種或多種另外的胰島素。
79.權(quán)利要求78的閉環(huán)系統(tǒng)，其中一種所述另外的胰島素為基礎(chǔ)作用胰島素。
80.權(quán)利要求68-79中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶。
81.權(quán)利要求80的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述透明質(zhì)酸酶為可溶性透明質(zhì)酸酶。
82.權(quán)利要求81的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述可溶性透明質(zhì)酸酶為PH20、或其截短形式。
83.權(quán)利要求82的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述PH20選自羊、?；蚪囟痰娜薖H20。
84.權(quán)利要求83的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述截短的人PH20選自具有SEQIDNO :4_9中任 一所示氨基酸序列的多肽、或者其與SEQ ID N0:4-9中任一所示的多肽具有60%、70%、 80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或 99%序列相同性并保留透明質(zhì) 酸酶活性的等位基因變體或其他變體。
85.權(quán)利要求80-84中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述透明質(zhì)酸酶為以命名為rHuPH20的 組合物的形式提供的可溶性透明質(zhì)酸酶。
86.權(quán)利要求68-79中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為軟骨素酶。
87.權(quán)利要求86的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述軟骨素酶選自軟骨素ABC裂解酶、軟骨素AC裂 解酶和軟骨素C裂解酶。
88.權(quán)利要求87的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述軟骨素酶具有SEQIDNO :98-100中任一所示 的氨基酸序列、或其截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體，其與SEQ ID NO 98-100 中任一所示多肽具有 60%、70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、 97%、98%或99%序列相同性并保留降解乙酰透明質(zhì)酸的能力。
89.權(quán)利要求68-88中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中包含所述速效胰島素的容器包含0.1單 位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、 2單位、5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位、100單 位、200單位、300單位、400單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單位、5000單位、6000單位、7000單位或者約0. 1單位、0. 2單位、0. 3單位、0. 4單 位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、10單位、15單 位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位、100單位、200單位、300單位、400單 位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2000單位、5000單位、6000 單位、7000單位或更多的胰島素。
90.權(quán)利要求68-89中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述系統(tǒng)能夠以0.1單位、0. 2單位、 0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、5單位、 10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或者約0. 1單位、0. 2 單位、0. 3單位、0. 4單位、0. 5單位、0. 6單位、0. 7單位、0. 8單位、0. 9單位、1單位、2單位、 5單位、10單位、15單位、20單位、25單位、30單位、35單位、40單位、50單位或更多胰島素 的單獨(dú)劑量增量遞送所述速效胰島素。
91.權(quán)利要求68-90中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中包含所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的容器 包含其量在功能上等價(jià)于0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、5單位、10單位、20單位、30單 位、40單位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、 450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2，000單位、3，000 單位、4，000單位、5000單位、6，000單位、7，000單位、8，000單位、9，000單位、10，000單 位、20，000單位或者約0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、5單位、10單位、20單位、30單 位、40單位、50單位、100單位、150單位、200單位、250單位、300單位、350單位、400單位、 450單位、500單位、600單位、700單位、800單位、900單位、1000單位、2，000單位、3，000單 位、4，000單位、5000單位、6，000單位、7，000單位、8，000單位、9，000單位、10，000單位、 20，000單位或更多透明質(zhì)酸酶活性的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。
92.權(quán)利要求68-91中任一項(xiàng)的閉環(huán)系統(tǒng)，其中所述系統(tǒng)能夠以功能上等價(jià)于0.3單 位、0. 5單位、1單位、2單位、3單位、5單位、10單位、20單位、30單位、40單位、50單位、100 單位、150單位或者約0. 3單位、0. 5單位、1單位、2單位、3單位、5單位、10單位、20單位、 30單位、40單位、50單位、100單位、150單位或更多透明質(zhì)酸酶活性的乙酰透明質(zhì)酸降解酶 量的單獨(dú)劑量增量遞送所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶。
93.制備超速效胰島素組合物的方法，其包括選擇速效胰島素并將其與使所述組合物成為超速效胰島素組合物的足量的乙酰透明 質(zhì)酸降解酶組合。
94.權(quán)利要求93的方法，其中所述組合物包含10U/mL或約10U/mL至500U/mL或約 500U/mL的胰島素，和其量在功能上等價(jià)于至少 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/ mL、10U/mL、15U/mL、20U/mL或25U透明質(zhì)酸酶活性/mL 30至35透明質(zhì)酸酶單位/mL或者 約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、10U/mL、15U/mL、20U/mL 或25U透明質(zhì)酸酶活性/mL 30至35透明質(zhì)酸酶單位/mL的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。
95.權(quán)利要求93或權(quán)利要求94的方法，其中所述組合物包含其量在功能上等價(jià)于至少 30至35透明質(zhì)酸酶單位/mL或約30至35透明質(zhì)酸酶單位/mL的乙酰透明質(zhì)酸降解酶。
96.權(quán)利要求95的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入螯合劑。
97.權(quán)利要求96的方法，其中所述螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)或乙二胺四乙酸鹽。
98.權(quán)利要求93-97中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入鋅。
99.權(quán)利要求98的方法，其中所述組合物中鋅的終濃度為0.002毫克每100胰島素單 位(mg/100U)、0· 005mg/100U、0. 01mg/100U、0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、0. 016mg/100U、 0. 017mg/100U、0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、0. 026mg/100U、 0. 028mg/100U、0. 03mg/100U、0. 04mg/100U、0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、0. 07mg/100U、 0.08mg/100U 或 0. lmg/lOOU 或者約 0.002mg/100U、0.005mg/100U、0. 01mg/100U、 0. 012mg/100U、0. 014mg/100U、0. 016mg/100U、0. 017mg/100U、0. 018mg/100U、0. 02mg/100U、 0. 022mg/100U、0. 024mg/100U、0. 026mg/100U、0. 028mg/100U、0. 03mg/100U、0.04mg/100U、 0. 05mg/100U、0. 06mg/100U、0. 07mg/100U、0. 08mg/100U 或 0. lmg/100U。
100.權(quán)利要求93-99中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入張力調(diào)節(jié)劑。
101.權(quán)利要求100的方法，其中所述張力調(diào)節(jié)劑選自氨基酸、多元醇和鹽。
102.權(quán)利要求100或權(quán)利要求101的方法，其中所述張力調(diào)節(jié)劑為甘油和/或氯化鈉。
103.權(quán)利要求93-102中任一項(xiàng)的方法，其中所述組合物的同滲濃度為200m0sm/kg、 220m0sm/kg、240m0sm/kg、260m0sm/kg、280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、 360m0sm/kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/kg 或者約 200m0sm/kg、220m0sm/kg、240m0sm/kg、 260m0sm/kg、280m0sm/kg、300m0sm/kg、320m0sm/kg、340m0sm/kg、360m0sm/kg、380m0sm/kg 或 400m0sm/kgo
104.權(quán)利要求93-103中任一項(xiàng)的方法，其中所述組合物的pH為6、6.2、6· 4、6· 6、6· 8、 7、7· 2、7· 4、7· 6、7· 8 或 8 或者約 6、6· 2、6· 4、6· 6、6· 8、7、7· 2、7· 4、7· 6、7· 8 或 8。
105.權(quán)利要求93-104中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入所述速效 胰島素的穩(wěn)定劑、所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶的穩(wěn)定劑或二者。
106.權(quán)利要求105的方法，其中所述穩(wěn)定劑為去污劑、多元醇、金屬、鹽、共溶劑和/或 蛋白質(zhì)。
107.權(quán)利要求93-106中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入除氧劑。
108.權(quán)利要求107的方法，其中所述除氧劑選自抗壞血酸、抗壞血酸鹽、檸檬酸、檸檬 酸鹽、甲硫氨酸和白蛋白。
109.權(quán)利要求93-108中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入防腐劑。
110.權(quán)利要求93-109中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為單體、二聚體或六聚體。
111.權(quán)利要求93-110中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為速效人胰島素。
112.權(quán)利要求93-111中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
113.權(quán)利要求112的方法，其中所述正規(guī)胰島素為具有氨基酸序列如SEQID Ν0 103 所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :104所示的B鏈的胰島素或具有氨基酸序列如SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :123的氨基 酸殘基位點(diǎn)25-M所示的B鏈的胰島素。
114.權(quán)利要求93-113中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為重組胰島素。
115.權(quán)利要求93-113中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為合成的或部分合成的。
116.權(quán)利要求93-111中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為胰島素類(lèi)似物。
117.權(quán)利要求116的方法，其中所述胰島素類(lèi)似物選自具有氨基酸序列如SEQNO 103 所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ NO =147-149中任一所示的B鏈的胰島素。
118.權(quán)利要求93-117中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括向所述組合物中加入一種或多 種另外的胰島素。
119.權(quán)利要求93-118中任一項(xiàng)的方法，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶。
120.權(quán)利要求119的方法，其中所述透明質(zhì)酸酶具有SEQID NO :1_39或67-96中任 一所示的氨基酸序列、或者其截短形式或其等位基因變體、物種變體或其他變體。
121.權(quán)利要求120的方法，其中所述透明質(zhì)酸酶為可溶性透明質(zhì)酸酶。
122.權(quán)利要求121的方法，其中所述可溶性透明質(zhì)酸酶為PH20或其截短形式。
123.權(quán)利要求122的方法，其中所述PH20選自羊、?；蚪囟痰娜薖H20。
124.權(quán)利要求123的方法，其中所述截短的人PH20選自具有SEQIDNO :4_9中任一 所示氨基酸序列的多肽、或者其與SEQ ID N0:4-9中任一所示多肽具有60^^70^^80%, 90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶 活性的等位基因變體或其他變體。
125.權(quán)利要求119-124中任一項(xiàng)的方法，其中所述透明質(zhì)酸酶為以命名為rHuPH20的 組合物的形式提供的可溶性透明質(zhì)酸酶。
126.權(quán)利要求93-118中任一項(xiàng)的方法，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為軟骨素酶。
127.權(quán)利要求1 的方法，其中所述軟骨素酶選自軟骨素ABC裂解酶、軟骨素AC裂解 酶和軟骨素C裂解酶。
128.用于控制個(gè)體中血糖水平的方法，其包括向所述個(gè)體給藥權(quán)利要求1-63中任一 項(xiàng)的組合物的劑量單位。
129.權(quán)利要求128的方法，其中所述劑量為餐時(shí)劑量。
130.權(quán)利要求1 或129的方法，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
131.權(quán)利要求U8-130中任一項(xiàng)的方法，其中在進(jìn)餐前少于20、10或5分鐘或者約20、 10或5分鐘至進(jìn)餐后少于10分鐘或約10分鐘給藥所述組合物，或者與食物一起給藥所述 組合物。
132.方法，其包括指示患者在進(jìn)餐前少于20、10或5分鐘或者約20、10或5分鐘至進(jìn)餐后少于30分鐘 或約30分鐘給藥速效胰島素組合物，其中將所述速效胰島素與使得所述速效胰島素組合物成為超速效組合物的足量的乙酰透 明質(zhì)酸降解酶聯(lián)合給藥。
133.權(quán)利要求132的方法，其中指示所述患者在或約在進(jìn)餐時(shí)給藥所述速效胰島素組 合物。
134.權(quán)利要求133的方法，其中所述指示為書(shū)面的。
135.權(quán)利要求132的方法，其中所述指示為口頭的。
136.權(quán)利要求132-135中任一項(xiàng)的方法，其中將所述速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解 酶一起配制。
137.權(quán)利要求128-136中任一項(xiàng)的方法，其中通過(guò)注射器、胰島素筆、胰島素泵或閉環(huán) 系統(tǒng)向所述個(gè)體給藥所述組合物。
138.權(quán)利要求128-133中任一項(xiàng)的方法，其中皮下給藥所述組合物。
139.權(quán)利要求128-138中任一項(xiàng)的方法，其中所述超速效胰島素組合物中速效胰島素 的劑量小于無(wú)所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶時(shí)以相同途徑給藥的所述速效胰島素的劑量。
140.權(quán)利要求128-139中任一項(xiàng)的方法，其中向所述個(gè)體給藥的胰島素的量為針對(duì) 單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量，并為 0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 03U/kg、0. 04U/ kg、0. 05U/kg、0. 06U/kg、0. 07U/kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、 0. 13U/kg、0. 14U/kg、0. 15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg,0. 30U/kg、0. 40U/kg 或 0. 50U/kg 或 者約 0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 03U/kg、0. 04U/kg、0. 05U/kg、0. 06U/ kg、0. 07U/kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、0. 14U/kg、 0. 15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、0. 40U/kg 或 0. 50U/kg。
141.權(quán)利要求128-140中任一項(xiàng)的方法，其中向所述個(gè)體給藥的乙酰透明質(zhì)酸降解酶 的量用于與針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量的速效胰島素聯(lián)合給藥，且所述酶的量為0. 3U、0. 5U、 1U、2U、5U、10U、20U、30U、40U、50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、 600U、700U、800U、900U、1, 000U、2，000U、3，000U、4，000 單位、5，000U 或者約 0. 3U、0. 5U、1U、 2U、5U、10U、20U、30U、40U、50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、 700U、800U、900U、1, 000U、2，000U、3，000U、4，000 單位、5，000U 或更多。
142.權(quán)利要求128-141中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為單體、多聚體、二聚體 或六聚體。
143.權(quán)利要求128-142的方法，其中所述速效胰島素為速效人胰島素。
144.權(quán)利要求128-143中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
145.權(quán)利要求144的方法，其中所述正規(guī)胰島素為具有氨基酸序列如SEQID NO 103 所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :104所示的B鏈的胰島素或具有氨基酸序列如SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :123的氨基 酸殘基位點(diǎn)25-M所示的B鏈的胰島素。
146.權(quán)利要求128-143中任一項(xiàng)的方法，其中所述速效胰島素為胰島素類(lèi)似物。
147.權(quán)利要求146的方法，其中所述胰島素類(lèi)似物選自具有氨基酸序列如SEQID NO 103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :147-149中任一所示的B鏈的胰島素。
148.權(quán)利要求128-147的方法，其中所述胰島素為重組胰島素。
149.權(quán)利要求128-147中任一項(xiàng)的方法，其中所述胰島素為合成或部分合成產(chǎn)生的。
150.權(quán)利要求128-149中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括一種或多種另外的胰島素組合物。
151.權(quán)利要求128-147中任一項(xiàng)的方法，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶。
152.權(quán)利要求151的方法，其中所述透明質(zhì)酸酶為可溶性透明質(zhì)酸酶。
153.權(quán)利要求152的方法，其中所述可溶性透明質(zhì)酸酶為PH20或其截短形式。
154.權(quán)利要求153的方法，其中所述PH20選自羊、牛或截短的人PH20。
155.權(quán)利要求154的方法，其中所述截短的人PH20選自具有SEQIDNO :4_9中任一 所示氨基酸序列的多肽、或者其與SEQ ID N0:4-9中任一所示多肽具有60^^70^^80%, 90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶活性的等位基因變體或其他變體。
156.權(quán)利要求151-155中任一項(xiàng)的方法，其中所述透明質(zhì)酸酶為以命名為rHuPH20的 組合物的形式提供的可溶性透明質(zhì)酸酶。
157.權(quán)利要求128-147中任一項(xiàng)的方法，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為軟骨素酶。
158.權(quán)利要求157的方法，其中所述軟骨素酶選自軟骨素ABC裂解酶、軟骨素AC裂解 酶和軟骨素C裂解酶。
159.權(quán)利要求158的方法，其中所述軟骨素酶具有SEQID NO :98-100中任一所示 的氨基酸序列、或其截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體，其與SEQ ID NO 98-100 中任一所示的多肽具有 60%,70%,80%,90%,91%,92%,93%,94%,95%,96%, 97%、98%或99%序列相同性并保留降解乙酰透明質(zhì)酸的能力。
160.組合，其包含包含IOU或約IOU至500U或約500U胰島素的第一組合物；和包含當(dāng)與所述胰島素一起給藥時(shí)使得所述速效胰島素成為超速效胰島素的足量的乙 酰透明質(zhì)酸降解酶的第二組合物；其中所述足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/ mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、10U/mL、15U/mL、20U/mL 或 25U 透明質(zhì)酸酶活性 /mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL 或 25U透明質(zhì)酸酶活性/mL。
161.權(quán)利要求160的組合，其中所述足量的乙酰透明質(zhì)酸降解酶在功能上等價(jià)于至少 30至35單位透明質(zhì)酸酶活性/mL或約30至35單位透明質(zhì)酸酶活性/mL。
162.權(quán)利要求160或權(quán)利要求161的組合，其中所述第一組合物中速效胰島素的量為 10U/mL、20U/mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/ mL、200U/mL、250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL 或者約 10U/mL、20U/ mL、30U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、 250U/mL、300U/mL、350U/mL、400U/mL、450U/ml 或 500U/mL。
163.權(quán)利要求160-162中任一項(xiàng)的組合，其中所述第二組合物中乙酰透明質(zhì)酸降解酶 的量在功能上等價(jià)于 1 U/mL、2U/mL、3U/mL、4U/mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL U OU/ mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/mL、35U/mL、37. 5U/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、 80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、300U/mL、400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、800U/ mL、900U/mL、1000U/ml、2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL 或者約 lU/mL、2U/mL、3U/mL、4U/ mL、5U/mL、6U/mL、7U/mL、8U/mL、9U/mL、1OU/mL、15U/mL、20U/mL、25U/mL、30U/mL、35U/mL、 37. OT/mL、40U/mL、50U/mL、60U/mL、70U/mL、80U/mL、90U/mL、100U/mL、200U/mL、300U/mL、 400U/mL、500U/mL、600U/mL、700U/mL、800U/mL、900U/mL、lOOOU/ml、2000U/mL、3000U/mL 或 5000U/mL。
164.組合，其包含包含乙酰透明質(zhì)酸降解酶的第一組合物；和包含速效胰島素的第二組合物，其中這些組合物被配制用于腸胃外給藥；并且如果與所述第二組合物混合，乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使所得組合物成為超速效胰島素組合物；或如果在給藥所述第一組合物之前給藥，乙酰透明質(zhì)酸降解酶的量足以使所述速效胰島 素組合物成為超速效胰島素組合物。
165.權(quán)利要求164的組合，其中向個(gè)體給藥的胰島素的量為針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí) 劑量，并為 0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 03U/kg、0. 04U/kg、0. 05U/kg、 0. 06U/kg、0.07U/kg、0.08U/kg、0.09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、 0. 14U/kg、0. 15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、0. 40U/kg、0. 50U/kg、lU/kg 或 2U/kg 或者約 0. 001U/kg、0. 005U/kg、0. 01U/kg、0. 02U/kg、0. 03U/kg、0. 04U/kg、0. 05U/kg、0. 06U/ kg、0. 07U/kg、0. 08U/kg、0. 09U/kg、0. 10U/kg、0. llU/kg、0. 12U/kg、0. 13U/kg、0. 14U/kg、 0.15U/kg、0. 20U/kg、0. 25U/kg、0. 30U/kg、0. 40U/kg、0. 50U/kg、lU/kg 或 2U/kg。
166.權(quán)利要求164或權(quán)利要求165的組合，其中向個(gè)體給藥的乙酰透明質(zhì)酸降解酶 的量為針對(duì)單次進(jìn)食的餐時(shí)劑量，并為0. 3U，0. 5U、1U、2U、3U、4U、5U、10U、20U、30U、40U、 50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、700U、800U、900U、1000U、 2，000U、3，000U、4，000 單位、5，000U 或者約 0. 3U，0. 5U、1U、2U、3U、4U、5U、10U、20U、30U、 40U、50U、100U、150U、200U、250U、300U、350U、400U、450U、500U、600U、700U、800U、900U、 1000U、2，000U、3，000U、4，000 單位、5，000U 或更多。
167.權(quán)利要求160-166中任一項(xiàng)的組合，其中所述組合物被配制用于皮下給藥。
168.權(quán)利要求160-167中任一項(xiàng)的組合，其中所述速效胰島素為單體、二聚體、六聚體 或多聚體。
169.權(quán)利要求160-168的組合，其中所述速效胰島素為速效人胰島素。
170.權(quán)利要求160-169中任一項(xiàng)的組合，其中所述速效胰島素為正規(guī)胰島素。
171.權(quán)利要求170的組合，其中所述正規(guī)胰島素選自具有氨基酸序列如SEQID N0 103所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO 104所示的B鏈的胰島素或具有氨基酸序列如 SEQ ID NO 123的氨基酸殘基位點(diǎn)88-108所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ ID NO :123的 氨基酸殘基位點(diǎn)25-M所示的B鏈的胰島素。
172.權(quán)利要求160-169中任一項(xiàng)的組合，其中所述速效胰島素為胰島素類(lèi)似物。
173.權(quán)利要求172的組合，其中所述胰島素類(lèi)似物選自具有氨基酸序列如SEQNO 103 所示的A鏈和氨基酸序列如SEQ NO =147-149中任一所示的B鏈的胰島素。
174.權(quán)利要求160-173中任一項(xiàng)的組合，其中所述胰島素為重組胰島素。
175.權(quán)利要求160-174中任一項(xiàng)的組合，其中所述胰島素為合成或部分合成產(chǎn)生的。
176.權(quán)利要求160-175中任一項(xiàng)的組合，其進(jìn)一步包含一種或多種另外的胰島素組合物。
177.權(quán)利要求160-176中任一項(xiàng)的組合，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為透明質(zhì)酸酶。
178.權(quán)利要求177的組合，其中所述透明質(zhì)酸酶為可溶性透明質(zhì)酸酶。
179.權(quán)利要求178的組合，其中所述可溶性透明質(zhì)酸酶為PH20或其截短形式。
180.權(quán)利要求179的組合，其中所述PH20選自羊、牛或截短的人PH20。
181.權(quán)利要求180的組合，其中所述截短的人PH20選自具有SEQIDNO :4_9中任一 所示氨基酸序列的多肽、或者其與SEQ ID N0:4-9中任一所示多肽具有60^^70^^80%,90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性并保留透明質(zhì)酸酶 活性的等位基因變體或其他變體。
182.權(quán)利要求160-181中任一項(xiàng)的組合，其中所述透明質(zhì)酸酶為以命名為rHuPH20的 組合物的形式提供的可溶性透明質(zhì)酸酶。
183.權(quán)利要求160-176中任一項(xiàng)的組合，其中所述乙酰透明質(zhì)酸降解酶為軟骨素酶。
184.權(quán)利要求183的組合，其中所述軟骨素酶選自軟骨素ABC裂解酶、軟骨素AC裂解 酶和軟骨素C裂解酶。
185.權(quán)利要求184的組合，其中所述軟骨素酶具有SEQID NO :98-100中任一所示 的氨基酸序列、或其截短形式、或其等位基因變體、物種變體或其他變體，其與SEQ ID NO 98-100 中任一所示多肽具有 60%、70%、80%、90%、91 %、92%、93%、94%、95%、96%、 97%、98%或99%序列相同性并保留降解乙酰透明質(zhì)酸的能力。
186.權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物，其用于控制個(gè)體的餐后血糖。
187.權(quán)利要求160-185中任一項(xiàng)的組合，其用于控制個(gè)體的餐后血糖。
188.權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物用于制備用于控制個(gè)體餐后血糖水平的藥物的 用途。
189.權(quán)利要求160-185中任一項(xiàng)的組合用于制備用于控制個(gè)體餐后血糖水平的藥物 的用途。
190.用于控制個(gè)體中血糖水平的方法，其包括向所述個(gè)體給藥權(quán)利要求160-185中任一項(xiàng)的組合。
191.藥盒，其包含權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組合物或權(quán)利要求160-185中任一項(xiàng)的組 合和任選的使用說(shuō)明。
192.制品，其包含包裝材料和容納于所述包裝材料中的權(quán)利要求1-63中任一項(xiàng)的組 合物或權(quán)利要求160-185中任一項(xiàng)的組合。
全文摘要
本文提供了包含被配制用于腸胃外給藥的速效胰島素組合物和乙酰透明質(zhì)酸降解酶組合物的組合、組合物和藥盒。這些產(chǎn)品可用于治療胰島素可治療的疾病或病癥的方法中。本文也提供了給藥速效胰島素和乙酰透明質(zhì)酸降解酶的方法。
文檔編號(hào)A61K38/47GK102083458SQ200980124875
公開(kāi)日2011年6月1日 申請(qǐng)日期2009年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月28日
發(fā)明者B·休格曼, D·沃恩, G·I·弗羅斯特, I·比林斯基 申請(qǐng)人:哈洛齊梅公司